七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞增殖凋亡的影响

目的:观察中药复方七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞(AGS)增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度的七方胃痛颗粒药物血清处理AGS后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)、三叶因子1(TFF1)的表达。结果:不同浓度药物血清组AGS增殖抑制率显著高于对照组(P<0.05),并呈浓度、时间依赖性;七方胃痛颗粒使AGS停滞在G0/G1期,细胞凋亡率增加(P<0.05)。七方胃痛颗粒药物血清处理后PCNA表达显著下调,TFF1表达显著上调(P<0.05)。结论:七方胃痛颗粒能抑制AGS的增殖,促进凋亡,其作用机制可能与上调TFF1的表达有关。     

健脾疏肝活血化瘀法对人肝癌细胞裸鼠复种移植瘤的抑制作用观察

目的 :探讨健脾疏肝活血化瘀药物对人肝癌细胞复种移植瘤在裸鼠体内的抑瘤作用。方法 :建立肝癌(HepG2)小鼠模型 ,观察不同组方的健脾疏肝活血化瘀药物对其肿瘤的影响。结果 :Ⅳ号方 (黄芪、柴胡、莪术等 )与Ⅰ号方 (黄芪 )、Ⅱ号方 (柴胡 )、Ⅲ号方 (莪术 )相比,其肿瘤体积和体重以及抑瘤率的治疗后、治疗前后差值 ,均有显著性差异 ,P均<0.05。Ⅴ号方 (蒸馏水 )与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号方治疗后、治疗前后差值比较 ,亦有显著性差异。结论 :健脾疏肝活血化瘀药物有明显的抑瘤作用 ,且健脾疏肝活血化瘀法明显优于益气健脾法、疏肝理气法和活血化瘀法 ;从而 ,从治疗角度进一步反证了肝郁脾虚、瘀血内阻是原发性肝癌的主要病机     

六味地黄方药物血清对血管内皮细胞胞内Ca2+的影响

目的：探讨六味地黄方药物血清保护血管内皮细胞的分子机制。方法：取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，用脂多糖(LPS)造成凋亡细胞模型，通过激光共聚焦显微镜观察六味地黄方药物血清对胞内Ca^2 的影响。结果：六味地黄方药物血清可明显缓解其所致的钙超载。结论：六味地黄方药物血清有抗HUVEC凋亡作用，其防治血栓性疾病的机理可能与其缓解细胞钙超载有关。     

桂枝汤用药规律文献研究

目的总结古今医案中桂枝汤的用药规律。方法收集明确使用桂枝汤的医案,对纳入医案的药味和药量信息进行规范化处理并建立数据库。采用描述性统计方法对桂枝汤原方药物、加味药物及类别、常用加味药物及剂量、合方情况进行频次分析,对桂枝汤原方用量的均值、极小值、极大值、众数进行统计,并采用关联规则对加味药物与主症进行关联分析。结果共纳入医案1035则。桂枝汤方的临床常用剂量为桂枝10 g,白芍10 g(或赤芍15 g),生姜10 g或3片(或干姜6 g,炮姜3 g),大枣10 g或5枚,甘草6 g。加味药物共计229味,2481味次,出现频次最高的前5位药物为黄芪(181)、当归(144)、防风(141)、白术(137)、党参(128);其涉及药物类别在前5位者为补虚药(743)、解表药(399)、清热药(181)、活血化瘀药(155)、安神药(146)。合方方剂共47首,90频次,合方频次在2次以上者有玉屏风散(29)、当归补血汤(5)、生脉饮(4)、四物汤(3)、麻黄附子细辛汤(3)。结论桂枝汤临床用量与原方所载无明显差异,其加味药物以补虚药最多,方中生姜、大枣、甘草是重要组成药味,不可随意删减。     

齐教授信箱

如何对待《伤寒论》方剂的药量《伤寒论》方剂堪称中医方剂之祖。一方面,伤寒方之疗效经得起千百年临床的检验,用之不衰;另一方面,伤寒方示后业以组方之法度,被效法不止。论中一百一十三方(一方缺)不仅有药物组成,而且每味药皆示用量。对伤寒方,熟记其药味组成外,是否要注意其药量?此为习伤寒方者必面临的问题,对此从两方面加以认识。(一)药物的绝对量方剂中每味药的具体用量称绝对量。对伤寒方中药物的绝对量应注意二个问题:1.计量单位。《伤寒论》以斤、两、株;方寸匕、钱匕;升、合;尺;枚、个等为单位。此为汉     

扶正抗癌方对人肝癌细胞分化的影响

目的:寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂,探讨扶正抗癌方对人肝癌细胞诱导分化作用及机制。方法:用扶正抗癌方灌胃,分离大鼠血清,作用于体外培养细胞。通过噻唑蓝法、双抗体放射免疫法和酶联免疫吸附法检测,观察扶正抗癌方药物血清对人肝癌细胞SMMC_(7721)分化的影响。结果:扶正抗癌方药物血清处理后,SMMC_(7721)细胞活力明显减弱,细胞内 cAMP 明显升高,细胞分泌白蛋白量增多,分泌甲脂蛋白减少。结论:扶正抗癌方对人肝癌细胞 SMMC_(7721)具有诱导分化作用。其机理可能与升高细胞内 cAMP 有关。     

活血化痰方对高脂血症大鼠血脂代谢的影响

目的观察活血化痰方的降脂效果并探索其降脂的分子机制。方法 SD大鼠36只(180~200 g)据体质量和随机数字表完全随机区组分组,分为6组(n=6):空白组、模型组、可定组、活血化痰方低剂量组、活血化痰方等效剂量组、活血化痰方+可定组。空白组予基础饲料,其余各组均予高脂饲料。造模的同时各药物组按人-动物药物剂量换算表分别给予相应药物灌胃。8周后,观测各组大鼠体质量的变化;生化法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平;ELISA法检测大鼠血清前蛋白枯草酶溶菌素9(PCSK9)、血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、胆固醇酯转移蛋白(CETP)、肝脂酶(HL)的水平及HE染色观察肝脏的病理变化。结果 1)体质量:各组别大鼠体质量差异无统计学意义(P0.05)。2)血脂:与空白组比较,模型组大鼠血清的TC、TAG、LDL-C水平显著上升(P0.05);与模型组比较,各药物组大鼠血清的TAG、LDL-C水平均下降(P0.05);与模型组比较,可定组与活血化痰方+可定组的TC显著下降(P0.05)。3)关键靶酶:与模型组比较,活血化痰方低剂量组、活血化痰方等效剂量组、活血化痰方+可定组的PCSK9水平均下降(P0.05),活血化痰方等效剂量组的HL有升高的趋势。4)肝脏的病理变化:与模型组比较,各药物组肝小叶和肝细胞索的结构较清晰,肝细胞内脂质沉积和肝脏脂肪变性程度明显减轻;可定组出现明显的肝细胞肿胀现象。结论活血化痰方可有效降低高脂血症SD大鼠血清TAG、LDL-C水平,其机制可能与其调节血清PCSK9水平、升高血清HL水平有关,同时活血化痰方能够显著改善高脂血症大鼠肝脏的脂质沉积。     

消痰化瘀抗纤方药物血清对肝星状细胞增殖及胶原降解基因表达的影响

目的:观察消痰化瘀抗纤方(简称抗纤方)药物血清对肝星状细胞(HSC)增殖,Ⅰ型胶原含量及相关基因表达水平的影响,探讨该方抗肝纤维化的细胞分子学机制。方法:正常大鼠血清和药物血清干预HSC-T6细胞24h,MTT法检测抗纤方药物血清对HSC增殖,ELISA法测定细胞上清液Ⅰ型胶原含量变化,RT-PCR法检测细胞中金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的mRNA表达量。结果:抗纤方高(13.5倍)、中(4.5倍)、低(1.5倍)剂量组药物血清能明显抑制HSC增殖(P<0.05),且增殖抑制率与剂量呈正相关;对上清液中Ⅰ型胶原含量影响,随药物剂量增加明显降低(P<0.05);能明显抑制TIMP-1mRNA表达(P<0.05),促进MMP-1mRNA表达(P<0.05)。结论:抗纤方药物血清能抑制HSC增殖,减少Ⅰ型胶原含量,抑制TIMP-1表达,促进MMP-1表达,具有抗肝纤维化作用。     

蒿鳖养阴软坚方药物血清对肝星状细胞的作用

目的:探讨蒿鳖养阴软坚方药物血清对肝星状细胞(HSC-T6)的作用。方法:MTT法分析不同剂量的蒿鳖养阴软坚方药物血清对HSC增殖的影响,并测定培养上清中Hyp含量和LDH活力,流式细胞仪检测其对HSC细胞周期的影响。结果:与正常血清组比较,蒿鳖养阴软坚方(0.82 g/kg、2.59 g/kg、8.2 g/kg)药物血清组吸光度(A)值显著降低,抑制率分别为11.26%、30.24%、44.51%;G0/G1期细胞比例增多而S期细胞比例减少;Hyp生成减少,LDH略微升高。结论:蒿鳖养阴软坚方药物血清可能通过阻抑HSC于G0/G1关卡而抑制HSC-T6增殖,同时抑制了胶原蛋白产生,且无细胞毒作用。     

补肾调肝敛乳Ⅱ方治疗高泌乳素血症50例临床观察

补肾调肝敛乳方系治疗高泌乳素血症(Hyperprolactinemia,HPRL)的有效验方,其临床与动物实验研究结果表明,该方对于HPRL有着良好的治疗效果。在原方12味药物的基础上,进行了精简化裁,保留了其中6味药物,命名为补肾调肝敛乳2号方(简称调补2号方),并以溴隐亭为对照,对该方的疗效进行了观察,报告如下。     

运脾柔肝方治疗便秘型肠易激综合征作用机制的理论探讨

便秘型肠易激证(C-IBS)是消化科常见病、多发病之一,现代医学对其尚缺乏特异性的治疗方法和药物,中医药的治疗优势则逐渐显现,运脾柔肝方治疗C-IBS临床疗效显著。文章从中医学对C-IBS的认识、运脾柔肝方的方药组成及意义、组分药物的现代药理研究等角度进行分析,认为该方对C-IBS发挥作用与其中医传统功效理论及组分药物的药理作用密切相关。     

七方胃痛颗粒对人结肠癌耐药细胞株Caco-2增殖与凋亡的影响

目的研究七方胃痛颗粒对人结肠癌耐药细胞株Caco-2增殖与凋亡的影响。方法采用不同浓度的七方胃痛颗粒(药物组成为红参、黄芪、茯苓、白术、炙甘草、丹参、木香、黄连、吴茱萸、白芍、枳实、炒鸡内金)药物血清干预人结肠癌耐药细胞株Caco-2,运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度的七方胃痛颗粒药物血清对Caco-2增殖抑制的影响,流式细胞术(FCM)法检测药物血清对Caco-2细胞凋亡的作用及其在不同浓度下对Caco-2细胞凋亡的干预强度。结果七方胃痛颗粒药物血清对抑制细胞株Caco-2细胞增殖的作用呈时间-浓度依赖性,时间越长、药物浓度越高,抑制作用越强;而其对Caco-2细胞的凋亡作用随药物血清浓度增加而升高。结论七方胃痛颗粒药物血清能够有效抑制人结肠癌耐药细胞株Caco-2增殖及诱导细胞凋亡。     

脉健方药物血清抑制家兔动脉平滑肌细胞增殖的实验研究

目的:观察脉健方药物血清对动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法:采用组织酶离法分离培养家兔胸主动脉平滑肌细胞(ASMC)。实验分为不同浓度的脉健方药物血清组和正常血清组,观察血清对ASMC 生长分裂、噻唑蓝(MTT)降解和 DNA 合成的影响。结果:不同浓度的脉健方药物血清均能抑制ASMC 的生长分裂、MTT 降解和 DNA 合成,且呈浓度依赖性。结论:脉健方能抑制 ASMC 的增殖,这可能是其抗肢体动脉硬化闭塞的作用机理之一。     

消痰散结方对胃癌细胞系P16基因甲基化的影响

目的 研究消痰散结方含药血清对胃癌细胞系基因甲基化的影响,探讨该方抗癌作用机制.方法 培养胃癌细胞系MKN45、BGC823,制备消痰散结方药物血清.细胞分为空白对照组、空白血清组(无药大鼠血清)、药物血清组(消痰散结方药物血清)、5-Aza-CAR组(5-Aza-CAR).CCK-8测定细胞活力,RT-PCR法测定P16基因表达,Methylight法测定基因P16甲基化水平.结果 5-Aza-CAR和消痰散结方含药血清给药后72h后细胞增殖受到明显抑制,在MKN45细胞系中经过5-Aza-CdR和消痰散结方含药血清给药后72h后细胞增殖分别降低为76.14%和83.15%,在BGC823细胞系中经过5-Aza-CdR和消痰散结方含药血清给药后72h后细胞增殖分别降低为76.17%和83.44%,且消痰散结方药物血清组细胞增殖率明显低于5-Aza-CdR组.5-Aza-CAR和消痰散结方药物血清均能逆转P16基因甲基化,增加P16 mRNA表达,与空白对照组比较有统计学差异(P<0.05).结论 消痰散结方可以有效抑制胃癌细胞生长,逆转P16基因甲基化可能是其作用机制之一.     

中药核心系数法对栀子大黄汤类方配伍研究

目的:探讨栀子大黄汤类方的配伍规律,为湿热黄疸治疗方剂提供组方指导。方法:从历代瘟疫方剂数据库中检出栀子大黄汤及类方共20首,采用中药核心系数法对用药频率、性味配伍进行统计分析。结果:(1)栀子大黄汤类方共用药42味,药物按核心系数排在前3位的是栀子、大黄、茵陈。(2)栀子大黄汤类方的寒凉药性的总积分为2.631,温热药性的总积分为0.257,寒温比例约为10:1。且寒凉药物的药性以寒居多,微寒次之,大寒最少,没有凉;温热药物,以温居多,微温与热次之,没有大热。(3)栀子大黄汤类方苦味药最多、辛味药其次、甘味药第三,三类相合占总数的87.2%。药味积分占总数的92.2%。3者的使用频率远远大于酸味药、咸味药、淡味药。结论:(1)栀子、大黄、茵陈是湿热黄疸最基本和常用的药物,佐证了茵陈蒿汤是治疗湿热黄疸的基本方。(2)栀子大黄汤类方药物的药性以寒为主,少量温;药味以苦为主,辅以辛。寒温共用、苦辛结合是栀子大黄汤类方的配伍特点,也是湿热黄疸治疗方剂的性味配伍规律。     

益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响

目的 观察益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌细胞A549增殖及周期的影响.方法 大鼠灌胃制备益气化瘀养阴解毒方药物血清,采用MTT法观察药物血清干预24、48、72h后对细胞增殖的作用(分为空白组及药物血清高、中、低剂量组)采用流式细胞检测分析药物血清干预24h对细胞周期的影响(分为空白组、生长液组及药物血清高、中剂量组).结果 各药物血清组与空白组之间的吸光度差异有统计学意义(P＜0.05),随着作用时间的延长,其吸光度逐渐降低,抑制率逐渐增高(P＜0.05).药物血清组细胞周期G1期增多,G2期及S期减少.结论 益气化瘀养阴解毒方对肺癌细胞具有抑制作用,可能与其抑制细胞分裂有关.     

《伤寒论》113方没有佚一方

根据历代文献记载,《伤寒论》书中有113方,而实际上书中只有112方,所以就说佚一方。例如当代研究《伤寒论》的权威人士北京中医药大学刘渡舟教授主编的《伤寒论诠释》说:“……113方(佚1方)。” 笔者近来再次研读《伤寒论》,书中小柴胡汤前后共出现7次,前6次方中药物组成、剂量均相同:柴胡半斤、黄芩3两、人参3两、半夏半升(洗)、甘草(炙)、生姜各3两(切)、大枣12枚(擘)。唯独第7次即394条之小柴胡汤为:柴胡8两、人参2两、黄芩2两、甘草2两(炙)、生姜2两、半夏半升(洗)、大枣12枚(擘)。此方与前6次方相比较,虽然药物组成相同,但药物用量…     

平糖方药物血清改善INS-1胰腺β细胞脂性凋亡的作用研究

目的观察平糖方药物血清对INS-1胰腺β细胞脂性凋亡的改善作用及机制。方法以软脂酸(palmitic acid,PA)诱导INS-1胰腺β细胞脂性凋亡,采用平糖方药物血清干预。实验分为5组,即大鼠血清对照(RS)组、大鼠血清加PA(PA)组、平糖方低剂量药物血清加PA(PTR L)组、平糖方中剂量药物血清加PA(PTR M)组、平糖方高剂量药物血清加PA(PTR H)组,每组6个复孔。通过TUNEL法检测细胞凋亡,化学发光法检测Caspase-3活性,DCHF-DA掺入法检测细胞内ROS生成的变化,RT-PCR方法检测解偶联蛋白-2(UCP-2)的表达。结果 PA组比RS组的凋亡细胞增多(P0.01),PTR各组的凋亡细胞同PA组比较有降低的趋势。PA组INS-1胰腺β细胞Caspase-3酶活性增强,PTR M组同PA组比较Caspase-3酶活性降低(P0.05)。PTR L、M组可抑制由PA引起的细胞内ROS产生增多,与PA组比较差异有统计学意义(P0.05)。平糖方各组的UCP-2 mRNA表达量均较PA组降低(其中PTR L 1.286±0.373,P0.01;PTRM 1.627±0.348,P0.05)。结论平糖方药物血清对INS-1β细胞脂性凋亡有一定的保护作用,并可能通过调节ROS、UCP-2发挥作用。     

中药辨证干预对非酒精性脂肪性肝病肝细胞色素氧化酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表达的影响

目的探讨中药辨证干预对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝细胞色素氧化酶(cytochrome oxidase,COX)表达的影响机制。方法取SPF级Wistar大鼠40只,按随机数字表分为5组,即:正常组、模型组、对照药物组、药物A方组、药物B方组。采用高脂饲料诱导大鼠制作NAFLD模型,4周后对照药物组、药物A方组、药物B方组每天分别予相应组方中药1 mL/100 g灌胃给药,第12周时,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各实验组肝细胞COXⅡ、COXⅢmRNA表达,Western blot测定肝细胞COXⅠ蛋白表达。结果各组NAFLD大鼠肝细胞COX表达均降低,经过药物干预后,各药物治疗组COX表达有不同程度的升高。与模型组比较,对照药物组、药物B方组COXⅡmRNA表达增高(P0.01);且药物B方组COXⅡmRNA表达高于药物A方组及对照药物组(P0.05)。与模型组比较,对照药物组、药物A方组、药物B方组COXⅠ蛋白表达水平升高(P0.01);且药物B方组COXⅠ蛋白表达高于药物A方组及对照药物组(P0.01)。结论在NAFLD病程的后期阶段,运用化痰消瘀、清热利湿、补益肝肾的中药,可提高大鼠肝细胞COX表达水平,并显著优于其他治疗措施。     

消痰散结方药物血清对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察消痰散结方药物血清对人胃癌MKN-45细胞生长和凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度消痰散结方药物血清处理MKN-45细胞后,倒置相差显微镜下观察MKN-45细胞的形态学变化,血球计数盘计数细胞,细胞活性计数试剂盒检测消痰散结方药物血清对MKN-45细胞增殖的影响;AnnexinV-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双标记法流式细胞术检测消痰散结方药物血清诱导MKN-45细胞后细胞凋亡的情况。结果:低、中、高浓度消痰散结方药物血清均能不同程度地抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖,细胞发生了脱落、变圆、折光率下降等形态学变化;AnnexinV-FITC/PI双标记法检测显示消痰散结方药物血清可诱导细胞发生凋亡,其中中、高剂量的效果有高于低剂量的趋势。结论:消痰散结方药物血清可抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖,促进其凋亡。