过氧化氢联合低频超声波诱导卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡的研究

目的探讨过氧化氢联合超声波诱导人卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡的效果。方法体外培养人卵巢癌A2780/DDP细胞,MTT法研究过氧化氢对卵巢癌A2780/DDP细胞生长抑制情况,选择过氧化氢对A2780/DDP细胞作用的合适作用参数;实验分为对照组,0.5 W/cm2、30 s超声组,10μmol/L过氧化氢组,10μmol/L过氧化氢联合0.5 W/cm2、30 s超声组;不同因素作用A2780/DDP细胞24 h后,Hoechst33258染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测各处理因素作用A2780/DDP细胞的凋亡率;Western blot检测各组细胞caspases-9蛋白表达量的改变。结果对照组,0.5 W/cm2、30 s超声组和10μmol/L过氧化氢组无明显凋亡改变,而10μmol/L过氧化氢联合0.5 W/cm2、30 s超声组与对照组之间比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论过氧化氢联合超声波能增强诱导人卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡的作用。     

土贝母皂苷甲增强人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性

目的探讨土贝母皂苷甲(tubeimoside 1,TBMS1)促进人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂(cisplatin,DDP)的增敏作用。方法采用MTT法分别检测顺铂和TBMS1对A2780/DDP细胞作用的半抑制浓度值(IC50),将实验分为对照组:只加等量生理盐水;顺铂组:给予6μmol/L顺铂处理;联合用药Ⅰ组:6μmol/L顺铂+3μmol/L TBMS1;联合用药Ⅱ组:6μmol/L顺铂+6μmol/L TBMS1。按上述方法处理细胞后,MTT法检测细胞活力;电泳法检测细胞内DNA损伤;流式细胞技术检测细胞凋亡及周期;Western blot分析周期蛋白A(Cyclin A)和周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果 TBMS1(3、6μmol/L)与顺铂(6μmol/L)联用使人卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性增强;细胞的DNA损伤随TBMS1浓度的增加而明显增多;细胞周期被阻滞在S期,联合用药Ⅰ和Ⅱ组S期所占比例分别为(51.23±3.53)%、(77.34±2.80)%;细胞凋亡率为(5.19±0.78)%、(7.11±1.06)%;Cyclin A的表达为1.89±0.28及2.91±0.43,CyclinD1为0.66±0.09及0.28±0.05(P<0.05,P<0.01)。结论 TBMS1显著增加顺铂对A2780/DDP细胞增殖抑制作用,Cyclin A、Cyclin D1可能参与其调节。     

中药陵水暗罗提取物暗罗素逆转卵巢癌细胞顺铂耐药研究

目的:探讨陵水暗罗提取物暗罗素(ZPT)对耐药卵巢癌细胞株顺铂(DDP)敏感性的影响。方法:MTS法检测暗罗素和顺铂对卵巢癌细胞株A2780和耐药株A2780/DDP的增殖抑制效应。Western Blot法检测A2780和A2780/DDP细胞株p65蛋白表达水平,荧光素酶法检测A2780和A2780/DDP细胞株NF-κB活性。结果:暗罗素可以显著抑制人卵巢癌细胞株A2780和耐药株A2780/DDP的增殖活性[A2780和A2780/DDP的半数抑制浓度(IC50)值分别为1.498μmol/L和1.516μmol/L];联合组(0.5μmol/L暗罗素+5μmol/L顺铂)相对于顺铂单药组,显著下调A2780/DDP的增殖活性(80.80%vs 35.63%,P<0.01)。荧光素酶法检测A2780和A2780/DDP细胞株的NF-κB活性显示,A2780/DDP组NF-κB活性是A2780组的1.92倍(P<0.01);Western Blot法检测p65蛋白表达水平,提示A2780/DDP组p65蛋白表达显著高于A2780组。相对于对照组,0.5μmol/L暗罗素可以显著下调NF-κB活性(100%vs 39.69%,P<0.01)。Western Blot法检查0.5μmol/L暗罗素对A2780/DDP抗凋亡蛋白Bcl-2的影响,发现暗罗素可以显著抑制Bcl-2蛋白表达。结论:陵水暗罗提取物暗罗素可以增加顺铂耐药细胞株A2780/DDP对顺铂的敏感性,暗罗素下调NF-κB-Bcl-2途径活性可能是其逆转顺铂耐药机制。     

积雪草诱导人卵巢癌细胞A2780凋亡机制研究

目的:观察积雪草对人卵巢癌细胞A2780凋亡的影响并探讨相关机制。方法:用10μmol·L~(-1)、25μmol·L~(-1)、50μmol·L~(-1)、75μmol·L~(-1)的积雪草处理人卵巢癌细胞A2780 24 h,用MTT法检测细胞活性;用流式细胞术检测卵巢癌细胞A2780凋亡;用qRT-PCR检测卵巢癌细胞A2780中Bax、Bcl-2 mRNA的表达;用western blot法检测卵巢癌细胞A2780中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:50μmol·L~(-1)、75μmol·L~(-1)的积雪草作用于细胞后,乳腺癌细胞A2780细胞形态发生明显改变,细胞皱缩、变圆。与对照组比较,75μmol·L~(-1)积雪草对卵巢癌细胞A2780抑制效果最明显。与对照组比较,50μmol·L~(-1)、75μmol·L~(-1)积雪草能够有效升高Bcl-2 mRNA的表达,降低Bax mRNA的表达,差异有统计学意义(P0.01)。不同浓度积雪草均能有效升高Bax的表达并降低Bcl-2的表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:积雪草可抑制肿瘤的生长,其作用可能是通过诱导卵巢癌细胞A2780凋亡来实现的。     

OSTP增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用

目的 研究卵巢癌特异性结合肽（OSTP）及联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞生长及凋亡的影响.方法 体外培养卵巢癌A2780细胞,随机分为4组：溶剂对照组（1640和0.1％ DMSO组）、OSTP组、紫杉醇组、OSTP联合紫杉醇组.采用四甲基偶氮唑盐（MTT法）检测OSTP对A2780细胞生长的影响;用Annexin-V-FITC和PI双染法标记A2780细胞,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 MTT法检测OSTP以不同浓度作用于卵巢癌A2780细胞时,可对该细胞的生长起到抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.应用流式细胞技术检测细胞凋亡发现：不同浓度的OSTP（20、40、80、160、320μmol/L）对A2780细胞的凋亡率分别7.88％、8.348％、8.727％、9.393％和10.68％,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）,提示OSTP可诱导细胞凋亡.OSTP和紫杉醇联合应用,在不同的预处理组（加OSTP80μ mol/L 0、3、6、12h）后再加紫杉醇10μmol/L作用48h,结果发现细胞凋亡率分别是39.40％、53.09％、48.18％和45.62％,均高于OSTP和紫杉醇单独用药及两者的凋亡率相加值,且差异有统计学意义（P ＜0.001）.提示OSTP能增强紫杉醇诱导的卵巢癌A2780细胞凋亡作用.结论 OSTP对卵巢癌A2780细胞有生长抑制及凋亡作用,尤其是OSTP能增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,对于探讨和开发OSTP作为靶向化疗增敏剂治疗卵巢癌有良好的应用前景.     

Aurora B基因沉默对卵巢癌细胞A2780紫杉醇化疗敏感性的影响

目的 研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制Aurora B基因表达对卵巢癌细胞A2780细胞紫杉醇化疗敏感性的影响.方法 采用RNAi方法,将不同浓度AURKB siRNA转入A2780细胞(实验组),同时设阴性对照组和空白对照组,并以不同浓度紫杉醇作用各组细胞.采用MTT检测细胞存活率;AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞内Caspase-3蛋白水平;Hoechst染色观察细胞凋亡.结果 A2780细胞转染不同浓度siRNA后,随着siRNA浓度增加,细胞存活率逐渐下降,至50 pmol/L时,实验组与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);不同浓度紫杉醇处理各组细胞,随着紫杉醇浓度增加,细胞存活率明显下降,当紫杉醇浓度至10 μmol/L时,实验组与空白对照和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);50 pmol/L siRNA 转染A2780细胞48 h,再以10 μmol/L 浓度紫杉醇处理细胞,实验组细胞凋亡率明显增加,与空白对照组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);50 pmol/L浓度siRNA转染A2780 细胞48 h,再以10 μmol/L 浓度紫杉醇处理细胞,实验组细胞内Caspase-3蛋白表达明显上调,细胞凋亡明显增加.结论 Aurora B的抑制可增强A2780细胞对紫杉醇的化疗敏感性,并使细胞凋亡增加.     

唑来膦酸对肺腺癌细胞的生长及化疗敏感性研究

目的:本研究主要探讨第三代双磷酸盐类药物唑来膦酸在体外对人肺腺癌细胞株A549生长的影响,进一步研究唑来膦酸与顺铂(DDP)对A549细胞的生长抑制是否具有协同作用。方法:采用MTT法检测不同剂量的唑来膦酸对人肺癌细胞株A549的生长作用,检测唑来膦酸单药及联合DDP对人肺腺癌细胞A549的增殖抑制,采用流式细胞术分析唑来膦酸联合DDP对细胞周期及凋亡的影响。结果:唑来膦酸对A549细胞的抑制效应与药物剂量及作用时间均成正比。单用唑来膦酸(1、10μmol/L)对A549细胞的生长抑制率分别为(20.69±2.69)%、(44.05±4.03)%,单用DDP(0.5mg/L)组的抑制率为(13.58±3.13)%。唑来膦酸(1、10μmol/L)联合DDP(0.5mg/L)作用A549细胞72h时,对A549细胞的生长抑制率分别为(44.23±3.77)%、(60.9±3.03)%,联合用药组与单药组相比差异有显著性(P<0.01)。唑来膦酸作用A549细胞72h的IC50值为25μmol/L。流式细胞术分析显示,单用唑来膦酸(1、10μmol/L)的细胞凋亡率分别为(16.94±1.95)%、(24.03±0.44)%,单用DDP(0.5mg/L)组的细胞凋亡率为(9.08±1.31)%。唑来膦酸(1、10μmol/L)联合DDP(0.5mg/L)时,引起的细胞凋亡率分别为(32.22±1.68)%、(39.22±7.00)%,联合用药组的凋亡率明显高于单药组(P<0.01)。唑来膦酸单药或者联合DDP均表现将A549细胞明显阻滞于S期(DNA合成期)。结论:唑来膦酸对肺癌细胞株有生长抑制作用,呈时间、剂量依赖性效应,其IC50值为25μmol/L。唑来膦酸可以干扰DNA合成,与DDP有协同作用。     

槐果碱对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、凋亡以及TGF-β蛋白的影响

目的 探讨槐果碱对非小细胞肺癌A549细胞殖、凋亡以及TGF-β蛋白的影响,并探讨其作用机制.方法 将非小细胞肺癌A549细胞(对数生长期)分5组,分别为空白对照组以及槐果碱给药组(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L).分别检测非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡水平(CCK-8法和...     

黄芩素对人舌鳞状细胞癌CAL27细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨黄芩素对人舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌) CAL27细胞增殖的影响,阐明其潜在的作用机制。方法：将对数生长期CAL27细胞分为对照组和不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0和200.0μmol·L^-1)黄芩素组,采用结晶紫染色法观察各组细胞克隆形成情况,CCK-8法检测各组细胞增殖率,2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测各组细胞中活性氧(ROS)水平,罗丹明123 (Rhodamine123)荧光探针检测各组细胞线粒体膜电位(MMP)水平。对数生长期CAL27细胞分为对照组和不同浓度(50、100和200μmol·L^-1)黄芩素组,采用流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率。对数生长期CAL27细胞分为对照组、不同浓度(50和100μmol·L^-1)黄芩素组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、50μmol·L^-1黄芩素+NAC组和100μmol·L^-1黄芩素+NAC组,采用DCFH-DA荧光探针和Rhodamine123荧...     

LY294002联合顺铂对卵巢癌细胞A2780和SKOV3增殖、侵袭的影响及机制

目的 探讨LY294002联合顺铂对卵巢癌细胞A2780和SKOV3的影响及机制研究.方法 将A2780和SKOV3细胞分为正常对照组、LY294002组、顺铂组和LY294002+顺铂组,采用CCK-8法检测不同浓度的LY294002(10、20、40、60)μmol/L和顺铂(5、15、25、40)μmol/L处理...     

卵巢癌耐药细胞株的P38MAPK活性与凋亡关系的研究

目的 研究卵巢癌细胞耐药过程中P38MAPK活性与凋亡的关系,探讨P38MAPK信号转导途径在卵巢癌细胞耐药中的作用.方法 流式细胞技术分析P38MAPK特异性抑制剂SB203580对A2780/Taxol细胞凋亡的影响;利用免疫细胞化学法观察SB203580处理后细胞内P38MAPK表达水平.四甲基偶氮唑蓝检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),Western blot检测细胞内P-gp蛋白表达.结果 与未干预组和对照组比较,SB203580(10μmol/L)干预24h后A2780/Taxol细胞凋亡率为23.7%(P＜0.01);A2780/Taxol细胞的P38MAPK表达颗粒密度减低,数量减少;紫杉醇对A2780/Taxol细胞的IC50显著降低(P＜0.01);P-gp蛋白表达水平明显降低.结论 P38 MAPK信号转导途径与卵巢癌耐药密切相关,可能参与卵巢癌耐药的形成.其可能机制为P38MAPK通路起到保护A2780/Taxol细胞逃避凋亡的作用.因此,阻断该通路可增强卵巢癌耐药细胞发生凋亡.     

洛铂诱导人肺腺癌A549细胞凋亡机制的实验研究

目的探讨洛铂(LBP)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡作用机制。方法取对数生长期的A549细胞分为阴性对照组和实验组(分别加入2.5、5和10μmol/L LBP)。采用倒置相差显微镜观察各组A549细胞形态学改变,利用流式细胞仪检测各组A549细胞凋亡率,RT-PCR检测凋亡A549细胞中Bax、Bcl-2的表达。结果显微镜下观察到LBP抑制A549细胞的增殖;流式细胞仪结果显示LBP诱导A549细胞凋亡,并呈浓度和时间依赖性;RT-PCR结果显示LBP可使A549细胞Bax基因表达上调,Bcl-2基因表达下调,二者呈负相关。结论 LBP明显诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,通过线粒体途径参与其凋亡过程。     

拓扑替康对人卵巢癌顺铂耐药细胞株作用的研究

目的:探讨拓扑替康(TPT)在体外诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡的作用及其对凋亡相关蛋白表达的影响。方法:应用TPT诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡,运用MTT法、透射电镜、DNA凝胶电泳检测和观察TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/杀伤效应、凋亡形态、生物特性。采用Westernblot印迹杂交法以检测TPT对凋亡相关蛋白bcl-2和bax表达的影响。结果:TPT可诱导细胞株A2780/DDP凋亡,经TPT作用后A2780/DDP细胞内bax蛋白增加,而bcl-2蛋白不表达,bax/bcl-2比值增加。结论:TPT可诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡,其机制可能与bax蛋白高表达及bax/bcl-2不表达有关。     

吉马酮调节FAK/YAP信号通路对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药性的影响

目的 探讨吉马酮(GMC)调节局部黏着斑激酶(FAK)/Yes相关蛋白(YAP)通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法 将A549/DDP细胞分为CK组、低剂量GMC组(GMC-L组,5μmol/L)、中剂量GMC组(GMC-M组,10μmol/L)、高剂量GMC组(GMC-H组,20μmol/L)、GMC-H+pcDNA组(20μmol/L+转染pcDNA)、GMC-H+pcDNA-FAK组(20μmol/L+转染pcDNA-FAK)。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况;检测多药耐药基因1(MDR1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷酸化的FAK(p-FAK)、YAP蛋白表达情况。结果 与CK组比较,GMC-L组、GMCM组、GMC-H组A549/DDP细胞OD450值、克隆形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数、MDR1、PCNA、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、p-FAK蛋白及核YAP蛋白表达降低,细胞凋亡率升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与GMC-H组、GMC-H+...     

青蒿琥酯增强顺铂对人肝癌HepG2细胞的细胞毒作用

目的 研究青蒿琥酯(Art)及其联合顺铂(DDP)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法 分别采用不同浓度的Art(0.16、0.8、4、20、100μmol/L)、DDP(0.16、0.8、4、20、100 mg/L)及Art(4μmol/L)和DDP(4 mg/L)联合处理HepG2细胞24 h、48 h和72 h,MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测Art(4μmol/L)组、DDP(4mg/L)组和Art(4μmol/L)+DDP(4 mg/L)联合处理组细胞48 h的凋亡状况.结果 随着处理时间延长(24～72h),Art和DDP对HepG2细胞生长的抑制/杀伤作用明显增强;它们在暴露72 h的条件下分别在0.16 μmol/L和0.8 mg/L以上浓度具有浓度依赖性细胞毒作用.Art联合DDP处理细胞组对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用比单用Art或DDP组更强(P＜0.05);人肝癌HepG2细胞48 h的早期凋亡率分别为:Art组23.5％,DDP组27.8％,Art+DDP联合用药组49.7％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 青蒿琥酯可抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导其凋亡;它与顺铂联合应用可能增强后者对人肝癌HepG2细胞的细胞毒作用.     

超声联合紫杉醇微泡对卵巢癌细胞株A2780/DDP增殖和凋亡的影响

目的:探讨超声联合紫杉醇微泡对人卵巢癌细胞A2780/DDP细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人卵巢癌细胞株A2780/DDP随机分为5组:对照组、紫杉醇组、紫杉醇+超声组、紫杉醇微泡组和紫杉醇微泡+超声组。采用噻唑蓝(Methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测作用24、48 h和72 h后卵巢癌细胞的增殖活性,并用Hochst 33258和TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。结果:MTT法检测显示紫杉醇微泡+超声组24、48 h和72 h抑制率分别为(37.20±2.01)%、(51.60±2.10)%和(57.47±2.85)%,明显高于其他各处理组(P<0.05);Hochst 33258和TUNEL染色均显示紫杉醇微泡+超声组凋亡率最高,作用24 h后的凋亡率为(46.10±4.15)%,明显高于其余各组(P<0.05)。结论:超声联合紫杉醇微泡能明显抑制人卵巢癌细胞A2780/DDP的增殖和诱导其凋亡。     

新型小分子化合物cyy-287联合CDK抑制剂roscovitine抑制SBC-2细胞生长的机制

目的：探讨新型小分子化合物cyy-287联合细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂roscovitine抑制小细胞肺癌细胞SBC-2生长的机制。方法：取对数生长期的SBC-2细胞,通过MTS检测cyy-287和顺铂(DDP)的IC₅₀值,以及cyy-287和roscovitine联合使用的联合指数(CI)。cyy-287与roscovitine联用抗肿瘤活性实验分组：DMSO(对照)组、roscovitine(20μmol/L)组、cyy-287(1.5μmol/L)组、cyy-287+roscovitine组。通过克隆形成实验检测各组药物处理后肿瘤细胞的生长和增殖情况;流式细胞术测定细胞周期分布和凋亡比例的变化情况。采用Western blot法检测各组CL-PARP的蛋白表达水平,以及AKT的磷酸化水平。结果：cyy-287对SBC-2的IC₅₀值为(1.77±0.10)μmol/L,与roscovitine联合使用的CI<1,说明两药联合使用存在协同作用。与cyy-287组比,cyy-287+roscovitine组能够显著抑制S...     

芹菜素对人急性髓性白血病细胞化疗敏感性的增强作用

目的:观察芹菜素(API)能否增强人急性髓性白血病(HL-60)细胞系细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性.方法:取对数生长期的HL-60细胞,分为API组、DDP组、API DDP组与空白对照组.API组加入API,终浓度为1.0 μmol·L-1,DDP组加入DDP,终浓度分别为1.0 mg·L-1,2.0 mg·L-1,4.0 mg·L-1,API DDP组API终浓度为1.0 μmol·L-1,DDP分别为1.0 mg·L-1,2.0 mg·L-1和4.0 mg·L-1,空白对照组仅加入等量完全培养基.采用MTT比色法测定细胞生长抑制率.另取对数生长期的HL-60细胞,分组同上,采用流式细胞术测定细胞凋亡率.另取对数生长期的HL-60细胞,分为3组,前2组加入1.0 μmol·L-1API,分别培养24 h,48 h,对照组仅加入等量完全培养基,采用间接免疫荧光标记流式细胞术观察API对HL-60细胞NF-κB和Bcl-2表达的影响.结果:1.0 μmol·L-1API无细胞毒作用,不能有效诱导HL-60细胞的凋亡,但它与不同浓度的DDP合用,可增强DDP对HL-60细胞增殖的抑制作用,并使细胞凋亡率明显增加.1.0 μmol·L-1API可抑制HL-60细胞NF-κB和Bcl-2的表达(P均＜0.01).结论:API可增强DDP对HL-60细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与下调NF-κB和Bcl-2的表达有关.     

动物源性ω-3 PUFAs对耐多柔比星人卵巢癌细胞系A2780逆转耐药性研究

目的:通过人卵巢癌细胞及多柔比星耐药株的体外细胞毒性实验,探讨两种动物源性ω-3多不饱和脂肪酸对耐多柔比星人卵巢癌细胞系A2780 逆转耐药性的作用.方法:采用浓度梯度倍增法诱导建立耐药细胞A2780/DXR,并与亲代细胞A2780进行耐药性比较.将耐药细胞A2780/DXR和亲代细胞A2780分别分为空白对照组、VRP逆转对照组(VRP10μmol/ml)、DHA10μmol/ml组、DHA20μmol/ml组、EPA10μmol/ml组、EPA20μmol/ml组,用动物源性ω-3多不饱和脂肪酸对A2780/DXR进行逆转耐药.结果:亲代细胞A2780组,DHA20μmol/ml和EPA20μmol/ml的逆转效果与VRP10μmol/ml的逆转效果具有显著性差异(P<0.05);耐药细胞A2780/DXR组,DHA20μmol/ml的逆转效果与VRP10μmol/ml的逆转效果具有显著性差异(P<0.05).结论:动物源性ω-3多不饱和脂肪酸DHA、EPA均能有效逆转耐药株对DXR的敏感性,且有明显的剂量依赖性.其中尤以EPA(20μmol/ml)的逆转作用更加明显.     

miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨miR-200b与miR-200c靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A和DNMT3B对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响。方法以人卵巢癌细胞株(A2780)、人卵巢癌顺铂耐药细胞株(A2780/DDP)作为研究对象,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测A2780、A2780/DDP细胞株中miR-200b与miR-200c表达量。耐药细胞株A2780/DDP转染后分为si-miR-200b组、si-miR-200c组、si-NC组,MTT法检测转染后3组细胞IC50值;蛋白印迹免疫法(Western blotting)检测转染后3组细胞DNMT1、DNMT3A和DNMT3B蛋白表达水平;流式细胞术检测转染后细胞凋亡率。结果qRT-PCR结果显示A2780细胞系中miR-200b与miR-200c表达高于A2780/DDP细胞系(P＜0.05)。 si-miR-200b组和si-miR-200c组IC50值、DNMT1、DNMT3A 和DNMT3B 蛋白表达水平低于si-NC组(P＜0.05)。结论miR-200b与miR-200c高表达能抑制DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基因表达,从而逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性。