胰腺组织单细胞悬液制备方法的比较研究

目的:寻找更好的胰腺组织单细胞悬液制备方法。方法:以大鼠冷缺血胰腺组织作为标本,分别采用剪碎和研磨法制备胰腺组织悬液。经台盼蓝染色测细胞存活率,并进行流式细胞术分析。结果:剪碎法细胞形态较完整、存活率高;两种方法细胞凋亡水平(APO)、CV值有显著性差异(P<0.01)。结论:胰腺组织单细胞悬液制备剪碎法优于研磨法。     

人肾上腺组织单细胞悬液制备方法的研究

目的:探讨人肾上腺组织单细胞悬液制备的最佳消化方法.方法:收集来自广西医科大学第二附属医院手术终止妊娠的16～18孕周胎儿肾上腺组织3例,分别使用3种消化方案(A方案:HBSS溶液中加入1 mg/mL Ⅰ型胶原酶,0.1mg/mLDN-ase Ⅰ;B方案.:HBSS溶液中加入1 mg/mLⅡ型胶原酶,0.1 mg/mL...     

研磨法和组织分离器制备乳腺癌腋窝淋巴结单细胞悬液的比较

目的比较研磨法和Gentle MACS组织分离器制备乳腺癌患者腋窝淋巴结单细胞悬液在活细胞率、丝状物及细胞团块方面的优缺点,为淋巴组织细胞培养和流式分析找到一种更为可靠的方法。方法分别用研磨法和Gentle MACS组织分离器制备单细胞悬液,台盼兰染色后计数活细胞、死细胞、细胞团块和丝状物,并比较两种方法的优缺。结果两种方法制备的腋窝淋巴组织单细胞悬液在细胞存活率方面有显著性差异(P<0.05)。在丝状物和细胞团块方面,组织分离器法丝状物和细胞团块数量更少(P<0.05)。结论制备淋巴组织单细胞悬液,组织分离器法较研磨法更为优异。     

骨肉瘤石蜡包埋组织标本FCM单细胞悬液样品的制备

采用１０例骨肉瘤石蜡包埋组织标本，以Ｈｅｄｌｅｙ报道的方法为基础，进行单细胞悬液样品的制备和流式细胞术检测。每例组织块经切片、脱蜡、水化、漂洗等过程，并用０．５％ｐｅｐｓｉｎ（ｐＨ１．５）作为组织片的消化液，放入３７℃恒温磁力搅拌装置中进行孵育消化６０ｍｉｎ，经高速和低速短时离心去除未消化完的组织块和细胞碎片，加７０％＾冷乙醇固定。上机前用碘化丙啶作一步插入ＤＮＡ荧光染色。结果显示消化良好，镜检细     

一种高效的小鼠肺单细胞悬液制备方法的研究

目的:应用胶原酶Ⅴ酶消化法建立一种高效的小鼠肺单细胞悬液制备方法。方法:小鼠处死后取出肺脏,将其剪碎,应用胶原酶Ⅴ(175 U.ml-1)消化,37℃孵育1 h,随后进行细胞计数、活细胞百分率和流式细胞仪检测。结果:(1)光镜下见胶原酶Ⅴ消化所得小鼠肺细胞多种多样,大小不一,细胞形态完整,分散度好;(2)30 mg小鼠肺组织可提取细胞数量为(1～3)×106个,肺单细胞悬液中活细胞百分率均在95%以上;(3)流式细胞术检测可见大量的肺细胞。结论:应用胶原酶Ⅴ酶消化法制备小鼠肺单细胞悬液高效、简便,为肺细胞生物学及肺部疾病发病机制研究提供了有效的肺单细胞制备方法。     

浓缩血小板悬液的三种制备方法比较

0　引言　浓缩血小板悬液 ( PC)在白血病、再障等血小板减少的出血及外科手术中均有显著的止血作用 ,而 PC中血小板数量的多少和质量的高低又是影响临床输注效果的重要因素 .为探讨 PC的最佳制备方法和条件 ,我们对二次离心法、白膜回浆法和机器单采法三种方法制备的 PC细胞参数进行了检测比较 .1　材料和方法1.1　供血者选择　按国家卫生部规定标准 ,对献血员进行体格检查和 AL T,HAV,HBV,HCV,HIV及 RPR等化验检测均合格 ,5 d内未服阿斯匹林等影响血小板功能的药物 ,静脉血管良好 ,血小板计数在 15 0× 10 9·L- 1以上者 .1.2　…     

脾细胞悬液的制备与输注方法

研究表明 ,脾脏除有造血、破血、滤血等功能外 ,还有抗感染免疫、抗肿瘤免疫和储存血友病甲球蛋白 (ＡＨＧ)的功能。脾移植对血友病甲和晚期肝癌不失为一种有效的治疗措施。我所自 1985年来除脾移植外 ,另施行脾细胞移植 (输注 ) 6 0例 75次 ,分别治疗血友病甲和晚期肝癌患者。其中晚期肝癌患者 33例 ,血友病甲患者 2 7例 15次 ,均获得满意效果。血友病甲患者出血症状减轻 ,Ⅷ因子水平不同程度的有所提高。肝癌患者则α-ＦＰ水平降低 ,食欲增加 ,自觉症状缓解 ,患者生命质量提高和延长生存时间。最长 1例为一血友病甲患者 ,有效功能为 9个月…     

对照检测病原体单细胞悬液的制作与保存

病原体单细胞悬液有广泛的应用前景，尤其在临床实验、病理诊断中更是具有十分重要的作用。由于无论是机器操作还是手工操作均不能保证每张玻片的条件（如时间、剂量、效价程度或其他因素等）相同，到目前为止还没有设立真正意义上的对照的方法，除少数试剂可于片中寻找自身对照外，部分结果阳性、阴性及阳性的度以及结果的准确性较难判定。而单细胞悬液的制作选择各种已知阳性组织、细胞以及病原体标本，制成可以长期保存的含有均匀分散的单细胞悬浮液体对照物质，在进行玻片实验时将相应的对照物质点、涂少许于玻片上，同实验对象一起进行实验，以建立真正的对照，判断的结果准确可靠。为此，我们对与病原体形态检测有关的对照物质的制作与保存做了一些研究探讨。     

红细胞悬液制备方法的改进

为提高红细胞悬液的质量,改进红细胞悬液的制备方法,将80袋全血分为两组,按传统方法和改进方法分别制备红细胞悬液,红细胞回收率分别是70．48％和75．04％,两者经t检验比较,P＜0．05。说明改进离心和分浆方法可提高红细胞回收率,同时改进法简化了制备程序,提出了工作效率。     

两种不同染色法在流式细胞术中检测细胞周期的探讨

目的 比较碘化丙啶(PI)和4,6-联脒-2苯基吲哚(DAPI)两种不同染色方法在流式细胞术中对细胞周期检测的影响.方法 A549细胞分别采用PI和DAPI染色法进行染色,于染色后0和24h进行流式细胞仪检测细胞G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较两种方法的测定结果,同时进行细胞计数,观察细胞浓度变化.结果 PI和DAPI法染色后0h上机测定,结果分别为:CV值(7.72±0.19)、(5.92±0.09),G0/G1期含量(69.63±1.16)％、(69.87±1.28)％,S期含量(24.53±0.47)％、(24.43±0.86)％,G2/M期含量(5.85±1.04)％、(5.72-0.65)％,两种方法检测细胞周期的结果基本一致(P＞0.05);染色后24h重新测定,结果分别为:CV值(8.82±0.05)、(6.09±0.30),G0/G1期含量(58.50±0.90)％、(70.47±0.81)％,S期含量(31.73±0.75)％、(23.67±0.45)％,G2/M期含量(9.51±0.47)％、(5.86±0.46)％,两种方法检测细胞周期的结果差异有统计学意义(P＜0.05).DAPI法染色后0和24h测定结果基本一致(P＞0.05),而PI法检测结果差异有统计学意义(P＜0.05).细胞计数结果显示,放置24hPI法细胞损耗为63.14％,DAPI法细胞损耗为12.50％,两种方法结果差异有统计学意义(P＜0.05).染色24h后PI法细胞开始崩解,镜下见较多的细胞碎片,而DAPI法细胞形态良好.结论 应用流式细胞术检测细胞周期,DAPI染色法优于PI染色法.     

流式细胞术检测小鼠主动脉组织中炎性反应细胞浸润的方法研究

目的 应用剪碎和混合酶消化法,建立一种有效的用于流式细胞术分析的小鼠血管组织单细胞悬液,用于检测血管紧张素Ⅱ刺激引起的血管组织中炎性细胞的浸润。方法 采用皮下微量泵持续泵入血管紧张素Ⅱ(1 000 ng·kg^-1·min^-1),于灌注3 d后将小鼠麻醉后立即处死,取出胸主动脉和腹主动脉,迅速剪碎,用混合酶消化小鼠血管组织,制备单细胞悬液,用于流式细胞技术检测。结果 每只小鼠血管组织分离细胞数可达5×10⁵个/mL;光镜下单细胞悬液细胞完整透明,分散排列,状态良好;流式细胞术检测显示血管紧张素Ⅱ处理后明显增加了血管组织中中性粒细胞、T淋巴细胞和巨噬细胞的数量。结论 应用剪碎和混合酶联合消化法制备小鼠血管组织单细胞悬液简便可行,为血管炎性细胞浸润的研究提供了有效的组织单细胞悬液制备方法。     

两种制作铸造桩核方法的比较研究

目的评价自凝树脂直接法与硅橡胶间接法制作单根管铸造桩核印模的临床效果。方法选取山西医科大学口腔医院修复科门诊患者247例,共282颗患牙,经过完善的根管治疗和牙体根管预备后拟行单根管桩核修复,随机分为两组,分别采取上述两种方法制作桩核印模,从印模制取时间、熔模完整性、就位情况等几方面进行评价。结果自凝树脂直接法和硅橡胶间接法在制备印模的完整性及就位情况方面比较无显著性差异。结论自凝树脂制取桩核可以达到与硅橡胶同样完美的效果,用此方法来修复单根管残根残冠是一种安全、价廉、实用的有效方法,有较好临床使用价值,值得临床应用推广。     

两种纯化大鼠毛囊干细胞方法的比较

目的:显微分离技术分别与流式细胞仪分选和免疫磁珠分选两种方法联合使用,比较不同方法的优缺点,以进一步探索毛囊干细胞的体外分选培养的条件.方法:显微分离鼠毛囊隆突部,消化成单细胞悬液.分别利用流式细胞仪和免疫磁珠分选毛囊干细胞.观察细胞形态并检测分选前后细胞的纯度,活性,回收率,进行免疫荧光鉴定.结果:两种方法均能分选出实验所需的毛囊干细胞.流式细胞仪分选细胞纯度高,活性稍弱;免疫磁珠法分选细胞纯度稍低但活性强.结论:流式细胞仪分选和免疫磁珠分选均能有效获取毛囊干细胞.显微分离技术可根据实验需求选择不同的分选方法搭配.     

亲属供肾单支动脉与多支动脉的临床疗效比较

 目的 探讨亲属供肾单支血管与多支血管在肾移植临床疗效上有无差异。方法 采用回顾性分析方法统计130例亲属肾移植受体病史资料,采用基本统计方法计算供体肾动脉、静脉变异的发生率,并对受体进行1~5年随访,采用χ²检验比较多支供肾动脉与单支供肾动脉疗效有无差异。结果 供体术前CT血管成像检查（CT angiography,CTA）评估结果发现,32例供体出现副肾动脉,发生率为24.6%,其中双肾副肾动脉10例,发生率为7.7%;肾静脉多支15例,发生率为11.5%,且均为右肾。受体和供肾的1年存活率分别为94.3%和91.5%。单支动脉供肾与多支动脉供肾在肾移植中的临床疗效无明显差异。结论 亲属供肾单支血管与多支血管在肾移植中的临床疗效无差异,且对供体和受体均安全。     

雪卡毒素两种检测方法的比较研究

目的建立雪卡毒素的细胞毒性试验检测和小鼠生物法检测方法,对比评价两种方法的优缺点。方法利用不同浓度的雪卡毒素标准品（P—CTX-1）结合乌苯苷和黎芦定处理小鼠神经母细胞瘤细胞（N-2a）,研究和建立毒素剂量与细胞活性的毒性曲线关系式。同时,通过测定昆明系小白鼠的雪卡毒素半数致死剂量LD50和毒素剂量与小鼠死亡时间的关系方程式,建立小鼠生物法检测标准,再分别以两种方法对32份不同月份采集的鱼样品的毒素提取物进行检测,对两种方法检测结果做分析比较。结果细胞毒性试验法检测结果与小鼠生物法检测结果具有一定的相关性,但细胞毒性试验法检测雪卡毒素的检测灵敏度远高于小鼠生物法。结论细胞毒性试验检测法适用于大量样品的初步筛选方法,而小鼠生物法可作为雪卡毒素检测的重要参考方法。     

肾细胞癌DNA倍性测定的意义

目的　探讨DNA倍性在肾细胞癌预后中的作用。方法　运用流式细胞仪和图像分析技术对 5 6例肾细胞癌标本进行DNA含量测定 ,按照肾癌的病理分级、临床分期及细胞类型进行DNA倍性的统计学分析。并对近二倍体和非整倍体肾癌患者的生存率进行统计学分析。结果　肾癌的DNA非整倍体率与癌细胞的病理分级、临床分期呈递增关系 ,各病理分级、临床分期间的非整倍体率有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;而各病理细胞类型间的DNA非整倍体率无显著性差异。近二倍体肾癌患者生存率明显高于非整倍体肾癌患者 (P <0 .0 1)。结论　DNA倍性与肾癌预后相关 ,综合病理分级、临床分期和DNA倍性可对肾癌的恶性程度及预后作出更准确的判断     

细胞毒性试验中两种细胞计数方法的比较

目的比较Countstar自动细胞计数仪法和传统显微镜计数法两种计数方法在细胞毒性试验中细胞计数的差异。方法选用常见的两种类型的药品稀释液,稀释液为真溶液的注射用左旋泮托拉唑钠和稀释液为混悬液的毛蚶提取物,设立不同剂量组,细胞染毒6 h后制备细胞悬液,台盼蓝染色,分别用显微镜和Countstar自动细胞计数仪计数,对结果进行比较分析。结果 Countstar自动细胞计数仪法和显微镜计数法两种计数方法相关性良好,细胞计数结果差异无统计学意义(P0.05)。结论 Countstar自动细胞计数仪法是相对简单、快捷、准确的细胞计数方法。     

Analysis of two single nucleotide polymorphisms and loss of heterozygosity detection in the VHL gene in Chinese patients with sporadic renal cell carcinoma

Renalcellcarcinoma(RCC)isthemostcommonmalignanttumourintheadultkidney.Recentstudieshaveshownthatinactivationofthe tumoursuppressorgeneVHLlocatedin chromosome3p2526regionisresponsiblefor sporadicRCCs.1AccordingtoKundson’stwohit theory,themechanismofinactivationofatumour suppressorgeneinvolvesmutation,hyper methylationandlossofheterozygosity(LOH).MutationsandhypermethylationoftheVHLgene havebeenwellanalysedinRCC,butduetothe deficiencyofspecificgenemarkersintheVHL region,theexactLOHfre…