丙型肝炎病毒山东分离侏核衣壳蛋白区cDNA的序列测定

①目的 通过核衣壳蛋白区（Ｃ区）基因序列分析，对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）山东分离株进行定型。②方法 应用反康 套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）方法，从山东省ＨＣＶ抗体阳性血清听主增出ＨＣＶ Ｃ区基因的一个片段（４３２ｂｐ），对其进行ＴＡ克隆及测序，并通过ＤＮＡＳＩＳ软件和Ｇｅｎｅｂａｎｋ进行序列分析。③结果此分离株与基因型１ｂ的ＨＣＶ分离株同源性最高，与４个已知１ｂ型分离株的核苷酸相应     

中国大陆基因2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒部分基因的cDNA序列分析

目的分析来源于徐州的中国株２ａ／Ⅲ型丙型肝炎病毒（ＨＣ－ＸＺ）的部分核苷酸序列。方法以逆转录巢式聚合酶链反应获得位于７９１８位至８２９３位间的ｃＤＮＡ片段，聚合酶链反应直接序列分析技术测定核苷酸序列，计算机分析其特征。结果与日本株２ａ／Ⅲ型丙型肝炎病毒（ＨＣＪ６）及中国株１ｂ／Ⅱ型丙型肝炎病毒ＨＣＣ２相比，ＨＣＸＺ在核苷酸水平的同源性分别为８９．６０％与６８．００％，在氨基酸水平的同源性分别为９２．９２％与６９．０３％。ＨＣＸＺ与ＨＣＪ６在此区域的亲水性相仿。结论ＨＣＸＺ与ＨＣＪ６属于同一亚型，且亲缘性较高。     

丙型肝炎病毒核心蛋白基因序列变异分析

为了研究西安地区丙型肝炎病毒基因组中Ｃ区基因的变异性,采用单链构象多态性（ｓｉｎｇｌｅ－ＳｔｒａｎｄＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＳＳＣＰ）分析方法,对３６份ＨＣＶＲＮＡ阳性血清的ＰＣＲ产物进行分析,结果有３１份样品的ＳＳＣＰ图谱同,对其中二份样品进行测序,证明序是相同的;     

南京地区肝病患者丙型肝炎病毒基因型与乙型肝炎病毒亚型分布

目的:了解南京地区丙型肝炎病毒(HCV) 感染及乙型肝炎病毒(HBV) 抗原亚型分布情况。方法:对1993 ～1995 年住院肝病患者2 157 例,应用RT- PCR、HCV 进行基因型、阳性克隆序列分析及HBV亚型的检测。结果:HCVRNA 阳性率为8.7 % 。对100 例HCV 基因型分析:Ⅱ型占91% ,Ⅲ型占6% 。HBV亚型分析:adr 占55.6% ,adw 占38.4% 。2 例HCV 阳性克隆均为Ⅲ型,与日本株(HC- J5 、HC-J6)密切相关。结论:中国南京的HCV可能是近代从日本传入的,HBV亚型以adr、adw 为主     

丙型肝炎病毒基因型的研究进展

本文从丙型肝炎病毒的基因型分布以及和临床关系等方面探讨,研究各基因型的临床差别以及引起差别的机制,为掌握丙型肝炎病毒治疗的难易程度及制定抗病毒治疗的个体化方案提供依据。     

2009~2013年四川大学华西医院1 998株丙型肝炎病毒基因分型研究

目的 了解四川大学华西医院近年来检测出的丙型肝炎病毒基因型分布特点。方法 收集2009年1月至2013年12月间在四川大学华西医院就诊的丙型肝炎病毒感染者的基因分型结果,分析基因型分布特征。结果 1 998例丙型肝炎病毒感染者中,共检出5种基因型、15种基因亚型,其中4例为2种基因亚型的混合感染。其基因型或亚型分布:1a型8例（0.40%）、1b型1 368例（68.47%）、1c型18例（0.90%）、2a型78例（3.90%）、2b型1例（0.05%）、2i型16例（0.80%）、3a型291例（14.56%）、3b型154例（7.71%）、3k型4例（0.20%）、5a型1例（0.05%）、6a型50例（2.50%）、6b型3例（0.15%）、6h型1例（0.05%）、6n型1例（0.05%）,混合感染中1b/1c型、1b/6h型、2c/2a型、3b/3k型各1例（各占0.05%）。不同性别间主要基因亚型分布差异无统计学意义（P ＞0.05）,不同年龄段间分布差异有统计学意义（P <0.05）。结论 四川大学华西医院就诊患者丙型肝炎病毒基因亚型主要为1b亚型,其次为3a、3b、2a、6a亚型,同时还存在1a、1c、2b、2i、3k、5a、6b、6h、6n、1b/1c、1b/6 h、2c/2a、3b/3k等单一或混合基因型,提示患者基因型存在多样性。     

中国人丙型肝炎病毒囊膜蛋白2HVR1 cDNA的序列分析

目的：了解中国ＨＣＶ流行株高变区１（ＨＶＲ１）的特点。方法：对来自山东（ＳＤ）、上海（ＳＨ）两地患者血清ＲＮＡ进行逆转录－巢式ＰＣＲ，扩增ＨＣＶ囊膜蛋白２基因片段，用ＰＣＲ直接测序法对该片段进行序列测定。结果：（１）扩增片段（命名为Ｐ３８８）对应于日本ＨＣＶ－Ｊ株序列核苷酸１４３９￣１８２６位（氨基酸位３７１￣４９８）；（２）中国人ＨＣＶ ＨＶＲ１位于氨基酸位３８４￣４１０，与发表的ＨＣＶⅡ型ＨＶ     

丙型肝炎病毒基因型的研究进展

本文从丙型肝炎病毒的基因型分布以及和临床关系等方面探讨,研究各基因型的临床差别以及引起差别的机制,为掌握丙型肝炎病毒治疗的难易程度及制定抗病毒治疗的个体化方案提供依据。     

慢性丙型肝炎患者HCV核心蛋白基因及其肽链的序列分析

为探讨丙型肝炎病毒感染在肝癌发生中的作用，从３５例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的非甲非乙型肝病患者血清中提取ＨＣＶ－ＲＮＡ，经随机引物逆转合成ｃＤＮＡ，在病毒的Ｃ基因区进行分型，再于病毒５‘－末端至Ｅ１区进行测序分析。     

血液病患者中HCV和HBV感染及其复制分析

对１２６例血液病患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染及其病毒复制进行了研究，结果：（１）１２６例患者中ＨＣＶ抗体阳性８例（６．４％）大约比献血员感染率高１０倍（Ｐ〈０．０１），在抗体阳性者中有７例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性（８７．５％）（２）所测患才中ＨＢＶ五项标志物单项或多项阳性２６例（２０．６％）其中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（４６．２％）在８例ＨＣＶ感染者中有３例与ＨＢＶ重叠感染（３７．５％）５例有既往输血史（６２     

丙型肝炎患者肝组织中病毒抗原检测

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原在患者肝组织中的分布状况及其相互关系。方法采取免疫组织化学方法，用多克隆抗－ＨＣＶ和单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３、抗－ＨＣＶ－ＮＳ５，对１０７例ＨＣＶ感染患者肝组织中ＨＣＶ抗原进行检测。结果应用三种抗体均从ＨＣＶ患者肝组织中检出相应抗原，检出率分别为３８．３％，２８．０％和５２．３％；阳性颗粒定位于肝细胞浆；阳性细胞分布呈散在、弥漫状和簇状；ＨＣＶ－ＮＳ３的表达与炎症反应无明显解剖学关系，ＨＣＶ－ＮＳ５阳性细胞较常见位于炎症灶旁或灶中。结论ＨＣＶ各成分在肝组织中的表达水平存在差别；ＨＣＶ－ＮＳ５的表达可能与ＨＣＶ的致病机制有关。     

HBV与HCV重叠感染的研究

应用ＰＣＲ法和套式ＰＣＲ法对深圳地区４４例ＨＢＶ血清学标志物阳性者进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，并同时作ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠的感染情况，同时观察其血清ＡＬＴ的情况。结果发现，４４例患者中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（２７．２７％）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２２例（５０．００％），抗ＨＣＶ阳性２１例（４７．７３％）．表明ＨＢＶ与ＨＣＶ的重叠感染率较高，应引起人们的重视。     

检测HCA-RNA的RT-PCR技术改进与应用

以台湾株丙型肝炎病毒的非结构区基因序列(HCV-T_3)设计内外五条呈巢式排列的引物,结合AGPC核酸一步抽提法,寡聚核苷酸探针5′末端标记法和Southern电泳转移杂交法,建立简捷特异检测HCV-RNA的逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)技术。应用这一技术对121例非甲非乙型肝炎患者和45例抗HCV阳性的慢性乙型肝炎患者进行了血浆HCV-RNA检测,结果阳性率分别为66.1％(80/121)和66.7％(30/45)。本文对这一技术的方法学、HCV-RNA与抗HCV的关系、血液暴露史对HCV感染的意义以及HBV与HCV的重叠感染进行了讨论。     

HBV相关肝细胞癌患者HBV前S/S基因变异的分析

目的:研究肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)患者体内乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)前S/S基因变异特点.方法:分别对9例乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性肝癌患者及其家族中11例HBsAg阳性者血清乙肝病毒前S/S基因PCR扩增克隆.测序并进行结构分析.找出基因变异活跃位点,再对两组资料作统计学分析.结果:除对照组中1例未能扩增出前S/S基因,仅能扩增出S基因,其它样本均扩增出前S/S基因片段.所有HBV株均为B或C基因型和adrq 或adw2血清型.肝癌患者来源的HBV在包膜蛋白抗体结合区点突变发生率较高,但与对照组相比,没有统计学差异(P＞0.05).肝癌组4例发生HBV前S区删除变异,具有特异性.与对照组(0/10)相比,有统计学差异(P＜0.05).结论:HBV前S/S区点突变可能与肝癌发生没有相关性,而前S区删除变异可能与肝癌发生有密切联系,应当对HBV感染者进行前S区基因变异监测.     

原发性肝癌和职业献血员中庚肝病毒感染和核酸序列测定

目的为了解本地区原发性肝癌(PHC)中HGV感染状况和与输血的关系。方法采用逆转录-套式聚合酸链反应法(RT-nPCR)对20例PHC和44例职业献血员进行了HGV-RNA检测，并对3例阳性产物纯化克隆后，采用ABI Pism 377 DNA自动测序仪，对其5＇非编码区基因序列(115～467nt)进行了测定。结果20例PHC中，2例(10.0％)HGV-RNA阳性，该2例分别为HBV、HCV三重感染和HBV三重感染和HBV、HGV重叠感染，且均有输血史；44例职业献血员中，1例(2.3％)HGV-RNA阳性。该3株HGV核苷酸序列同源性为97.3％～98.8％，与GBV-C(U36380)、HGV(U44402)和HGV3型(D90601)的核苷酸同源性分别为88.3％～89.4％、88.4％～89.7％和95.2％～96.3％。结论PHC中HGV感染与输血有关；HGV可能与PHC的发生无关。本地区HGV感染株属基因3型。     

COLNING AND ANALYSIS OF THE GENOMIC DNA SEQUENCE OF AUGMENTER OF LIVER REGENNERATION FROM RAT

Objiect:To search for genomic DNA sequence of the augmenter of liver regeneration(ALR) of rat.Methods:Polymerase chain reaction(PCR)with sepcific primers was used to amplify the sequence from the rat genome.Results:A piece of genomic DNA sequence and a piece of pseudogene of rat ALR were identified.The lengths of the gene and pseudogene are 1508 bp and 442 bp,respectivel.The ALR gene of rat includes 3 exons and 2 introns.The 442 bp DNA sequence may represent a pseudogene or a ALR-related petide.Predicted amino acid sequence analysis showed that threre were 14 different amino acid residues between the gene and pseudogene.ALR-related petide is 84 amino acid residues in length and relates closely to ALR protein.Conclusion:There might be a multigene family of ALR in rat.     

拉米夫定治疗中乙肝病毒多聚酶YMDD变异对患者临床经过的影响

研究乙肝病毒(HBV)多聚酶YMDD变异后HBVDNA复现对慢性HBV感染患者临床经过的影响。方法用mpPCR-RFLP技术检测24例拉米夫定治疗过程中出现HBVDNA复现的患者血清,对YMDD变异者的系列临床资料,应用SAS软件进行统计学分析。结果检出YMDD变异18例;YMDD变异后转氨酶水平较HBVDNA转阴时有显著升高,并反跳至治疗前水平。结论出现YMDD变异后,部分病例可有类似肝炎发作、甚至肝脏失代偿的表现。