虎杖黄芪合用抗HSV-2药效分析

目的：为了得到新的抗ＨＳＶ中药方剂的制佳配方比,我们进行了此项研究。方法：我们以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为阳性对照,采用空斑减数实验,观察了虎杖、黄芪单用及合用抗ＨＳＶ－２３３３株的药效,用中效作用原理对药效进行了分析。结果：在ＨＥｐ－２细胞系统中,ＡＣＶ对ＨＳＶ－２３３３株直接杀灭、增殖抑制、感染阻断的ＥＤ５０依次为１６．４５、１０．８５、８５．１８、６２μｇ／ｍｌ,虎杖黄芪合用比为１（Ｄｍ）虎杖／１     

虎杖蒽醌化合物抗疱疹病毒的实验研究

目的：为了利用并开发虎杖的抗病毒性质,研究了虎杖蒽醌化合物抗疱疹病毒药效。方法：利用空斑减数实验以及ＨＳＶＣＰＥ的抑制,进行此项研究。结果：在ＨＦＰ－２细胞系统中,晶Ⅰ对ＨＳＶ－１Ｆ株增殖抑制、感染阻断、直接杀灭的ＥＤ５０分别为１．２０ｕｇ／ｍｌ、０．９７ｕｇ／ｍｌ晶ＩＶ的相应数值为０．０９ｕｇ／ｍｌ、２．９０ｕｇ／ｍｌ、０．０７ｕｇ／ｍｌ。结论：晶Ⅰ对ＨＳＶ－１Ｆ株增殖抑制、感染、直接杀灭的ＴＩ     

金银花黄芪合用抗Ⅱ型疱疹病毒药效分析

目的：获得抗 Ｈ Ｓ Ｖ 中药的最佳配方比。方法：以 Ａ Ｃ Ｖ 为阳性对照组,采用空斑减数实验,观察金银花与黄芪单用及合用抗 Ｈ Ｓ Ｖ ２３３３ 株的药效,用中效作用原理对药效进行了分析。结果：在 Ｈｅｐ ２ 细胞系统中, Ａ Ｃ Ｖ 对 Ｈ Ｓ Ｖ ２３３３ 株直接杀灭增殖抑制感染阻断的 Ｅ Ｄ５０分别为１６４５,１０８５, １８６２ μｇ／ｍ ｌ 合用比为 １（ Ｅ Ｄ５０）金银花／１（ Ｅ Ｄ５０）黄芪时,相应数值分别为 ０６７, ０８０,１１９ μｇ／ｍ ｌ,药效比 Ａ Ｃ Ｖ 强,而且合用指数（ Ｃ Ｉ）较小,协同作用十分明显。结论：上述抗 Ｈ Ｓ Ｖ ２３３３株合用比是组方时的最佳配方比。     

抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７￣１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３，腹水抗体效价在１０＾－５￣１０＾－７之间免疫沉淀。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３     

虎杖蒽醌化合物抗CVB3病毒的实验研究

目的：为了解虎杖蒽醌化合物晶Ⅰ,晶Ⅳ抗ＣＶＢ３病毒的药效从而明确虎杖的抗病毒性能并开发利用。方法;以病毒唑为阳性对照,利用空斑减数实验进行研究。结果：在ＨＥＰ－２细胞系统中,晶Ⅰ对ＣＶＢ３直接杀灭,增殖抑制,感染阻断ＥＤ５０分别为１．５４μｇ／ｍＬ,８．３４μｇ／ｍＬ,３．０６μｇ／ｍＬ,晶Ⅳ的相 系数分别为１．７９μｇ／ｍＬ,７．０５μｇ／ｍＬ,３．１７μｇ／ｍＬ,而病毒唑的相应系数分别为６．２     

抗HSV－1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７～１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＬｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ｇ）、ＩｇＧ＿３，腹水抗体效价在１０￣（－５）～１０￣（－７）之间免疫沉淀。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３株与１２０～１２８Ｋ多肽，２株与６０Ｋ多肽发生特异性反应，具有ＨＳＶ型共同抗原特异性。７株ＭｃＡｂ与ＣＭＶ均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于ＨＳＶ的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。     

抗病毒药物对CHB病人离体培养外周血淋巴细胞的遗传学影响

应用３种不同抗乙型肝炎病毒药物，以单独和联合用药的方式，离体处理慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）病人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），分别观察姊妹染色单体交换（ＳＣＥ）平均频率、脆性位点（ＦＳ）和ＨＢＶ标记物（ＨＶＢＭ）等多项实验指标。结果表明，９个实验组均能显著地降低ＣＨＢ病人ＰＢＬ－ＳＣＥ频率，具有显著的ＨＢｅＡｇ，ＨＢＶ－ＤＮＡ的阴转率和ＡＬＴ的复常率，说明人白细胞干扰素等３种抗病毒药物均具有体外诱导ＣＨＢ病人ＤＮＡ损伤的修复作用。染色体核型中第１，２，３号染色体可能易受ＨＢＶ的侵袭。     

抗HCV NS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴

目的：为研制抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的ＨＣＶＮＳ３抗原。方法：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的细胞株。结果：获得有实用价值的两株ＭｃＡｂ。两株ＭｃＡｂ与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶＮＳ４、ＮＳ５及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。结论：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。     

秘灵王提取物抗DNA、RNA病毒效应

采用秘灵王（ＭＬｗ）提取物在人羊膜细胞ＦＬ株及小鼠纤维母细胞Ｌ９２９株上进行抗病毒作用研究，并对其抗病毒机理进行探讨。结果表明，ＭＬＷ提取物可不同程度地抑制ＤＮＡ病毒ＡｄＶ—Ⅲ、ＨＳＶ—１及ＲＮＡ病毒ＣＢ３Ｖ、ＰｏｌｉｏＶ、ＶＳＶ的致细胞病变效应（ＣＰＥ），使组织培养的细胞得到不同程度的保护     

抗P^185McAb的制备,鉴定及其在免疫组化检测的应用

本文以ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌基因表达产物为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，采用常规淋巴细胞杂交瘤技术立一株稳定分泌抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ的杂交瘤株５Ｅ１２，ＭｃＡｂ５Ｅ１２属ＩｇＧ亚类，与ＳＫＢＲ－３，Ｔ４７Ｄ乳癌细胞系呈阳性反应，与ＨＴ２９，ＥＣ１０９，ＤＡＣ－１，ＳＰ２／０，成纤维细胞及小鼠ＮＩＨ３Ｔ３等细胞系列呈阴性反应，３０例乳癌组织石蜡切片同时以自制抗Ｐ＾１８５ＭｃＡｂ５Ｅ１２及进口ＭｃＡｂＣ－ｅ     

乙型肝炎病毒DNA转染细胞的一种内参标准:真核细胞报告基因SEAP

目的 建立用真核细胞报告基因ＳＥＡＰ转染人肝癌细胞系及鸡肝癌细胞系（ＬＭＨ）的表达系统,供研究ＨＢＶ基因功能应用。方法 分别将带有分泌性碱性磷酸酶（ＳＥＡＰ）报告基因的ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ及ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ转染Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２及ＬＭＨ细胞,并用ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ与Ｓ基因区变异体的克隆ＨＢＶ ＤＮＡ共转染ＨｅｐＧ２细胞。培养后收取细胞培养液,用ＥＬ     

虎杖中蒽醌化合物部分分离晶体抗Ⅰ型人疱疹病毒的实验研究

对虎杖中蒽醌化合物进行了分级分离，并且对乙酸乙酯卒取部分晶Ⅲ、晶Ⅳ抗ＨＳＶ－１药效，通过病毒所致细胞病变的抑制以及空斑减数实验进行了观察。结果表明，在ＨＥＰ－２细胞系统中，晶Ⅳ对ＨＳＶ－１Ｆ株的增殖及其感染均具有明显的抑制作用，ＥＤ５０分别为０．０６７ｍｇ／Ｌ及０．０３０７２ｍｇ／Ｌ，ＥＤ９０分别为３．３９８ｍｇ／Ｌ及１．８１１ｍｇ／Ｌ。同样，晶Ⅳ对ＨＳＶ－１Ｆ株也具有显著的直接杀灭作用，ＥＤ５０及ＥＤ９０分别为０．０９４４３ｍｇ／Ｌ及３．５０１ｍｇ／Ｌ。认为晶Ⅳ对ＨＳＶ－１具有显著的抑制作用，而其细胞毒作用不强，值得开发利用。     

合肥地区献血员HBV和HCV感染现状的分析

采用ＥＬＩＳＡ法检测１４４０名献血员的ＡＬＴ、抗－ＨＣＶＩｇＧ和ＨＢＶＭ。结果显示：抗－ＨＣＶ阳性率为５．５％，其中职业或定期献血员抗－ＨＣＶ阳性率为６．６％，抗－ＨＣＶ阳性率与献血员的ＡＬＴ，年龄和献血次数有显著相关，且农村明显高于城市和郊区。ＨＢ－ｓＡｇ阳性率为１．５％，初次献血员ＨＢｓＡｇ阳性率为３．３％，明显高于职业献血员。抗－ＨＢｃ阳性率为３．２％，抗－ＨＢｅ单项的阳性为１．２％。建议将抗－ＨＢｃ作为筛选献血员的指标之一。     

抗-HCV阴性献血员丙肝病毒感染及意义

目的：探讨抗－ＨＣＶ阴性献血员隐匿性ＨＣＶ感染情况。方法：采用逆转录套式ＰＣＲ检测１００例抗ＨＣＶ阴性献血员血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果：血清中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２例,ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性６例;有１例血清及ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论：抗－ＨＣＶ阴性的献血员中仍有少数存在ＨＣＶ输血传播的可能,对献血员仅筛查抗－ＨＣＶ是不够的,应对血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－     

反义基因转移表达及抗乙型肝炎病毒的作用

目的观察重组逆转录病毒载体－包装细胞系统介导反义基因转移表达和抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的作用。方法将ＨＢＶａｙｗ１４０２－２９０６片段和２８３９－１９８６片段反向插入重组逆转录病毒载体质粒，分别转染ＰＡ３１７包装细胞，分别感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞和２．２．１５细胞。结果转导的ＮＩＨ３Ｔ３细胞内有ＨＢＶ反义ＲＮＡ转录表达。ＨＢＶ反义基因重组逆转录病毒感染２．２．１５细胞后第３天，表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）表达量减少，感染后第５天，ＨＢＶ抗原表达抑制率达高峰。ｐｒｅＳ／Ｓ片段反义基因转移后，ＨＢｓＡｇ表达抑制率为７１％，ＨＢｅＡｇ抑制率为２３％；ｐｒｅＣ／Ｃ片段反义基因转移后，ＨＢ－ｓＡｇ表达抑制率为２３％，ＨＢｅＡｇ抑制率为５９％。结论逆转录病毒载体－包装细胞系统能够介导ＨＢＶ反义基因在真核细胞内转移和表达，并对ＨＢＶ复制和表达均有抑制作用。     

戊型肝炎病毒抗体检测及临床分析

采用ＥＬＩＳＡ法对２５５例肝炎病人分别检测抗－ＨＥＶ－ＩｇＭ、抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ、抗－ＨＣＶ及ＨＢＶ－Ｍ。结果显示：５５例中抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性乾６６例（２６．９＾），为检测例数中的第３位，男女比例为２：１，临表现类似甲型肝炎。一     

IL—12提高DNA疫苗诱导小鼠抗HBV皮下移植瘤的免疫研究

目的 观察ＩＬ－２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２＾ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法肌肉注射ＤＮＡ疫苗,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果 对照组、ｐＣＲ３．１－Ｓ及共同免疫     

不同药物抗风疹病毒的实验研究

目的：为筛选有效的ＲＶ药物。方法：选用９种新合成的腺嘌呤衍生物、６种尿嘧啶衍生物及大黄醇提液,分别在ＢＨＫ２１、ＲＮＣ和ＨＮＣ细胞上进行了体外抗病毒估ＢＨＫ２１上以ＣＰＥ为观察指标,在ＲＮＣ和ＨＮＣ上因不出现明显的ＣＰＥ,则将细胞培养物转种于ＢＨＫ２１细胞并用间接免疫荧光和免疫酶技术检测药物的抗病毒效应。结果：取代基为－－ＣＨ２－Ｃ６Ｈ５、－（ＣＨ２）２ＯＨ、０Ｃ６Ｈ５－ＣＨ３的腺嘌呤衍生物及取代     

白细胞介素2增强HBV基因疫苗的免疫效应

目的：构建乙型肝炎病毒基因疫苗ｐＣＲ３．１－Ｓ,观察重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２）作为佐剂对其诱导ＮＡＬＢ／ｃ小鼠产生免疫应答的影响．方法：以ＥＬＩＳＡ法检测免疫小鼠血清抗ＨＢｓ,另用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测定淋巴细胞增殖活性,初步研究不同免疫组的体液和细胞免疫应答．结果：ｒｈＩＬ－２组免疫小鼠抗ＨＢｓ抗体和淋巴细胞增殖活性与对照组相比有显著差异（Ｐ〈０．０５）．结论：ＨＢＶ基因疫苗可诱发ＢＡＬ     

乙型和丙型肝炎重叠感染患者肝组织免疫组织化学双标记研究

探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）重叠感染患者肝组织中病毒的复制状况和相互关系。方法采用免疫组织化学双标记技术，以抗－ＨＣＶＮＳ３、抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体和抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ多克隆抗体，检测２５例尸检肝组织中ＨＣＶＡｇ和ＨＢＶＡｇ的分布和表达。结果ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ同时阳性１１例，ＨＢｓＡｇ和ＮＳ５Ａｇ阳性１２例，ＨＢｃＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ及ＨＣＶＮＳ５Ａｇ阳性各１０例。几乎所有单标记染色阳性切片，其双标记染色也阳性。感染ＨＣＶ或ＨＢＶ的肝细胞各呈灶性、散在或弥散混杂分布，在重叠感染肝组织中，与ＨＢＶ复制有关的表达类型，如ＨＢｓＡｇ膜、浆型和ＨＢｃＡｇ浆型以及ＨＣＶＮＳ３Ａｇ和ＨＣＶＮＳ５Ａｇ的检出例数，同单纯感染组相比差异无显著意义（χ２＝０．１５４及０．１９８，Ｐ＞０．０５）。结论乙型和丙型肝炎病毒在重叠感染时，两种病毒在肝组织内可能不存在互相干扰和抑制。