参麦注射液及人参皂苷Rb1、Rg1抗神经、血管内皮、星形胶质细胞缺氧/缺糖损伤的研究

目的研究参麦注射液及其成分人参皂苷Rb1、Rg1对神经、血管内皮、Ⅰ型星形胶质细胞缺氧/缺糖再给氧损伤的保护作用,揭示参麦注射液脑保护作用的细胞机制,并初步确定其主要效应成分.方法培养神经、血管内皮、星形胶质三种细胞,含连二亚硫酸钠的无糖Earle's液模拟造成缺氧/缺糖损伤,台盼蓝染色、MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率评价药效.结果参麦注射液及其成分人参皂苷Rb1、Rg1对正常培养的三种细胞均无明显毒性损伤;与缺氧/缺糖再给氧损伤模型组比较,参麦注射液及人参皂苷Rb1、Rg1各组的LDH漏出率、细胞死亡率显著下降(P<0.001),细胞存活率显著提高(P<0.001～P<0.05).结论参麦注射液的脑保护作用机制与其对神经、血管内皮、Ⅰ型星形胶质三种细胞缺氧/缺糖再给氧损伤的保护作用有关,人参皂苷Rb1、Rg1是其脑保护作用的主要效应成分;提示参麦注射液能够应用于中风病急性期的治疗.     

中药代谢化学研究进展

一 中药有效成分代谢化学研究进展 1.1 萜类化合物 1.1.1.人参皂苷(ginsenosides) 人参皂苷是中药人参(Panax gin-seng C.A.Meyer)的主要有效成分,近年来人们已对人参皂苷Rb1,Rb2,Rc,Rg1,Rg2的代谢做了大量深入研究。 人参皂苷Rb1很被大鼠和人消化道菌群代谢,相继出现Rd,F2,IH-901及PPd四种代谢产物,PPd为最终产物。人参皂苷Rb2在人体内肠道菌群的作用下,其代谢途径与Rb1类似,亦产生IH-     

人参皂苷Rb1抗抑郁作用的动物行为学研究

摘要:目的:利用动物抑郁模型实验观察给予人参皂苷Rb1后动物的行为学变化,探讨人参皂苷Rb1的抗抑郁作用.方法:给予动物不同剂量的人参皂苷Rb1后,分别进行小鼠悬尾实验(TST)和强迫游泳实验(FST),观察人参皂苷Rb1对小鼠不动时间的影响;通过大鼠的FST,观察人参皂苷Rb1对大鼠不动时间和不动潜伏期的影响;利用大...     

人参皂苷Rb1在体外肠道菌群模型中的代谢研究

目的 研究人参皂苷Rb1在厌氧和有氧条件下经肠道菌群作用下逐级脱糖基的代谢差异。方法 利用UPLC-MS/MS研究人参皂苷Rb1在厌氧和有氧条件下经肠菌液的作用下,分别温孵0、2、4、8、12、24、48、72 h后,人参皂苷Rb1及其脱糖基代谢物的变化情况。结果 体外温孵实验中,人参皂苷Rb1在厌氧和有氧条件下经大鼠肠菌液作用下脱糖基生成人参皂苷Rd、F2、C-K,其中Rd→F2是Rb1在肠菌液的作用下脱糖基代谢的限速步骤。人参皂苷Rb1在大鼠肠道菌群作用下代谢途径为Rb1→Rd→F2→C-K。结论 人参皂苷Rb1在有氧和厌氧条件下脱糖基代谢产物没有差异,有氧代谢速率快于厌氧代谢。      

人参皂苷Rg1与Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用研究

目的:观察三七总皂苷主要成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用,并通过研究血管新生探索其可能的作用机制。方法:采用小鼠经皮下移植LLCs肿瘤细胞及腹腔注射异丙肾上腺素的方法制备肿瘤复合心肌缺血动物模型,再随机分为模型组、人参皂苷Rg1组、人参皂苷Rb1组;另设正常对照组。Rg1组和Rb1组分别予腹腔注射Rg1、Rb1(50 mg/kg);正常组与模型组给予等体积生理盐水。连续干预15 d后,比较各组小鼠的肿瘤生长情况、心肌组织病理形态学变化及通过免疫组织化学的方法检测心肌和肿瘤组织中CD34、vWF的蛋白表达。结果:人参皂苷Rg1及Rb1治疗组小鼠移植肿瘤生长显著受到抑制,其平均瘤重显著低于模型组(P0.05);两组心肌组织缺血损伤显著改善,胶原含量明显减少(P0.05,P0.01);同时心肌组织中CD34和vWF蛋白表达量显著升高,而肿瘤组织中CD34和vWF蛋白表达量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:三七总皂苷主要活性成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下显著抑制LLCs肿瘤生长,并显著改善心肌缺血损伤,其双向作用的机制可能与对血管生成双向调节作用有关。     

人参皂苷对神经系统作用的研究现状及分析

人参(panax ginsen C.A.meyer)是常见的补益中药,其主要成分是人参皂苷(ginsenoside),按其在薄层色谱上RF值的大小,分别称为Ra、Rb、Rc......,共计20余种.近年来,大量学者致力于人参皂苷对神经系统作用机制的研究,取得了可喜的进步.如通过神经生长因子引导鼠胚脊神经节体外培养模型,研究9种主要人参皂苷单体(Rb1、Rb3、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、Rh2)对脊髓神经元生长的影响,发现人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rf、Rh1可明显提高体外培养神经元的活力,具有促进周围神经轴突生长作用,而Rb3、Rd、Rg2、Rh2对脊髓神经元活力无明显影响[1].目前,多数实验也证实人参皂苷Rb1及Rg1是其作用于神经系统的主要成分.鉴于在细胞和分子水平上,已对其进行了较深入的研究,笔者就近年来的研究现状作一综述,希望为今后进一步探索和应用提供借鉴.     

人参皂苷对心肌缺血/再灌注损伤的保护机制

急性心肌梗死开通闭塞血管后会出现缺血/再灌注损伤,其机理是缺血心肌重新接受充足氧气后,会产生大量活性氧。活性氧可直接氧化细胞成分,诱发心肌细胞损伤。人参皂苷Rb3和Rg1可减少活性氧的产生,且Rg3可通过激活Keap-1/Nrf2/HO-1信号通路,增加抗氧化蛋白的表达。缺血/再灌注损伤还伴随着心肌细胞凋亡,稀有人参皂苷标准提取物可减轻内质网应激,抑制心肌细胞TXNIP/NLRP3信号通路的活性,减少白细胞介素-1β的分泌,从而减少心肌细胞凋亡。Rb2通过激活SIRT1对I/R损伤发挥保护作用,Rg5抑制Drp1激活并通过Akt激活保留线粒体HK-II来减少心肌细胞凋亡。另外,人参皂苷Rb3还可抑制核因子-κB的活化,进而减少炎症因子的产生。心肌梗死后,部分患者会出现心肌纤维化和心力衰竭,人参皂苷Re可通过TGF-β1/Smad通路抑制Ⅰ型胶原的表达,从而减轻心肌纤维化。人参皂苷Rg3可通过增加SERCA2a蛋白的SUMO化水平来提高其活性,从而维持心肌细胞内钙稳态,改善心力衰竭。综合既往研究,人参皂苷通过多途径、多靶点发挥对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。     

黄芪甲苷和三七总皂苷中主要有效成分抗PC12细胞氧化损伤的配伍研究

目的 探索黄芪甲苷和三七总皂苷中主要有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1抗CoCl2 诱导的PC12细胞氧化损伤的有效配伍剂量.方法 采用CoCl2诱导PC12细胞氧化损伤模型,以细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率为指标,研究4种有效成分对PC12细胞氧化损伤的有效机制浓度.在此基础上按Us*(85)均匀设计实验,确定4种有效成分的有效配伍剂量.结果 4种有效成分都能抑制CoCl2诱导的PC12细胞LDH的漏出,与损伤组相比差异有统计学意义(P＜0.05).且随着药物浓度的增加,对LDH漏出率的抑制作用增强.黄芪甲苷和人参皂苷Rb1在50 μmol/L,人参皂苷Rg1和三七皂苷R1在100 mol/L浓度时LDH漏出抑制率约为80％.U8*(85)均匀设计实验多元逐步回归分析得:4种有效成分的8个不同浓度配伍都能抑制CoCl2诱导的PC12细胞LDH的释放,与损伤组相比差异有统计学意义(P＜0.05).人参皂苷Rg150 μmol/L、黄芪甲苷0.781 25 μmogL、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1各1.562 5μ.mol/L配伍时抗PC12细胞氧化损伤的效应最强.结论 人参皂苷Rg1 50 μmol/L、黄芪甲苷0.78125 μmol/L、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1各1.562 5μmol/L配伍组方为抗PC12细胞氧化损伤的有效配伍剂量.     

人参皂苷Rb1改善局灶性CIRI小鼠模型神经损伤的调控机制研究

目的 探究人参皂苷Rb1对局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的调控机制。方法 60只C57/BL小鼠随机分为6组(n=10):假手术组、CIRI模型组、人参皂苷Rb1低、中、高剂量组和尼莫地平(阳性对照)组。手术方法构建局灶性CIRI小鼠模型。行神经功能评分、行为学测试，尼氏染色检测海马体中尼氏体数量。qPCR、Western blot和免疫组化检测人参皂苷Rb1对海马体中Wnt信号通路分子表达的影响，通过分子对接和共沉淀实验研究人参皂苷Rb1的调控机制。结果 与CIRI模型组相比，添加人参皂苷Rb1后能够降低小鼠神经功能评分(P<0.05),降低通过平衡木时间(P<0.05),提高小鼠进入正确臂时间(P<0.05),增加小鼠摇摆时间和攀爬时间(P<0.05),证明了人参皂苷Rb1能够有效恢复小鼠神经系统功能，提高模型小鼠行为学能力。人参皂苷Rb1治疗后海马体中轴抑制蛋白2(Axin2)和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)降低，Wnt3a、Wnt1和β-连锁蛋白(β-catenin)表达量增加。结论 人参皂苷Rb1能够改善CIRI小鼠模型的神经功能并提高海马体...     

人参皂苷Rb1通过P38MAPK信号通路对缺血/再灌注损伤心肌的保护作用及机制研究

目的:探讨人参皂苷Rb1通过P38MAPK信号通路对缺血/再灌注损伤心肌的保护作用及机制。方法:通过建立模型模拟缺血/再灌注损伤心肌,分析人参皂苷Rb1在成年雄性SD大鼠中的机制,并随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、人参皂苷Rb1组(GS Rb1组)。结果:在体水平再灌注2h后,GSRb1组心肌梗死面积、P38α、TNF-α和Caspase-3含量较I/R组均减低(P0.05),在敲低P38α的情况下,I/R组及GS Rb1组均与未敲低组相比(P0.001,P0.01,P0.01),转染si-P38后,I/R组和GS Rb1组凋亡细胞与未敲低组相比(P0.01,P0.01),且GS Rb1组之间相比有统计学意义(P0.01)。结论:人参皂苷Rb1通过抑制p38α磷酸化显著减小缺血再灌注损伤心肌梗死面积、降低TNF-α和Caspase-3含量,进而抑制TNF-α细胞受体途径凋亡。     

人参皂苷Rb1对胎鼠背根神经节损伤的保护作用

目的观察不同浓度人参皂苷Rb1对损伤胎鼠背根神经节（DRG）神经元形态学改变的影响,探讨人参皂苷Rb1对谷氨酸引起的兴奋性神经毒损伤的保护作用,为Rb1的进一步研究和临床应用提供理论依据。方法选择胎龄为15 d的SD大鼠,获取DRG神经元并进行体外分散培养48 h后,随机分为对照组、谷氨酸损伤组、谷氨酸损伤＋低浓度Rb1（10μg/ml）保护组和谷氨酸损伤＋高浓度Rb1（100μg/ml）保护组,继续培养12 h。终止培养后,倒置相差显微镜观察各组神经元的生长状态,MTT检测不同浓度人参皂苷Rb1孵育的背根神经节神经元的凋亡增殖情况。结果对照组DRG神经元细胞贴壁呈单层散在分布,少部分出现细胞聚集现象,突起较长且互相交织形成网状;谷氨酸损伤组DRG神经元细胞聚集现象明显,神经元突起变短、断裂甚至消失;谷氨酸损伤＋Rb1保护组DRG神经元细胞部分呈簇状聚集,部分呈单个散在分布,突起仍然相互交织。MTT结果显示谷氨酸损伤＋Rb1保护组细胞存活率均高于谷氨酸损伤组,但高浓度Rb1保护组与低浓度Rb1保护组之间差异无统计学意义。结论人参皂苷Rb1可以影响损伤胎鼠DRG神经元的形态学改变和凋亡增殖情况,对胎鼠背根神经节神经元具有一定的保护作用。     

人参皂苷Rb1、Re对Aβ25-35诱导SK-N-SH细胞损伤的保护作用

目的观察人参皂苷Rb1和Re对Aβ25-35诱导损伤SK-N-SH细胞的保护作用进而研究其内在机制。方法用Aβ25-35处理人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞),模拟阿尔茨海默病的神经元损伤,并以适当浓度人参皂苷Rb1或Re处理。采用MTT法测定细胞存活率,荧光探针法检测细胞内ROS水平变化,Western blot法检测tau蛋白磷酸化水平及活性GSK-3β蛋白表达。结果培养基中添加Aβ25-35后SK-N-SH细胞存活率明显下降,而人参皂苷Rb1和Re均能显著提高损伤细胞的存活率,降低细胞内ROS水平,降低活性GSK-3β的表达,造成tau蛋白396位点的磷酸化程度下降,缓解tau蛋白的过度磷酸化。结论人参皂苷Rb1和Re对Aβ25-35诱导损伤的SK-N-SH细胞具有一定的保护作用。     

人参皂苷Rb1对心血管系统的药理作用研究进展

人参皂苷Rb1是我国传统中药——人参的主要有效成分之一,属于人参皂苷二醇型,其在中枢神经系统、心血管系统、免疫系统以及在抗肿瘤方面都具有显著调节作用。人参皂苷Rb1通过对钙、钾等多种离子通道的影响而起到抗心律失常作用;其可保护心肌细胞因缺血/再灌注或其他化学物质引起的损伤,抑制急性心肌梗死后心室重构,抑制心肌肥大和心室肥厚,保护心脏收缩功能;其可通过刺激内皮细胞依赖的血管舒张,实现降压;此外,其还通过改善血管内皮细胞功能,而对多种心血管疾病(如高血压、冠心病)起到防治作用。     

西洋参叶三醇皂苷对正常大鼠学习记忆的影响

西洋参Panax quinquefolium L.为五加科多年生宿根草本植物。许多资料表明西洋参主要活性成分是人参皂苷,在西洋参的根、茎、叶、花、果实、种子中都含有人参皂苷。人参皂苷根据其基础化学结构可分为3组:人参二醇(如Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg3、Rh2和Rs1),人参三醇(如Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1)和齐墩果酸(如Ro)[1]。有实验发现短期内给予西洋参茎叶中的人参皂苷对动物受损伤的学习记忆功能有改善作用[2]。西洋参作为一种滋补药品,在较长期应用的条件下对正常大鼠学习记忆功能有何影响未见报道。本实验初步探讨长期应用西洋参叶三醇皂…     

人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠LncRNA Malat1表达的调控作用

目的探讨人参皂苷Rb1是否可以增加脑缺血再灌注损伤小鼠脑梗死半暗带区LncRNA Malat1的表达。方法将30只C57/B6小鼠按随机数字表法分成假手术组、模型+生理盐水对照组、模型+人参皂Rb1组,每组10只。采用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。人参皂苷Rb1组和模型组大鼠在制模后即刻分别腹腔注射人参皂苷Rb1(40 mg/kg)和等量生理盐水。再灌注损伤后24 h观察各组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、Bcl-2蛋白表达量和LncRNA Malat1含量。结果与假手术组相比,模型组小鼠神经行为学评分和脑梗死体积明显增加(P0.05),Bcl-2蛋白表达量和LncRNA Malat1表达水平明显增加(P0.05);与模型组相比,人参皂苷Rb1组小鼠神经行为学评分和脑梗死体积明显减少(P0.05),Bcl-2蛋白表达量和LncRNA Malat1表达水平进一步增加(P0.05)。结论人参皂苷Rb1可以改善MCAO小鼠的神经行为学评分、减小脑梗死体积和增加Bcl-2蛋白表达量。人参皂苷Rb1具有脑保护作用,其可能的机制与增加小鼠脑梗死半暗带区LncRNA Malat1的表达有关。     

人参皂苷Rb1与黄芪协同逆转肝癌免疫抑制的实验研究

目的探讨人参皂苷Rb1与黄芪协同应用逆转肝癌细胞抑制NK细胞免疫功能的效果及其机制.方法分别对肝癌细胞(HepG2)进行人参皂苷Rb1、黄芪以及人参皂苷Rb1联合黄芪的预处理,分别收集经过药物作用后HepG2的培养上清,同时收集未经过药物预处理的HepG2的培养上清作为对照.通过ELISA方法检测上清中抑制性细胞因子IL-10的水平;检测比较各种上清对NK细胞胞吐和杀伤功能的影响.结果未经过药物预处理的HepG2的培养上清中含有IL-10,经过人参皂苷Rb1、黄芪以及人参皂苷Rb1联合黄芪的预处理后,HepG2培养上清中的IL-10水平下降,以联合应用两种药物的效果最为明显(P<0.01).同时未经过药物预处理的HepG2的培养上清作用于NK细胞后显著抑制其胞吐和杀伤功能;而经过人参皂苷Rb1、黄芪以及人参皂苷Rb1联合黄芪的预处理后,HepG2的培养上清对于NK细胞的胞吐和杀伤功能的抑制减轻,以联合应用两种药物的效果最为明显(P<0.01).结论肝癌细胞(HepG2)可能通过分泌抑制性细胞因子IL-10下调NK细胞的胞吐,减少其释放杀伤介质,从而达到抑制免疫的作用.而人参皂苷Rb1以及黄芪能够拮抗HepG2对NK细胞的免疫抑制,而且两者合用有协同效果,从而提高机体的抗肿瘤免疫.     

人参皂苷Rg1和Rb1抗肝纤维化的体视学研究

目的观察三七总甙单体成分人参皂苷Rg1和Rb1对肝纤维化的作用。方法用50%四氯化碳致大鼠肝纤维化模型,共35 d,同时给予三七总皂甙单体成分人参皂苷Rg1或Rb1治疗,于第5周时分离肝组织,电镜观察肝组织病理变化,并应用体视学方法计量各组大鼠肝细胞线粒体的体积密度(Vvm)、面积密度(Svm)、比表面(Qm)和面数密度(Nam)。结果人参皂苷Rg1及三七总甙能减轻肝组织胶原的沉积,改善肝纤维化程度,而人参皂苷Rb1不能改善肝纤维化程度;各组大鼠肝细胞线粒体体视学结果比较组间存在差异。结论人参皂苷Rg1具有三七总甙的抗肝纤维化作用,在一些方面甚至超过三七总甙,故可以认为是较理想的防治肝纤维化的药物。人参皂苷Rb1不具有抗肝纤维化的作用,不是三七总甙抗肝纤维化的有效成分。     

人参Rb组皂苷对实验性心梗大鼠血粘度和游离脂肪酸水平的影响

人参Rb组皂苷(简称G-Rb)系从五加科人参属植物人参及西洋参茎叶提取的总皂苷中分离而得.人参皂苷单体Rb1、Rb2、Rb3虽均具有钙通道阻滞作用,但在抗心肌缺血、抗氧化、调节血脂及改善血粘度等药理作用上有所不同[1～3].     

人参皂苷对心衰大鼠Periostin蛋白及TGF-β信号通路影响

目的:探讨人参皂苷对心衰大鼠Periostin蛋白及TGF-β信号通路的作用机制。方法:选取SD大鼠100只。随机分为对照组、心衰组、人参皂苷Rb1低剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组、西药组等5组。每组20只。手术诱导心衰模型,手术方法为缩窄腹主动脉,并给予相应药物治疗。观察大鼠一般形态及检测每组大鼠的心肌组织中periostin蛋白及TGF-β1蛋白的表达。结果:Periostin蛋白含量表达:与心衰组比较,人参皂苷Rb1高剂量组Periostin蛋白表达降低明显(P0.05),西药组和人参皂苷Rb1低剂量组Periostin蛋白表达显著降低(P0.01)。TGF-β1蛋白含量:心衰组和对照组的TGF-β1蛋白含量对比显著升高(P0.01);和心衰组对比,人参皂苷Rb1高剂量组、西药组的TGF-β1蛋白含量显著下降(P0.01)。结论:人参皂苷Rb1能够通过影响心肌组织periostin蛋白的表达,抑制TGF-β信号通路,从而改善心衰大鼠心室重构,防治心力衰竭。     

人参皂苷对血管的保护机制

内皮功能障碍是动脉硬化、血管收缩和舒张以及血小板和白细胞黏附改变的初始步骤。高同型半胱氨酸血症、氧化低密度脂蛋白和尼古丁均可抑制内皮细胞中NO的生成,增加活性氧的产生,从而损伤内皮细胞。人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb3和Rd均有增加NO生成的功效,Rb1和Rb3还可以减少活性氧的生成,Rd可减轻内皮细胞凋亡并减少黏附分子表达,从而发挥对内皮细胞的保护作用。新生内膜增生是血管损伤后动脉狭窄的主要原因,Re和Rb3均可抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,但也有部分人参皂苷对VSMC产生了副作用,如Rg3可导致血管收缩力受损和结构重塑,诱导VSMC功能障碍。动脉粥样硬化还与巨噬细胞凋亡和炎症以及泡沫细胞形成密切相关,人参皂苷CK和Rg1可激活巨噬细胞自噬,抑制巨噬细胞凋亡;CK还可抑制泡沫细胞形成,减轻巨噬细胞炎症,从而减轻动脉粥样硬化进展。综合既往研究,人参皂苷通过多途径、多靶点发挥对血管的保护作用。