FADD在大鼠脑出血周围组织的表达及其与细胞凋亡的关系

目的研究大鼠脑出血时血肿周围组织FADD的表达与细胞凋亡之间的关系。方法大鼠70只,随机分为出血前1组及出血后6组,采用胶原酶与肝素联合注射建立大鼠脑出血模型,分析出血前、后不同时相血肿周围组织中FADD的表达与细胞凋亡。结果出血灶血肿周围组织细胞凋亡、FADD的表达上调,分别与对照组比较,组间差异有显著性（P〈0．01）。结论大鼠脑出血后引起了FADD的表达及细胞凋亡,FADD的表达强度与细胞凋亡密切关联。     

Bax的基因结构与功能

从人B细胞中首次发现与Bcl-2共沉淀的另一类蛋白质即Bax,它可以促进细胞凋亡,作用与Bcl-2相反。bax基因含6个外显子,有α、β、γ和δ等4种可变的剪接方式,其5′非翻译区含有4个p53结合位点,编码区含有与Bcl-2蛋白高度同源的BH_1和BH_2结构域,该区是Bax自身和与Bcl-2家族其它成员形成同型和异型二聚体并参与细胞凋亡调节的主要结构基础。Bax在p53诱导凋亡的过程中也发挥重要作用。     

FADD研究进展

FADD是Fas系统的一个信号连接蛋白,是死亡受体与胞浆成分之间联系的纽带,可将膜表面受体与胞浆中细胞凋亡的终末酶联接起来,从而向胞内传递凋亡信号,介导细胞凋亡,与多种疾病过程有关。同时,FADD在T细胞增殖中也起一定的作用。现就有关FADD与细胞凋亡、T细胞增殖以及在疾病中作用的研究进展加以综述。     

基因转移及其诱导的肿瘤细胞凋亡

凋亡是一种特殊类型的细胞死亡，受某些基因及分子的调控。基因转移可导肿瘤细胞凋亡，根据不同肿瘤基因变异或基因表达的特点，采用不同的目的基因对肿效率细胞进行基因修饰以诱导细胞凋亡的发生可能成为肿瘤免疫基因治疗的有效手段。     

细胞凋亡的基因调控及应用展望

细胞凋亡的基因调控及应用展望１苏长青综述２龚西马俞审校作者单位：１南京八一医院电镜室，南京２１０００２２安徽医科大学病理学教研室，合肥２３００３２目前，虽然对细胞凋亡的激发与抑制的详细机制还不十分清楚，但已有许多研究资料证实，有多种基因参与了细胞凋亡...     

FADD、Caspase-3与稽留流产的关系探讨

目的探讨FADD及Caspase-3在稽留流产绒毛滋养细胞中的表达及其关系。方法随机选取早孕稽留流产组35例（实验组）和正常早孕绒毛组30例的绒毛（对照组）检测两组绒毛滋养层细胞FADD和Caspase-3表达。结果FADD和Caspase-3在两组滋养层细胞中均有阳性表达,表达部位均以合体滋养层细胞为主。FADD和Caspase-3在稽留流产组绒毛滋养细胞中表达明显强于对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论Fas凋亡途径可能是滋养层细胞凋亡的主要凋亡途径,FADD、Caspase-3是滋养层细胞凋亡中重要的促凋亡因子,滋养层细胞凋亡的增加可能参与了稽留流产的发生。     

转录因子配对盒基因5在肠癌中的功能及机制

目的:研究配对盒基因5(PAX5)在肠癌中的功能及机制。方法:克隆过表达PAX5的表达质粒,在正常的肠细胞中进行过表达;通过设计RNAi的oligos进行肿瘤细胞中PAX5的基因沉默。结果:PAX5在肠癌细胞中异常高表达,并且过表达PAX5可以促进细胞增殖,敲减PAX5可以抑制细胞增殖,其可能机制是通过调节c-Myc的表达。PAX5可以调节DOX所诱导的细胞凋亡。结论:PAX5的异常表达可能会促进肿瘤的发生发展,为肠癌的治疗提供新的靶标。     

食管上皮癌变过程中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子FAS、FASL、FADD和caspase-8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法用免疫组化SP法检测食管黏膜中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达;原位杂交法检测食管黏膜中FADDmRNA和caspase-8mRNA的表达。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FAS蛋白表达率呈逐渐下降趋势,FASL蛋白表达率呈逐渐上升趋势,食管癌与正常组织之间差异明显(P<0·05)。高、中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌(P<0·05)。从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FADD和caspase-8蛋白及RNA阳性表达率呈逐渐下降趋势,食管癌与正常黏膜组织之间差异明显(P<0·01);caspase-8蛋白和mRNA在高、中分化鳞癌中的表达率高于低分化鳞癌(P<0·05)。结论FAS与FASL的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关。FADD与caspase-8基因表达异常在食管癌的发生、发展中可能起着重要作用。     

p53基因结构与功能研究的新进展

ｐ５３蛋白的信号区有１个ＳＨ－３区结合部位，非专一ＤＮＡ结合区可促进顺序的ＤＮＡ结合区与ＤＮＡ损伤部位结合。Ｐ５３蛋白可整合细胞对各种危急情况的反应，其信息传递途径上游是各种危急状况，有ＡＴＭ类的基因起作用。     

Survivin基因与喉鳞状细胞癌

在正常状态下，机体的细胞增殖和凋亡呈动态平衡，以维持正常的细胞数目；而肿瘤则是通过细胞增殖过度和／或细胞凋亡不足而产生。凋亡在正常情况下可消灭DNA受损或细胞循环周期失调的细胞，即有恶变潜能的细胞；凋亡机制受损则促进肿瘤的进展和转移，并使癌细胞能抗拒多种治疗。因而肿瘤细胞的凋亡机制失调成为肿瘤研究的重点；近年来，凋亡抑制基因的研究从基因水平进一步揭示了肿瘤产生机制并为肿瘤治疗提供了理论基础。     

转染Kv1.5基因抑制人气道平滑肌细胞的增殖

 目的：转染Kv1.5基因对人气道平滑肌细胞(HASMCs)增殖及凋亡的影响。方法:通过脂质体介导瞬时转染Kv1.5基因于培养的HASMCs中，以转染空载体pRc/CMV的细胞及未转染质粒的细胞为对照；用Western blotting 检测平滑肌细胞Kv1.5蛋白表达；用荧光光度法检测HASMCs胞内钙浓度；用流式细胞术观察细胞周期；用MTT法检测HASMCs 增殖及DNA 末端转移酶介导的原位缺口末端标记技术(TUNEL)检测细胞的凋亡。 结果: (1) 转染质粒组Kv1.5蛋白质的表达明显高于未转染组及空载体转染组(P<0.01); (2) 转染质粒组细胞胞内钙浓度明显低于未转染组及空载体转染组(P<0.05)，且其细胞周期中的G₀/G₁期细胞比例明显高于、细胞增殖率显著低于未转染组及空载体转染组(P<0.01)；同时，转染质粒组细胞的凋亡率明显高于未转染组及空载体转染组 (P<0.01)。 结论: 转染Kv1.5基因能抑制HASMCs的增殖、促进其凋亡，为进一步探讨哮喘气道重塑的机制及其治疗提供实验依据。     

胶质瘤bcd—2基因表达水平与其细胞增殖和凋亡关系的研究

目的 探讨胶质瘤细胞ｂｃｌ－２基因表达水平与肿瘤恶性程度、细胞增殖活性及凋亡程度的关系。方法 以６９例不同级别的人胶质瘤组织为研究对象,用原位杂交及免疫组化染色ＡＢＣ法分别检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ、ｂｃｌ－２蛋白和增殖细胞核抗原（细胞增殖活性标记物）的表达,并用３’末标记法做原位细胞凋亡检测。结果 ６４例（９２．８％）表达ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ,６０例（８７．０％）表达ｂｃｌ－２蛋白,两者的表达水平呈正     

天花粉蛋白对T淋巴细胞功能的调节作用

天花粉蛋白是从中药天花粉中提取纯化的一种活性蛋白,具有引产、抗肿瘤、抗病毒等多种生物学活性。近年来的研究发现,天花粉蛋白对免疫系统具有调节作用。本文从细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡三个方面就其对T淋巴细胞功能的调节作用作一综述。     

食管癌相关基因4在肝细胞肝癌中的表达和功能

目的了解人食管癌相关基因4（ ECRG4）在人肝细胞肝癌组织和肝癌细胞系中的表达情况,探讨ECRG4对肝癌细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法提取24例配对肝细胞肝癌组织和癌旁肝组织的总RNA以及正常肝细胞系QSG7701和肝癌细胞系HepG2的总RNA和总蛋白,分别利用即时荧光定量PCR（ RT-qPCR）和Western blot法检测ECRG4的表达;构建ECRG4的真核表达质粒ECRG4-pcDNA3.1,转染肝癌细胞系HepG2,进行体外的细胞增殖、凋亡以及迁移实验。结果与癌旁肝组织相比,在肝细胞肝癌组织中ECRG4 mRNA表达下调或缺失（98.5％,23／24,P＜0.01）;和正常肝细胞系QSG7701相比,ECRG4 mRNA在肝癌细胞系HepG2中的表达明显下调（ P＜0.05）并且其蛋白表达水平也明显降低。转染ECRG4表达质粒后HepG2细胞的增殖和迁移能力明显低于对照组（P＜0.05）,细胞凋亡率明显高于对照组（P＜0.05）。结论 ECRG4在肝细胞肝癌中表达下调,在体外肝癌细胞系中过表达ECRG4可抑制细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡,ECRG4可能是肝细胞肝癌潜在的抑癌基因,有望为肝细胞肝癌分子靶向治疗提供新策略。     

一定浓度下三氧化二砷对T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株增殖的影响

背景：近年来有将三氧化二砷试用于T细胞肿瘤的有效报道,但未见其治疗机制的相关研究。 目的：检测三氧化二砷对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞的抑制增殖、诱导凋亡及细胞周期的影响。 方法：分别采用MTT、PI单标记流式细胞术和TUNEL法检测2,5,10 μmol/L的三氧化二砷干预24,48,72 h, 对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株抑制增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响,及其凋亡相关基因bcl-2及血管内皮细胞生长因子基因表达的变化。 结果与结论：在一定的浓度范围内,三氧化二砷对Hut-78细胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能与下调血管内皮细胞生长因子基因的表达有关,同时还存在一定的细胞毒作用;三氧化二砷可诱导Hut-78细胞发生凋亡,凋亡机制主要发生在G2~M期,其凋亡作用可能与下调bcl-2基因表达有关。三氧化二砷对Hut-78细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用呈时间剂量依赖性。     

超抗原诱导T细胞凋亡或增殖的体外研究

研究抗原递呈细胞在超抗原诱导人外周血特异性Ｔ细胞反应中的作用。方法金黄色葡萄球菌Ａ肠毒素刺激短期人外周血ＳＥＡ反应Ｔ细胞系的作用中,通过去除或加入Ａｐｃ观察细胞形态,ＦＣＭ检测细胞亚ＧＯ／Ｇ１峰大小及１．８％ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征条带。     

Yaa基因与狼疮性BXSB小鼠

:BXSB小鼠是系统性红斑狼疮小鼠 (SLE)模型之一。由于Y染色体上存在Yaa(Ychromosome linkedautoimmuneacceleration ,Yaa)基因能够加速自身免疫反应 ,使得雄性鼠早发病 (earlyonsetofdisease)。但是 ,Yaa基因的作用依赖于狼疮性遗传背景基因的存在 ,并由此导致B细胞和T细胞的表型或功能的变化 ,继而引起致病性自身抗体的产生 ,从而形成BXSB小鼠SLE发病的细胞学基础     

survivin基因与胶质瘤研究进展

细胞凋亡受多个基因的调控，其中抑制凋亡的基因主要包括bcl-2基因家族和凋亡抑制蛋白(IAP)基因家族，survivin基因是IAP家族新成员,在各种胶质瘤中高表达，并能强烈抑制胶质瘤细胞的凋亡。survivin在胶质瘤中的研究表明它是一种有效的判断胶质瘤患者预后的指标，并有望成为胶质瘤基因治疗的新靶点。     

Pax-8 基因真核表达载体的构建及其功能的初步研究

目的: 构建大鼠 Pax-8 基因全长序列的真核表达载体pcDNA3.1(+),并将重组质粒转染至心肌细胞系H9c2中进行表达,测定转染后 Pax-8 基因对心肌细胞增殖及凋亡的影响。方法: 酶切pCMV sport6- Pax-8 获得大鼠 Pax-8 全长基因,通过基因重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-Pax-8。限制性酶切鉴定和DNA测序鉴定插入片段。将重组质粒经脂质体法转染至大鼠心肌细胞系H9c2细胞中,RT-PCR法及Western blotting法分别检测转染后Pax-8 mRNA及蛋白表达水平。CCK-8法检测细胞增殖;以血清饥饿诱导心肌细胞凋亡,同时进行 Pax-8 质粒转染,流式细胞仪检测细胞凋亡指数,Western blotting法检测活化caspase-3的表达。结果: 成功构建了大鼠pcDNA3.1(+)-Pax-8真核表达载体,且证实转染后心肌细胞的 Pax-8 mRNA 及蛋白表达均明显高于空白对照组(P<0.05)及空质粒组(P<0.05)。转染 Pax-8 基因能提高心肌细胞的增殖能力(P<0.05),明显抑制血清饥饿引起的细胞凋亡(P<0.01),同时下调活化caspase-3的表达(P<0.01)。结论: 通过基因重组技术成功使得 Pax-8 基因在心肌细胞中过表达。 Pax-8 基因可能通过促进心肌细胞增殖及抑制心肌细胞凋亡从而参与胚胎心脏发育的过程。     

槲寄生凝集素的制备与免疫学功能研究

目的:分析从中国槲寄生中提取的55 KD凝集素诱导T淋巴细胞增殖和肿瘤细胞凋亡的免疫学活性.方法:通过CM-Sepharose和ConA柱分离和纯化了分子量为55 kD的槲寄生凝集素.用流式细胞术和ELlSA检测纯化的槲寄生凝集素诱导T淋巴细胞表型和细胞因子分泌格局.并经Annexin V染色法研究其诱导肿瘤细胞凋亡的免疫学机制.结果:从中国槲寄生中分离纯化了由两个30 kD亚基组成的55 kD槲寄生凝集素蛋白,其具有特异诱导人γδT趼细胞扩增和以Caspase依赖途径诱导Jurkat细胞凋亡,并能促进TNF-α释放和抑制IL-10的释放的作用.结论:中国槲寄生凝集素具有免疫学调节作用和诱导肿瘤细胞凋亡作用.在研究抗肿瘤和免疫学机制中具有应用价值.