拉米夫定治疗中乙肝病毒聚合酶YMDD变异的早期预测因子研究

目的：建立HBV多聚酶YMDD变异的快速检测方法，并藉此进行临床流行病学研究，以了解应用拉米夫定治疗乙肝过程中YMDD变异的发生率及其早期预测因子。方法：收集91例应用拉米夫定治疗的慢性HBV感染者临床资料及系列血清。应用mpPCR-RFLP技术检测治疗过程中HBV DNA复现患者的YMDD变异情况，并采用SPSS软件进行统计学分析。结果：检出YMDD变异35例（38．5％），其累计发生率在治疗12和18个月时分别为20．48％、53．46％。拉米夫定治疗前诊断为肝硬变者YMDD变异出现较早（P=0.0279)，在慢性肝炎中HBeAg阳性者YMDD出现较早（P=0.0296)。Cox比例风险模型显示：肝硬变（P=0.0092)和HBeAg阳性（P=0.0778)与YMDD变异有关。结论：慢性肝炎中HBeAg阳性和肝炎肝硬变可作为拉米夫定治疗过程中YMDD变异的早期预测因子。     

拉米夫定治疗中乙肝病毒多聚酶YMDD变异对患者临床经过的影响

研究乙肝病毒(HBV)多聚酶YMDD变异后HBVDNA复现对慢性HBV感染患者临床经过的影响。方法用mpPCR-RFLP技术检测24例拉米夫定治疗过程中出现HBVDNA复现的患者血清,对YMDD变异者的系列临床资料,应用SAS软件进行统计学分析。结果检出YMDD变异18例;YMDD变异后转氨酶水平较HBVDNA转阴时有显著升高,并反跳至治疗前水平。结论出现YMDD变异后,部分病例可有类似肝炎发作、甚至肝脏失代偿的表现。     

乙型肝炎病毒聚合酶变异在耐拉米夫定患者中的临床意义

拉米夫定是目前应用较广的核苷类似抗病毒药物 ,能有效地抑制乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)的复制。目前在国内主要用于慢性乙型肝炎患者抗ＨＢＶ治疗。在治疗过程中 ,ＨＢＶ可发生聚合酶的变异而产生对拉米夫定的耐药。为了研究ＨＢＶ聚合酶变异的分布及临床意义 ,笔者观察了在拉米夫定抗ＨＢＶ治疗中发生耐拉米夫定者的ＨＢＶＹＭＤＤ变异发生情况及变异后临床表现。１．１病例选择系１９９９年１０月～２００１年１０月浙江大学医学院附属第一医院和附属邵逸夫医院用拉米夫定１００ｍｇ／ｄ治疗的ＨＢＶ感染者６２例 ,男性４８例 ,女性１４例 ;…     

拉米夫定治疗中乙型肝炎病毒YMDD变异的研究

目的观察拉米夫定治疗慢性乙型盱炎后乙型肝炎病毒YMDD基序变异的情况。方法105例慢性乙型肝炎患者随机分成两组，一组68例为治疗组给予拉米夫定；另一组37例为对照组，给予除拉米夫定外的其他治疗。治疗1年后对患者乙型肝炎病毒多聚酶基因YMDD基序进行定性检测，观察突变情况。结果拉米夫定治疗组：用药1年后有12例发生YMDD突变，其中YVDD变异有8例，YIDD变异4例，变异株中有9例伴血清ALT、HBV-DNA水平回升；对照组无变异株产生。结论拉米夫定可诱导乙型肝炎病毒YMDD基序发生变异，导致耐药株的产生。     

拉米夫定治疗前与治疗期间乙肝病毒YMDD变异研究

目的研究慢性乙型肝炎患者应用拉米夫定治疗前与治疗一年期间的乙肝病毒YMDD变异情况。方法103例接受拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者,在开始治疗前和治疗第1、4、8个月以及1年时采集患者外周血,提取乙型肝炎病毒DNA,采用单核苷酸多态性分析方法,进行短核苷酸片段测序分析。结果乙型肝炎病毒DNA多聚酶区,使用拉米夫定治疗前,发生YVDD变异者1例,发生YIDD变异者2例;治疗第1月,发生YVDD变异者2例,发生YIDD变异者2例;治疗第4月,发生YVDD变异者3例,发生YIDD变异者4例;治疗第8月,发生YVDD变异者6例,发生YIDD变异者8例;治疗1年时,发生YVDD变异者11例,发生YIDD变异者13例。结论在进行拉米夫定治疗前,乙型肝炎病毒即有变异情况发生,随拉米夫定治疗变异率增加治疗1年时,乙型肝炎病毒发生变异率最高。     

未经拉米夫定治疗而发生乙型肝炎病毒YMDD变异的临床分析

目的探讨未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者乙肝病毒（HBV）的YMDD基因变异情况。方法采用PCR荧光法诊断YMDD基因变异。结果84例慢性乙型肝炎HBV YMDD变异阳性17例,阴性67例。17例YMDD变异的患者中12例从未应用过抗病毒药物,5例曾行抗病毒治疗。结论未经抗病毒治疗的乙型肝炎患者亦存在较高的YMDD变异率,临床上在应用抗病毒治疗前应对患者是否存在YMDD基因变异进行检测。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎发生病毒学反弹患者YMDD变异分析

选取402例服用拉米夫定后出现乙型肝炎病毒(HBV)DNA反弹的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清样品,应用荧光PCR法定性检测YMDD变异情况。402例中有309例(76.87%)检测出YMDD变异,其中120例为YVDD变异,74例为YIDD变异,115例为YVDD+YIDD联合变异;309例YMDD变异患者中同时检测出变异株与野生株占69.26%(214/309),仅检测出变异株占30.74%(95/309)。另外,93例为YMDD野生型阳性。     

拉米夫定治疗过程中YMDD变异与HBVDNA载量关系的研究

目的研究拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染中YMDD变异发生与治疗前HBVDNA水平的关系。方法98例拉米夫定治疗的乙型肝炎病毒感染者,测定治疗前HBVDNA水平,定期随访,分别以PCR和PCR-RFLP法检测HBVDNA水平和YMDD变异。结果25例病例出现YMDD变异,出现的平均时间为11.2±7.45周。按治疗前病毒DNA水平分为5×102～5×104,5×105～5×106,5×106～5×108和大于5×108copies/ml四个组,YMDD发生率分别为8.3%,15.6%,30.2%和55.6%。结论乙肝患者进行拉米夫定治疗时,病毒DNA水平越高,发生YMDD的机率越大。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗程中YMDD变异

2000年～2006年，笔者用拉米夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型病毒性肝炎，疗程中发生YMDD变异36例，治疗3年尚未发生YMDD变异27例。现对63例血清HBeAg动态变化进行回顾性分析。     

拉米夫定治疗过程中YMDD变异与HBVDNA载量关系的研究

目的 研究拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染中YMDD变异发生与治疗前HBV DNA水平的关系.方法 98例拉米夫定治疗的乙型肝炎病毒感染者,测定治疗前HBV DNA水平,定期随访,分别以PCR和PCR-RFLP法检测HBVDNA水平和YMDD变异.结果 25例病例出现YMDD变异,出现的平均时间为11.2±7.45周.按治疗前病毒DNA水平分为5×102～5×104, 5×105～5×106, 5×106～5×108和大于5×108 copies/ml四个组,YMDD发生率分别为8.3%,15.6%,30.2%和55.6%.结论 乙肝患者进行拉米夫定治疗时,病毒DNA水平越高,发生YMDD的机率越大.     

Detection of hepatitis B virus polymerase variations resistant to lamivudine therapy

Objective To investigate variations in hepatitis B virus (HBV) polymerase gene in chronic HBV infected patients resistant to lamivudine therapy. Methods Specimens were obtained from nine patients with chronic HBV infection, who were resistant to lamivudine therapy. Partial segments of the HBV DNA polymerase gene we re amplified by polymerase chain reaction (PCR). Nucleotide sequence was performed using an applied 373 automated sequencer. Titre of HBV DNA was measured by branched DNA assay (Chiron). Results Of nine patients with HBV DNA positive after 64 weeks of treatment, five (56%) had variations in the highly conserved YMDD motif in domain C of the HBV polymerase, three of those were substitutions of isoleucine for methionine(M), and two were substitutions of valine(V) for methionine. Additionally, in two patients with variations characterized by substitutions of V for M, one had a simultaneous amino acid change from the first aspartic acid to glycine and this pattern of variation was not reported in other literatures. With respect to viremia, in two subjects with low titre of HBV DNA (<100 MEq/ml), no variation was found in the YMDD motif, whereas in seven patients with high titre of HBV DBA (>300 MEq/ml), five (71%) had variations in the YMDD motif. Conclusions Lamivudine is a potent anti-viral agent for treatment of chronic HBV infection. Resistance to lamivudine is likely caused by the variations in the YMDD motif of the HBV polymerase gene.     

治疗基线乙型肝炎病毒BCP区和PC区变异对拉米夫定耐药预测的探讨

目的探讨慢性乙型肝炎患者治疗基线乙型肝炎病毒(HBV)BCP区和PC区基因变异对拉米夫定耐药的影响。方法收集接受拉米夫定(100mg/片)初治2年内耐药的26例(耐药组)和2年内无耐药的16例(对照组)慢性乙型肝炎患者治疗基线的血清标本,采用型特异性多引物对巢式PCR法检测HBV基因型,用PCR产物直接测序技术检测治疗基线HBV的BCP区、PC区和P区变异位点,对发生频率较高的两组位点变异进行统计学分析。结果两组病人无1例发生P区rt204/180变异;在HBV BCP/PC区突变中,耐药组与对照组在点突变A1762T(38.48%vs 68.75%,P>0.05)、G1764A(26.92%vs50.00%,P>0.05)和G1896A(19.23%vs 18.75%,P>0.05)差异无统计学意义;对照组在点突变C1799G(43.75%vs 0,P<0.05)、T1802C(18.75%vs 0,P<0.05)、G1838A(25.00%vs 0,P<0.05)、A1846C(37.50%vs 0,P<0.05)、C1856T(31.25%vs 0,P<0.05)、G1888A(25.00%vs 0,P<0.05)明显高于耐药组。结论治疗基线HBV BCP区的A1762T/G1764A变异和PC区的G1896A变异对拉米夫定的2年疗效影响不大;治疗基线HBV BCP区的C1799G、T1802C、G1838A、A1846C的变异和PC区的C1856T、G1888A的变异可能是接受拉米夫定初始治疗获得长期维持应答的预测因素之一。     

乙型肝炎病毒基因型与拉米夫定疗效关系研究

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型与拉米夫定治疗疗效的关系及其机理。方法 收集拉米夫定治疗的51例慢性乙型肝炎患者的临床资料，分析HBV基因型与拉米夫定治疗疗效的关系。结果 HBV基因型B型对拉米夫定的应答率为45．4％（10／22），C基因型的应答率为20．7％（6／29），两组应答率差异有显著性（P〈0．05）；B基因型的HBeAg的血清转换率为31.8％（7／22），C基因型为13．8％（4／29），经统计学处理差异有显著性（P〈0．05）。结论 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者，B基因型疗效较C基因型好，HBV基因型可能是预测拉米夫定治疗效果的因素之一。     

乙型肝炎病毒多聚酶基因YMDD变异与临床治疗反应

目的：了解深圳地区慢性乙型肝炎患者在长期拉米夫定治疗中HBV多聚酶基因YMDD变异的情况及其对治疗反应的影响。方法：对100例拉米夫定治疗中28例出现血清病毒核酸（HBV DNA）阳性的患者,采用限制性片段长度多态性分析法（PCR－RFLP）检测YMDD变异,并观察其血清HBV DNA及丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果：100例中有17例YMDD变异阳性，其中以YVDD（M550V）变异为主,占64．7％（11／17），YIDD（M550I）变异为35．3％（6／17）。发生YMDD变异的患者均伴有HBV DNA及ALT水平反跳，1例住院患者停用拉米夫定后出现病情加重。结论：深圳地区慢性乙型肝炎患者在长期拉米夫定治疗中（疗程1年，100md/d）HBV多聚酶基因YMDD变异率为17．0％（17／100）。发生变异者较无变异者疗效降低，检测YMDD变异有助于监测疗效。     

肝动脉化疗栓塞术对乙肝病毒再激活的影响及拉米夫定对乙肝病毒再激活的作用

目的探讨肝动脉化疗栓塞术（TACE）对乙肝病毒再激活患者的影响及拉米夫定对乙肝病毒再激活的预防作用。方法将66例行TACE术治疗的HBV相关肝癌病人按有无服用拉米夫定分为TACE治疗组33例（单纯组）和拉米夫定联合TACE治疗组33例（联合组）。对这些患者栓塞术前、术后的乙肝病毒定量进行分析,并观察拉米夫定对乙肝病毒再激活的作用。结果单纯TACE组中,乙肝病毒再激活率为36.4%,联合组中,HBV再激活率为15.2%。两组相比,有统计学意义（P〈0.05）。结论 TACE会导致HBV的再激活,出现肝炎活动。拉米夫定可预防TACE后的HBV再激活。HBeAg（＋）可作为提示HBV再激活的一个指标。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎31例临床疗效观察

目的研究拉米夫定对血清乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)阳性的慢性乙型肝炎病毒感染患者的疗效和安全性.方法61例患者随机分成拉米夫定治疗组(31例)和对照组(30例).治疗组每日口服拉米夫定100mg,疗程1年,对照组采用一般保肝、退黄、降酶治疗.结果治疗组累计75%患者血清HBV-DNA阴转,最终持续阴转率70%.对照组HBV-DNA累计阴转率33.3%,最终阴转率为23.8%,两组疗效比较P＜0.05.治疗前丙氨酸转氨酶(ALT)增高的患者,52周时治疗组的复常率83.8%,对照组为25.8%,P＜0.05,治疗组累计53.8%患者血清HBeAg阴转,最终持续阴转率53.8%.对照组HBeAg累计阴转率13.3%,最终阴转率为6.0%,两组疗效比较P＜0.05.两组不良反应发生率比较,差别无显著性P＞0.05.结论拉米夫定能明显降低血清HBV-DNA水平,促使ALT恢复正常,不良反应轻,耐受性好.     

HBeAg阳性和阴性乙型肝炎病毒相关性肾炎相关因素的对比分析

目的比较HBeAg阳性和阴性乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）的临床、病理及抗病毒疗效的特点,探讨二者之间的异同。方法将98例HBV-GN患者分为HBeAg阳性组（52例）与HBeAg阴性组（46例）,并对其临床、病理及抗病毒疗效进行对照分析。结果 HBeAg阳性组患者肾病发病年龄,男性患者所占的比例、肝硬化患者所占的比例均低于HBeAg阴性组,差异有统计学意义（P〈0.05）,以拉米夫定为主的48周治疗方案治疗两组患者,治疗前两组患者的肝硬化、Child-Pugh积分、凝血酶原活动度（PTA）,血尿比例,24 h尿蛋白、血肌酐、血清白蛋白、丙氨酸氨基转移酶（ALT）以及肾穿刺活检病理检查结果,经比较差异无统计学意义（P〉0.05）,48周疗程结束后到门诊随访24周时发现,两组24 h尿蛋白,ALT及HBVDNA水平,血肌酐均较治疗前下降,血清白蛋白水平较治疗前上升,差异有统计学意义（P〈0.05）。HBeAg阳性组乙型肝炎病毒酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）变异的发生率为25.0%,高于HBeAg阴性组的6.5%（P〈0.05）。两组共有24例患者复发,复发率为24.49%,其中HBeAg阳性组有4例（7.69%）、HBeAg阴性组有20例（43.48%）,差异有统计学意义。结论 HBeAg阳性HBV-GN与HBeAg阴性HBV-GN相关因素中既有共同点也有不同点,了解两者的异同,有助于提高HBV-GN的诊治水平。     

阿德福韦酯联合拉米夫定对拉米夫定耐药的慢性乙肝患者病毒学应答疗效研究

目的 观察阿德福韦酯联合拉米夫定对拉米夫定耐药的慢性乙肝患者病毒学应答的效果.方法 使用免疫荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量,实时荧光-PCR法检测HBV-YMDD变异,并采用全自动测序仪对PCR产物直接进行HBV-P基因测序,同时对46例拉米夫定耐药的慢性乙肝患者加用阿德福韦酯联合治疗48周,观察治疗期间所有患者的肝功能和病毒学相关指标.结果 46例拉米夫定耐药的慢性乙肝患者出现YMDD变异株35例;12周后HBV-DNA的转阴率为57.78%,ALT正常率58.90%;24周后HBV-DNA的转阴率为73.91%,ALT正常率78.26%;治疗48周后HBV-DNA的转阴率为80.43%,ALT正常率86.96%.拉米夫定联合阿德福韦酯治疗后各时段的原发性治疗无应答组HBV-DNA转阴率均低于病毒学突破组（均P＜0.05或0.01）;治疗48周后HBV-DNA转阴者的治疗前HBV-DNA平均载量低于未转阴者（P＜0.05）.结论 阿德福韦酯联合拉米夫定治疗拉米夫定耐药的慢性乙肝患者有效、安全,且原发性治疗无应答组HBV-DNA转阴率低于病毒学突破组,治疗前HBV-DNA水平较低者联合治疗后转阴率较高.     

拉米夫定辅助治疗乙型肝炎病毒携带者合并肺结核病的价值

目的 探讨拉米夫定辅助治疗乙型肝炎病毒(HBV)携带者合并肺结核病的价值.方法 HBV携带者合并肺结核病患者94例,随机分为试验组和对照组,每组47例,两组患者均给予2HRZE/4HR方案进行抗结核治疗,试验组在上述治疗的基础上口服拉米夫定,两组疗程均为6个月.比较两组患者疗效,HBV-DNA阴转率及阴转时间、肺结核指标、肝脏损伤情况.结果 试验组治疗总有效率为95.75％,高于对照组的82.98％ (P ＜0.05);试验组的HBV-DNA阴转率为100.00％,高于对照组的89.36％,且试验组HBV-DNA阴转时间为(2.22±1.23)个月,短于对照组的(2.89±1.11)个月(P＜0.05);试验组的痰菌阴转率、病灶显吸率分别为97.9％、89.36％,均高于对照组的74.5％、61.7％ (P ＜0.05);试验组的肝损伤率为8.51％,低于对照组的36.17％ (P ＜0.05).结论 拉米夫定辅助治疗HBV携带合并肺结核病能降低肝功能损伤,抑制体内HBV复制,提高痰菌阴转率及病灶显吸率,从而改善总体病情.