颅神经嵴细胞迁移的调控

<正>颅神经嵴细胞(cranial neural crest cells,CNCC)起源于背侧神经管,是一个对颅颌面部各种软硬组织的衍生都具有十分重要作用的细胞群。其产生后便向腹侧迁移,并向多种方向进行分化,如骨细胞、神经元细胞、神经胶质细胞、色素细胞、肌细胞等等[1],而这些细胞则进一步组织构建成颅颌面大部分的软硬结缔组织,因此,颅神经嵴细胞对于颅颌面发育具有十分重要的意义。颅神经嵴细胞迁移的启动、迁移     

小鼠颅神经嵴细胞的培养和特征

目的：在体外原代培养Balb/c小鼠胚胎的颅神经嵴细胞。为颅面部各种组织细胞的发育研究提供细胞来源。方法：采用胰酶消化法分离小鼠胚胎第8.5天的颅神经管，从小鼠颅神经管中游离出来的细胞即为颅神经嵴细胞，用免疫组织化学方法鉴定细胞的来源，并测定细胞的生长曲线。结果：成功地培养出小鼠的颅神经嵴细胞，其形态类似成纤维样细胞，免疫组化检测结果表明，神经特异性烯醇化酶（NSE）抗体染色结果阳性。细胞的群体倍增时间为43.65h。结论：原代培养的小鼠颅神经嵴细胞生长稳定，来源明确，是颅面部各种细胞的发育和分化研究中一种有用的工具。     

神经嵴细胞的特性和培养

在胚胎的发育中，神经嵴细胞是一组特殊的细胞群，可以分化为神经元、神经胶质细胞及多种非神经细胞，是机体内最具多能性的结构之一。在口腔颌面部的发育中，大部分组织如牙乳头、牙囊、牙周膜、骨组织、肌肉中所包含的细胞几乎无一例外地均来源于神经嵴细胞。因此，神经嵴细胞，尤其是     

颅神经嵴细胞向成骨细胞表型分化的诱导实验

目的：观察颅神经嵴细胞（CNCC）在体外是否可以向成骨细胞表型进行诱导分化。方法：用标准的无血清培养液和含10^-8mol/L地塞米松、50mg/L左旋抗坏血酸和10mmol/L β－磷酸甘油钠的矿化诱导培养液对CNCC进行培养。15d后取两组细胞用于实验，观察两组间细胞形态，群体倍增时间、活力细胞数、碱性磷酸酶的活性和OC的含量等方面的变化。结果：诱导后的CNCC形态由成纤维样转变为多角形，细胞群体倍增时间延长，细胞活力数减少，碱性磷酸酶的活性和OC的含量升高。结论：CNCC在特定的矿化诱导培养液中，可以向成骨细胞表型分化。     

颅神经嵴细胞及内胚层在鳃弓发育中作用的研究进展

颅神经嵴细胞在脊椎动物颌面部发育中起着主导作用。其衍生物包括牙齿及牙周组织、骨及衍生物、鳃弓神经节等。近来大量研究发现，颅神经嵴细胞在鳃弓模式形成中并非起决定性作用，而鳃弓的发育是颅神经嵴和内胚层交互作用的结果，内胚层在其中起着关键作用。为此，可以认为对颅神经嵴在鳃弓发育中的作用有了新的认识。     

神经嵴细胞与颅颌面骨骼的发生

脊椎动物颅颌面骨骼的发育涉及一系列复杂的细胞和分子生物学机制,神经嵴细胞的迁移、位置确定及其相关分子信号调控是整个进程的中心,也是形成颅面部间充质的主要来源。该文对颅颌面骨骼发生中颅神经嵴细胞的生物学特性作一综述。     

颅神经嵴细胞及内胚层在鳃弓发育中作用的研究进展

颅神经嵴细胞在脊椎动物颌面部发育中起着主导作用。其衍生物包括牙齿及牙周组织、骨及衍生物、鳃弓神经节等。近来大量研究发现,颅神经嵴细胞在鳃弓模式形成中并非起决定性作用,而鳃弓的发育是颅神经嵴和内胚层交互作用的结果,内胚层在其中起着关键作用。为此,可以认为对颅神经嵴在鳃弓发育中的作用有了新的认识。     

鸟苷酸交换因子Trio通过调控神经嵴细胞迁徙影响颅颌面发育

目的:研究鸟苷酸交换因子Trio在胚胎发育过程中对神经嵴细胞的影响.方法:将trio反义寡核苷酸通过显微注射入斑马鱼胚胎内,抑制其trio功能;在斑马鱼胚胎发育96 h时使用体式显微镜观察神经嵴细胞衍生物下颌骨的发育情况,120 h时通过阿尔辛蓝染色观察颅颌面部软骨的发育状况.利用转基因斑马鱼(sox10:EGFP)特...     

牙本质非胶原蛋白诱导颅神经嵴干细胞向成牙本质细胞表型分化

目的探讨颅神经嵴干细胞(CNCSC)用于牙再生研究的可行性,观察牙本质基质非胶原蛋白(DMNCP)对CNCSC的成牙本质样细胞表型分化的影响。方法小鼠神经管组织块无血清条件培养法获取颅神经嵴干细胞,以DMNCP体外诱导CNCSC的分化,形态学、免疫细胞化学、茜素红特染等方法,分别从Ⅰ型胶原表达、牙本质涎磷蛋白(DSPP)表达、碱性磷酸酶(ALP)活性及钙结节形成情况,鉴定CNCSC的成牙本质样细胞表型。结果诱导后的CNCSC呈现I型胶原、DSPP阳性表达,ALP活性增高,钙结节形成,具有成牙本质细胞表型特征。结论DMNCP具有诱导CNCSC向成牙本质细胞表型分化的作用,利用CNCSC开展牙再生研究是可行的。     

颅神经嵴干细胞的发育生物学特征

颅神经嵴干细胞可特征性地分化成颌面部硬组织，形成上下颌骨及牙体（釉质除外）外周组织。颅神经嵴干细胞发生于早期胚胎神经板，具有多能分化，广泛迁移，模式预成，可塑性等生物学特性，在内外多因素调控下发生不同的分化。     

脑神经嵴干细胞体外培养方法的研究进展

脊椎动物的脑神经嵴干细胞(CNCSC)具有多向分化潜能,参与形成颅颌面部多种组织器官.下文就近年来CNCSC体外分离培养技术作一,为研究CNCSC与口腔颌面部组织器官发育、再生修复以及相关疾病发生机制提供方法 学参考.     

AP-2 and HNK-1 define distinct populations of cranial neural crest cells

Authors – Minarcik JC, Golden JA Objective – To determine if distinct populations of cranial neural crest cells (CNCC) exist by characterization of their divergent gene expression patterns. Design – Identification of unique populations of CNCC was determined by a combination of lineage and immunohistochemical analyses. Setting – Department of Pathology, Children's Hospital of Philadelphia and the University of Pennsylvania School of Medicine, Philadelphia, PA 19104. Results – We found antibodies of two proteins previously described as identifying all CNCC, label three populations of CNCC at specific time‐points. Furthermore, the activating protein 2 (AP‐2) expressing CNCC become neural or mesenchymal NCC derivatives whereas the HNK‐1 labeled cells do not participate in the mesenchymal lineage. Conclusion – These data provide molecular markers for unique CNCC fates and thus will be invaluable in the characterizing of craniofacial anomalies related to defects in NCCS. In addition, our data suggest AP‐2 may function in determining the unique mesenchymal fate of CNCCs.     

rhBMP-2诱导颅神经嵴细胞向神经元分化的体外研究

目的；观察重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）对颅神经嵴细胞的诱导发化作用。方法：分别用不含rhBMP-2的无血清培养液和含有不同浓度rhBMP-2的培养液对颅神经嵴细胞进行培养。10d后，观察两组细胞的形态学差别，用胶质纤维酸性蛋白（GFAP），神经纤维细丝蛋白（NF），颅神经嵴细胞的特异性抗体P75等抗体进行免疫组化染色，鉴定细胞的分化状态，并计算NF阳性细胞数的百分比及进行统计分析。结果：在含有rhBMP-2的培养液中，颅神经嵴细胞的形态由成纤维细胞样向神经元样的表型进行转变，可见较长的细胞突起出现。NF染色结果阳性，而GFAP，P75染色结果阴性。50ng/mL组中，NF的阳性细胞数比其它浓度组明显增多，并有显著性差异（P＜0．05）。结论：rhBMP-2可以诱导颅神经嵴细胞向神经元进行分化，50ng/mL是其中最有效的诱导浓度。     

Experimental analyses of the migration and cell lineage of avian neural crest cells

Neural crest cells migrate extensively during embryonic development and give rise to numerous and varied derivatives. Two important and unresolved questions are: what controls the migration and differentiation of these cells? This review summarizes recent experiments that address these issues. Specifically, this overview describes the pathways of neural crest cell migration, the functional importance of interactions between neural crest cells and the extracellular matrix for their movement, and studies on neural crest cell lineage in vivo by labelling individual precursor cells.     

重组人骨形成蛋白2诱导颅神经嵴细胞向肾上腺能神经元分化的研究

目的：研究重组人骨形成蛋白2(rhBMP2)诱导小鼠颅神经嵴细胞(CNCC)分化后所产生的神经元类型是否为肾上腺能神经元。方法：用50ng／ml rhBMP2诱导CNCC分化为神经元。提取诱导前后细胞内的总RNA,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测细胞中酪氨酸羟化酶(TH)和γ-氨基丁酸受体(GABAAR)亚单位的表达情况。结果：诱导前的CNCC中，TH和GABAAR亚单位均无mRNA水平的表达，诱导后二者均有表达，但表达的量均低于脑组织中的表达。结论：rhBMP2诱导CNCC后所分化的神经元为肾上腺能神经元，但在功能上可能弱于正常的肾上腺能神经元。     

In vitro models of cranial neural crest development toward toxicity tests: frog,mouse, and human

During craniofacial development, cranial neural crest (NC)‐derived mesenchymal cells migrate to pharyngeal arches and contribute extensively to neurons, Schwann cells, smooth muscle cells, osteoblasts, chondrocytes, and odontoblasts, forming maxillofacial structures. In vitro models using model organism cells, such as African clawed frog (Xenopus Laevis) and mouse (Mus Musculus), were developed to understand cellular and molecular mechanisms of cranial NC development. Recent studies using human embryonic stem cells (hESCs) and human‐induced pluripotent stem cells (hiPSCs) have enabled the generation of human NC cells (NCCs) in vitro to provide insight into human NC development. Understanding molecular mechanisms underlying craniofacial development will contribute to develop novel embryotoxicity tests and to decrease the incidence of drug‐induced congenital anomalies in the craniofacial region, such as cleft lip or cleft palate. Here, we review culture methods to derive NCCs in vitro from Xenopus presumptive ectoderm (animal caps), mouse embryonic stem cells (mESCs), and human pluripotent stem cells (hPSCs) and discuss how these in vitro models can be used to help clarify the mechanisms underlying craniofacial development and for developing embryotoxicity tests predicting drug‐induced congenital anomalies in the craniofacial region.