应用RNA干扰技术对旋毛虫Ts87基因功能的初步研究

为研究旋毛虫Ts87基因的功能,通过RNA干扰途径抑制目的基因的表达。针对Ts87基因序列设计并合成特异性dsRNA、siRNA,通过浸泡方式分别将dsRNA、siRNA导入肌幼虫体内,利用实时荧光定量PCR分析Ts87基因及旋毛虫管家基因GAPDH的表达。此外,测定RNA干扰作用下的肌幼虫体外存活率的变化。根据实时荧光定量PCR结果,dsRNA及siRNA均能有效抑制Ts87基因mRNA的表达。此外,两种RNA能够在一定程度上降低肌幼虫体外存活率。实验表明,RNA干扰技术能够有效抑制旋毛虫功能基因Ts87表达,从而为研究旋毛虫基因的功能提供一种新的有效途径。     

RNA干扰在基因功能和病毒防治中的应用

RNA干扰(RNA interference)是近年来出现的一和利用小双链RNA(dsRNA)高效、特异的促使。RNA降解。从而阻断体内特定基因表达，诱使细胞表现出特定基因缺失表型的一种技术．本文主要对RNA干扰的发现，机制，优越性，以及在基因功能研究和病毒防治等方面的应用的最新进展作以综述，并对其未来发展作以预计．     

RNA干扰技术在胰腺癌基因治疗中的研究进展

RNA干扰（RNAi）是生物体内由具有同源性的双链RNA（dsRNA）引发的序列特异的转录后基因沉默。该技术能够快速、高效、特异地抑制靶基因的表达。从1998年发现RNA干扰现象至今,该技术得到了广泛的应用。胰腺癌是一种恶性度高的肿瘤,但是由于各种原因,至今尚无有效的治疗方法。RNA干扰技术是一种十分有前途的基因治疗方法,已广泛应用到胰腺癌的基因治疗研究之中,包括采用RNA干扰技术抑制癌基因、抗凋亡因子;利用RNA干扰技术抑制胰腺癌侵袭、转移蛋白来探讨治疗胰腺癌;利用RNA干扰技术提高胰腺癌对化疗的敏感性等。     

RNA干扰在免疫学研究中的作用

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是内源或外源性双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)诱发的mRNA水平上的基因沉默机制,具有高度特异、高效、持久的特点。RNAi现象在生物界广泛存在,是一种古老而高度保守的防御机制。21bp小干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA)在哺乳动物细胞中可诱导特异性RNA干扰作用,为人类疾病的研究和治疗提供了新的途径。目前RNAi已经在功能基因组学、免疫学研究、以及基因治疗和信号转导等广泛的领域里取得了令人瞩目的进展。     

RNA干扰技术在生物医学领域中的应用

RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默过程。在这一过程中,dsRNA被核酸内切酶切割成小干扰RNA(siRNA),siRNA与相关的蛋白结合成RNA诱导沉默复合体,这一复合体可识别并降解mRNA,导致基因沉默。它是一种比反义寡聚核苷酸技术更为有效的方法,具有更高的特异性,在生物医学领域有广阔的应用前景。文章就RNAi技术在功能基因组学、基因治疗(如人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、肿瘤)、神经性疾病及其药物设计等领域的实验及其应用研究及存在问题作一综述。     

RNAi技术与基因治疗

RNA干扰(RNAi)是由特定双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默,广泛存于在真菌、植物和动物中.RNAi技术是近年来迅速发展起来的高效、特异、易操作的基因阻断技术,在基因治疗中有广阔的应用前景,并将极大地促进基因治疗的发展.     

RNA干扰技术抑制病毒复制的研究进展

RNA干扰是指dsRNA抑制细胞内同源基因表达的现象。dsRNA不仅参与内源基因表达调控 ,而且能够抑制宿主内病原微生物基因的表达 ,参与构筑生物体的防御机制。近年来 ,运用RNAi技术在哺乳动物中的研究不断深入 ,尤其是抑制病毒复制的研究成果令人欣喜 ,这为人类抗病毒治疗提供了新的思路。     

RNA沉寂及其抗病毒效应研究进展

RNA沉寂 (RNAsilencing)是一种新发现的、在RNA水平发挥作用的基因调控机制 ,以序列特异性方式降解病毒、转基因的RNA或内源性mRNA ,发生于真核生物 ,包括在植物细胞中描述的转录后基因沉寂、真菌中的压制现象和动物细胞中的RNA干扰。RNA沉寂发挥作用的一般机制是由dsRNA启动 ,经Dicer酶处理成2 1～ 2 5nt的小片段siRNA ,作为向导序列与核糖核酸酶构成RNA诱导的沉寂复合体 ,降解与dsRNA同源的RNA序列 ,防御外来核酸序列的入侵和调节细胞内基因的表达。作为一种古老的病毒防御机制 ,可通过沉寂同源的病毒基因或沉寂与病毒复制有关的宿主细胞基因 ,在病毒感染的不同时期抑制病毒的复制。RNA沉寂的应用非常广泛 ,在某种意义上 ,RNA沉寂将会产生一场新的生物学革命。     

siRNA在自身免疫病治疗中的研究进展

小干扰RNA(siRNA)是RNA干扰(RNAi)的主要介导者,其通过双链RNA(dsRNA)使同源基因沉默,是以核酸为基础最广泛使用于治疗疾病的基因沉默技术。现今,siRNA已被应用于诸多研究领域,在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化等自身免疫病中的研究也日益增多。本文对siRNA的发现、siRNA介导的基因沉默机制以及siRNA在自身免疫性疾病治疗中的应用进行综述。     

小干扰RNA的设计及原理

RNA干扰技术在人类基因功能研究、药物靶点鉴定等方面备受青睐,并且具有潜在的临床应用价值。但只有设计合理的小干扰RNA (siRNA)才能高效、特异地抑制靶基因表达。本文总结了siRNA序列的一般特点以及设计siRNA的方法和相应原理,并介绍了如何利用实验手段,验证RNA干扰的有效性及特异性。从而促进RNA干扰技术的广泛开展。     

核糖核酸干扰

The phenomenon of RNA interference (RNAi) is highly conserved mechanism in the organism evolution. As a immune system , RNAi is a ubiquitous mechanism against invading microorganism in plant and animal cells. Recently, it has been found that RNAi is the process by which double-strand RNA (dsRNA) directs sequence - specific degradation of messenger RNA and the mediations of sequence specific messenger RNA degradation are 21 - and 23 - nucleotide small interfering RNAs that generate by ribonuclease from endogenous longer dsRNA or by transfectious technics from heterologous dsRNA. Over the past few years,the way in which cells respond to dsRNA by silencing homologous genes has revealed a new regulating paradigm in biology.     

哺乳动物中介导RNA干扰的载体研究进展

RNA干扰是指利用双链RNA诱导同源靶基因的mRNA降解,从而抑制特异基因表达的过程.近年来,RNA干扰技术作为一种工具在哺乳动物基因功能研究方面发展十分迅速.本文综述了有关在哺乳动物中介导RNA干扰的载体研究新进展及其应用.     

RNA干扰技术在免疫学研究中的应用

RNA干扰是由双链RNA引发的转录后基因沉默。双链RNA经Dicer酶降解成21-23nt的小干扰RNA,并以其为模板,特定位点、特定间隔降解与之序列相应的mRNA。随着RNA干扰机制的深入研究与广泛应用,RNA干扰作为一个强有力的研究工具,正发挥着越来越重要的作用。短期内这种方法将成为各国研究者关注的对象,并用于人类疾病的研究这项技术不仅是功能基因组分析的工具,在免疫学上,已用于癌症、病毒病、免疫信号转导、免疫疾病和炎症等,以后RNA将会为免疫学的研究提供强大的工具。     

RNA干扰技术及应用的研究进展

RNA干扰是近年被发现的细胞本身固有的对抗外源基因浸害的一种自我保护现象 ,人们利用这一现象对要研究的基因表达进行阻断 ,从而形成了 RNA干扰技术。 RNA干扰具有特异、高效、持久的特点 ,利用 RNA干扰技术对目的基因的阻断过程比基因剔除简便 ,而且应用范围广泛。但是 ,RNA干扰技术尚处于完善阶段 ,其作用机制还未完全明了 ,RNA干扰的方法学也有许多亟待改进之处     

siRNA活性与mRNA二级结构关系的研究

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(dsRNA)引起的基因沉默现象,它通过降解具有同源序列的mRNA起作用,特殊设计的siRNA能使靶基因发生特异性沉默,确定基因功能或沉默致病基因从而治疗疾病。在RNAi技术的应用中,通常采用的是19bp长度,正、反义链3′端各有2个不配对核苷酸的双链RNA(siRNA)。而合成siRNA模板的选择,即靶mRNA作用位点的选择对RNAi的作用效果的影响相当大,原因之一是因单链的mRNA存在二级结构。本研究试图从具体的实验结果出发,研究靶mRNA二级结构对siRNA活性的影响。     

HCMV编码的dsRNA结合蛋白在抗机体RNA干扰中的作用

人巨细胞病毒（HCMV）是一种感染广泛的疱疹病毒家族中的一员，它对人群中的易感者尤其对免疫能力下降患者的危害已引起社会的广泛重视。RNA干扰（RNAi）是近年来发现存在于体内抵御病毒感染和基因损伤的一种重要的保护机制。而HCMV则可通过编码dsRNA结合蛋白（DRBPs），特异性结合dsRNA，阻断宿主细胞抗病毒的RNAi途径，保护病毒mRNA的表达，最终达到逃避宿主细胞的抑制病毒转录的作用。     

RNA干扰的体内应用研究进展

RNA干扰是由双链RNA引发的序列特异性基因沉默现象，目前已成为体外实验中抑制基因表达的首选方法。在体内实验中，近年也已经发表了上百篇将siRNA运用于哺乳动物的研究，说明RNA干扰同样可成为体内实验的强有力工具，并有望成为一种有效的疾病治疗手段。本文就RNA干扰体内实验中的影响因素、实验设计及近年研究进展等进行综述。