痰与支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌FQ-PCR检测对涂阴肺结核诊断价值的比较

目的 探讨呼吸道痰标本和支气管肺泡灌洗液(BALF)Mtb-DNA检测对涂阴肺结核的诊断价值。方法 选择福州肺科医院2009年7月至2009年12月胸部影像学疑为肺结核但至少3份痰涂片镜检Mtb阴性,或胸部影像学无法排除肺结核需进一步检查的患者共51例,所有入选患者初诊根据临床症状、体征、胸部影像学结果分为疑似结核组（24例）和待排结核组（27例）。均行抗结核抗体、红细胞沉降率检测及PPD试验,应用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）定性及定量检测两组患者痰和BALF中的Mtb-DNA。结果 疑似结核组和待排结核组各有22例和2例确诊肺结核,确诊的24例中痰FQ-PCR敏感度为45.8%（11/24）,特异度为96.3%（26/27）,Youden指数42.1%;BALF FQ-PCR的敏感度为75.0%（18/24）,特异度96.3%（26/27）,Youden指数71.3%。结论 FQ-PCR检测BALF Mtb较痰更为敏感,对影像学疑诊但痰涂片阴性的结核患者有很高的实用价值,尤其适用于无痰的患者。     

环介导等温扩增法快速检测结核分枝杆菌的初步观察

目的建立1种用于结核分枝杆菌快速检测的LAMP技术平台,用于结核分枝杆菌的鉴定。方法使用了11株标准菌株,建立了一套用于结核分枝杆菌快速检测的平台,对灵敏度和特异性进行优化,随后使用47株临床分离株,和13株食源性致病菌对建立的方法进行了验证。结果经过标准菌株建立并优化检测平台,经过优化的LAMP反应体系检出限为1pg的模板DNA,在使用47株临床分离株,和13株食源性致病菌对方法进行验证,发现LAMP特异性为97.4%。结论通过这项研究发现LAMP应用于结核分枝杆菌的快速检测,具有检出浓度低、特异性强和检测周期短的优点。     

CRISPR-Cas13a检测在肺结核诊断中的价值

目的:评价应用CRISPR-Cas13a检测临床样本对肺结核的诊断价值。方法:采用回顾性研究方法,收集首都医科大学附属北京胸科医院2022年9月至2022年12月收治住院的102例经GeneXpert MTB/RIF检测(简称“Xpert检测”)确诊的肺结核患者的支气管肺泡灌洗液标本,作为结核病组;收集同期收治入院的100例非结核病患者(包括肺癌,细菌性肺炎,支气管扩张,慢性阻塞性肺疾病)的支气管肺泡灌洗液标本,作为非结核病组。所有患者的支气管肺泡灌洗液标本均进行涂片抗酸杆菌染色镜检、培养、Xpert检测及CRISPR-Cas13a检测。以Xpert检测结果为参照,评价CRISPR-Cas13a检测支气管肺泡灌洗液对肺结核的诊断价值。结果:结核病组102份标本中,CRISPR-Cas13a检测阳性为99份(97.1%),涂片阳性40份(39.2%),培养阳性68份(66.7%)。CRISPR-Cas13a检测阳性率明显高于涂片和培养法,差异有统计学意义(涂片：χ²=58.141,P<0.001;培养：χ²=30.250,P<0.0...     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

支气管肺泡灌洗液检查对痰涂阴肺结核的诊断价值

本文报告对痰涂阴肺结核患者纤维支气管镜刷检、活检、支气管肺泡灌洗液细菌学检查和术后痰涂片镜检结果。ＢＡＬＦ涂片辅以术后痰涂片检出率达３２．７％，简单、快速。根据镜下所见采用不同的取材方法可望提高诊断率。指出常规痰涂片抗酸杆菌阴性的肺结核病人并非均为不排菌者，部份病人仍需积极治疗。     

环介导等温扩增法检测临床标本中结核分枝杆菌的系统评价

目的采用Meta分析的方法评价环介导等温扩增法（LAMP）检测临床标本中结核分枝杆菌的准确性。方法通过检索PubMed、Embase、WebofScience、CochraneLibrary、CNKI、万方、维普数据库广泛收集文献,根据QUADAS质量评价标准评价纳入文献的质量,最终纳入16篇相关文献,共计18项研究。应用Meta—Disc软件对环介导等温扩增法检测临床标本中结核分枝杆菌的敏感度、特异度、诊断比值比进行合并分析,对纳入的研究绘制受试者工作特征曲线。对纳入的研究进行异质性检验,采用Meta回归分析异质性的来源。Meta回归会生成相对诊断比值比（relativediagnosticoddsratios,RDOR）。当RDOR〉1．0,表明某个研究特征比没有这个特征的诊断准确性要高。结果最终纳入16篇文献,共计18项研究综合分析所有数据,合并敏感度为0．91（95％CI：0．90～0．93）;合并特异度为0．97（95％CI：0．96～0．97）;合并诊断比值比为283．02（95％CI：157．37～509．00）;受试者工作曲线曲线下面积为0．9829。研究间异质性来源与结果判断相关,紫外灯判读试验的精确性比肉眼判读试验的精确性高5．66倍（RDOR--5．66,95％CI：1.32-24．22,P=0．0225）。结论对纳入的研究分析证实,环介导等温扩增法检测临床标本中的结核分枝杆菌的敏感度和特异度很高,表明该方法在结核病的快速诊断方面具有优势。     

环介导等温扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用评估

目的 进行环介导等温扩增法（LAMP法）快速检测结核分枝杆菌的临床验证与应用,评估该方法在结核病临床诊断中的效能。方法 选取广东6地市专业结核病防治机构（简称“结防机构”）的肺部不同疾病及健康人员的痰标本2129份,分别采用直接涂片法、罗氏固体培养法及LAMP法检测痰标本中结核分枝杆菌;另广州、汕头两市337例结核病患者的痰标本浓缩处理后进行实时荧光定量（qPCR）及LAMP两种方法检测。 结果 2129例痰标本中,直接涂片法、罗氏固体培养法和LAMP法的阳性检出率分别为13.2%（282/2129）、21.7%（463/2129）和20.3%(432/2129);同罗氏培养法相比,LAMP法灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值分别为89.1%(432/485)、95.5%(1570/1644)、85.4%(432/506)和96.7%(1570/1623);337例浓缩处理后的痰标本qPCR阳性率为35.0% (118/337),LAMP阳性率为35.9% (121/337);LAMP法同直接涂片法检测、罗氏固体培养法和qPCR法比较,检测结果实际一致率分别为87.9%（Kappa值＝0.612）、96.1%（Kappa值＝0.89）和91.4%（Kappa值＝0.812）。 结论 LAMP法用于痰标本中结核分枝杆菌检测,其效能同罗氏培养法及qPCR法相当,同直接涂片法相比,LAMP法能够大幅提高阳性检出率,具有很好的临床应用和推广前景。     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的　研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法 对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果 防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论 防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

支气管肺泡灌洗液纳米孔测序对涂片阴性肺结核诊断价值的验证性研究

目的:验证纳米孔测序技术用于疑似肺结核患者支气管肺泡灌洗液样本的诊断价值。方法:采集2021年11月至2022年4月首都医科大学附属北京胸科医院就诊的50例符合入组标准的涂片阴性疑似肺结核患者的支气管肺泡灌洗液作为研究样本,对其进行BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960培养”)、GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)和纳米孔测序。以临床最终诊断为参照标准,比较3种方法对诊断肺结核的检测效能。结果:50例疑似肺结核患者中,最终确诊肺结核22例(44.0%)、非结核分枝杆菌病10例(20.0%)和细菌性肺炎18例(36.0%)。以最终临床诊断为参照标准,纳米孔测序测定技术、MGIT 960培养和Xpert检测的敏感度分别为72.7%(16/22)、27.3%(6/22)和31.8%(7/22),特异度分别为78.6%(22/28)、75.0%(21/28)和96.4%(27/28),符合率分别为76.0%(38/50)、54.0%(27/50)和68.0%(34/50),约登指数分别为0.51、0.02和0.28。结论:纳米孔测序检测BALF样本具...     

支气管肺泡灌洗液行Xpert MTB/RIF检测对涂阴肺结核的诊断价值

目的评价支气管肺泡灌洗液行Xpert MTB/RIF检测对涂阴肺结核的诊断价值。方法选取从2014年11月至2015年12月徐州市传染病医院收治的3次痰涂片阴性的可疑肺结核患者110例,对所有患者行支气管镜检查进行刷检及收集BALF,进行涂片镜检找抗酸杆菌、结核分枝杆菌培养及Xpert MTB/RIF检测,同时进行诊断。分别以BALF的罗氏培养结果及临床诊断标准作为肺结核诊断的阳性标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结果以BALF培养阳性结果作为判断肺结核的阳性标准,BALF行Xpert MTB/RIF检测对诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为100%、97.4%、97.8%、100%。以临床诊断标准为诊断肺结核的阳性标准,BALF行Xpert MTB/RIF检测对诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.9%、97.4%、98.3%、74.0%。以DST结果为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为75.0%、96.0%。结论BALF行Xpert MTB/RIF检测在涂阴肺结核中的敏感度、特异度均较高,且检测快速并能判断是否利福平耐药,对涂阴肺结核的快速诊断及治疗具有较大的应用价值。     

支气管肺泡灌洗检查对痰涂阴肺结核的诊断价值

痰涂阴肺结核在临床上颇为多见，诊断往往根据X线胸片来判断．易造成误诊，为了提高痰涂阴肺结核的诊断率，我们进行了纤支镜支气管肺泡灌洗液(BALF)做PCRTB-DNA检测，结果报告如下。     

荧光定量PCR测定支气管肺泡灌洗液中TbDNA对涂阴肺结核的诊断价值

目的探讨纤支镜肺泡灌洗液中结核分枝杆菌DNA在涂阴肺结核诊断中的价值。方法应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对300例涂阴肺结核,178例菌阳肺结核及119例肺炎或肺癌患者的纤支镜肺泡灌洗液标本进行结核分枝杆菌DNA检测。结果3种病因肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA阳性检出率分别为：74.3%（223/300）、94.9%（169/178）、17.6%（21/119）。结论荧光定量聚合酶链反应检测肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA,用于肺结核诊断可提高肺结核诊断的敏感性和准确性,明显优于痰抗酸染色,亦较痰结核菌培养诊断灵敏、快速,可作为肺结核诊断较可靠指标。     

支气管肺泡灌洗液噬菌体生物扩增法对老年不典型肺结核的诊断价值

老年患者由于抵抗力低、合并糖尿病者较多,导致发生肺结核的机会增加.而老年肺结核患者由于症状、胸部影像、PPD试验等均可表现不典型,痰涂片检查阳性率低,给老年肺结核诊断带来极大困难.噬菌体生物扩增法(PhaB)具有特异、快速、简便等优点.本研究采用支气管肺泡灌洗液(BALF)标本进行PhaB检测老年不典型肺结核,并与涂片法比较,以探讨其应用的价值.     

结核分枝杆菌环介导恒温扩增（LAMP）快速检测方法的评价

目的 对国内建立的结核分枝杆菌DNA环介导恒温扩增（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）快速检测方法进行了介绍和评价。 方法 实验菌株来源于北京结核病胸部肿瘤研究所。以结核分枝杆菌作为研究对象,设计了4 条LAMP 引物特异地识别结核分枝杆菌中 gyr B 基因的6个特殊区域。所有的菌株样本提取DNA作为模板,加入LAMP反应管后,65 ℃恒温反应60 min即可。其结果可以通过肉眼观察到的颜色变化来判断。 结果 实验共验证了79株临床和标准菌株。对于菌株的培养物,LAMP实验的灵敏度为100%,特异度为92%。 结论 结核分枝杆菌LAMP快速检测方法是一种快速、可靠的结核分枝杆菌诊断方法。     

SAT技术与荧光定量PCR在痰涂片阴性肺结核诊断中的价值研究

目的通过采用RNA恒温扩增实时检测技术(SAT-TB)与荧光定量PCR(FQ-PCR)两种不同类型的方法检测痰涂片阴性肺结核患者的肺泡灌洗液(BALF)标本,探讨两种检测方法的临床价值。方法采集2015年3月-2017年3月本院收治的疑似肺结核,且至少3次痰涂片结果为阴性的患者共1050例,其中531例肺结核为观察组,519例其他肺部疾病患者为对照组。以临床诊断为金标准,计算SAT-TB、FQ-PCR、结核分枝杆菌快速培养、抗酸杆菌染色等检测方式的各类评价指标,并进行比较。结果菌阴肺结核肺泡灌洗液抗酸杆菌染色、结核分枝杆菌快速培养、SAT-TB、FQ-PCR单独检测与SAT-TB联合FQ-PCR检测单阳、双阳的准确性分别为12. 99%、21. 28%、56. 69%、54. 24%、62. 52%、42. 37%,SAT-TB、FQ-PCR与SAT-TB联合FQ-PCR检测的诊断价值均具有统计学意义(P 0. 05);对痰涂片阴性的肺结核患者的肺泡灌洗液(BALF)诊断有价值,单阳 SAT-TB FQ-PCR双阳结核分枝杆菌快速培养抗酸杆菌染色。结论与细菌学检测方法比较,SAT-TB、FQ-PCR检测具有快速、敏感等优势,能显著缩短确诊时间,提高诊断的准确率,给痰涂阴性肺结核患者提供了有效的诊断手段和依据,值得临床推广应用。     

支气管肺泡灌洗液细菌学检查和腺苷脱氨酶活性测定对痰涂阴肺结核患者的诊断价值

作者报告痰涂阴肺结核患者纤支镜刷检、活检、支气管肺泡灌洗液（BALF简写B）细菌学检查、腺苷脱氨酶（ADA）活性测定和术后痰涂片检查结果。B涂＋术后痰涂片和B涂＋B-ADA阳性率分别达32．7％和36．6％，多指标联合检测阳性率达46．9％，指出常规痰涂片阴性的肺结核患者并非都是不排菌者，部份患者仍需积极治疗。     

纤支镜灌洗液的结核分支杆菌快速培养对不典型肺结核的诊断价值

目的　评价纤维支气管镜(以下简称纤支镜)支气管肺泡灌洗液(BALF)的结核分支杆菌快速培养对不典型肺结核的诊断价值。方法 选无痰或痰菌阴性的不典型肺结核患者49例行纤支镜检查,进行活检、刷检、BALF经BBLMGIT分支杆菌快速培养查结核杆菌。结果 49例经纤支镜刷检、BALF快速培养结核分支杆菌检出率分别是67.4%、83.7%,其中15例经纤支镜肺活检,10例病理证实为结核肉芽肿,检出率为66.7%。结论 纤支镜对无痰或痰菌阴性下BALF行结核分支杆菌快培对不典型肺结核具有较高的诊断价值,快速,阳性率较高。根据镜下所见采用不同的取材方法可望提高诊断率。