大鼠腺垂体GH细胞在衰老过程中的形态学研究

本实验选用３０只不同月龄健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠（２０月龄、１２月龄、３月龄各１０只）,应用免疫细胞化学、计算机图像分析、形态计量法和电镜研究大鼠腺垂体在衰老过程中生长激素（ｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ,ＧＨ）细胞的形态学改变。结果表明：腺垂体实质细胞总数、ＧＨ细胞数随龄显著减少,ＧＨ细胞直径也随龄下降,以青年组到中年组减少最为明显（Ｐ＜０．０５）。应用ＩＰ－８计算机图像分析系统发现,ＧＨ细胞面密度随增龄显著减少（Ｐ＜０．０５）。老年大鼠腺垂体实质细胞排列紊乱,出现间质及血管周的纤维化和大量退化细胞,ＧＨ细胞呈固缩的表现,ＲＥＲ池扩张,核蛋白体脱落     

大鼠松果体细胞增龄变化

目的:探讨大鼠松果体细胞增龄变化。方法:SD大鼠,随机分为1～2月龄组,4～5月龄组,11～12月龄组和≥24月龄组4个组。采用H-F染色、Benda胶质细胞染色和TUNEL法细胞凋亡染色光镜观察,超薄切片透射电镜观察。结果:松果体细胞数从4～5月龄组至≥24月龄组递减(P<0.001),而胶质细胞数随增龄递增(P<0.01),松果体细胞凋亡随增龄增多(P<0.01),松果体细胞胞质随增龄电子密度降低,细胞器减少,线粒体扩张、嵴断裂呈空泡状,粗面内质网排列紊乱、池扩张,脂滴增多。结论:大鼠松果体随增龄而出现松果体细胞减少、胶质细胞增多,松果体细胞退变。这些变化可能是导致机体衰老的原因之一。     

体外培养大鼠腺垂体细胞三氯化钐作用下的电镜观察

本实验应用细胞培养、扫描电镜、透射电镜及放射免疫等技术,以形态和功能相结合的方法,研究了三氯化钐(SmCl_3)对腺垂体细胞形态、超微结构及功能的影响.SmCl_3作用后,放免测定实验组细胞上清液中GH、LTH浓度较对照组明显增高,而TSH、FSH及LH浓度较对照组明显降低.电镜观察:实验组嗜酸性细胞质内的粗面内质网扩张、高尔基复合体发达,分泌颗粒增多且移向细胞的周边,细胞呈分泌及合成功能旺盛相;而实验组嗜碱性细胞数量减少,胞质中的分泌颗粒减少,细胞呈分泌及合成功能抑制状态,说明SmCl_3对腺垂体嗜酸性细胞的合成及分泌激素的功能有促进作用,对腺垂体嗜碱性细胞的合成及分泌激素的功能有抑制作用.     

杜仲对D-半乳糖所致衰老小鼠睾丸的形态学研究

目的 本实验以D－半乳糖所致衰老小鼠为研究对象，研究了杜仲的抗衰老作用。方法 应用光镜电镜技术观察小鼠睾丸的重量、生精小管直径、生精上皮细胞数、间质细胞数的随龄变化，同时观察了杜仲对上述指标的影响。结果 1、随增龄，睾丸重量减轻，生精小管直径缩小。衰老时生精细胞缺如，仅剩支持细胞或见散在分布，间质细胞随龄递减。2、杜仲具有一定的抗衰老作用，使生精过程活跃，生精细胞增多，间质细胞增多不明显，生精小管直径改变不显著。结论 杜仲具有一定的抗衰老作用。     

细辛对D-半乳糖所致衰老小鼠睾丸的形态学研究

本文研究了细辛对D－半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用，应用光镜电镜技术测定小鼠睾丸的重量、生精小管直径、生精上皮细胞数、随龄变化的间质细胞数，同时观察了细辛对上述指标的影响。结果 1．随增龄、睾丸重量减轻，生精小管直径缩小。衰老时租精细胞缺如，仅有支持细胞或散在分布，间质细胞随龄递减。2．细辛可以使小鼠的曲细精管增粗，生精过程活跃，生精细胞增多，间质细胞增多。结论 细辛有一定抗衰老作用。     

老年大鼠垂体神经叶分泌纤维的电镜观察

透射电镜观察青年组（３－６月）和老年组（１８－３０月）雄性大鼠的垂体神经叶，发现老年大鼠的神经膨大中神经分泌颗粒随增龄减少显著，而分散的微泡和空泡相对较多。退化，变性的神经膨大增多。轴－轴突触样结构缺乏。细胞间隙增宽。根据超微结构特征将神经膨大划分五型，并型神经膨大的随龄变化进行讨论。     

中国大鲵垂体的显微与超微结构观察

为了探讨大鲵腺垂体的生殖活动中的作用，用光镜和电镜观察了大鲵产卵前不同时期垂体的显微和超微结构及其变化。大鲵腺垂体中间部很发达，远侧部内按细胞嗜色性可分为嗜碱区、嗜酸区和混合区。远侧部的ＧＴＨ细胞内有直径为１５０￣１１００ｎｍ的小分泌颗粒和１．５￣２．４μｍ的大型球状分泌颗粒。在８月份的ＧＴＨ细胞中，由于大分泌颗粒的变形而出现一些不规则的团块，小分泌颗粒也有融合现象。从５月份到８月份间，ＬＴＨ细胞     

细辛和杜仲合剂对D-半乳糖所致衰老小鼠睾丸的形态学研究

目的 本实验研究了细辛与杜仲合剂对D－半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用。方法 应用光镜电镜技术测定小鼠睾丸的重量、生精小管直径、生精上皮细胞数、间质细胞数的随龄变化，同时观察了细辛、杜仲合剂对上述指标的影响。结果 1．随增龄，睾丸重量减轻，生精小管直径缩小。衰老时生精细胞缺如，仅剩支持细胞或见散在分布，间质细胞随龄递减。2．细辛与杜仲合剂具有一定的抗衰老作用，可以使小鼠的生精小管增粗，生精过程活跃，生精细胞增多，间质细胞增多。结论 细辛与杜仲合剂具有一定的抗衰老作用。     

两种染色方法对脑垂体三种嗜色细胞显示效果的比较

脑垂体由腺垂体和神经垂体两部分组成,其中腺垂体内有3种类型细胞：嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。在常规的苏木精-伊红染色切片中,脑垂体3种嗜色细胞显示的效果一直不甚理想,学生在显微镜下进行观察辨认比较困难,为了更清晰地显示脑垂体3种嗜色细胞,我们采用不同的染色方法对脑垂体进行染色,经过多次实验显示,采用Mallory氏法染色,获得了较满意的染色效果,现介绍如下：     

人胎儿垂体前叶P物质免疫阳性纤维与促甲状腺素免疫阳性细胞的关系及其发育变化

用免疫组化双标记法研究了２９例不同胎龄人胎儿垂体前叶Ｐ物质免疫反应阳性神经纤维与促甲状腺素免疫反应阳性细胞的关系。人胎儿垂体前叶存在少量粗细不等的Ｐ物质反应神经纤维，多成丛分布于前叶的中央区及其与外侧部的交界区。随着发育，Ｐ物质反应纤维增多、增长，分布趋于集中。促甲状腺素反应细胞在早期多有短粗突起，中期增长、增多，晚期又减少；细胞主要位于背腹缘及中央区，晚期较密集。在Ｐ物质反应纤维与促甲状腺素反应细胞的分布重叠区域内可有较密切接触，随发育其接触数量及其密切程度均有增加。结果提示人胎儿垂体前叶内Ｐ物质反应神经纤维与促甲状腺素反应细胞可能存在功能方面的联系。     

棉酚对大鼠垂体远部细胞超微结构的影响

本文对服棉酚30mg/kg体重/d共5周的成年雄性大鼠垂体远部细胞的超微结构进行了观察。结果表明,促性腺激素细胞的分泌活性显著增强,表现为功能不太活跃的Ⅰ、Ⅱ型细胞比对照组减少;而高尔基复合体发达,粗面内质网扩张为小泡的Ⅲ、Ⅳ型细胞增多,并出现类阉割细胞(Ⅴ型)和脱颗粒细胞(Ⅵ型)。垂体远部其他类型促激素细胞未见明显变化。本文还讨论了垂体促性腺激素细胞的分型、棉酚引起促性腺激素细胞变化的可能机制。     

LPS性肺损伤大鼠一氧化氮合酶表达和肺细胞凋亡变化

目的: 观察内毒素性肺损伤过程中肺细胞凋亡和一氧化氮合酶（NOS）mRNA表达的时程性变化及关系,探讨LPS性肺损伤（ALI）的发病机制。方法: 健康雄性SD大鼠48只,随机分成2组:①对照组：静注等量生理盐水；②模型组(LPS组)：静注LPS复制ALI模型,分别于给药1、3、6、9及12h后采集样品；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定肺组织中NOSmRNA表达变化；电镜、流式细胞术检测肺细胞凋亡率；免疫组化法测定Bcl-2和Bax；光镜、电镜观察肺组织病理变化。结果: 与对照组比较，LPS组iNOSmRNA表达随时间延长而增强，给予LPS 3 h后有显著差异(P<0.05)，eNOSmRNA随时间延长而降低，给LPS 3 h时有显著差异(P<0.05)，nNOSmRNA在观察时间内没有变化；光镜和电镜下可见在观察时间内1 h起肺损伤随时间延长加重；流式细胞术显示LPS组凋亡细胞随时间延长增多，9 h达高峰，12 h有所降低；免疫组化结果显示，LPS组随时间延长Bcl-2减少，主要表现在肺上皮细胞，Bax增多；对照组无明显变化。结论: 不同一氧化氮合酶在ALI中表达强度不同；抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax是ALI时调节细胞凋亡的途径之一；一氧化氮合酶可能通过调节Bcl-2和Bax平衡而影响凋亡。     

大鼠催乳素瘤形成过程中催乳素基因的表达

给ＳＤ大鼠皮下埋植内含１７β－雌二醇硅橡胶管３０、６０、１２０天后，发现大鼠垂体重量随给药时间延长呈持续性增加；用放射免疫法测定血浆催乳素含量，亦依次明显升高；用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交方法检测垂体细胞中ＰＲＬ基因，发现ＰＲＬ ｍＲＮＡ含量也依次显著增加，但其增加却远低于血浆ＰＲＬ含量的增加，提示β－雌二醇除了促进ＰＲＬ基因的转录外，还可能增加ＰＲＬ ｍＲＮＡ的翻译效率。     

人外周血T淋巴细胞表型改变与衰老相关性研究

目的：探讨人T淋巴细胞表型随年龄变化的规律，寻找敏感的免疫衰老生物标志。方法：取年轻组(20—35岁)和年老组(50—75岁)志愿者的新鲜肝素抗凝静脉血，进行三色或四色直接免疫荧光染色，获取有核细胞后以流式细胞仪分析T细胞亚群的表型。结果：2个年龄组的总T细胞(CD3^ )、辅助T细胞(CD4^ )以及细胞毒T细胞(CD8^ )亚群的相对百分率没有明显差别，但年老组T细胞上CD3分子的密度(MFI)明显下降；粘附分子CD44与CD62L在3群T细胞上阳性率的差别均无统计意义；而2组间总T细胞、辅助T细胞以及细胞毒T细胞亚群的CD95阳性率都有显著差别，表现为随年龄增加，CD95表达率上升。结论：在所研究的年龄组间，T细胞及其亚群的相对数量没有显著改变，而CD3表达密度随年龄增加而下调；T细胞的凋亡诱导分子CD95阳性率随年龄增加而上升，提示CD95可能是评价免疫衰老的潜在生物标志。     

大鼠黑质胆碱能神经元形态学的增龄变化

目的：探讨大鼠中脑黑质胆碱能神经元的增龄变化规律。方’法：SD大鼠分为1～2月龄、3～4月龄、11～12月龄、≥24月龄4组,常规石蜡中脑黑质连续冠状切片,HE染色、尼氏染色、胆碱乙酰基转移酶(ChAT)免疫组织化学染色,图像分析仪测量ChAT免疫阳性产物的光密度和ChAT免疫反应阳性神经元的多种参数。结果：随着年龄增长,大鼠中脑黑质神经元数量减少,ChAT免疫反应阳性神经元平均光密度减少,ChAT免疫反应阳性神经元多种形态学参数均减少,呈增龄衰老性变化。结论：黑质胆碱能神经元随年龄增长而出现的衰老性变化,可能是黑质病变的原因之一。     

雷帕霉素对过氧化氢诱导血管内皮细胞衰老的干预研究

目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响及其可能的机制。方法:把HUVECs分为空白组、衰老组(H_2O_2诱导)、Rapa+H_2O_2组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+H_2O_2组。噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况;透射电子显微镜观察细胞超微结构改变;Western blot检测Rb、磷酸化Rb(p-Rb)、p21、LC-3II和beclin-1的表达变化。结果:与空白组相比,衰老组细胞活力下降,SA-β-Gal染色阳性率增高,细胞结构紊乱,并伴有衰老蛋白表达显著增加(P0.01);与衰老组相比,Rapa+H_2O_2组细胞活力增强,细胞衰老染色减少,p-Rb和p21表达显著减少(P0.05),电镜下细胞结构趋于正常,并可见自噬小体,beclin-1和LC3-II表达显著增多(P0.01);与衰老组相比,给予自噬抑制剂3-MA的细胞则表现为细胞活力进一步下降,SA-β-Gal染色阳性率进一步增高,p-Rb和p21表达增多,细胞结构破坏明显,beclin-1和LC3-II几乎不表达(P0.05)。结论:Rapa可延缓H_2O_2诱导的血管内皮细胞衰老,这种抗衰老作用可能与促进自噬有关。     

腺垂体细胞培养及低温冻存研究

垂体移植目前依就是解决垂体功能低下的有效治疗手段。垂体细胞的培养及低温冻存是垂体移植研究中心的基础。本文对腺垂体培养的发展过程及目前的现状进行了简要的回顾和概括，对低温冻存的理论发展过程做过综述，同时从腺垂体移植发展的角度对垂体细胞培养及垂体移植工作的意义前景做了展望。     

十二指肠、回肠、盲肠嗜银细胞生后发育的组织学变化

目的:研究小鼠肠道内分泌细胞的形态发生规律,为消化系统的生理和病理学研究提供形态学依据.方法:用Grimelius银染法显示小鼠十二指肠、回肠、盲肠嗜银细胞的生后发育情况.结果:嗜银细胞多分布于肠黏膜绒毛和肠腺上皮内,少量分布于肠黏膜绒毛固有层.十二指肠和回肠嗜银细胞的数量在20日龄达到最高,25日龄降低,随后又升高;盲肠中嗜银细胞数量呈波浪形变化.同日龄比较,十二指肠和回肠中嗜银细胞数量较盲肠中的多.嗜银细胞的形态主要呈花瓶形、梭形、蝌蚪形、圆形和羽毛球拍等形状.结论:小鼠十二指肠、回肠和盲肠内的嗜银细胞分布于绒毛和肠腺上皮内,形态多样,20日龄量最高,具有内分泌和外分泌功能.     

腺垂体细胞培养及低温冻存研究

垂体移植目前依就是解决垂体功能低下的有效治疗手段.垂体细胞的培养及低温冻存是垂体移植研究中的基础.本文对腺垂体培养的发展过程及目前的现状进行了简要的回顾和概括,对低温冻存的理论发展过程做过综述,同时从腺垂体移植发展的角度对垂体细胞培养及垂体移植工作的意义前景做了展望.     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛A细胞的结构和功能变化

目的　探讨胰岛Ａ细胞参与溃疡自愈调节的可能途径。　方法　应用形态计量、放射免疫测定及透射电镜方法，研究大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛Ａ细胞的面数密度、超微结构及血清胰高血糖素的变化。　结果　与正常组及盐水组比较，Ａ细胞面数密度于溃疡后６ｄ、１０ｄ 明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。溃疡后１４ｄ 开始呈减小趋势，２８ｄ 基本恢复正常。Ａ细胞超微结构变化在溃疡后第６～１４ｄ 较明显，主要表现为：（１）细胞核增大，异染色质减少，核周隙扩张；（２）部分Ａ 细胞粗面内质网增多，有的呈板层状排列，有的扩张成囊泡；（３）部分Ａ 细胞内分泌颗粒增多，大小不等，密度不一。血浆胰高血糖素水平从溃疡后１４ｄ 到２１ｄ 呈增高趋势（Ｐ＜ ０．０１），２８ｄ 时接近正常。　结论　胰岛Ａ细胞的形态和功能变化表明，它通过增加其细胞数目及增强其合成与分泌胰高血糖素的功能，积极参与了胃溃疡自愈的调节过程。