Survivin基因沉默对裸鼠人卵巢癌细胞移植瘤凋亡的影响

目的探讨survivin基因沉默对人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法将重组survivin shRNA plasmid转染人卵巢癌细胞株SKOV3细胞,通过裸鼠移植瘤实验比较survivin基因沉默对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测与凋亡密切相关的cytochrome-c、caspase-9和caspase-3基因的表达。结果裸鼠移植瘤实验显示,与对照组(空载体组和未转染组)相比,survivin shRNA plasmid转染组人卵巢癌细胞株SKOV3细胞生长速度减慢,肿瘤体积缩小(P<0.05);荧光定量PCR和蛋白印迹法结果都显示,与对照组相比,survivin shRNA plasmid转染组cytochrome-c、caspase-9和caspase-3的表达明显升高(P<0.05)。结论 survivin基因沉默可通过促进肿瘤细胞的凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长。     

PITX2 shRNA对卵巢癌细胞H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的探讨PITX2基因沉默对人卵巢癌细胞株H08910裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法将重组PITX2 shRNA plasmid转染人卵巢癌细胞株H08910细胞,通过裸鼠移植瘤实验观察PITX2基因沉默对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,同时,利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法检测PITX2基因沉默对caspase-3、cytochrome-c和caspase-9表达的影响。结果与对照组(空载体组和未转染组)相比,PITX2 shRNA plasmid转染组人卵巢癌细胞株H08910细胞生长速度减慢,肿瘤体积缩小(P<0.05),而且caspase-3、cytochrome-c和caspase-9的表达明显升高(P<0.05)。结论 PITX2基因沉默可通过促进肿瘤细胞的凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长。     

RNA干扰靶向cyclin D1基因对K562细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的 利用RNA干扰（RNAi）技术体外观测其对K562细胞cyclin D1基因的沉默效应及对细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法 通过壳聚糖介导转染K562细胞、Westernblot分析检测转染前后CyclinD1蛋白表达变化；集落形成实验检测细胞增殖能力；流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率的影响。结果 构建靶向cyclin D1基因的shRNA表达质粒（pshRNA-419和pshtNA-575）经壳聚糖转染后．能显著抑制cyclin D1基因表达；抑制K562细胞增殖，影响其集落形成能力；影响K562细胞周期分布，诱导细胞凋亡。而设计一碱基突变的序列所构建的质粒并无上述生物学效应。结论 cyclin D1基因表达下调可抑制K562细胞生长，并诱导细胞凋亡。提示cyclin D1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点的。     

非小细胞肺癌Ki—67的表达及其意义

目的：探讨非小细胞肺癌Ki-67的表达及其意义。方法：采用免疫组化EnVision二步法对46例非小细胞肺癌石蜡标本进行Ki-67检测，并结合临床病理资料作结果分析。结果：Ki-67阳性表达率为65．2％（30／46），与性别、年龄、肿瘤直径大小、组织学类型及分化程度无明显相关性，但与淋巴结转移情况密切相关，随着淋巴结转移程度的进展，其阳性率也逐渐升高，N2、N3组与N0组比较差异显著（P＜0．05）。结论：在非小细胞肺癌中检测Ki-67的表达对判断和预测淋巴结转移或评估预后有一定指导意义。     

TopoⅡ及Ki67在基底细胞样乳腺癌中的表达及意义

目的 研究Ki67和TopoⅡ蛋白在基底细胞样乳腺癌中的表达意义.方法 收集我院收治的浸润性乳腺癌标本,筛选出基底细胞样型乳腺癌(BLBC组)及83例非基底细胞样乳腺癌(非BLBC组).用免疫组化S-P法染色检测TopoⅡ及Ki67在不同组织中的表达.结果 Ki67蛋白在四种乳腺组织的阳性表达率差异有极显著性(x2=18.36,P=0.001),非BLBC组与BLBC组的Ki67蛋白表达差异有显著性,BLBC组的Ki67蛋白表达率水平最高.TopoⅡ表达与临床病理分期有密切关系,在BLBC组中肿瘤组织学分级越高,TopoⅡ蛋白表达越强(P＜0.05);非BLBC组中TopoⅡ在Ⅱ级中阳性表达率最高.进一步进行Spearman等级相关分析,r=0.346,P=0.004,说明两种蛋白表达存在显著正相关性.结论 Ki67蛋白在BLBC组、非BLBC组中的表达与组织学分级存在密切关系.TopoⅡ蛋白在BLBC组、非BLBC组中的表达与组织学分级、TNM分期存在密切关系.Ki67与TopoⅡ蛋白在BLBC组中表达显著高于非BLBC组.BLBC组中的Ki67与TopoⅡ蛋白表达存在着显著的正相关性.     

Ki67和p63蛋白表达与舌鳞状细胞癌的相关性

目的探讨舌鳞状细胞癌(SCC)组织中Ki67和p63蛋白表达与其临床特征的相关性。方法采用免疫组化方法检测60例原发性舌SCC组织Ki67和p63蛋白的表达,分析其与舌SCC临床特征的关系。结果在舌SCC组织中,p63总阳性率明显高于Ki67总阳性率(P<0.05)。Ki67表达率随组织分化程度的降低而增高(P<0.05);Ki67在舌SCCⅠ、Ⅱ期的表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.05);有局部淋巴结转移者的Ki67表达明显高于无局部淋巴结转移病例(P<0.05)。p63蛋白表达与其临床病理特征无明显相关性(P>0.05)。结论 Ki67表达与舌SCC预后密切相关。     

RNA干扰对5637膀胱癌细胞生存素基因表达的影响

目的 研究RNA干扰（RNAi）对膀胱癌5637细胞生存素（survivin）基因表达的干扰效应。方法 化学合成生存素序列特异性双链RNA（dsRNA）,用Lipofectamine 2000转染5637细胞,采用荧光定量PCR检测生存素基因的表达,用流式细胞仪检测Annexinv标记的凋亡细胞。结果 序列特异性dsRNA-生存素可显著抑制生存素基因在转录水平上的表达,和阴性对照组相比,浓度为40nmol／L的dsRNA-生存素在转染5637细胞24、48h后生存素mRNA表达的抑制率分别为29％和53％,浓度为100nmol／L时抑制率为46％和86％。生存素基因表达的抑制与5637细胞的凋亡呈正相关。结论 转染dsRNA-生存素可明显抑制膀胱癌5637细胞株生存素基因的表达,并伴有细胞凋亡。     

乳腺癌组织中Ki67的表达及临床意义

目的通过检测乳腺癌组织中Ki67的表达水平,探讨Ki67与各临床病理指标之间的关系及临床意义。方法收集河北医科大学第四医院乳腺外科原发性乳腺癌患者术后标本2390例,对Ki67与临床病理因素进行相关性分析。结果 Ki67与绝经情况无相关(P>0.05);与年龄、肿瘤大小、病理分期、病理类型、脉管瘤栓、组织分级、淋巴结转移、ER、PR、HER-2、Ki67、p53均有相关性(P<0.05)。结论 Ki67阳性表达可以作为判断乳腺癌生物学行为的重要指标。     

基因沉默的维持——长效RNA干扰

自揭示了哺乳动物细胞中的RNA干扰（RNAi）现象以来,对其进行了大量的研究与资金投入,期望将其发展成一种切实可行的治疗手段。毫无疑问,RNAi是最具发展潜力的基因治疗策略。由于许多采用RNAi治疗的疾病需要长期用药,因此,有关RNAi类药物长期应用的安全性问题成为关注重点。     

FHIT、MLH1及Ki67与宫颈癌的关系

目的：探讨FHIT、MLH1及Ki67在宫颈鳞癌发生、发展中的作用和意义,以及三者之间的关系。方法：应用免疫组化方法检测50例宫颈癌和20例正常宫颈组织中FHIT,Ki67和MLH1蛋白的表达。结果：MLH1蛋白的表达随病理分级的升高而降低（P〈0．05）,与年龄、临床分期、组织学类型、淋巴结转移无明显相关性。FHIT蛋白的表达与MLH1的表达成正相关（rs=0．340,P〉0．05）,与Ki67的表达成负相关（rs=-0．292,P〈0．05）。结论：FHIL、MLH1及Ki67在宫颈鳞癌中的表达可作为预后指标;三者有协同作用,共同检测有助于预测宫颈癌的侵袭、转移、预后。     

p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学法检测10例正常脑组织及208例人脑胶质瘤组织中p53和Ki67的表达。结果p53和Ki67在正常脑组织中均无表达。p53在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为52．8％和74．1％,Ki67在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为17．8％和67．1％。p53在Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=22．004,P=0．000;x^2=9．610,P=0．002）。p53在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织中的表达（x^2=10．336,P=0．001）。Ki67在Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=16．765,P=0．000;x^2=51．596,P=0．000）。而Ki67在正常脑组织中及Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤组织中的表达差异无统计学意义（x^2=2．143,P=0．143）。结论p53和Ki67在脑胶质瘤的发生中可能起重要作用,二者与胶质瘤的恶性程度相关。     

Ki67、CyclinD1在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的探讨Ki67、CyclinD1在食管鳞状细胞癌中的表达意义及与食管鳞癌发生发展之间的关系。方法应用流式细胞术方法（flowcytometry,FCM）检测60例食管鳞状细胞癌及食管正常组织中Ki67、CyclinD1蛋白的表达情况,并检测食管癌组织中Ki67、CyclinD1蛋白表达与不同临床参数之间的关系。FCM方法检测食管癌组织中Ki67与CyclinD1蛋白表达的相关性。结果流式细胞术方法检测到食管癌组织中Ki67、CyclinD1蛋白表达水平显著高于正常食管组织（P〈0.05）。食管癌组织中Ki67、CyclinD1蛋白表达水平与食管鳞癌细胞分化程度、有无淋巴结转移、癌浸润深度有关（P〈0.05）,与患者的性别及年龄无关（P〉0.05）。食管癌组织中Ki67与CyclinD1蛋白表达呈正相关性。结论 Ki67、CyclinD1蛋白在食管癌组织中的高表达可能参与了食管癌的发生与发展,其高表达使细胞具有旺盛增殖能力,促进肿瘤发生。联合检测Ki67、CyclinD1可作为食管癌诊断指标。     

VEGF、Ki67的表达与宫颈癌浸润、淋巴结转移关系的探讨

目的:探讨宫颈癌组织中VEGF、Ki67的表达与肿瘤浸润性及淋巴结转移的关系.方法:收集45例手术切除或活检标本,包括正常宫颈组织,宫颈鳞癌组织(按有无淋巴转移、分化及临床分期分组).进行SP免疫组化染色测定VEGF蛋白、Ki67蛋白的表达.结果:正常宫颈组织VEGF蛋白不表达,宫颈癌组织中VEGF的表达率为48.57%.VEGF阳性表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移呈正相关(χ2＝10.3001,P＜0.01;Z.一10.1521,P＜0.0t;χ2＝5.9063,P＜0.05).Ki67阳性表达与临床分期、分化程度无正相关,与淋巴结转移呈正相关(χ2=2.6662,P＞0.05;χ2=0.8649,P＞0.05;χ2=11.9442,P＜0.01).结论:VEGF可能在宫颈癌的发生发展和袭转移中起重要作用,有望成为判断宫颈癌预后的指标.Ki67可作为反映宫颈癌细胞增殖能力的指标.     

P53、Ki67在宫颈癌中表达及意义的探讨(附83例分析)

目的 探讨P53、Ki67在宫颈癌中的表达及临床意义.方法 应用免疫组化S-P法对83例宫颈癌组织进行P53和Ki67的检测,并通过统计学方法分析其与临床病理因素间的关系.结果 P53和Ki67在宫颈癌组织中阳性表达率分别为61.45％、75.90％,两者的阳性表达呈正相关关系(r=0.23,P＜0.05); P53、...     

p53和Ki67在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨p53蛋白、Ki67在慢性胃炎和胃癌中的表达及意义。方法采用免疫组化法分别对58例胃癌,20例胃炎,进行了p53蛋白和Ki67的检测。结果①胃癌组织中p53蛋白、Ki67的阳性表达率分别为31.03%(18/58)、70.69%(41/58),均显著高于胃炎组织,差异均有统计学意义(P=0.042,P=0.005)。②在胃癌组织中p53蛋白的阳性表达与胃癌的临床分期、浸润深度、和淋巴结转移有关(P<0.05),与组织学分化程度无关(P>0.05);胃癌中Ki67的表达阳性率与胃癌的临床分期和浸润深度有关(P<0.05),与组织学分化程度和淋巴结转移无关(P>0.05)。③p53蛋白和Ki67共同阳性者14例,共同阴性者14例,相关性分析显示,二者之间呈正相关(r=0.372,P=0.004)。结论 p53蛋白和Ki67在胃癌中的表达明显升高,可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要参考指标。     

高危型人乳头瘤病毒DNA与E-钙黏素Ki67在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)和浸润性鳞状细胞癌(ISCC)中高危型人乳头瘤病毒(HPV)16/18、31/33DNA及E-钙黏素和Ki67蛋白的表达,并分析它们与宫颈鳞癌临床病理特征的关系,进而探讨它们在宫颈鳞癌发生发展过程中的作用,为临床早期诊断及可能的基因治疗提供理论依据。方法将73例ISCC,30例HSIL,32例LSIL和21例正常宫颈鳞状上皮(NCE)制成组织芯片,原位杂交法检测HPV16/18、31/33DNA,免疫组织化学PV-9000二步法检测E-钙黏素和Ki67蛋白在其中的表达。结果(1)HPV16/18、31/33DNA的表达在4组间差异有统计学意义(P<0.01),HPV16/18DNA阳性者更容易发生脉管内瘤栓(OR=3.875),HPV31/33DNA阳性者临床期别更容易进展(OR=3.5)。(2)E-钙黏素和Ki67在4组间差异有统计学意义(P<0.01);随着E-钙黏素异常表达阳性率的升高,临床期别增高(P=0.046)。(3)随着年龄增大临床期别增高(OR=1.063)。结论HPV16/18、31/33的感染与宫颈鳞癌的发生密切相关,并与进展有关;E-钙黏素和Ki67可作为宫颈病变诊断的客观参考指标。     

乳腺癌中Ki67、Her-2和nm23的表达及其临床意义

目的研究Ki67、Her-2和nm23蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨其临床意义。方法应用免疫组化方法检测104例乳腺癌组织中Ki67、Her-2和nm23蛋白的表达水平。结果 Ki67、Her-2和nm23蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移均密切相关。结论联合检测Ki67、Her-2和nm23蛋白表达是衡量乳腺癌预后的重要指标。     

HIF-1、Bax、Ki67在卵巢上皮性肿瘤的表达及其相关性的研究

目的探讨HIF-1（缺氧诱导因子）、Bax（细胞凋亡相关因子）、Ki67（细胞增殖因子）在卵巢上皮性肿瘤的表达状况及其相关性,研究其在肿瘤发生发展中的作用和关系,为卵巢癌的治疗提出新的思路。方法采用免疫组织化学法分析107例卵巢上皮性肿瘤HIF-1、Bax、Ki67的表达状况及三者间的相关性。结果 HIF-1、Bax、Ki67在卵巢癌中的表达明显高于其他三组（P〈0.05）;HIF-1增高程度与临床分期、组织学分型无关（P〉0.05）,而与肿瘤的组织学分级呈正相关（P〈0.05）;Bax蛋白的表达与组织学分型、手术病理分期及分级均无关（P〉0.05）;Ki67阳性率在交界瘤和癌中的表达显著高于良性肿瘤（P〈0.01）,与肿瘤的分期及分级呈正相关,与组织学分型无关。Bax与HIF-1、Ki67在卵巢癌组织的表达分别呈负相关（r=-0.352,P=0.012;r=-0.354,P=0.012）,HIF-1与Ki67表达呈正相关（r=0.382,P=0.006）。结论 HIF-1、Bax、Ki67在上皮性卵巢癌组织上高表达并具有相关性,在其发生、分化、进展过程中起重要作用,有望成为治疗卵巢癌的新靶点。