人胰腺腺癌细胞系中p16基因、cyclin D1基因和pRb蛋白的改变

目的研究胰腺腺癌细胞系 pRb- p16细胞调节途径相关因子的异常情况。方法用 PCR及单链构象多态性 (SSCP)的方法检测 5株人胰腺腺癌细胞系 p16基因的缺失和突变;用 Southern印迹分析 cyclin D1基因的扩增;用 Western印迹分析检测 pRb基因的表达。结果 2株胰腺腺癌细胞系存在 p16基因第 1外显子纯合性缺失,未发现第 1、 2外显子的基因突变; 1株细胞系有 cyclin D1基因的扩增; pRb基因在 5株细胞系中均呈高磷酸化的表达。结论胰腺腺癌细胞系中存在 pRb- p16细胞调节途径的异常,主要表现为 p16和 cyclin D1基因的改变。     

人胰腺腺癌细胞系中p16基因、cyclin D1基因和pR6蛋白的改变

目的：研究胰腺腺癌细胞系ｐＲｂ－ｐ１６细胞调节途径相关因子的异常情况。方法：用ＰＣＲ及单链构象多态性（ＳＳＣＰ）的方法检测５株人胰腺腺癌细胞系ｐ１６基因的缺失和突变;用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的扩增;用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析检测ｐＲｂ基因的表达。结果：２株胰腺腺癌细胞系存在ｐ１６基因第１外显子纯合性缺失,未发现第１、２外显子的基因突变;１株细胞系有ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的扩增;ｐＲｂ基因在５株细胞系中均呈高磷酸化的表达。结论：胰腺腺癌细胞系中存在ｐＲｂ－ｐ１６细胞调节途径的异常,主要表现为ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因的改变。     

胰腺内分泌肿瘤P16、cyclinD1和PCNA蛋白表达

①目的　探讨胰腺内分泌肿瘤 (PET)组织P1 6、cyclinD1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的表达及其意义。②方法　应用免疫组化S P法 ,检测P1 6、cyclinD1和PCNA蛋白在 32例PET和 1 5例正常胰腺组织中的表达。③结果　P1 6蛋白在PET中的阳性表达率为 2 8.1 % ,在正常胰腺中为 86 .7% ,二者比较 ,差异有显著性 (χ2 =1 4 .0 6 ,P <0 .0 1 )。cyclinD1蛋白在PET中过表达率为 5 6 .3% ,而在正常胰腺未见过表达 ,二者比较差异有显著性(χ2 =1 3.6 7,P <0 .0 1 ) ;cyclinD1过表达组PCNA标记指数 (PCNALI)明显高于cyclinD1低表达组 (t =5 .76 ,P <0 .0 1 )。恶性PET的PCNALI显著高于良性PET(t=5 .32 ,P <0 .0 1 )。P1 6和cyclinD1蛋白在PET中的表达呈负相关 (r =- 0 .6 2 ,P <0 .0 1 )。④结论　P1 6蛋白表达缺失与cyclinD1蛋白过度表达可能在PET的发生中发挥协同作用 ,PCNA的高表达与cyclinD1过度表达可能与PET的恶性转化有关。     

p16、Rb、cyclinD1蛋白在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的检测细胞周期相关蛋白p16、Rb和cyclinD1在子宫内膜腺癌组织中表达。探讨其在子宫内膜腺癌中的临床病理意义及相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测60例子宫内膜腺癌组织和20例子宫内膜单纯性增生及20不典型性增生中p16、Rb和cyclinD1蛋白的表达状况。结果p16在子宫内膜腺癌和不典型性增生中及子宫内膜单纯性增生中表达率分别为（46．7％,60．0％,75．0％）。Rb在三者中表达率分别为（58．3％,75．0％,85．0％）。cyclinD1在三者中表达率分剐为：（55．0％,45、0％,20．0％）。p16与Rb表达呈负相关（P〈0．05）,cyclinD1与Rb表达呈正相关（P〈0．05）。p16与cyclinD1表达无相关性。结论子宫内膜腺癌发生机制涉及p16、Rb和cyclinD1调节环路中多个基因的异常。p16、Rb低表达和cyclinD1过度表达可能起在子宫内膜腺癌发生中起协同作用。     

原发性肝细胞癌中p16和cyclinD1蛋白表达及p16突变研究

目的：研究p16和cyclinD1蛋白表达及p16基因第2外显子突变与原发性肝细胞癌（HCC）发生的关系。方法：利用SP免疫组织化学方法与多聚酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）分析技术分别检测44例HCC及癌旁肝组织p16和cyclinD1蛋白表达和12例新鲜手术肝癌组织的p16基因突变。结果：HCC中p16蛋白阳性率和阳性信号强度明显低于癌旁肝组织（P＜0．01）,而cyclinD1蛋白阳性率和阳性信号强度明显高于癌旁肝组织,12例新鲜HCC标本中p16基因第2 子突变率为16．7％（2／12）,癌旁组织未发现p16基因第2外显子突变;有p16基因突变的HCCp16蛋白表达呈阴性。结论：P16蛋白失活或／和缺乏可能是肝细胞增殖失控的重要因素之一;HCC存在P16基因第2外显子突变,但不是频发事件;在HCC形成过程中,P16基因异常与cyclinD1过度表达可能存在协同作用。     

NSCLC中p16、pRB、cyclinD1和PCNA基因蛋白的表达及预后意义的评估

目的　研究抑癌基因蛋白 p16、pRB、细胞周期素D1(cyclinD1)及PCNA在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及与预后的关系。方法　复查全部 5 7例NSCLC患者病理切片 ,重新进行TNM分期和随访 ,应用免疫组化方法检测p16、pRB、cyclinD1及PCNA的表达 ,结果由Cox回归模型与Kaplan -Meier单因素分析处理。 结果　(1) 5 7例NSCLC标本均示PCNA阳性 ,PCNA高表达与p16 (- )、pRB(+)、PT状况、远处转移呈正相关。增殖指数 (PI)Ⅰ -Ⅱ级的生存时间≥ 2 4个月为 81.82 %,Ⅲ -Ⅳ级为 18.18%,P <0 .0 1。 (2 )细胞周期相关蛋白 ,p16阳性率是 49.12 %,p16的表达与腺癌分化有关 ,高分化 >中分化 >低分化 ,P <0 .0 1。p16 (+)与 p16 (- )患者生存期≥ 2 4个月的比率分别是 72 .73%和 2 7.2 7%,P <0 .0 5。pRB阳性表达率是6 4.91%。cyclinD1阳性表达率是6 4.91%。(3)p16 (- )、pRB(+)细胞增殖活性较强 ,生存期较短 ;cyclinD1(+)、p16 (- )、pRB(+)生存期较短 ,增殖活性较强。结论　PCNA及p16分别是NSCLC进展和预后判断的独立指标 ;PCNA、p16、pRB、cyclinD1联合检测对NSCLC的预后评估更有价值和客观。     

cyclinD1、p16与妇科肿瘤

由于基因技术的不断发展,人们普遍认识到肿瘤的发生与多种癌基因和抑癌基因的失调有关,同时也认识到细胞增殖周期的失调在肿瘤发生发展中的作用.肿瘤分子生物学家认为,某些细胞周期调控因子本身可作为癌基因或抑癌基因,促进或抑制肿瘤的发生发展.本文就细胞增殖周期G1期调控因子cyclinD1、p16及其相互作用与妇科肿瘤作一综述.     

人肺腺癌细胞系GLC-82中p21WAF1和p53基因的过表达

目的 探讨p21^WAF1和p53基因过表达对人肺腺癌细胞生长和细胞凋亡的影响。方法 用带有p21cDNA的真核表达载体pCEP和带有p53的腺病毒表达载体pAdCMV,分别通过基因转染和腺病毒感染,使其在人肺腺癌细胞系(GLC—82)中过表达;通过流式细胞仪、透射电镜和原位末端分析(TUNEL)观察细胞的生长和凋亡情况。结果 p21过表达的细胞系G1期细胞增加,细胞生长抑制,克隆形成率下降,电镜下未见特征性凋亡小体,原位细胞凋亡分析未见凋亡信号;p53腺病毒感染的肿瘤细胞增殖明显抑制并出现死亡,原值细胞凋亡检测到凋亡信号。结论 P21和p53基因的过表达能够抑制人肺腺癌细胞的生长,其中p53能够诱发细胞凋亡,因此这两种基因在肿瘤基因治疗上有着广泛的应用前景。     

人脑胶质瘤p16、p15、CDK4基因改变和pRb表达及等位基因谱分析的研究

颅内肿瘤中以胶质瘤最常见,约占43.5％。尽管应用了手术、放疗和化疗等综合疗法,胶质瘤患者的预后仍然很差,绝大部分患者难以避免肿瘤复发,其中胶质母细胞瘤患者术后的平均生存期不到一年。因此,人脑胶质瘤的治疗仍然是神经外科所面临的一大难题。本研究针对临床实践中的这一难点,对脑胶质瘤发生发展的分子生物学和分子遗传学机制进行了探索,共包括两大部分内容。 1.针对肿瘤的多基因病变特性,同步进行了4     

乳腺癌细胞中p16、p21、cyclinD1的表达及临床意义

目的:探讨p16、p21和cyclinD1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色方法,检测60例乳腺癌组织石蜡切片上p16、p21和cyclinD1蛋白的表达,比较其与临床病理学指标之间的关系;用Kaplan-Meier法Log-rank检验进行单因素生存分析,应用Cox比例风险模型进行多因素生存分析。结果:p16、p21、CyclinD1蛋白阳性表达率分别为53.3%、58.3%、41.7%,阳性产物主要位于细胞核中。p16蛋白的表达与组织学分级(P<0.05)及淋巴结转移(P<0.01)相关。p21蛋白的表达与淋巴结转移相关(P<0.05)。cyclinD1蛋白的表达与ER相关(P<0.01)。p16蛋白的表达与p21、cyclinD1蛋白表达不相关(P>0.05)。p21蛋白表达与cyclinD1蛋白表达相关(P<0.05)。单因素生存分析提示,影响总生存率的因素有:组织学分级、淋巴结转移、ER和p16、p21、cyclinD1蛋白(P<0.05)。多因素生存分析结果表明,组织学分级、淋巴结转移、ER状态和p16、cyclinD1蛋白是影响乳腺癌患者总生存率的独立预后因素(P<0.05)。结论:p16、p21蛋白的失表达和cyclinD1蛋白的过表达可能参与了乳腺癌的发生和发展。p16、p21蛋白是判断乳腺癌浸润转移的客观指标,cyclinD1蛋白表达与ER有关。组织学分级、淋巴结转移、ER以及p16、p21、cyclinD1蛋白表达可能是判断乳腺癌患者术后生存的有效指标,综合考虑这些指标对判断乳腺癌的预后、合理确定治疗方案具有重要意义。     

原发皮肤恶性黑色素瘤p16蛋白、pRb表达研究

目的:为探讨p16蛋白、pRb在恶黑中的作用.方法:以黑素细胞痔为对照,用免疫组化法检测了p16蛋白、pRb在恶黑中的表达.结果:发现恶黑中的p16蛋白阳性率(33.06%)显著低于黑素细胞痣(84.21%)(P＜0.05);伴淋巴结转移组阳性率(33.33%)显著低于无转移组(64.25%)(P＜0.05).pRb和p16蛋白在恶黑中的表达强度存在明显负相关关系.结论:p16蛋白表达缺失与恶黑及其转移有关,p16蛋白与pRb在恶黑中的负相关表明,恶黑发生机制涉及到周期表D1、CDK4、p16蛋白、pRb调节通路障碍.     

Rb、p16和cyclinD1基因在早期胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Rb、p16和cyclin D1基因在胃癌发生中的作用及临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测Rb、p16和cyclin D1基因在22例早期胃癌、23例异型增生和15例正常胃黏膜组织中的表达。结果 cyclin D1胃癌早期的过表达率高于正常胃黏膜(P0.05);Rb与p16胃癌早期的阳性表达率均低于正常胃黏膜(P0.05)。结论 Rb、p16和cyclin D1与胃癌的发生、发展相关,他们的变化是胃癌发生中的早期事件,CDK4/cyclin D1/p16/Rb途经在胃癌的早期发生过程中起着非常重要作用。     

细胞周期蛋白cyclinD1和p16在胃癌中的表达及其意义

应用免疫组化SP法检测cyclinD1和p16在50例胃癌和24例慢性胃炎中的表达。结果:50例胃癌中,cyclinD1的阳性表达率为64%(32/50),p16蛋白的阳性表达率为44%(22/50)。24例慢性胃炎中,cyclinD1的表达率为0,p16的表达率为100%。高分化腺癌中cyclinD1的过表达率为38.5%(5/13),低分化腺癌中为90.9%(20/22),两者差异显著(P<0.0.1);有淋巴结转移组的cyclinD1过表达率为73.1%(19/26),无淋巴结转移组为54.1%(13/24),两者无显著性差异(P>0.05)。高分化腺癌中p16的表达率为76.9%(10/13),低分化腺癌为27.3%(6/22),两者差异显著(P<0.01);有淋巴结转移组的p16的表达率为30.8%(8/26),无淋巴结转移组的为58.3%(14/24),两者有差异(P<0.05)。认为cyclinD1的过表达和p16的缺失两者可能共同参与了胃癌的发生发展过程,cyclinD1和p16作为反映胃癌病理学特点的参考指标有一定的临床意义。     

胶质母细胞瘤中p16、RB、cyclinD1、CDK4基因表达异常的研究

目的：探讨胶质母细胞瘤中p16基因、视网膜母细胞瘤基因（retinoblastoma gene，RB）、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)基因、细胞周期蛋白依赖性激酶4（cyclin dependent kinase4，CDK4）基因表达的异常及其与细胞增殖活性之间的关系。方法：应用流式细胞仪检测32例胶质母细胞瘤标本中p16、RB、cyclinD1、CDK4基因蛋白表达的相对含量。结果：胶质母细胞瘤中p16、RB基因蛋白表达量较正常脑组织降低，cyclinD1、CDK4基因蛋白表达量较正常脑组织升高，二者的异常可使细胞发生过度增殖。结论：p16、RB基因蛋白表达量降低和cyclinD1、CDK4基因蛋白表达量升高是胶质母细胞瘤发生发展的重要因素之一。     

食管鳞癌组织中p16、cyclinD1、CDK4的表达

目的：探讨p16、cyclinD1、CDK4蛋白在食管鳞癌发生中的意义及其相互间的作用。方法：采用LSAB免疫组化染色法,对43例食管癌手术标本的p16、cyclinD1、CDK4蛋白进行标记。结果：在鳞癌组织中,3种抗体的阳性物质存在于细胞核中和／或胞浆中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,p16的阳性率逐渐下降,而p16、cyclinD1、CDK4的阳性率却逐渐上升。正常皮皮与癌组织之间的阳性率差异均有显著性（P＜0．05）;随着癌分化程度下降,p16阳性率呈下降趋势,Ⅲ级与Ⅰ级鳞癌之间阳性率差异有显著性（P＜0．05）,但未检出cyclinD1、CDK4与癌分化程度的关系。结论：p16、cyclinD1、CDK4蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,三者构成的调节通路障碍可能参与了癌的发生。     

皮肤鳞状细胞癌中p16、pRb蛋白表达的临床病理研究

目的 探讨在皮肤鳞状细胞癌中p16、pRb蛋白表达与其临床病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测42例皮肤鳞状细胞癌和10例正常皮肤组织中p16、pRb蛋白的表达,并结合其临床病理特征进行分析.结果 p16、pRb蛋白在正常皮肤和皮肤鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为90%、59.5%和0、45.2%,两者在皮肤鳞状细胞癌中的表达与正常皮肤比较差异均有统计学意义(P<0.05);高分化鳞癌中p16的表达显著高于低分化者(P<0.05),pRb的表达与之相反;皮肤鳞状细胞癌伴淋巴结转移者p16蛋白的阳性表达明显下调(P<0.05),pRb蛋白阳性表达明显升高(P<0.05).结论 p16、pRb蛋白的异常表达与皮肤鳞状细胞癌的发生、发展相关,两者的检测可作为判断皮肤鳞状细胞癌的恶性程度及预后的重要指标.     

头颈部鳞癌中端粒酶活性与调节蛋白p16、CyclinD1和pRb表达的关系

目的：探讨端粒酶活性与细胞周期调节蛋白p16、cyclinD1和pRb的关系.方法：采用TRAP-PCR-ELISA法对32例原发头颈部鳞癌组织进行端粒酶活性检测,并应用免疫组织化学方法检测细胞周期调节蛋白p16、CyclinD1和pRb的表达.结果：32例原发头颈部鳞癌中,有27例端粒酶活化,阳性率为84.4%.p16、CyclinD1、pRb的总异常率为90.6%（29/32）,其中p16和pRb蛋白表达缺失分别为62.5%（20/32）和34.4%（11/32）,CyclinD1过表达为34.4%（11/32）.p16与pRb呈负相关性（P＜0.01）.端粒酶活性与细胞周期调节蛋白p16、CyclinD1和pRb总异常无相关性 端粒酶活性与p16、CyclinD1和pRb两两之间无相关性 p16、pRb的表达组与失活组端粒酶活性值无统计学差异,CyclinD1的正常表达组和过表达组端粒酶活性值无差异 但按照p16、CyclinD1和pRb表达不同将32例标本分成八组后,分析发现p16＋/pRb-/CyclinD1过表达组端粒酶活性值明显高于其它组,其余各组间无统计学差异（P＞0.05）.结论：端粒酶活化与头颈部鳞癌的发生发展有密切关系.p16/CyclinD1/pRb通路异常与HNSCC的发病机制密切相关.头颈部鳞癌中端粒酶活性与p16、CyclinD1和pRb的确切关系有待深入研究.     

p16基因蛋白在大肠癌中表达的改变及其意义

目的探讨大肠癌中p16蛋白失表达及其意义,以及p16蛋白与细胞增殖活性的关系.方法应用免疫组化EnVision法检测60例大肠癌和47例大肠腺瘤中p16蛋白及Ki-67抗原的表达.结果 1.大肠癌、大肠腺瘤中p16失表达率分别为26.7%、25.5%,二者无显著性差异(P＞0.05).2.随肿瘤分化程度的下降,p16蛋白的失表达率增高,p16表达程度明显下降(P＜0.05),但p16表达的改变与Dukes'分期、淋巴结转移等无关(P＞0.05).3.大肠癌Ki-67阳性表达率为38.1%±10 1%,较腺瘤24.3%±8.3%显著增高(P＜0.01).大肠癌低分化组Ki-67阳性表达率较高、中分化组增高(P＜0.01).4.大肠癌p16阴性组Ki-67阳性表达率37.6%±11.47%与p16阳性组38.18%±9.68%相比,无显著差异(P＞0.05).结论 p16蛋白失表达与大肠癌分化呈负相关.大肠癌Ki-67阳性表达率高于腺瘤,而且分化越差,Ki-67表达越高.p16表达的改变与Ki-67阳性表达率无显著相关性.