醛糖还原酶基因研究进展

醛糖还原酶 (AR)是多元醇通路的限速酶 ,此酶的激活被认为与糖尿病慢性并发症有关。人类AR基因是定位于染色体 7q3 5,其调控区具有一个TATA盒、一个CCAAT盒、三个Sp1结合元件、一个GC富含序列和一个GA富含区。该基因转录起始点上游还存在一个高度多态性的微卫星DNA标记———(AC)n串联重复序列和几个与高渗表达增加直接相关的渗透应答元件。对AR基因及其调控区的研究有助于阐明此酶激活及糖尿病慢性并发症发生的机理。     

完全型雄激素不敏感综合征雄激素受体基因突变的鉴定与分析

目的 对l例完全型雄激素不敏感综合征(complete androgen insensitivity syndrome,CAIS)患者的雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行分析,寻找潜在的突变位点,并进一步分析其发病原因.方法 提取患者外周血全基因组DNA,扩增位于X染色体AR基因8个外显子及邻近外显子与内含子剪切位点DNA序列,对扩增产物直接进行DNA序列测定,与GenBank中的基因序列进行比对.结果 该患者AR基因在第6外显子核苷酸序列3507位点缺失一个碱基C而引起移码突变,致使在第808位密码子出现终止密码子(TGA)使得翻译提前终止形成截短的雄激素受体蛋白.该突变可能诱导雄激素受体结合能力发生功能上的变异,导致CAIS的发生.结论 AR基因第6外显子核苷酸序列3507位点缺失碱基C引起的移码突变是一种导致CAIS新的基因突变方式,该研究丰富了AR基因突变谱,为了解CAIS的发病机制提供了新的依据.     

雄激素受体基因新突变引起的完全型雄激素不敏感综合征

目的 对1例完全型雄激素不敏感综合征(complete androgen insensitivity syndrom,CAIS)的雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行分析,寻找致病突变.方法 提取外周血全基因组DNA,扩增位于X染色体上的AR基因所有8个外显子及邻近外显子与内含子之间的剪切位点DNA序列,对扩增片段直接进行DNA序列测定,与基因库中的序列进行比对.结果 该病例AR基因第1外显子的441位密码子发生无义突变(GAA→TAA),由编码谷氨酸(Glu)变为终止密码,导致雄激素受体蛋白翻译至441位时终止,产生没有功能的氨基酸多肽残段.结论 Glu441stop(GAA→TAA)是一种导致CAIS的AR基因新的突变方式,之前在世界范围内均未见报道,丰富了AR基因突变谱,增加对CAIS发病机制的了解.     

宁夏回、汉族群体雄激素受体基因(CAG)n、(GGN)n重复多态性研究

目的 研究雄激素受体(androgen receptor,AR)基因(CAG)n、(GGN)n重复序列多态性在宁夏回、汉族群体中的分布特征.方法 用ABI 3730XL测序仪测定AR基因的(CAG)n及(GGN)n重复数目并对结果进行分析.结果 CAG等位基因在宁夏回、汉族群体中的分布差异无统计学意义(P＞0.05).GGN等位基因在两个群体中的分布差异有统计学意义(P＜0.01),汉族女性GGN重复数为23的等位基因频率(48.4％)显著低于回族女性(64.7％,P=0.01).结论 AR基因GGN等位基因在宁夏回、汉族群体中的分布差异有统计学意义(P＜0.01).     

雄激素受体基因新突变引起的完全型雄激素不敏感综合征

目的 对1例完全型雄激素不敏感综合征(complete androgen insensitivity syndrom,CAIS)的雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行分析,寻找致病突变.方法 提取外周血全基因组DNA,扩增位于X染色体上的AR基因所有8个外显子及邻近外显子与内含子之间的剪切位点DNA序列,对扩增片段直接进行DNA序列测定,与基因库中的序列进行比对.结果 该病例AR基因第1外显子的441位密码子发生无义突变(GAA→TAA),由编码谷氨酸(Glu)变为终止密码,导致雄激素受体蛋白翻译至441位时终止,产生没有功能的氨基酸多肽残段.结论 Glu441stop(GAA→TAA)是一种导致CAIS的AR基因新的突变方式,之前在世界范围内均未见报道,丰富了AR基因突变谱,增加对CAIS发病机制的了解.     

中国男性雄激素受体基因(CAG)n重复多态性的初步研究

目的 研究正常中国男性雄激素受体（androgen receptor,AR)基因（CAG）n重复序列的多态性。方法 应用DNA测序基础上的[α-^32P]dCTP掺入不对称PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)方法,对107名正常男性AR基因的（CAG）n重复数进行测定。结果 AR基因（CAG）n序列在正常男性人群中呈现重复多态性,其重复范围为11-29,集中于20-24,以22最多。结论 AR基因（CAG）n序列在正常男性人群中呈现重复多态性,为今后进一步研究其病理学及遗传学意义打下基础。     

雄激素受体基因(CAG)n重复多态性与前列腺癌

前列腺癌 (ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒ,ＰＣ)是雄激素依赖性肿瘤 ,雄激素介导其作用的受体 (ａｎｄｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ)在ＰＣ的发生、发展中起着重要的作用。已发现ＡＲ基因内的 (ＣＡＧ)ｎ三核苷酸重复 /微卫星序列具有多态性 ,其多态性分布存在人种差异。国外有研究提示 (ＣＡＧ)ｎ重复序列与ＰＣ的发病有关 ,但尚无定论。目的 :建立ＡＲ基因 (ＣＡＧ)ｎ重复数的测定方法 ,研究中国人正常人群中该重复的多态性分布 ,与其他人种进行比较 ,并探讨 (ＣＡＧ)ｎ重复多态性与ＰＣ发病之间的关系。方法 :应用建立的 [α - 32 Ｐ…     

完全型雄激素不敏感综合征雄激素受体基因突变分析

目的 对完全型雄激素不敏感综合征一家系雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行突变检测;并对发现突变的基因进行分析.方法 应用PCR扩增、DNA序列测定等技术分析所有AR基因外显子及其邻近DNA序列片段;应用核苷酸内切酶诊断方法观察其是否存在于正常人群;应用跨物种比对方法探讨突变所在位置的保守性.结果 3例患者AR基因第4外显子均发生E681D(GAG→GAT)错义突变,患者母亲为此突变杂合子携带者;患者父亲未见异常;正常人群未发现AR基因E681D突变;681位谷氨酸在不同物种间高度保守.结论 AR基因E681D(GAG→GAT)突变可能是导致完全型雄激素不敏感综合征新的突变方式.     

一种导致完全性雄激素不敏感综合征的AR基因移码突变的鉴定

目的 对1个男性假两性畸形完全性雄激素不敏感综合征的家系雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行突变检测,并分析其致病原因.方法 用PCR扩增及DNA测序等技术分析男性假两性畸形先证者候选基因AR的外显子及外显子内含子接头序列,根据检测到的突变位点情况,检测患者及其家系其他成员的相应DNA区段的碱基序列.结果 先证者及其家庭成员共3例患者均为AR基因1910delA的移码突变.其母亲为AR基因突变杂合子,是此疾病的携带者.该突变导致AR基因的N637I(AAU→AUC)、L638*(CTG→TGA)改变,导致AR蛋白283个氨基酸的截短.正常人群未发现该移码突变,该突变尚未见文献报道.结论 基因水平确定了该家系为AR基因突变引起的完全性雄激素不敏感综合征男性假两性畸形家系,同时发现了1种AR基因病理性新突变.     

前列腺癌中发现的4种雄激素受体突变体在PC3细胞中转录激活功能的研究

目的 :雄激素受体 (AR)基因突变在前列腺癌 (PC)的发生、发展中具有重要作用。本实验室曾应用PCR -SSCP法 ,从 5 0余例PC患者肿瘤组织中筛选出 4种AR基因点突变 (G14 2V、D2 2 1H、E872Q、M886I) ,它们均位于AR重要的功能区中。本实验拟观察在雄激素的激动剂二氢睾酮 (DHT)以及其他甾体激素 (雌二醇及孕激素 )作用下 ,这 4种突变体在前列腺癌细胞系PC3中转录激活功能的变化 ,为阐明AR基因突变对AR功能的影响及其在前列腺癌发生、发展和治疗中的作用提供理论依据。方法 :将野生型AR(wtAR)或AR突变体的表达载体与报告基因 (p…     

雄激素受体基因新突变引起的完全型雄激素不敏感综合征

目的 对1例完全型雄激素不敏感综合征(complete androgen insensitivity syndrom,CAIS)的雄激素受体(androgen receptor,AR)基因进行分析,寻找致病突变.方法 提取外周血全基因组DNA,扩增位于X染色体上的AR基因所有8个外显子及邻近外显子与内含子之间的剪切位点DNA序列,对扩增片段直接进行DNA序列测定,与基因库中的序列进行比对.结果 该病例AR基因第1外显子的441位密码子发生无义突变(GAA→TAA),由编码谷氨酸(Glu)变为终止密码,导致雄激素受体蛋白翻译至441位时终止,产生没有功能的氨基酸多肽残段.结论 Glu441stop(GAA→TAA)是一种导致CAIS的AR基因新的突变方式,之前在世界范围内均未见报道,丰富了AR基因突变谱,增加对CAIS发病机制的了解.

Abstract：

Objective To identify the mutation of human androgen receptor gene(AR) in a patient with complete androgen insensitivity syndrome (CAIS). Methods DNA sequences of 8 exons and their exon/intron boundaries of the AR gene in the patient were amplified by PCR and directly sequenced. Results DNA sequencing revealed a nonsense mutation in exon 1, resulting in a change of codon 441 GAA (glutamic acid) to a stop codon (TAA). Conclusion A novel mutation Glu441stop (GAA to TAA) of the androgen receptor gene leading to complete androgen insensitivity syndrome was identified in this study in a Chinese patient. It may help us further understanding the pathogenesis of CAIS.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗多聚谷氨酰胺病的研究进展

近年研究发现基因转录异常可导致亨廷顿病(Huntington's disease,HD)等多聚谷氨酰胺(polyglutamine,PolyQ)病中的神经元功能异常.组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)作为一种转录抑制因子,可与辅阻遏物复合体相互作用导致染色质重塑,最终抑制目的基因的转录.PolyQ蛋白与基因转录调控因子异常的相互作用可能是PolyQ病转录失调的原因之一.作者就PolyQ病转录失调的可能发生机制,尤其是组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferases,HATs)和HDACs在其中所起的作用,以及组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylases inhibitors,HDACIs)的治疗潜能等方面予以综述.     

微卫星估价异基因外周血干细胞移植后嵌合状态

目的用检测5个四核苷酸重复序列了解异基因干细胞移植后嵌合状态以及预后的关系.方法PCR扩增120份正常人和10对移植供受者基因组DNA,据所得片段大小确定5个微卫星在人群中的多态性及移植后嵌合状态.结果各微卫星均发现7个以上等位基因(7～12)多态性,杂合度仅CSF1PO低于70%.移植患者中完全嵌合状态(CC)8例,1例死于GVHD;混合嵌合状态(MC)1例,死亡;受者型1例,死亡.结论5个四核苷酸重复序列点多态性可成功检测大多数嵌合状态.混合嵌合状态预后差.     

靶向雄激素受体与糖皮质激素受体的抗前列腺癌药物筛选模型的建立和应用

目的寻找可以克服由于糖皮质激素(GR)高表达造成的现有抗雄激素治疗药物耐药问题的化合物分子。方法构建双荧光素酶报告系统检测模型评价化合物对雄激素受体(AR)与GR的转录活性影响,进行基于AR拮抗剂分子共同特征药效团模型和基于GR蛋白晶体结构的虚拟筛选,对虚拟筛选得到的化合物分子进行初步活性评价,验证先导物分子的AR与GR转录抑制活性、耐药性前列腺癌细胞的增殖抑制活性。结果成功构建可用来评价化合物对AR与GR转录活性影响情况的双荧光素酶报告系统,通过虚拟筛选与活性检测得到了化合物分子G8,G8可以抑制AR与GR双靶点转录活性,抑制GR高表达的恩杂鲁胺耐药细胞22Rv1的增殖。结论证实了通过理性药物设计与生物筛选模型筛选得到的化合物G8,可以克服由于GR高表达造成的现有抗雄激素治疗药物耐药问题,具有潜在的临床应用价值。     

雷氏按蚊多态微卫星DNA位点的筛选和特征

本研究对雷氏按蚊的微卫星DNA序列进行了分离,并筛选了其中具有多态性的微卫星位点.应用雷氏按蚊基因组DNA的酶切片段与生物素标记的寡核苷酸探针杂交,亲合素富集和超滤离心浓缩目的片段,扩增放大后克隆并测序,获得雷氏按蚊微卫星DNA序列.在其中挑选合适的微卫星位点,建立扩增体系.应用雷氏按蚊现场样本对不同的微卫星DNA进行扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选具有多态性的位点.本研究结果获得了雷氏按蚊微卫星DNA序列58条,GenBank注册登记号为EF620299～EF620356.其中,完整序列41条,占70.7%;非完整序列7条,占12.1%,复合序列9条,占15.7%;仅1条为非典型序列.电泳结果显示其中14个微卫星位点中有11个具有多态性.     

45例人前列腺癌雄激素受体基因B～H外显子的突变研究

目的和方法:为探讨雄激素受体(AR)与前列腺癌(PC)发生发展及内分泌治疗不敏感的关系,我们首先建立了用PC的穿刺和石蜡切片组织检测AR基因突变的PCR-SSCP(双链构象多态性)-双链DNA循环测序法.并用上述方法检测了45例国人前列腺癌组织(6例穿刺组织,39例石蜡切片)AR基因B～H外显子的基因突变.结果:在6例患者的癌组织中证实有7个SSCP泳动变位片段(其中一患者有两个外显子异常),这6例患者中4例为低分化腺癌,其中2例已有远处转移,而序列分析证实这2例转移患者SSCP异常的外显子H片段各存在一错义突变(Glu 872 Gln、Met 886 Ile).这两种AR的基因突变国内外均未见报道,为在PC中新发现的突变.结论:实验发现AR突变均发生在前列腺癌的中晚期,提示AR基因突变可能与PC的进展和转移有关.     

信号转导和转录激活因子6基因多态性与湖北汉族人变应性哮喘的相关性研究

目的　探讨信号转导和转录激活因子 (STAT) 6基因 3′非翻译区G2 96 4A位点多态性和第一外显子GT串联重复序列遗传多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性的关系。方法　用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术检测STAT6基因G2 96 4A位点多态性 ;用聚合酶链反应 短串联重复多态性 (PCR STR)技术对STAT6基因第一外显子微卫星进行分型 ,并将PCR产物克隆及测序鉴定 ;采用病例 对照法研究了 1 35例变应性哮喘患者和 1 0 9例对照。结果　 ( 1 )湖北地区汉族人群STAT6基因G2 96 4A位点基因型以GA型最为常见 ;哮喘组与对照组STAT6基因G2 96 4A位点的等位基因频率和基因型频率GG、GA、AA之间差异无统计学意义 (P >0 .0 5)。 ( 2 )STAT6基因第一外显子微卫星多态性共检出GT串联重复次数为 1 3、1 4、1 5、1 6的 4种等位基因 ;第一外显子微卫星的多态性检测出 1 3/1 4基因型在哮喘患者组和正常对照组相比差异具有统计学意义(P =0 .0 0 1 4 )。 ( 3)STAT6基因第一外显子GT二核苷酸串联重复序列多态性中 1 3 GT重复等位基因与 2 96 4A变异体之间存在连锁不平衡 (P =0 .0 0 0 0 2 1 8)。结论　STAT6基因 3′非翻译区G2 96 4A位点多态性与湖北汉族人哮喘易感性无明显相关性 ;第一外显子GT二核苷酸串联重     

β2-肾上腺素能受体基因多态性与支气管哮喘的研究

目的探讨β2-肾上腺素能受体(β2- AR)基因16、27位点多态性与支气管哮喘的相关性.方法采用等位基因特异性聚合酶链反应方法,对74例支气管哮喘者进行β2-AR基因多态性分析,并与43例肺炎患者、39名健康者对照.结果①两对照组β2-AR基因16、27位点多态性分布无差异性;②支气管哮喘组β2-AR基因16位点分布频率:精氨酸/甘氨酸占47.2%,甘氨酸/甘氨酸占35.2%,与两对照组比较(p<0.05);27位点分布频率:谷氨酰胺/谷氨酰胺占33.7%,谷氨酰胺/谷氨酸占52.7%,谷氨酸/谷氨酸占13.6 %,与两对照组比较(p>0.05).结论支气管哮喘的发生与β2-AR基因16位点多态性相关联,与27位点多态性不相关.     

雄激素不敏感和男性不育

目的正常男性性征的分化,睾丸的发育和精子的产生都需要雄激素和具有功能性的雄激素受体(AR)存在.由于AR基因突变导致雄激素不敏感综合征,受累个体的表型变化较大,从完全女性化到仅有男性化不足或男性不育.因此雄激素受体基因突变是男性不育的一个重要原因.本文就AR基因突变导致的雄激素不敏感与男性不育的关系进行综述.     

激素受体相关的微小RNA和乳腺癌

一、微小RNA(miRNA)在乳腺癌中的表达和调控 乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤,雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)已作为预测内分泌治疗疗效的关键指标.近年来的一些研究显示,乳腺癌的发生、浸润、转移和耐药与一些miRNA关系密切,miRNA通过调节mRNA的翻译在转录后水平对基因的表达进行调控.研究还显示,雄激素受体(AR)的转录活化可调节miRNA的表达,与乳腺癌的进展和预后有着重要的潜在相关性[1].