HPLC法测定复方紫草颗粒中咖啡酸四聚体异构体

目的 建立HPLC法测定复方紫草颗粒剂中咖啡酸四聚体异构体的方法.方法 YMC ODS-A C-18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.5%磷酸水(40:60);体积流量:1 mL/min检测波长:252 nm,柱温:室温;进样量:10μL.结果 咖啡酸四聚体异构体在0.052～1.65μg与峰面积值呈良好的线性关系.平均回收率为101.8%,RSD为2.46%.结论 本方法简便可靠,结果稳定,重复性好,可用于测定复方紫草颗粒剂中咖啡酸四聚体异构体.     

新疆紫草咖啡酸及迷迭香酸糖基转移酶的克隆及功能研究

咖啡酸及其衍生物是传统中药材紫草的重要水溶性有效成分,具有抗菌、抗氧化、保护心脑血管、抗肝纤维化和保肝、抗病毒及抗肿瘤等多种生物学活性。由于该类化合物经苯丙烷途径合成,而UDP-葡萄糖基转移酶(UDP-glycosyltransferases,UGTs)对苯丙烷途径的调控发挥重要作用,因此推测紫草细胞中存在糖基转移酶参与咖啡酸或/和其衍生物的修饰。该研究通过挖掘新疆紫草Arnebia euchroma转录组数据克隆获得15条糖基转移酶候选基因全长,并通过原核表达检测了对咖啡酸及迷迭香酸的体外活性。结果表明AeUGT_01,AeUGT_02,AeUGT_03,AeUGT_04,AeUGT_10可催化咖啡酸或/和迷迭香酸生成1~3种糖基化产物。这些糖基转移酶处于不同的系统进化分支,与同分支其他糖基转移酶具有底物或催化功能的相似性。因此推测糖基转移酶不同分支通过独立进化不断扩张而产生了趋同进化现象,糖基转移酶的底物宽泛性是这一现象产生的基础。上述工作为进一步研究新疆紫草咖啡酸及迷迭香酸糖基转移酶体内功能奠定了基础,有助于明确咖啡酸衍生物的形成及调控机制;也为咖啡酸及迷迭香酸的糖基化修饰提供了工具酶。     

新疆软紫草中咖啡酸四聚体对照品的制备

目的从新疆软紫草的丙酮水提取物中分离制备了咖啡酸四聚体对照品。方法经紫外光谱、红外光谱、核磁共振和质谱确定结构。结果其相关数据与文献一致,纯度为98.11%。结论符合中药化学对照品含量测定要求,可作为高纯度咖啡酸四聚体化学对照品的制备分离方法。     

新疆紫草总酚酸提取物指纹图谱建立及4种成分测定

目的建立新疆紫草总酚酸提取物HPLC指纹图谱,并测定总酚酸、咖啡酸、咖啡酸四聚体、紫草酸的含有量。方法新疆紫草总酚酸提取物70%乙醇溶液的分析采用Waters Symmtry C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.05%甲酸水,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长220 nm。结果 9批样品指纹图谱中共有8个特征峰。总酚酸、咖啡酸、咖啡酸四聚体、紫草酸的含有量分别为55.62%～62.84%、0.20%～0.23%、18.55%～25.49%、0.46%～0.77%。结论该方法稳定可靠,可用于新疆紫草的质量控制。     

紫草抗人乳头瘤病毒作用的研究

目的筛选紫草抗人乳头瘤病毒(HPV)的有效部位.方法用系统溶媒(石油醚、正丁醇、乙醇、蒸馏水)对紫草依次进行提取,应用荧光定量PCR技术检测在体外的抗HPV-DNA的效果.结果仅紫草水提物显示在体外抑制HPV-DNA活性,最低有效浓度为0.08 g/mL.结论紫草具有体外抑制HPV-DNA作用,其水提物中存在抗HPV-DNA活性成分.     

体外氧化咖啡酸所得具有抗促性腺活性的化合物

唇形科植物欧地笋Lycopus europaeus L.和紫草科植物白果紫草Lithospermum office-nale L. 的提取物经植物酶氧化,具有抗促性腺的活性。这些植物中的主要成分咖啡酸当与高锰酸钾氧化时也显示了抗促性腺的活性。曾尝试从植物粗提取物中分离有活性的成分,但均因其在粗提取物中含量低且不稳定而未获成功。为分离此活性成分和阐明其结构,遂用咖啡酸/高锰酸钾系统制备高产量的且至少与植物提取物中相似的活性化合物。早期研究表明活性并非来自第一次的氧     

咖啡酸的高锰酸钾氧化产物或酶氧化产物对促性腺和促甲状腺激素的影响

已知各种唇形科和紫草科植物叶片的水提取物有抗促性腺和抗促甲状腺的活性,这些活性与植物内的酚性成分如儿茶酚或咖啡酸的氧化产物有关。在植物提取过程中,此氧化反应受儿茶酚氧化酶(邻苯二酚氧化酶)所催化。有报道认为用高锰酸钾氧化也能得到活性产物。本文分离和研究了以高锰酸钾氧化咖啡酸的氧化产物,并与酶氧化产物作比较。咖啡酸经高锰酸钾氧化后,用HPLC测得4个产物,根据保留时间不同,用制备性板层可分得产物1,2,3。以孕马血清(PMS)对体外Leyding细胞的睾酮释放的抑制作用来测定其抗促性腺活性。     

新疆紫草抗HIV有效成分咖啡酸四聚体的理化性质和纯化工艺研究

目的：初步研究咖啡酸四聚体(CAT)的理化稳定性的基础上选择合适的大孔吸附树脂，去除杂质，提高紫草水溶性部分中有效成分咖啡酸四聚体的含量。方法：以咖啡酸四聚体为指标,HPLC检测纯化前后或其他条件改变的含量变化。结果：7种型号的树脂中LK001纯化效果最佳。确定工艺为吸附液质量浓度10 g·L^-1，pH 4.5，3 BV·h^-1的流速流过树脂柱，用去离子水快速洗脱至Molish反应为阴性, 再用20%乙醇洗脱至无色，然后以50 mL 45%的乙醇洗脱，洗脱液除去乙醇，50 ℃浓缩干燥得粉末。收率为3.6%，CAT单个有效成分的含量为58%，纯度提高了45倍。结论：采用LK001树脂可以去除杂质,提高粗提物中有效成分咖啡酸四聚体的含量。     

新藏假紫草咖啡酸四聚体钠、钾盐的抗艾滋病毒作用

新藏假紫草咖啡酸四聚体钠、钾盐的抗艾滋病毒作用自艾滋病在世界范围内蔓延，人们开始努力发据各种治疗剂以抑制它们的病原体一人类免疫缺损病毒（ＨＩＶ）的复制。ＨＩＶ－１逆向转录酶（ＲＴ）和ＨＩＶ－１蛋白酶在ＨＩＶ复制循环中是基本酶类。因此，研究主要着重于搜...     

HPLC-MS—MS分析复方茵陈黄连汤中抗HBV活性部位主要成分

目的:在对中药二联复方茵陈蒿汤联合黄连解毒汤(复方茵陈黄连汤)进行活性研究后,对该联合汤剂抗HBV有效部位中的主要成分进行分析。方法:采用电喷雾电离-串联质谱方式建立了LC-MS/MS方法,并采用MS和MS/MS扫描模式分析。结果:鉴定了其中9个活性成分,分别是木兰花碱、原儿茶碱、咖啡酸、芦荟苷、阿魏酸、岩白菜素、乙酰紫草素、异栀子苷、大黄酸。结论:液质联用能快速、准确地鉴定传统中药复方中主要有效成分,为更好地阐明中药复方的物质基础和作用机制提供依据。     

复方三黄散胶囊体外抗艾滋病病毒的实验研究

目的:探讨复方三黄散胶囊体外抗艾滋病毒(HIV-1)活性。方法:采用病毒诱导的细胞致病变效应(CPE)测定和HIV-1p24的定量ELISA测定,分别检测本复方对HIV-1ⅢB(X4型病毒)和HIV-1Ada-M(R5型病毒)的抑制活性。结果:复方三黄散胶囊体外抗HIV-1ⅢB的EC50±标准差为54.0±20.1μg/ml,治疗指数(TI)±标准差28.000±7.382,体外抗HIV-1Ada-M的EC50±标准差为286±141μg/ml,治疗指数±标准差为6.160±0.934。结论:在体外,复方三黄散胶囊不但对HIV-1ⅢB具有一定的抑制活性,而且对HIV-1Ada-M具有很微弱的抑制活性。     

咖啡酸衍生物的氧化反应及其有效的促性腺抑制剂的形成

已知紫草属(Lithospermum)和地笋属(Lycopus)植物提取物中的酚性成分能被高活化的儿茶酚氧化酶所催化氧化。其氧化产物具有抗促性腺活性。此氧化过程也可由高锰酸钾或溶解空气中氧(自动氧化)来完成。作为这些植物的主要酚性成分咖啡酸经氧化后仅有弱的抗促性腺活性,但其天然存在的衍生物如迷迭香酸(rosmarinicacid)及其合成的酯经氧化后均为有效的促性腺抑制剂。本文研究了咖啡酸及其衍生物的氧化反应、氧化产物的生成和它们的抗促     

银黄不同煎煮方式体外抗单疱病毒作用比较

目的考察抗病毒方银黄复方合煎与分煎提取液的体外抗病毒作用。方法建立人喉癌细胞(Hep2细胞)的体外单疱病毒1型增殖模型,采用体外CPE法,中性红染色法,比较合煎、分煎液抗单纯疱疹病毒活性的优劣,进而为下一步的实验做好前期准备。结果金银花、黄芩均具有抗疱疹病毒的活性,两种提取方式均具有体外抗疱疹病毒作用,且单煎后混合样品对疱疹病毒的抑制率高于合煎样品。结论不同煎煮方式对银黄复方制剂中具有抗疱疹病毒作用的有效成分的溶出有影响。     

咖啡酸酰胺类衍生物的合成及调脂活性研究

目的设计并合成天然产物咖啡酸的酰胺类衍生物,并对该系列化合物进行体外抗脂质代谢紊乱活性评价。方法以咖啡酸为起始原料,卡特缩合剂(BOP)为缩合剂,与十四种胺依次反应制得目标产物,利用人肝癌HepG2细胞评价该类衍生物的调脂活性。结果设计并合成14个咖啡酸酰胺类化合物CA1～CA14,均经波谱技术确证结构。药理实验结果表明,14个化合物对HepG2细胞呈现不同程度的调血脂活性,其中衍生物CA6的调血脂活性优于先导物咖啡酸和阳性药辛伐他汀。结论化合物CA6、CA7和CA11均为未见文献报道的咖啡酸酰胺类新化合物,其中CA6和C11具有潜在的调脂生物活性,值得进一步深入研究。     

紫草素及其衍生物抗肿瘤作用的研究进展

<正>紫草是常用的传统中药材:研究表明紫草具有抗生育、抗病原微生物、抗炎及抗过敏、解热、抗肿瘤、保肝、止血、降血糖、镇静和影响免疫功能等作用[1]。紫草素(shikonin)是从天然紫草中提取的萘醌类(naphthoquinone)化合物,具有广谱的生物学和药理学活性[2]。紫草主要的抗癌有效成分为萘醌类色素化     

紫草及紫草制剂的抗炎作用研究进展

目的:为紫草和紫草制剂的抗炎机制研究及产品开发提供参考。方法:以"紫草""紫草素""制剂""抗炎""进展""zicao""shikonin""anti-inflammatory"等为关键词,在Pub Med、CNKI等多个数据库中查询建库至2017年12月31日的相关文献,对紫草、紫草素和紫草复方制剂抗炎作用的相关研究进行综述。结果与结论:共检索到相关文献128篇,其中有效文献41篇。紫草以新疆软紫草品质最佳,而滇紫草、泰山紫草等也被逐步肯定。紫草醇提物抗炎效果最优,紫草素及其衍生物的抗炎活性突出。紫草、紫草素及紫草复方制剂治疗烧烫伤、湿疹、银屑病、过敏性紫癜、关节炎、静脉炎、妇科炎症、急性肺损伤、重症急性胰腺炎伴肺损伤或肝损伤、局部脑缺血等多种疾病的实验研究正逐步深入,多认为其抗炎机制与NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α、NO、CCR、COX-2、IL-22、IL-17等密切相关。紫草及紫草制剂现已广泛用于临床治疗湿疹、皮炎、妇科炎症、皮肤创面及黏膜损伤等多种炎症性疾病,其剂型多为油剂、膏剂、栓剂、喷雾剂等。如何高效发挥紫草及紫草制剂的抗炎作用,尚有待在微观层面运用生物组学技术等继续深入研究。     

复方茵黄解毒汤有效部位体外抗乙肝病毒活性测定及薄层扫描指纹图谱的构建

目的：初步构建复方茵黄解毒汤乙酸乙酯有效部位体外抗乙肝病毒活性指导下的薄层扫描指纹图谱，为复方茵黄解毒汤建立更高的质量标准打下基础。方法：以HepG2-2．2．15细胞系为模型，采用ELISA法测定复方茵黄解毒汤的乙酸乙酯有效部位活性，再通过薄层色谱法对乙酸乙酯有效部位进行展开，运用岛津CS9000薄层扫描仪进行单波长扫描。结果：该有效部位在体外培养中对病毒抗原的分泌有较强的抑制作用。同时其薄层色谱峰也得到较好分离，获得了较理想的薄层色谱指纹图谱，并确定其中小檗碱、咖啡酸、阿魏酸和大黄酸峰的归属。结论：在活性指导下的薄层扫描指纹图谱将谱与效联系起来，可更好地体现和控制复方中药制剂的质量。     

新疆紫草中多糖的超声提取工艺优选

紫草根药用．含多种萘醌类化合物——紫草素及其衍生物，具有显著的抗生育、抗炎、抗肿瘤、杀菌、抗病毒、保肝和免疫调节等作用。紫草中还含有多糖。紫草多糖具有抗病毒活性，能够激活巨噬细胞的吞噬功能，增强T淋巴细胞的数量和活性，抑制DFH强度，促进T淋巴细胞的免疫应答作用，具有     

复方紫草油体外抑菌实验研究

目的:研究复方紫草油主要成分及成药的体外抑菌作用特点。方法:利用平板打孔法、牛津杯法和菌落计数法研究1)紫草、白芷、忍冬藤水煎液及不同浓度醇提液对金黄色葡萄球菌的抑制能力; 2)紫草、白芷的95%乙醇浸泡液及忍冬藤水煎液对创面常见感染菌种和益生菌的抑制作用; 3)含50%复方紫草油的复方紫草油-乳化剂混合物对创面常见感染菌种和益生菌的抑制作用。结果:复方紫草油的抑菌特点与紫草醇提物抑菌特点基本一致,对白色念珠菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等常见感染致病菌的ATCC菌株均有较好抑制作用,同时也对益生菌有一定抑制作用,对大肠埃希菌无效。结论:复方紫草油抑菌谱不等于各组分抑菌谱的简单叠加。根据该药抑菌特点,可以考虑用于烧烫伤、特应性皮炎等病的创面护理。     

紫草多糖的分离纯化及生物活性研究

目的：研究紫草多糖的提取、分离与纯化方法,并初步探讨其生物活性。方法：采用蒸馏水提取、乙醇分级沉淀、Sephadex凝胶柱色谱分离、纯化获得紫草多糖,由HPLC确定其相对分子质量和质量分数;建立荧光定量PCR检测方法,将实验分为生理盐水组和8个不同剂量紫草多糖组,观察与疣体组织作用后,抗HPV效果。结果：经HPLC检测,该组分为两个分子量的多糖,其重均分子量分别为27336、1152。生物活性检测结果表明,紫草粗多糖具有体外抑制HPV-DNA活性,最低有效浓度为0.781mg/ml。结论：本方法提取的紫草多糖为含两个分子量的多糖混合物,具有明显的抗人乳头瘤病毒作用。