碱性成纤维生长因子的表达对大鼠视神经损伤修复的意义

目的:观察碱性成纤维生长因子(bFGF)在视神经中的表达及在视神经损伤后的反应和作用。方法:健康Wistar大鼠20只,雌雄不拘,按处理方式随机分为3组,视神经钳夹伤8只(A组),假伤对照组8只(B组),正常对照4只(C组)。采用大鼠球后视神经钳夹伤模型,利用免疫组化法和计算机图像分析技术,于术后1,3,7,14d检测视神经bFGF的表达。结果:损伤后胶质细胞排列紊乱,胞体增大。视神经损伤后(1,3,7,14d)bFGF阳性细胞表面积密度(%)分别为2.20±0.18,2.18±0.17,2.29±0.45,2.32±0.37,与假伤组(1.52±0.33,1.51±0.37,1.50±0.42,1.48±0.32)和对照组(1.49±0.29,1.50±0.30,1.49±0.35,1.51±0.29)比较,差异有显著性意义(t=3.037～4.158,3.531～4.182,P<0.05)。结论:视神经损伤提高bFGF在视神经中的表达,对视神经损伤的修复具有积极的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨骼肌拉伤修复的影响

目的：探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠骨骼肌拉伤后肌肉再生修复的影响。方法：雄性Sprague—Dawley大鼠，体质量约250g，随机区组法分为3组，每组6只：肌肉拉伤后给bFGF组、拉伤后给生理盐水对照组以及假拉伤组。用万能材料测试仪对大鼠腓肠肌造成拉伤后，于损伤肌肉皮下肌膜外注射bFGF(200AU／d&;#215;6)或生理盐水，免疫组织化学染色观察再生肌纤维中结蛋白的表达(用其积分光密度integra optical density,IOD表示)。结果：生理盐水对照组结蛋白IOD值(25．79&;#177;10．44)&;#215;10^3显著高于假拉伤组(9．28&;#177;4．83)&;#215;10^3(t=13．85，P&;lt;0．01)，bFGF治疗组肌肉结蛋白IOD值(34．48&;#177;10．62)&;#215;10^3高于生理盐水对照组(25．79&;#177;10．44)&;#215;10^3组，差异具有显著性(t=24．08，P&;lt;0．01)。结论：外源性碱性成纤维生长因子可以促进肌肉拉伤后的结蛋白表达，提高肌肉再生能力，从而改善肌肉损伤后的结构修复。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠神经损伤后肌肉的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠坐骨神经钳夹损伤后小腿三头肌的保护作用。方法 42只大鼠随机等分成6组，钳夹对照：4周组(C4)，8周组(C8)，12周组(C12)；bFGF用药：4周组(F4)，8周组(F8)，12周组(F12)。手术暴露坐骨神经，外科止血钳钳夹坐骨神经。实验组夹伤后即刻于损伤处神经干内分别注射bFGF，对照组注射等量生理盐水，术后在术侧腓肠肌注射药物，1次／d，直到实验结束。分别存活4，8，12周时，进行足印分析及坐骨神经功能指数(sciatic nerve function index，SFI)测定实验；随后麻醉动物，20g／L多聚甲醛和12．5g／L戊二醛，经心灌注固定，切取小腿三头肌，称重，后取其中段，石蜡包埋、切片，光镜下测量小腿三头肌的横截面直径。结果 大鼠坐骨神经钳夹损伤后各组之间小腿三头肌质量比结果不同，C4组0．708&;#177;0．015，F4组0．763&;#177;0．035，t=1．6，P&;lt;0．01；C8组0．903&;#177;0．032，F8组0．963&;#177;0．013，t=5．0，P(0．01；C12组0．920&;#177;0．073。F12组0．980&;#177;0．014，t=16．7，P&;lt;0．0l。肌纤维直径不同，正常侧(15．2&;#177;0．6)μm，C4组(10．8&;#177;0．9)μm，F4组（12．2&;#177;0．7）μm，t=6．7，P&;lt;0．01，C8组（11．1&;#177;0．1)μm。F8组（13．5&;#177;0．9)μm，t=l0．2，P&;lt;0．0l，C12组(13．1&;#177;0．8)μm，F12组(14．2&;#177;1．0)μm，t=4．8，P&;lt;0．01，组间差异具有显著性意义。结论 大鼠坐骨神经钳夹损伤后．bFGF能减轻或延缓小腿三头肌的萎缩。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的抑制

目的：探讨大鼠脊髓损伤后应用碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor bFGF)对脊髓损伤区细胞凋亡的影响。方法：利用Allen氏WD(Weight drop，WD)技术，以10g&;#215;2．5cm致伤力造成SD大白鼠Ts脊髓损伤模型，并于损伤平面以下蛛网膜下腔置细塑料导管。bFGF治疗组(A组)分别于术后即刻，1，2，4，8，12，24，及48h经导管注入bFGF溶液20μL(含bFGF100u），以后每周经导管注，20μL bFGF：对照组(B组)则在同时间注入等量生理盐水：损伤后1，3．7，14，28d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TuNEL)，采用计算机图像分析技术进行定量分析并计算凋亡指数(AI)，AI=凋亡细胞核数，总细胞核数计算：结果：A，B两组中均发现凋亡细胞，A组损伤后不同时间段神经细胞凋亡指数分别为(4.57&;#177;0．43)，15．38&;#177;1.16)，(3．43&;#177;0．65)．(3.38&;#177;058)．(2．63&;#177;0．43)；B组分别为(7.36&;#177;0．68)，(13.96&;#177;2．74),(9．26&;#177;1．03)，(7．25&;#177;0．73)，(5．79&;#177;0．57).B组细胞凋亡率大于A组结论：bFGF能抑制脊髓损伤后脊髓损伤区的细胞凋亡。     

周围神经损伤程度与伤后早期诱发神经电图改变的相关性

背景：周围神经损伤后，其神经电图会发生改变，但其损伤程度和神经电图各指标改变的相关性如何?目的：研究周围神经损伤后早期诱发神经电图变化以提供临床参考。设计：3组样本配对t检验。单位：北京大学人民医院创伤骨科。材料：实验于2003—08／12在北京大学人民医院动物实验中心完成。成年新西兰兔来源于北京大学医学部实验动物中心，共8只，体质量约1．5kg，雌雄不限，SPF级。方法：采用8只家兔共16条胫神经，在同一条神经的同一水平上，手术显微镜下先后缝扎神经横截面的1／3及2／3，做成神经损伤模型．分为神经未损伤时、损伤1／3、损伤2／3共3组。主要观察指标：分别观察神经未损伤时、损伤1／3、损伤2／3时早期的诱发神经电图改变(包括运动神经传导速度、M波负向波渡幅、M波负向波面积、M波最大波幅、M波最大面积)，并将神经损伤程度分别与诱发神经电图的5个指标做相关分析。结果：5项指标在神经未损伤、损伤1／3、损伤2／3这3种不同方式处理下，每项指标数据之间差异均有显著性意义(P&;lt;0．05)，其中正常组均值分别为1．00&;#177;0.0，0．97&;#177;0．18，1．01&;#177;0．22，0．98&;#177;0.16，0．98&;#177;0．19．损伤1／3组均值分别为0．76&;#177;0．12，0．41&;#177;0．24，0．47&;#177;0．30．0．48&;#177;0．27，0．50&;#177;0．29，损伤2／3组均值为0．62&;#177;0．10，0．11&;#177;0．11，0．11&;#177;0．10，0．12&;#177;0．14，0．13&;#177;0．12；5项指标与胫神经损伤程度的相关系数分别为0．902，0．938，0．936．0．907，0．914。结论：周围神经损伤后，早期诱发神经电图各项指标数值均与神经损伤程度呈显著负相关。其中，M波负向波波幅和负向波面积与神经损伤程度相关性较大。     

电刺激对脑梗死大鼠脑内碱性成纤维生长因子表达的影响

目的：研究不同方式的电刺激对大鼠脑梗死后碱性成纤维生长因子[basic fibroblast growth factor，bFGF)表达的影响。方法：成年健康雄性Wistar大鼠96只，随机分为对照组、患侧刺激组和双侧刺激组。采用线栓法建立大脑中动脉缺血动物模型，应用免疫组织化学方法观察电刺激对大鼠脑梗死后bFGF表达的影响。结果：在各梗死周围区bFGF的阳性反应产物增加，3d时反应最高，对照组、患侧刺激组、双侧刺激组A值分别为89．47&;#177;11．19．92．19&;#177;10．50，97．44&;#177;12．40，7d时下降。分别为81．17&;#177;11．78。87．05&;#177;6．78，96．62&;#177;9．33，14d时为76．75&;#177;9．25，90．19&;#177;9．52，91．58&;#177;5．59，28d时为74．22&;#177;8．29，78．15&;#177;9．54，79．82&;#177;7．41，仍有阳性产物表达。患侧刺激组在14d时明显高于对照组(F=5．048，P&;lt;0．05)，双侧刺激组在7，14d时均明显高于对照组(F=4．389，5．048，P&;lt;0．05)。结论：电刺激明显增强bFGF的表达，双侧电刺激效果更早出现。     

大鼠坐骨神经损伤性疼痛的行为观察和背根神经节中生长相关蛋白表达的变化

目的：观测坐骨神经损伤对大鼠行为的改变，以及运用免疫组化技术观察大鼠坐骨神经损伤对相应背根神经节中生长相关蛋白表达的影响，探讨生长相关蛋白与神经损伤所致的自发性疼痛的关系。 方法：实验于2004-04／2005-04在汕头大学医学院第二附属医院外科和病理实验室完成。250只Wistar大鼠随机分成3组：神经切断组120只、神经压榨组120只、正常对照组10只；神经切断组，神经压榨组按存活时间不同再各分为3，7，14，21，30，60d6个亚组，每个亚组20只。用自噬评分方法观察大鼠神经损伤后的行为改变；并处死取材L5节段损伤侧背根神经节用免疫组化方法研究生长相关蛋白表达的变化。 结果：250只大鼠全部进入结果分析。①自噬评分：神经损伤后，神经切断各亚组自噬发生率均比神经压榨各亚组高，程度也较重。神经切断60d组自噬平均分为2．1，而神经压榨60d组仅为0．7分。②生长相关蛋白表达：神经切断组背根神经节生长相关蛋白免疫阳性标志平均吸光度表达伤后7d达高峰（0．614&;#177;0．004），持续到伤后60d仍有高表达（0.515&;#177;0．004）；而神经压榨组伤后14d才达高峰（0．583&;#177;0．006），伤后21d即有所下降（0．563&;#177;0．008），伤后60d基本回复到正常水平（0．231&;#177;0．003）；正常对照组背根神经节仅有少量表达（0．225&;#177;0．005）。神经损伤后神经切断组、神经压榨组生长相关蛋白的表达与正常对照组比较差异有显著性意义（t=14．726，t=4．074，P≤0．05）；神经切断组、神经压榨组伤后的表达差异也存在显著性意义（t=3．357，P≤0．05）。 结论：不同的坐骨神经损伤方法所致的大鼠自噬程度和生长相关蛋白表达变化不同，提示神经源性疼痛的发生可能与神经的可塑性有关。     

双侧电刺激并静注碱性成纤维生长因子对生长相关蛋白-43的影响

目的：内源性碱性成纤维生长因子(basic blast growth，factor，bFGF)可促进出芽轴突标记物生长相关蛋白-43(growth associated protein-43，GAP-43)的表达从而促进神经再生，观察双侧电刺激和bFGF在促进神经再生方面是否有协同作用。方法：成年健康雄性Wistar大鼠96只，随机分为对照组、双侧电刺激组和双侧电刺激+bFGF组。采用线栓法建立大脑中动脉缺血动物模型，应用免疫组织化学方法观察电刺激对脑梗死后GAP-43表达的影响。结果：在各梗死周围区生长相关蛋白-43的阳性反应产物增加，对照组、双侧刺激组、双侧刺激组+bFGF组，3d时反应增高吸光度值分别为43．32&;#177;7．31，52．80&;#177;9．69，65．03&;#177;6．47，7d时达高峰，为58．94&;#177;6．81，76．36&;#177;8．99，78．10&;#177;6．43，14d时降低为43．17&;#177;8．39，61．17&;#177;5．89，63．41&;#177;6．18，28d仍有阳性产物表达，为40．35&;#177;8．52，59，79&;#177;9．58，60．21&;#177;8．34。双侧刺激组在7，14，28d时均明显高于对照组(P&;lt;0，05)，双侧电刺激联合静脉bFGF组在3，7，14d和28d与对照组比较差异均有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：双侧电刺激明显增强GAP-43表达，联合bFGF应用后效果早出现。     

碱性成纤维细胞生长因子转染兔关节软骨细胞的研究

背景：软骨细胞体外培养困难和表型难以维持是软骨组织工程研究的一大难题。目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor，bFGF)基因转染兔关节软骨细胞后对培养的关节软骨细胞形态、分裂增殖及代谢等方面的影响。设计：完全随机对照实验研究。地点和方法：实验在解放军第一军医大学热带军队卫生学系完成，对象为兔软骨细胞(3周龄新西兰新生兔购于第一军医大学实验动物中心)。干预：将bFGF基因克隆于真核表达载体pHβ0AP-1中，构建重组真核表达载体pHβ-bFGF，转染兔关节软骨细胞。G418筛选阳性克隆，检测阳性细胞bFGF基因的表达水平。测定培养软骨细胞的DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及进行细胞周期分析。主要观察指标：DNA含量、糖醛酸含量、软骨细胞增殖情况及细胞周期分析。结果：bFGF基因转染软骨细胞表型未见显著变化；bFGF基因转染组、载体对照组、空白对照组DNA含量分别为(77．37&;#177;6．21)，(40．39&;#177;4．33)，(33．77&;#177;4．25)μg／瓶(P&;lt;0．01)，糖醛酸含量分别为(308．8&;#177;10．2)，(77．9&;#177;8．7)，(80．2&;#177;10．5)μg／瓶(P&;lt;0．01)，软骨细胞G1期分别为59．3&;#177;2．1，69．5&;#177;4．0，73．1&;#177;3．9(P&;lt;0．05)。结论：bFGF转染关节软骨细胞后，可显著促进细胞分裂增殖并缩短细胞周期，为软骨组织工程研究提供新的技术路线及理论基础。     

脊髓损伤大鼠后肢功能恢复与内源性神经营养素表达之间的关系

目的：观察随着脊髓不完全损伤后大鼠后肢功能恢复，内源性神经营养因子表达的变化。 方法：实验于1998-04／09在解放军第三军医大学野战外科研究所完成。Wistar大白鼠44只，脊髓功能观测组12只；脊髓形态观察组32只，随机分为正常组2只、手术假伤组15只和脊髓腹侧损伤组15只。脊髓功能观测组12只和脊髓腹侧损伤组15只造脊髓损伤模型；手术假伤组15只进行造模处理，但不损伤脊髓。脊髓功能观测组于脊髓受压前及脊髓受压迫损伤后6，24，72h，7，14，21d对受试动物进行后肢行为功能评定。脊髓形态观察组32只实验动物进行免疫组织化学染色．随机计数50个细胞，观察神经营养素脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子、神经生长因子、神经营养素3的表达。 结果：44只实验大鼠均进入结果分析。①脊髓致伤后受试动物后肢出现明显瘫痪，随着时间的延长，脊髓功能得到逐步恢复。其中以伤后3-14d脊髓功能恢复最快，以后恢复较缓慢。②自伤后3h开始，脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子、神经生长因子、神经营养素3的表达开始增加，并于伤后72h达到高峰；1周内神经营养素维持在相对较高的表达水平，2周后这几种神经营养素的表达明显减弱[伤后3h：（14．82&;#177;4．93），（9．77&;#177;4．97），（2．27&;#177;1．85），（10．35&;#177;5．56）；伤后72h：（45．22&;#177;15．61），（34．54&;#177;12．56），（13．89&;#177;7．58），（33．2&;#177;11．53）；伤后1周：（31．94&;#177;12，82），（15．69&;#177;11．53）．（7．17&;#177;4．92），（16．74&;#177;13．2）；伤后2周：（14．02&;#177;7．36），（6．97&;#177;4．05），（2．27&;#177;1．87），（9．7&;#177;5．62）]。 结论：伤后脊髓组织内源性神经营养因子的过度表达参与了伤后2周内脊髓功能的快速恢复，但内源性神经营养因子的表达是短暂的．延续内源性神经营养因子的表达有望进一步促进脊髓功能恢复。     

白细胞介素-6对周围神经损伤后神经细胞FOS表达的影响

背景：神经系统正常情况下低水平FOS表达，损伤后FOS表达增强，白细胞介素-6(interleulin-6，IL-6)，在中枢神经系统损伤后能抑制，神经细胞FOS表达，但周围神经损伤后神经细胞FOS表达与IL-6的关系的研究目前尚未见报道。目的：观察周围神经损伤后神经细胞FOS表达及lL-6对其表达的影响。设计：完全随机对照的前瞻性实验研究。地点和对象：2002／08～12在广东医学院实验动物中心完成，实验对象为DS大鼠48只，体质量250～340g，雌雄不拘。干预：大鼠在无菌条件下显露左侧坐骨神经，实验组神经内注射IL-6 2mL，对照组神经内注射生理盐水2mL。术后1h挤压损伤坐骨神经，分别于伤后1，2，3，4h取出标本进行免疫组化染色。主要观察指标：观察实验组和对照组FOS免疫阳性细胞。结果：伤后1，2，3，4h对照组FOS免疫阳性细胞分别为548&;#177;14，640&;#177;12，718&;#177;21，732&;#177;11；实验组分别为202&;#177;13，212&;#177;17，245&;#177;22，288&;#177;14。随挤压时间的延长而增加。实验组各时间FOS免疫阳性细胞数较对照组明显减少(t=-1．812，2．128，P&;lt;0．05；t=-2．864，3．159，P&;lt;0．01)差异有显著性意义。结论：IL-6对周围神经损伤后神经细胞FOS表达有抑制作用，提示IL-6参与神经损伤后的调控过程。     

坐骨神经切断后胶质细胞源性神经营养因子mRNA的表达变化

目的 探讨大鼠坐骨神经切断后，胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA在两侧断端的表达变化及其意义。方法 采用Trizol一步法提取坐骨神经总RNA，取少量作紫外扫描分析和琼脂糖电泳分析，切断SD大鼠左侧坐骨神经，不同时间、半定量RT—PCR方法，观察两侧断端GDNF mRNA的表达变化。结果 坐骨神经切断前，GDNF mRNA在两侧坐骨神经微量表达，为(6．5&;#177;1．3)％，坐骨神经切断后远断端表达逐渐增加，伤后1d(7．8&;#177;1．9)％，伤后7d(10．3&;#177;2．1)％，伤后14d(11．9&;#177;2．3)％，伤后28d(12．3&;#177;2．4)％，近断端表达逐渐减少，伤后1d(5．8&;#177;1．3)％，伤后7d(4．0&;#177;1．0)％，伤后14d(3．6&;#177;1．1)％，伤后28d(3．1&;#177;1．0)％。伤后1d与伤前比较(P&;gt;0．05，t=1．193，0．879)，伤后7，14，28d与伤前比较(P&;lt;0．01，t=3．762，3．565，5．059，4．083，5．164，4．905)。结论 GDNF在损伤信号的刺激下表达急剧增加，起到修复神经元的作用，为外源性GDNF治疗脊髓损伤提供了理论基础。     

局灶脑缺血时碱性成纤维生长因子和内皮生长因子的表达及其关系

目的：就血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)，碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和VEGF-mRNA在局灶脑缺血不同时间和不同部位的表达和变化及他们之间的关系进行探讨。方法：SD大鼠48只。根据缺血时间和再灌时间分为9组，采用线栓并环扎的方法建立局灶脑缺血再灌模型，采用单片脑组织四氮唑(TTC)染色定位的方法确定中心区和边缘区。LASB法免疫组化染色观察缺血中心区和边缘区VEGF,bFGF免疫阳性表达。RT-PCR法检测VEGF-mRNA动态变化。结果：在缺血3～6h，缺血中心区与边缘区VEGF，bFGF免疫阳性反应同时达高峰。单纯缺血组6h中心区和边缘区VEGF-mRNA转录水平达高峰，分别为0．86&;#177;0．07，1．00&;#177;0．11，24h基本降至正常水平：而假手术组和24h组中心区分别为0．20&;#177;0．04，0．22&;#177;0．04。缺血再灌组6h中心区和边缘区也在6h达高峰，分别为0．60&;#177;0．02，0．62&;#177;0．07，24h基本降至正常水平。假手术组和24h组中心区分别为0．20&;#177;0．037，0.31&;#177;0．04。结论：VEGF，bFGF早期的高表达在缺血损伤中起重要的作用，可能与神经细胞和内皮细胞的自身保护作用有关，VEGF，bFGF有相互促进表达的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对脊髓损伤后bcl-2及bax基因表达的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脊髓损伤后bcl-2和bax基因表达的影响。方法：利用Allen WD法以25gcf致伤SD大鼠脊髓制作损伤模型，经蛛网膜下腔导管于术后即刻，0.5，1．2，3，4，6,12，24，48h导管注入bFGF20μL(含bFGF200U)；对照组相同时间点注入等量生理盐水作对照。术后2，6，12，24，48h取损伤脊髓组织，采用免疫组化和原位杂交方法分别检测Bcl-2、Bax蛋白和bcl-2 mRNA基因的表达。结果：脊髓损伤后应用bFGF显著促进bcl-2基因的表达，2，6，12，24，48h Bcl-2平均光密度值分别为0.165&;#177;0.020,0.254&;#177;0.081，0．312&;#177;0．017,0.415&;#177;0．021，0．304&;#177;0．031，(P&;lt;0．01，t=2.729—9．279),Bax平均光密度值分别为0．034&;#177;0．021，0．184&;#177;0.014，0．204&;#177;0．014．0.216&;#177;0027，0．180&;#177;0.013(P&;lt;0.01，t=4．601～6，376),提高Bcl-2蛋白的含量，降低了Bax蛋白的水平，每组数据差异具有统计学意义。结论：bFGF通过促进bcl-2基因的表达、抑制Bax蛋白的表达抑制脊髓损伤后神经细胞的凋亡，从而保护脊髓组织，这可能是bFGF对脊髓损伤具有保护作用的机制之一。     

血管性痴呆大鼠模型学习记忆障碍与海马半胱氨酸蛋白酶1蛋白的表达：空白对照及量化盲法评估

目的：定量测定血管性痴呆大鼠的学习记忆成绩，同时观察海马半胱氨酸蛋白酶1蛋白在血管性痴呆大鼠海马中的表达及其意义。方法：实验于2004-01／11在中国医科大学动物实验室进行，取健康雄性SD大鼠100只，随机分正常对照组(n=28，仅分离双侧颈总动脉)、假手术组(n=28，仅麻醉，不做手术)，和血管性痴呆组(n=44)。采用血管阻断的方法，复制大鼠血管性痴呆模型，每组随机取10只大鼠，采用水迷宫实验进行行为学检测，定量测定其学习记忆成绩。每组剩余大鼠在缺血后24，48，72，96，120h及7d处死，用免疫组化方法检测海马区半胱氨酸蛋白酶1蛋白表达水平的变化。结果：100只大鼠死亡4只，进入结果分析96只。①水迷宫学习成绩：血管性痴呆组大鼠游完全程的时间、进入盲端的次数及时间[(3．78&;#177;1．65)min，(5．21&;#177;1.56)次，(1.90&;#177;1．38)min]明显多于正常对照组及假手术组[(0．68&;#177;0．12)min，(1．13&;#177;0．21)次，(0．21&;#177;0．08)min；(0．76&;#177;0．13)min，(0．98&;#177;0．32)次，(0．31&;#177;0．09)min]。②水迷宫记忆成绩：血管性痴呆组大鼠游完全程的时间、进入盲端的次数及时间[(2．98&;#177;1．05)min，(5．62&;#177;2．11)次，(1．78&;#177;0．84)min]明显多于正常对照组及假手术组[(0．24&;#177;0．16)min，(0．48&;#177;0．73)次，(0．04&;#177;0．02)min；(0．35&;#177;0．20)min，(0．52&;#177;0．80)次，(0．10&;#177;0．02)min]。③血管性痴呆组脑缺血后24h半胱氨酸蛋白酶1蛋白表达，为(82&;#177;12)个／视野，第3天时达高峰[(198&;#177;20)个／视野]，明显多于正常对照组和假手术组[(17&;#177;3)，(20&;#177;3)个／视野]。结论：血管性痴呆大鼠发生了明显的学习记忆功能障碍，在血管性痴呆大鼠海马脑区有大量半胱氨酸蛋白酶1蛋白表达。作为一种抑制细胞凋亡的基因，半胱氨酸蛋白酶1蛋白可能对血管性痴呆大鼠脑内与学习记忆密切相关的海马神经元有保护作用。     

臂丛损伤修复中胶质纤维酸性蛋白的表达及意义

目的：观察大鼠臂丛损伤修复中脊髓前角胶质纤维酸性蛋自的表达并探讨其意义。方法：实验于2004-09／2005-03年在中山大学中山医学院解剖教研室完成。成年雄性SD大鼠65只，其中对照组5只，实验组60只。建立3种臂丛损伤模型：右C7前根撕脱组（A组）；右C7前根撕脱＋同侧C5-T1后根离断组（B组）；右C7前根撕脱＋右C5与C6之间脊髓半横断组（C组）。术后1，3，7，14d采用联合行为评分对各组大鼠的神经缺失症状进行评分；评分后取C7节段脊髓，采用免疫组织化学方法和图像分析方法观察星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白的表达。结果：实验选用大鼠65只，其中实验组中C组术后12d死亡1只，进入实验结果分析共64只。①臂丛损伤后脊髓星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白表达：A组〈B组〈C组，均比对照组明显增高（A组1，3，7，14d依次为141．5&;#177;2．1，150．1&;#177;6．4，158．4&;#177;5．0，169．3&;#177;1．6；B组为156．7&;#177;1．9，160．2&;#177;1．9，172．5&;#177;3．5，190．1&;#177;3．2；C组为162．7&;#177;5．1，183．3&;#177;1．7，191．2&;#177;3．7，228．7&;#177;4．2；对照组均为127．6&;#177;2．2；P〈0．01）。②损伤各组联合行为评分1～14d呈降低趋势。③A，B，C组胶质纤维酸性蛋白表达与对应组联合行为评分之间均呈负相关（r=-0．956 - -0．993，P〈0．01）；结论：臂丛撕脱伤诱导胶质纤维酸性蛋白表达持续升高，提示星形胶质细胞参与神经损伤和修复的全过程。     

亚低温条件下局部脑神经元c-fos蛋白表达变化

目的：研究颅脑枪弹伤常温下及全身亚低温治疗后脑神经元c-fos蛋白表达的变化。方法：18只杂种犬，随机分为常温组(正常犬温为38．5～39．5℃)，亚低温组（31．5～32．5℃)。以德国小口径步枪子弹致伤犬颅脑贯通伤(penetrating craniocerebral injury，PCI)模型为对象，采用免疫组化法检测两组脑组织伤后30min，2，3h弹道挫伤区，震荡区及脑干神经元中fos蛋白的表达。结果：全身亚低温治疗3h组弹道挫伤区、震荡区及脑干神经元中fos蛋白阳性数分别为(15．5&;#177;1．6)，(21．6&;#177;2．1)，(6．7&;#177;1．8)个，较常温对应组弹道挫伤区，震荡区及脑干神经元中fos蛋白阳性数分别为（21．6&;#177;5．4)，(32．2&;#177;1．7)，(11．2&;#177;1．8)个显著减少（P&;lt;0．01)。结论：颅脑枪弹伤后全身亚低温治疗能够抑制脑神经元c-fos蛋白的表达。     

脑缺血不同时期胰岛素样生长因子-1在大鼠脑内的表达及其意义

目的：观测脑缺血不同时期胰岛素样生长因子(insulin-1ike growth factor，IGF)在脑内的表达，同时探讨IGF-1生物制剂对脑缺血损伤的保护作用。方法：将55只sD大鼠单纯随机分为3组，正常对照组5只。用药组和非用药组各25只。后两组分别再按缺血时间分为1，3，5，7，10d组，每组5只大鼠。除正常对照组外，均建立脑缺血模型，造模后1h非用药组侧脑室内注射生理盐水；用药组侧脑室内注射IGF-1，定时间处死动物．取脑组织固定。免疫细胞化学ABC法，动态观测不同时期大脑皮质IGF-免疫反应阳性细胞数的变化情况。结果：脑缺血后第1，3，5，7天大脑皮质IGF-1免疫反应阳性细胞数非用药组分别为(13．6&;#177;0．41)，(14．9&;#177;0．67)，(15．6&;#177;0．89)。(13．2&;#177;0．69)个，较正常对照组(12．2&;#177;0．56)个明显增高，差异有显著性意义(t=2．03—3．23，P&;lt;0．05或0．01)；用药组为(14．5&;#177;0．95)。(16．3&;#177;0．79)，(17．1&;#177;0．65)，(14．2&;#177;0．45)个，较相应非用药组比较均有增高趋势，差异有显著性意义(t=1．90—3．06，P&;lt;0．05，0．01)。结论：脑缺血损伤后IGF-1表达有明显变化，同时提示了IGF-1可能在脑缺血损伤中起保护作用。     

牛磺酸对大鼠缺血心肌缺血再损伤的保护作用

目的：探讨大鼠心肌缺血损伤与凋亡蛋白Bcl—2和Bax的关系及牛磺酸的影响。方法：选择健康SD大鼠30只，随机分为假结扎组、结扎组和牛磺酸保护组，每组10只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型。检测3组心肌线粒体中超氧化物歧化酶(supevoxide dismutase，SOD)、Ca^2+-ATP酶活性和丙二醛含量，用免疫组化法检测心肌中的Bct-2和Bax蛋白。结果：结扎冠状动脉左前降支可致心肌线粒体丙二醛含量升高[假结扎组：(4．89&;#177;0．54)μmol／g；结扎组：(9．85&;#177;0．68)μmol／g]，SOD和Ca^2+-ATP酶活性下降[假结扎组：(8．63&;#177;0．35)μmol／(g&;#183;s)，(13．97&;#177;1．97)mmol／(g&;#183;s)；结扎组：(6．73&;#177;0．39)μmol／(g&;#183;s)，(8．54&;#177;2．28)mmol／(g&;#183;s)]。缺血心肌Bax蛋白表达呈显著升高(t=3．931，P&;lt;0．01)，牛磺酸能明显减少缺血心肌线粒体丙二醛的生成[牛磺酸保护组：(5．46&;#177;0．72)μmol／g]，降低心肌BAT蛋白的表达，增加Bcl—2蛋白的表达(t=3．716，P&;lt;0．01)。结论：结扎大鼠冠状动脉左前降支所致心肌缺血损伤与Bcl—2和Bax蛋白的表达有关，牛磺酸对缺血心肌Bcl—2和Bax蛋白的表达有较好的调控作用。     

亚低温治疗改善急性颅脑损伤后近期运动功能的机制研究

背景：目前已有大量国内外研究显示亚低温能够改善脑缺血和脑创伤后的神经功能预后，然而其脑保护作用的机制尚未明确，尤其尚未深入到分子生物学水平。目的：探讨亚低温对脑创伤的治疗作用，并从分子生物学角度探讨其可能的机制。设计：随机对照的实验研究。单位：北京天坛医院麻醉科、检验科、神经外科。地点和对象：实验在首都医科大学附属北京神经外科研究所完成。对42只Wistar大鼠进行研究。42只健康大鼠随机分为3组：常温组15只，亚低温组15只和假手术对照组12只。干预：常温组和亚低温组用液压装置制成创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury，TBI)侧方打击模型，伤后早期(5miu)脑温分别维持在37～38℃和33～34℃，假手术对照组除不损伤外处理同常温组。控温1h后每组5只立即灌注固定取脑，冷冻切片免疫组织化学方法染色显示c-fos的表达产物Fos蛋白。其余放回动物房，观察24h死亡率并进行运动功能评分。主要观察指标：①运动功能评分。②c-fos的表达产物Fos蛋白表达情况。③24h死亡率。结果：亚低温组与损伤有关的24h死亡率（10％)较常温组（60％)明显降低(，=5．495，P&;lt;0．05)，亚低温组前肢肌力、侧方推力、爬坡能力[(3．0&;#177;0．7)分，(2．7&;#177;0．7)分，（3．6&;#177;0．7)分]较常温组[(1．8&;#177;1．0)分．(1．5&;#177;0．6)分，（1．8&;#177;0．5)分]明显改善(t=-2．655，-2．88，3．165．P&;lt;0．05)，亚低温组损伤侧皮质Fos的表达(3．0&;#177;0．7)较常温组(1．2&;#177;0．4)明显增加(t=-4．811，P&;lt;0．01)。结论：亚低温对TBI有显著的治疗作用，其机制可能与Fos表达增加有关。