氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征ＤＮＡ梯形图谱（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），研究了氧化修饰和低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ｏｘ－ＬＤＬ处理的细胞核发生固缩，染色体ＤＮＡ断裂的的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化的ＬＤＬ（Ｎ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞雕凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征DNA梯形图谱（DNAladder）．研究了氧化修饰低密度脂蛋白（Ox－LDL）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ox－LDL可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ox－LDL处理的细胞核发生固缩，染色体DNA断裂的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化LDL（N－LDL和AC－LDL）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ox－LDL引起的巨噬细胞凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰程度有关，修饰程度越高，引起凋亡越明显．     

扇贝糖胺聚糖对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响

动脉粥样硬化（AS）是缺血性心脑血管疾病的主要病理基础,其形成的确切机制尚未阐明。近年来研究证实氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）通过促进巨噬细胞源性泡沫细胞的形成、诱导调亡、促进血管平滑肌增殖等在AS的形成和发展中发挥着极为重要的作用。因此普遍认为减少体内OX-LDL的生成,能抑制AS的形成和发展。     

胆固醇流出对氧化性低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞凋亡的影响

目的探讨胆固醇流出对氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞凋亡的影响。方法采用高效液相分析法检测细胞内胆固醇含量;用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果用ox-LDL处理RAW264.7细胞48h后,细胞内胆固醇明显增加,同时细胞的凋亡率也随之明显增加;而用胆固醇流出刺激物高密度脂蛋白3和β-环糊精处理细胞后,细胞内胆固醇流出显著增加,细胞内总胆固醇明显减少,细胞凋亡率也下降明显。而用胆固醇流出阻断物BFA后,细胞内胆固醇流出明显下降,高密度脂蛋白对细胞的保护作用被明显的削弱。结论促细胞内胆固醇流出能够抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞的凋亡。     

XBP1在氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡中机制研究

目的探讨X盒结合蛋白1(XBP1)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞凋亡中的机制。方法不同浓度的ox-LDL刺激人巨噬细胞THP-1后,利用Western bolt法检测XBP1表达的变化。ox-LDL刺激THP-1细胞不同时间(6 h、12 h和24 h)后,用Western bolt法检测XBP1表达的变化。利用慢病毒介导的shRNA干扰技术及基因过表达技术,分别构建XBP1基因干扰与过表达的THP-1细胞系后,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹检测干扰或过表达XBP1基因后对ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡的影响。结果用不同浓度ox-LDL处理THP-1细胞,XBP1表达强度随着ox-LDL诱导浓度的增加而增强。用100 mg/L ox-LDL处理THP-1细胞不同的时间,XBP1表达强度出现时间依赖性的增强。用100 mg/L ox-LDL处理THP-1细胞24 h出现细胞凋亡。ox-LDL诱导巨噬细胞,与对照组CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA相比,THP-1细胞干扰XBP1基因表达后,CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA表达水平明显增强(对照组CHOP 31.93±0.21,C-Caspase-3 24.16±1.18;干扰组CHOP 48.30±0.53,C-Caspase-3 39.12±2.75;P<0.01)。ox-LDL诱导巨噬细胞,与对照组CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA相比,当THP-1细胞过表达XBP1基因后,CHOP mRNA和C-Caspase-3 mRNA表达水平明显减少(对照组CHOP 31.53±0.47,C-Caspase-3 22.23±0.63;过表达组:CHOP 14.79±0.51,C-Caspase-3 10.69±0.29;P<0.01)。结论 XBP1在ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡中起保护性作用,并可能成为治疗动脉粥样硬化的新靶点。     

高糖和氧化型低密度脂蛋白对THP-1源性巨噬细胞转化的影响

目的 探讨高糖和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对THP-1源性巨噬细胞转化的影响.方法 体外培养人THP-1单核细胞系,由佛波酯作用使其转化为巨噬细胞,并随机分为四组(n=6):对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、ox-LDL组(100μg/mLox-LDL)和高糖/ox-LDL(G-ox-LDL)组(30 mmol/L葡萄糖+100 μg/mL ox-LDL).应用高效液相色谱法检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量;透射电镜和油红O染色光镜观察细胞内脂质.结果 ox-LDL组和G-ox-LDL组细胞胞质内出现大量的红染颗粒或脂质空泡,总胆固醇和胆固醇酯均较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05);且两组胆固醇酯含量均大于总胆固醇含量的50%.对照组和高糖组细胞胞质内可见少量红染颗粒或脂质空泡,两组细胞内总胆固醇和胆固醇酯比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组胆固醇酯含量均小于总胆固醇含量的50%.结论 ox-LDL能使THP-1源性巨噬细胞转化泡沫细胞,而高糖不能使THP-1源性巨噬细胞转化泡沫细胞.提示ox-LDL可能是THP-1源性巨噬细胞转化为泡沫细胞的必要条件.     

高糖和氧化型低密度脂蛋白对THP-1源性巨噬细胞转化的影响

目的探讨高糖和氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）对THP-1源性巨噬细胞转化的影响。方法体外培养人THP-1单核细胞系,由佛波酯作用使其转化为巨噬细胞,并随机分为四组（n=6）：对照组、高糖组（30mmol／L葡萄糖）、ox—LDL组（100μg／mL ox—LDL）和高糖／ox—LDL（G—ox—LDL）组（30mmol／L葡萄糖＋100μg／mL ox—LDL）。应用高效液相色谱法检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯含量;透射电镜和油红O染色光镜观察细胞内脂质。结果ox—LDL组和G—ox—LDL组细胞胞质内出现大量的红染颗粒或脂质空泡,总胆固醇和胆固醇酯均较对照组增加,差异有统计学意义（P〈0．05）;且两组胆固醇酯含量均大于总胆固醇含量的50％。对照组和高糖组细胞胞质内可见少量红染颗粒或脂质空泡,两组细胞内总胆固醇和胆固醇酯比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组胆固醇酯含量均小于总胆固醇含量的50％。结论ox—LDL能使THP-1源性巨噬细胞转化泡沫细胞,而高糖不能使THP-1源性巨噬细胞转化泡沫细胞。提示ox—LDL可能是THP-1源性巨噬细胞转化为泡沫细胞的必要条件。     

氧化低密度脂蛋白自身免疫与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是一种与脂质代谢异常、血液凝固失调以及与遗传、环境等基础因素有关的血管慢性炎症共同造成的疾病过程。血中修饰低密度脂蛋白浓度升高是动脉粥样硬化发展的重要危险因素，破裂的斑块脂质核心非常丰富，几乎占总的斑块体积的40％左右。现已有多种证据表明体内存在氧化型低密度脂蛋白(oxidized LDL，OX-LDL)及其自身抗体，抗OX-LDL自身抗体不仅为体内确实存在OX—LDL提供了证据，     

氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化研究进展

氧化型低密度脂蛋白是一种重要的致动脉粥样硬化脂蛋白,作为动脉粥样硬化的独立危险因素,在动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有重要的作用。它可诱导血管内皮细胞损伤,诱导单核细胞与内皮细胞的黏附,并在泡沫细胞的形成及影响斑块稳定性方面发挥作用。本文就近年来氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化关系的研究予以综述。     

氧化低密度脂蛋白免疫复合物与细胞因子在冠心病患者外周血中的检测及意义

目的：为探讨OX-LDL引发的免疫反应在动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法：选择93例各种冠心病患者,用ELISA法对其血清中OX-LDL免疫复合物及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性血管细胞间粘附分子-1(sVCAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平进行了测定。结果：冠心病各组患者血清OX-LDL-IC水平均明显高于对照组,表现出随病情严重程度逐渐增加的趋势,IL-18、TNF-α及sVCAM-1浓度明显升高,表现出随OX-LDL-IC水平增高而升高的趋势。结论：OX-LDL-IC及其激活的细胞因子通过复杂的免疫调控网络改变了OX-LDL原来的作用范围和作用方式,参与动脉粥样硬化的发展过程。     

二甲双胍体外抑制低密度脂蛋白氧化的实验研究

目的氧化型低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生的重要危险因素之一。文中旨在探讨二甲双胍(Metformine)对人LDL体外氧化修饰的影响。方法共分为6组(每组6份样品):LDL组;LDL+Cu2+组;LDL+Cu2++二甲双胍组,将加入不同剂量的二甲双胍又分为10μmol/L组;20μmol/L组;50μmol/L组和200μmol/L组。通过体外实验,观察二甲双胍对Cu2+介导LDL氧化后,硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)含量和电泳迁移率(relative electrophoretic mobility,REM)的变化,分析二甲双胍对LDL脂质过氧化程度的影响。结果 LDL在体外铜离子介导下,24 h后其TBARS含量和相对REM增大,表明铜离子可诱导LDL发生氧化修饰。当加入二甲双胍后,氧化LDL的TBARS含量和相对REM较对照组低,2组相比,P<0.05。不同浓度二甲双胍作用24 h,随二甲双胍浓度增加,其氧化LDL的TBARS含量和相对REM变小,抑制加强,二甲双胍降低LDL的TBARS值以及减慢LDL的REM呈剂量依赖性。结论铜离子在体外能介导LDL氧化,二甲双胍能抑制铜离子介导的LDL氧化,能有效地降低LDL的脂质过氧化程度,具有一定的抗脂质氧化功能。     

Very low and intermediate density lipoprotein fractions from apolipoprotein E gene-knockout mice induce cholesteryl ester accumulation in J774 macrophages

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃｒｏｌｅｏｆｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＶＬＤＬ）ａｎｄｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＩＤＬ）ｆｒａｃｔｉｏｎｉｓｏｌａｔ...     

50例高血压患者低密度脂蛋白与血压变异性的关系

目的:探讨低密度脂蛋白与高血压患者血压变异性的关系.方法:选择50例原发性高血压(EH)患者,分为低密度脂蛋白升高(LDL>3.12 mmol/1)和LDI正常(LDL≤3.12 mmol/1)两组.采用无创性袖带式血压监测仪行24 h动态血压监测.以24 h血压及血压变异性(BPV)为监测指标.结果:两组的24小时血...     

植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体介导氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞存活和功能的影响

目的 研究植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体（LOX—1）是否介导氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）对内皮祖细胞（EPC）的存活及功能产生影响。方法 分选脐血CD34^＋细胞,培养于内皮细胞生长培养基（EGM-2）中。培养14d后,部分EPC与10、25、50μg/ml的oxLDL孵育48h;部分EPC先与LOX-1单克隆抗体（LOX—1mAb）预处理24h,再与50μg／ml oxLDL孵育48h;对照组不作处理。检测EPC存活率及EPC迁移、黏附和管状结构形成能力,并检测LOX-1的蛋白及mRNA表达。结果oxLDL浓度为25和50μg／ml时,凋亡率分别为（15．8±1．0）％和（18．8±2．0）％,显著高于对照组的（9．0±1．2）％（P〈0．05）;迁移率分别为（5．7±1．0）％和（5．1±0．8）％,显著低于对照组的（9．5±0．8）％,（P〈0．05）;黏附细胞数分别为（33±2）和（30±3）个,显著少于对照组的（37±5）个（P〈0．05）;形成的管状结构分别为（2．9±0．5）和（1．8±0．5）mm,显著短于对照组的（5．0±0．6）mm（P〈0．05）。OxLDL可增加LOX—1mRNA及蛋白的表达,oxLDL浓度为50μg／ml时,LOX—1mRNA表达由100％增加为（174±39）％,蛋白表达由100％增加为（172±8）％。OxLDL的上述作用能被LOX1mAb所阻断。结论OxLDL可降低EPC存活,抑制EPC功能,其作用是由LOX—1介导的。     

氧化低密度脂蛋白干预记忆性CD8+T细胞亚群的分化

目的 探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对CD8+记忆性T细胞亚群分化的影响及其机制.方法 将雌性10周龄未发生糖尿病NOD小鼠随机分为2组(n=5):ox-LDL组及对照组.断颈处死各组小鼠磁珠分离脾脏CD8+T细胞体外培养(IL-2),ox-LDL组加入ox-LDL 30μg/mL体外刺激24 h,ox-LDL未处理组作为对照组.24 h后分离细胞.体外实验利用流式细胞仪检测各组以下指标:胞内CD8+IFN-γ+确定胰岛β细胞特异性杀伤性CD8+T细胞的比例;细胞表面分子CD8、CD44、CD62L确定CD8+记忆性T细胞的不同亚群分化;T细胞相关转录因子TCF-1及STAT-3的活化确定关键性转录因子的作用.体内实验中,将各组CD8+记忆性T细胞通过尾静脉注射的方法移植给未发病NOD小鼠,同时设立未移植的模型对照组,每5 d检测血糖1次,监测小鼠的血糖改变及生存率.结果 相比对照组,ox-LDL(30μg/mL)作用24 h后,胰岛β细胞特异性杀伤性CD8+T细胞活化减少[(0.7±0.03)%vs(2.7±0.14)%,P<0.01],记忆性T细胞中的效应记忆性T细胞形成数目减少[(10.3±0.71)%vs(30.3±1.36)%,P<0.01],干细胞样记忆性T细胞增加[(72.3±3.8)%vs(55.1±2.61)%,P<0.05].T细胞转录因子TCF-1及p-STAT-3活化的也受到抑制[TCF-1:(14.5±0.82)%vs(34.2±1.23)%,磷酸化STAT-3:(3.3±0.12)%vs(22.1±1.1)%,P<0.01].T细胞移植给未发病NOD小鼠后,ox-LDL处理组小鼠血糖升高明显低于对照组(P<0.05),且生存率提高(P<0.05).结论 ox-LDL干扰记忆性CD8+T细胞核转录因子TCF-1活化及STAT-3的磷酸化,抑制长效杀伤作用的效应性和记忆性CD8+T细胞形成,诱导干细胞样记忆性CD8+T细胞形成,从而阻止胰岛β细胞自身免疫损伤及□型糖尿病的发生.     

冠心病患者血浆D-二聚体与低密度脂蛋白水平的相关性探讨

目的：探讨冠心病患者血浆D-二聚体(D-dimer,D-D)与低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)水平之间的关系。方法经心血管造影确诊的冠心病患者150例,平均年龄(63.40±5.70)岁;体检者150例,平均年龄(47.40±7.60)岁;健康志愿者30例,平均年龄(20.30±3.50)岁。SIEMENS ADVIA-2400全自动生化分析仪测定LDL水平,>3.12 mmol/L为阳性;SYSMEX CA7000血凝仪测定D-D水平,>0.6 mg/L为阳性。结果 LDL与D-D水平呈正相关(r=0.237,P<0.05);冠心病组与体检组和健康对照组相比,LDL水平明显升高,差异均具有显著统计学意义(P<0.01);D-D水平同时明显升高(P<0.05)。冠心病患者中LDL水平的阳性率为75.3%;而D-D水平的阳性率为97.3%。体检组中LDL水平的阳性率为18%;LDL阳性体检者中D-D水平的阳性率为48.1%;LDL阴性体检者中D-D水平的阳性率为1.63%。结论 D-D的检测可以提高LDL水平对冠心病预测的准确性。     

脂蛋白（a）与巨噬细胞内脂质聚积关系的研究

目的：泡沫细胞形成是早期动脉粥样斑块的典型特征。本文通过对脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]与巨噬细胞的相互作用进行研究，探讨Lp(a)与泡沫细胞形成的关系。方法：经生物素—亲和素—酶联法到定不同浓度生物素标记的天然及氧化型Lp(a)与小鼠腹腔巨噬细胞表面的结合量。天然及氧化型Lp(a)与小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育后，酶法测定细胞内胆固醇及胆固醇酯含量的变化。结果：天然的Lp(a)能以一定的亲合力、可饱和的与巨噬细胞表面结合，氧化修饰后Lp(a)与巨噬细胞的结合量显著增加。天然及氧化型Lp(a)均能引起巨噬细胞的过量摄取，导致细胞内胆固醇含量增加，其中以氧化型Lp(a)的作用更为显著。与氧化型Lp(a)孵育后，巨噬细胞内胆固醇含量的增加是与天然Lp(a)孵育后的2．5倍，而胆固醇酯的含量增加是与天然Lp(a)孵育后的6．1倍。结论：Lp(a)能与巨噬细胞表面特异性结合，并促使细胞对其吞噬、降解；且巨噬细胞对氧化型Lp(a)的结合、摄取量显著增加。     

高脂饮食对氧化修饰低密度脂蛋白和巨噬细胞集落刺激因子影响的实验研究

目的：探讨高脂饮食引起动脉粥样硬化的机理。方法：采用高脂饮食喂养小鼠，用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中OX－LDL含量；用RT－PCR法检测小鼠腹腔M－CSF mRNA的表达。结果：高脂刺激动物体内OX－LDL含量增加和M－CSF mRNA的表达的增强。结论：高脂刺激动物体内OX－LDL、M－CSF含量的升高，加速动脉粥样硬化的形成。