补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的：观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法：采用大鼠大脑中动脉结扎模型研究补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血保护作用。结果：补阳还五汤可呈剂量依赖性降低脑组织Na^＋，NO，MDA浓度，抑制NOS，增强SOD，Na^＋-K^＋ATPase，Ca^2＋ ATPase活性，提高K^＋浓度及减轻脑水肿。结论：补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血有保护作用。     

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠血清细胞因子的影响

目的：观察补阳还五汤对局灶性脑缺血模型大鼠血清细胞因子的影响。方法：采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血的动物模型,在缺血后24h采静脉血,以酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血清中IL-1、IL-6和IL-10含量的变化。结果：脑缺血24h大鼠血清中IL-1、IL-6、IL-10水平均显著升高（P〈0.01）;中医方剂补阳还五汤均能显著降低脑缺血模型大鼠血清中IL-1和IL-6水平（P〈0.01）,显著升高IL-10水平（P〈0.01）。结论：补阳还五汤对局灶性脑缺血模型大鼠血清细胞因子的影响是其对脑缺血保护作用的可能机制之一。     

补阳还五汤对局灶性脑缺血后星形胶质细胞谷氨酰胺合成酶的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后不同时间点谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)的影响。方法改良线栓法建立大脑中动脉栓塞/再灌注模型,术后进行补阳还五汤灌胃,每天2次,模型组给予等量的生理盐水。分别于第1天、第3天、第5天和第7天灌注取材,采用免疫荧光染色法检测各组大鼠星形胶质细胞GS的表达,免疫荧光双染确定GS的细胞定位。结果同假手术组相比,模型组海马CA1区GS的表达显著下降;同模型组相比,补阳还五汤组可显著提高海马CA1区GS表达,其中第3天和第5天GS达到最高水平。免疫荧光双染表明GS主要表达于星形胶质细胞。结论补阳还五汤可以提高大鼠脑缺血后海马CA1区星形胶质细胞GS的表达,从而增强星形胶质细胞转运谷氨酸的能力。     

补阳还五汤及其精简方抗脑缺血损伤功效比较

目的评价补阳还五汤及其精简方对脑缺血损伤的保护作用。方法体内实验:SD大鼠按体质量随机分为假手术组、局灶性脑缺血(MCAO)模型组、补阳还五汤组和补阳还五汤精简方组,每组10只,观察各组大鼠体质量、脑梗死面积和脑含水量等指标的变化。体外实验:采用过氧化氢(H2O2)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)致损,建立体外氧化应激细胞模型,将PC12细胞分为正常组、空白对照组、补阳还五汤组和补阳还五汤精简方不同浓度组(0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.5 mg/mL)及模型组,MTT法考察补阳还五汤及其精简方对模型细胞的保护作用。结果体内实验表明,补阳还五汤及其精简方给药7 d后,均能恢复MCAO模型大鼠的体质量、降低脑梗死面积、减轻脑组织水肿,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),两方组间比较差异无统计学意义(P0.05);体外实验表明,补阳还五汤及其精简方与细胞作用2 h即能发挥保护作用,对H2O2所致的氧化应激损伤有明显的保护作用,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),细胞存活率升高,同一浓度两方组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论体内外实验均表明,补阳还五汤精简方在抗脑缺血损伤方面功效显著,且药效不亚于补阳还五汤,在保证药效的前提下大大节约了中药资源。     

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠TLR4表达的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织TLR4表达的影响。方法 72只大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,每组按给药后7、14、21 d 3个时间点再各分3组,用免疫组化、Western blot、RT-PCR法检测各组不同时间点TLR4的蛋白和基因表达。结果模型组和补阳还五汤组各时间点TLR4蛋白和mRNA表达均高于假手术组(P<0.05),补阳还五汤组在第7、14天TLR4蛋白表达明显低于模型组,但TLR4mRNA水平在第7天、14天却明显高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论补阳还五汤通过调节缺血后脑组织TLR4的表达可能是其治疗脑缺血的作用机制之一。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤行为和病理改变的保护

目的 :观察补阳还五汤 (BHD)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法 :采用非开颅可逆性大鼠大脑中动脉栓塞法造成大鼠脑缺血再灌注损伤。补阳还五汤小剂量 ( 1 0 g·kg- 1)或大剂量 ( 2 0 g·kg- 1)实验前连续灌胃给药 7d。结果 :补阳还五汤可显著减轻神经功能障碍及脑组织病理损伤 ,明显降低脑组织含水量和脑梗塞面积。结论 :补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

基因芯片分析补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用机制

目的 :用基因芯片分析补阳还五汤 (BYHWT)对脑缺血再灌注损伤大鼠的基因表达影响 ,探讨其保护作用机制。方法 :以博星公司定制的包含 512条大鼠的cDNA基因表达谱芯片 ,研究脑缺血 2h再灌注 2 4h的大鼠脑组织基因表达谱 ,并观察补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的基因表达影响。结果 :脑缺血 2h再灌注 2 4h的大鼠脑组织共筛选出差异表达基因 149条 ,其中 69条基因表达上调 ,80条表达下调 ;脑缺血同时灌胃BYHWT大鼠脑组织共筛选出差异表达基因 31条 ,其中 2 5条基因表达上调 ,6条表达下调。结论 :补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的许多基因表达变化都有调节作用 ,是其保护脑缺血再灌注损伤的机制。     

补阳还五汤精简方对局灶性脑缺血大鼠脑谷胱甘肽抗氧化系统的影响

目的观察补阳还五汤精简方对局灶性脑缺血大鼠脑谷胱甘肽抗氧化系统的影响,探讨其作用机制。方法将120只SD大鼠采用随机数字表法分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。除假手术组外,其余各组采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,造模2 h后,各给药组给予相应药物灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃。各组分别于脑缺血后1、3、7 d检测脑组织还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。同时,采用实时荧光定量PCR、Western blot检测大鼠脑缺血后γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)m RNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组脑组织GSH含量及GSH-Px活性明显降低(P0.05,P0.01),γ-GCS m RNA及蛋白表达升高,其中第1日最明显(P0.05);与模型组比较,各给药组多能不同程度升高GSH含量及GSH-Px活性,同时上调γ-GCS m RNA及蛋白表达,其中第3日差异有统计学意义(P0.05)。结论补阳还五汤精简方通过调控脑缺血后谷胱甘肽抗氧化系统中GSH、GSH-Px及γ-GCS的表达,发挥抗氧化作用。     

补阳还五汤促进大鼠局灶性脑缺血后血管生成和功能恢复

目的:研究补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠血管生成和神经功能恢复的影响。方法:采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉阻塞,缺血90min后再灌,缺血后24h开始灌胃补阳还五汤,1天1次,连续14天,在缺血后第1、3、7、14天分别采用肢体放置实验、错步实验和粘胶揭除实验评价感觉运动功能;采用免疫组化检测缺血周边区微血管密度(microvessels density,MVD)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达。结果:与模型组比较,补阳还五汤不仅能显著提高肢体放置实验成绩,减少错步次数和缩短粘胶揭除潜伏期(P<0.05或P<0.01),而且能显著增加缺血周边区vWF阳性血管和VEGF阳性细胞数量(P<0.01)。结论:补阳还五汤能促进脑缺血后神经功能恢复,机制可能与其促进缺血周边区血管生成和VEGF表达有关。     

补阳还五汤增强小鼠脑缺血耐受的实验研究

目的:本实验建立小鼠脑缺血耐受(brain ischemic tolerance,BIT)模型,观察BYHWT干预脑预缺血(cerebral ischemic preconditioning,CIP)诱导BIT形成的情况,以证实BYHWT具有增强C IP脑保护效果,促进脑缺血耐受形成的作用。方法:将64只健康昆明小鼠随机分为四组:假手术组、缺血损伤组、BIT模型组和中药干预组,每组16只。用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉6min作为预处理,夹闭20min作为缺血模型,中药干预组灌服补阳还五汤。结果:术后7d海马CA1区,假手术组组织学组织学分级多为0级和1级,神经元密度ND=214±28n/mm;缺血损伤组组织学分级多为2级和3级,神经元密度ND=76±26 n/mm;BIT模型组海马CA1区组织学分级多为1级和2级,神经元密度ND=153±31n/mm;中药干预组海马CA1区组织学分级多为1级和0级神经元密度ND=196±23n/mm。每组间相比均有显著差异(P<0.05)。Bax和bcl-2蛋白表达变化,假手术组(Bax:12.35±2.23。bcl-2:5.17±1.34);缺血损伤组(Bax:53.96±1.42。bcl-2:5.77±1.22);BIT模型组(Bax:22.59±1.83。bcl-2:21.14±1.21);中药干预组(Bax:15.82±1.40。bcl-2:28.43±1.43)每组间相比均有显著差异(P<0.05)。提示:在小鼠前脑缺血模型中,以6min脑缺血作为预处理,可对间隔2d后20m in脑缺血引起的海马神经元损伤产生一定的保护作用,补阳还五汤能够对其产生良性干预效应,增强其脑保护作用,促进脑缺血耐受形成。     

补阳还五汤对心肌缺血再灌注损伤过程中自噬的调控

目前心急梗死治疗主要以溶栓治疗和经皮冠状动脉介入治疗为主,能迅速开通闭塞血管,减少心肌梗死面积,但由于冠状动脉的骤然开通与血流恢复,可导致心肌缺血再灌注损伤(Myocardial Ischemia-reperfusion Injury,MI/RI),诱发病死率依然居高不下。而许多研究表明心肌MI/RI与心肌细胞过度自噬有关,自噬是真核细胞维持稳态的一种保守的降解过程。近年来,中医药在调节细胞自噬方面取得了一定的进展,越来越多的中药被证实可以通过调节心肌细胞的自噬水平,通过调控自噬,对受损心肌产生保护作用。而中医根据心肌MI/RI的临床表现将其归类为"胸痹""真心痛"范畴,认为其主要病机为气虚血瘀,治宜益气活血,以补阳还五汤为代表方,此方通过纠正心肌MI/RI后气虚血瘀、改善局部微环境及能量平衡、清除氧自由基等积聚,继而有效调控细胞自噬,减少心肌细胞损害。该文综述了心肌缺血再灌注损伤过程中自噬的主要分子机制和作用及补阳还五汤对其的调控。     

Neuroprotective effect of Buyang Huanwu decoction against focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats--time window and mechanism

Ethnopharmacological relevance

Buyang Huanwu Decoction, a traditional Chinese medicine, consists of different herbal medicines, and has been traditionally used for centuries to treat paralysis and stroke. However, its optimal therapeutic time window and the mechanism are still unclear.

Aim of the study

This study was designed to explore the therapeutic time window and mechanism of Buyang Huanwu Decoction on transient focal cerebral ischemia/reperfusion injury.

Materials and methods

Middle cerebral artery occlusion was conducted in male Sprague-Dawley rats, and 40 g/kg of Buyang Huanwu Decoction was intragastrically infused at different time points, and the same dose was infused every 24 h for 3 days. The level of glutamate in cerebrospinal fluid and the expression of metabotropic glutamate receptor-1 RNA in striatum were detected before, during, and after ischemia/reperfusion. Neurological deficit scores and brain infarction volumes were measured at 72 h after reperfusion.

Result

Cerebral ischemia/reperfusion resulted in significant neurological deficit and extensive cerebral infarct volume, associated with a large amount of glutamate in cerebrospinal fluid and elevation of metabotropic glutamate receptor-1 RNA expression. Buyang Huanwu Decoction significantly suppressed the release of glutamate, and reduced the expression of metabotropic glutamate receptor-1 RNA. The neurological defect score and infarction volume were significantly improved by administration of Buyang Huanwu Decoction, when compared with the Ischemia group.

Conclusions

Administration of Buyang Huanwu Decoction, within 4 h of post-transient focal stroke, reduced significant cerebral ischemia/reperfusion damage. The neuroprotective mechanism of Buyang Huanwu Decoction is, in part, associated with the down-regulation of metabotropic glutamate receptor-1 RNA and inhibition of glutamate release resulting from cerebral ischemia.     

补阳还五汤对小鼠脑缺血后NOS活性的影响

目的：观察补阳还五汤对小鼠局灶性脑缺血后脑组织内NOS活性的影响。方法：局灶性脑缺血模型由丝线结扎一侧带迷走神经的颈总动脉制成，用NOS试剂盒和紫外分光光度测定NOS活性。结果：缺血后脑组织内NOS显升高，以缺血4h达高峰．补阳还五汤组NOS活性比缺血对照组显降低，以缺血4h最明显。结论：补阳还五汤能抑制缺血后脑组织内NOS活性的升高，对缺血后脑组织具有保护作用。     

补阳还五汤4类有效部位对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积的影响

目的研究补阳还五汤(BYHWD)中生物碱、多糖、苷、苷元4类有效部位对大脑中动脉闭塞(MCAO)后局灶性脑缺血大鼠脑梗死的作用。方法用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,检测脑梗死体积,并比较其神经功能行为评分。结果脑缺血6h,模型组脑梗死体积显著增大(P<0.01),神经功能行为评分显著升高(P<0.01);生物碱、多糖、苷、苷元各组脑梗死体积较模型组缩小(P<0.05、0.01);生物碱、苷、苷元和多糖可使MCAO大鼠神经功能行为评分下降(P<0.05、0.01),其中以生物碱和苷的作用较强。结论MCAO后,大鼠脑组织出现梗死,补阳还五汤4类有效部位生物碱、多糖、苷、苷元能减少脑梗死体积,改善脑缺血后神经行为症状。生物碱和苷的抗脑缺血作用较强,这可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的部分物质基础。     

补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠皮质神经细胞凋亡的影响

目的　研究补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠皮质神经细胞凋亡的影响。方法　将 36只SD大鼠随机分为 3组 :假手术组 (P ,n =12 )、模型对照组 (C ,n =12 )、补阳还五汤组 (B ,n =12 )。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,脑缺血再灌注 4 8h后TTC染色计算脑梗死体积 ,TUNEL染色检测神经细胞凋亡 ,免疫组化方法检测缺血侧皮质Bcl- 2 /Bax的表达 ,电镜观察线粒体的变化。结果　脑缺血再灌注后缺血侧皮质神经细胞凋亡增多 ,同时Bcl- 2表达减少 ,Bax表达增多 ,Bcl- 2 /Bax比值下降 ,线粒体肿胀且大多破裂。补阳还五汤干预后 ,细胞凋亡减少 ,脑梗死体积减小 ,Bcl- 2 /Bax比值上升 ,线粒体肿胀减轻。结论　补阳还五汤可能通过抑制神经细胞凋亡而减小脑梗死体积 ,其机制可能是通过上调Bcl- 2 /Bax比值 ,保护线粒体 ,防止发生线粒体通透性转变。     

补阳还五汤治疗脑血栓的临床疗效分析

目的：分析观察补阳还五汤治疗脑血栓的临床疗效。方法：采用随机法将108例脑血栓患者分成两组。治疗组54例在西医常规治疗基础上加用补阳还五汤随证加减治疗。对照组54例应用低分子右旋糖酐和胞磷胆碱钠等西医治疗。结果：两组同时治疗一个月之后进行神经功能缺损评分的比较,两组的差异有极显著的统计学意义（P﹤0.01）,治疗组的日常生活能力优于对照组,也有极显著的统计学意义（P﹤0.01）。结论：补阳还五汤临证加减能明显提高脑血栓患者的治愈率并减少了后遗症和明显的改善了日常生活能力,值得临床应用及推广。     

加味补阳还五汤治疗脑梗塞恢复期临床观察

目的：观察加味补阳还五汤对脑梗塞恢复期患者,临床症状、神经功能缺损的影响,探讨加味补阳还五汤治疗脑梗塞的临床效果,揭示其在脑梗死中的作用机制,为脑梗塞的治疗提供新的方法。方法：采用随机双盲设计方案,将53例脑梗塞恢复期患者随机分为治疗组（30例）和对照组（33例）,同时观察患者临床症状、治疗前后神经功能缺损的变化。结果：治疗后两组在临床神经功能缺损程度积分较治疗前有明显改善（P〈0．05）,但治疗组更优于对照组（P〈0．05）。结论：加味补阳还五汤改善脑梗塞恢复期患者神经功能缺损程度,提高了疗效,改善了生存质量。     

补阳还五汤对脑缺血大鼠海马组织circRNA-miRNA-mRNA转录网络的影响

目的 研究补阳还五汤对脑缺血大鼠海马组织环状RNA (circular RNA,circRNA)-微小RNA (microRNA,miRNA)-mRNA转录网络的影响,探讨其治疗脑缺血的作用机制.方法 运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用仪(UPLC-Q-TOF/MS)分析补阳还五汤化学成分;SD大鼠随机分为对...     

建瓴汤合补阳还五汤加减治疗急性脑梗塞32例

目的:观察建瓴汤合补阳还五汤加减治疗急性脑梗塞的临床疗效。方法:将64例急性脑梗塞患者按照随机数字表分为两组,对照组予常规西药治疗(32例)和治疗组采用建瓴汤合补阳还五汤加减治疗(32例),治疗15d后观察其临床疗效。结果:对照组愈显率为37.50%,总有效率为81.25%;治疗组治愈率为78.13%,总有效率为93.75%;治疗组的总有效率与对照组无明显统计学意义,但在愈显率方面明显优于对照组。结论:建瓴汤合补阳还五汤加减治疗急性脑梗塞临床疗效好,且愈显率显著,后遗症少、安全毒副作用少,值得推广。