SUMO-1基因在肝癌中的表达及意义

目的 研究肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达及意义.方法 采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达.结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在肝癌传代细胞SMMC-7721、Hep3B、HepG2及肝癌标本中均明显高表达,而癌旁肝组织中SUMO-1基因明显低表达,肝癌组织和癌旁肝组织中SUMO-1表达差异有统计学意义(P<0.001).结论 SUMO-1基因在肝癌中高表达,SUMO-1可能为肝癌诊断和治疗中的一个靶点.     

SERPINA1在肝癌组织的表达及临床意义

目的 探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂A1(SERPINA1)在肝癌组织的表达及临床意义。方法 选取行手术切除的78例肝癌病例,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测肝癌组织和癌旁组织SERPINA1 mRNA和蛋白表达;免疫组织化学检测肝癌组织中SERPINA1表达。根据SERPINA1表达将肝癌患者分为SERPINA1高表达组和SERPINA1低表达组,分析SERPINA1表达与肝癌转移和预后的关系。采用RNA干扰技术干扰肝癌HepG2细胞中的SERPINA1表达,Transwell侵袭实验检测SERPINA1对肝癌细胞侵袭能力的影响,Western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和金属基质蛋白酶9(MMP-9)表达的变化。结果 患者肝癌组织中SERPINA1 mRNA和蛋白表达明显高于癌旁组织(t=4.872、5.811,P<0.05)。肝癌组织中SERPINA1阳性表达率明显高于癌旁组织(χ²=5.03,P<0.05),肝癌组织中SERP...     

KLF6基因在原发性肝癌中的表达

目的 通过研究潜在抑癌基因KLF6在肝细胞癌的表达,探讨KLF6基因作为肝癌抑制基因的可能性.方法 分别用荧光定量PCR、半定量RT-PCR和Western blot方法检测肝细胞癌及癌旁组织中KLF6基因在mRNA及蛋白水平的表达变化.结果 实时荧光定量PCR显示经过看家基因GAPDH标化的KLF6 cDNA 起始浓度,在配对癌旁组织约为肝癌组织的3倍.26例肝癌组织的KLF6 mRNA表达水平与配对癌旁组织相比,差异具有显著性意义(P<0.01).在肝癌细胞株HepG2及Hep3B,KLF6 mRNA的表达亦显著低于正常对照细胞L02(P<0.01).实验还发现,在肝细胞癌中KLF6蛋白表达变化与mRNA表达变化一致,即KLF6蛋白在癌组织及肝癌细胞的表达明显低于癌旁组织及L02(P<0.01).结论 KLF6表达下调可能是肝细胞癌的遗传学改变之一, KLF6基因可能为新的肝癌相关抑癌基因.     

肝型脂肪酸结合蛋白及血管内皮生长因子在原发性肝癌中的表达以及相互关系

目的 研究肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)与血管内皮生长因子(VEGF)在原发性肝癌中的表达变化,探讨二者在原发性肝癌发生、发展中的作用及相互关系.方法 采用RT-PCR及免疫组织化学技术,检测61例手术切除的病人肝癌组织及癌旁组织中L-FABP、VEGF的mRNA及蛋白质的表达水平,并做统计学处理.结果 RT-PCR结果显示,肝癌L-FABP以及VEGF在mRNA表达水平明显高于癌旁组织(L-FABP:0.97±0.12,0.83±0.14,t=5.21,P＜0.05;VEGF:0.92±0.11,0.59±0.15,t=11.79,P＜0.05).免疫组化染色发现,L-FABP阳性反应物主要存在于细胞浆,肝癌组阳性反应物灰度值明显高于癌旁对照组(肝癌组:92.73±7.67,癌旁对照组:82.83±6.90,t=7.44,P＜0.05),阳性细胞计数肝癌组高于癌旁对照组(肝癌组:92.18±4.44,癌旁对照组:84.52±6.43,t=5.94,P＜0.05);肝癌细胞胞浆有VEGF阳性反应物,在癌旁组织细胞则偶见VEGF阳性反应物,差异有显著性(肝癌组:88.69±5.56,癌旁对照组:77.61±5.93,t=8.72,P＜0.05).相关性分析表明L-FABP以及VEGF在肝癌组织与癌旁组织中在mRNA和蛋白质水平上均有正相关性(P＜0.05).结论 L-FABP、VEGF基因以及蛋白质在肝癌组织中表达均显著上调,并且二者具有正相关性,我们推测L-FABP在获取更多的脂肪酸的同时可以促进血管的增生,进而促进了肝癌的发展.     

原发性肝癌中AnnexinA2和P19的表达及意义

目的检测AnnexinA2和P19在原发性肝癌中的表达并探讨其在肝癌发生发展及转移中的作用。方法原发性肝癌62例,分别取癌组织及癌旁肝组织,采用IHC、RT-PCR及Western blot法分别检测AnnexinA2和P19 mRNA及蛋白的表达。结果肝癌组织中AnnexinA2 mRNA及蛋白表达量均明显高于癌旁肝组织(P<0.05),肝癌组织中P19 mRNA及蛋白表达量均明显低于癌旁肝组织(P<0.05);AnnexinA2、P19阳性表达与肝癌患者的性别、年龄和肿瘤大小均无关(P>0.05),而与乙肝表面抗原、组织分级和脉管内有无癌栓均有关(P<0.05)。结论联合检测AnnexinA2、P19 mRNA及蛋白在原发性肝癌中的表达水平,对判断其发生和转移有重要价值,可为临床治疗和判断预后提供依据。     

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中 Gli2、Cyclin D1 和 p21 的表达及其意义.方法 采用组织芯片和免疫组织化学方法以及 RT-PCR 检测了 44 对 HCC 和相应癌旁肝组织中 Gli2 蛋白和 mRNA 的表达情况,应用 Western blot检测了 Cyclin D1、p21 蛋白在两种组织中的表达差异.结果 免疫组化染色与 RT-PCR 示 Gli2 在 HCC 组织中的阳性表达率为 68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且 Gli2 与 HCC 的组织分化和门静脉转移相关.Cyclin D1 蛋白在 HCC 中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05).且与 Gli2 的表达呈正相关;而 p21 蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于 HCC,但与 Gli2 无明显相关性.结论 Gli2 过度激活可能通过上调 Cyelin D1 的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与 HCC 的发生和发展.     

The expression and clinical significance of MAGL in human primary hepatocellular Carcinoma

目的 探讨单酰甘油脂肪酶(monoacylglycerol lipase,MAGL)在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义.方法 应用Real-Time PCR、免疫组织化学和Western blot检测50例肝癌及癌旁组织、16例正常肝组织标本中MAGL的表达,比较MAGL在癌组织、癌旁组织及正常肝组织中表达的差异,并分析其与临床病理特征的关系.结果 (1)免疫组织化学检测结果显示,MAGL在癌组织主要表达于细胞核中,而在癌旁组织和正常组织主要表达在细胞质中;MAGL在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织三组中差异有统计学意义(P<0.05);MAGL在低分化肝癌中的表达阳性率明显高于高分化肝组织(P<0.05).(2)Real-Time PCR结果显示,高分化、低分化以及癌旁组织中MAGL的mRNA水平均较正常肝组织中显著增高(P<0.01);(3)Western blot结果显示,癌组织中MAGL蛋白呈强阳性表达,而癌旁组织和正常组织中呈弱阳性表达;高分化及低分化癌组织中MAGL的蛋白水平较癌旁组织和正常肝组织中显著增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 MAGL表达水平与原发性肝细胞肝癌的恶性表型呈正比,它可能在癌细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用.     

肝癌组织中FN和PTEN的表达及其临床意义

目的：探讨抑癌基因纤黏连蛋白（fibronectin,FN）、张力蛋白同源基因蛋白（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN）在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其临床意义。方法：收集215例HCC、癌旁组织和19例正常肝组织,用RT-PCR、Western blot、免疫组化SP法检测FN、PTEN mRNA和蛋白表达,分析FN和PTEN表达与HCC临床病理特征的关系。结果：肝癌组织中FN mRNA和蛋白表达均明显高于癌旁组织及正常肝组织（F=142.334,P=0.000）;而PTEN低于癌旁组织及正常肝组织,且在癌旁组织中的表达亦明显低于正常肝组织（F=80.861,P=0.000）。FN表达阳性患者组较阴性患者组生存时间短;而PTEN表达阳性患者较阴性患者生存时间长,且在1年以后两者生存期有统计学意义（P<0.05）。结论：HCC癌组织中 FN、PTEN在肝癌组织中存在异常表达,两者异常表达可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用。     

间隙连接基因Cx32在肝细胞癌中的表达意义

目的：探讨肝细胞癌（HCC）、癌旁组织及正常肝组织中细胞间隙连接Cx32mRNA与Cx32蛋白的表达及其在HCC发生中的意义和机制。方法：应用Western blot和RT-PCR分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在26例HCC组织、22例癌旁组织和9例正常肝组织中的表达。结果：Cx32蛋白在HCC中的表达明显低于正常肝组织和癌旁肝组织（P〈0.01）;Cx32mRNA在HCC、癌旁肝组织和正常肝组织均有一定水平,但三者之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：Cx32蛋白在肝癌中的表达下调可能是肝癌发生的重要环节,Cx32蛋白的减少与该基因在翻译或蛋白质的加工修饰过程中调控异常有关。     

原发性肝癌中AnnexinA2和P19的表达及意义

目的检测AnnexinA2和P19在原发性肝癌中的表达并探讨其在肝癌发生发展及转移中的作用。方法原发性肝癌62例,分别取癌组织及癌旁肝组织,采用IHC、RT-PCR及Western blot法分别检测AnnexinA2和P19 mRNA及蛋白的表达。结果肝癌组织中AnnexinA2 mRNA及蛋白表达量均明显高于癌旁肝组织（P〈0.05）,肝癌组织中P19 mRNA及蛋白表达量均明显低于癌旁肝组织（P〈0.05）;AnnexinA2、P19阳性表达与肝癌患者的性别、年龄和肿瘤大小均无关（P〉0.05）,而与乙肝表面抗原、组织分级和脉管内有无癌栓均有关（P〈0.05）。结论联合检测AnnexinA2、P19 mRNA及蛋白在原发性肝癌中的表达水平,对判断其发生和转移有重要价值,可为临床治疗和判断预后提供依据。     

SPP-1、GDF-15和CXCL-1在人小肝癌中表达的初步研究

目的:针对前期应用基因芯片(Affymetrix Rat Genome 230.2.0)筛选出的大鼠早期肝癌中高表达的人同源分泌蛋白基因SPP-1、GDF-15和CXCL-1,定量验证其在人小肝癌中mRNA和血清蛋白的表达水平,并探讨其临床应用价值。方法:应用实时定量PCR和双抗体夹心法ELISA,检测15例小肝癌及正常肝脏组织(癌旁正常肝脏组织)的mRNA水平及对应小肝癌血清和正常人血清中的蛋白表达水平。结果:①SPP-1、GDF-15和CXCL-1基因在小肝癌组织中较对照组表达显著上调,其差异有统计学意义(P<0.05);②SPP-1血清蛋白检测值与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);GDF-15血清蛋白含量在小肝癌组中表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小肝癌组中CXCL-1血清蛋白含量较正常对照组表达下调,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①NF-κB信号通路基因(CXCL-1)、P53信号通路基因(GDF-15)和SPP-1基因在人小肝癌组织中高表达,可能与肝癌发生的早期过程相关;②分泌性蛋白GDF-15和CXCL-1显示出小肝癌筛选诊断的潜在价值。     

HCCA1在原发性肝癌中的表达及其意义

目的 对近期克隆的新基因HCCA1与肝癌的相关性进行研究。方法 采用Northern杂交分析HCCA1 mRNA在肝癌中的表达,应用制备的特异性抗体检测其蛋白水平的表达,结合临床及病理学资料进行分析。结果 65例HCC患者在其癌组织中HCCA1 mRNA表达的检出率为90.8％（59／65）,其中91.5%(54/59)患者HCCA1 mRNA在肝癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,有13.8%(9/65)患者在癌旁组织中检测到较弱的HCCA1 mRNA的表达,86.2％（56／65）患者在癌旁组织中未检测到HCCA1 mRNA的,与病理指标的相关性分析表明,HCCA1 mRNA在Ⅲ-Ⅳ级肝癌中的表达水平明显高于Ⅰ-Ⅱ级肝癌,有门脉癌栓形成者的表达水平明显高于无癌栓形成者。免疫组织化学在蛋白水平上证实HCCA1在肝癌中的高表达。结论 HCCA1是一个新的肝癌相关基因,可能在肝癌的浸润和转移中起重要作用。     

MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达

目的 研究MTLC基因在肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达.方法 利用RT-PCR检测28例肝细胞癌及其相对应的癌旁肝组织中MTLC mRNA的表达.结果 28例肝细胞癌组织中,24例MTLC mRNA表达下调,其下调与肝细胞癌的分化程度无关.结论 本结果提示MTLC基因在肝细胞癌组织中表达下调,进一步说明MTLC表达降低可能与肿瘤发生发展关系密切.     

肝细胞癌p53及c-myc mRNA的表达

目的探讨p53及cmycmRNA表达在原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)发生发展过程中的作用。方法应用原位杂交方法检测63例HCC癌及其癌周组织中p53和cmyc基因mRNA的表达状况。结果p53基因mRNA在HCC中阳性表达率显著高于癌周组织(P<0.05),癌周组织中p53基因表达仅见于癌周增生结节,癌周肝硬化及正常肝组织内未见p53mRNA阳性表达;cmyc基因mRNA的阳性表达率在HCC与癌周增生结节中相近(P>0.05),且两者均显著高于癌周肝硬化和正常肝组织(分别为P<0.05,P<0.01);p53及cmyc基因mRNA表达均与HCC分化程度呈显著正相关,低分化组p53及cmyc基因的mRNA阳性表达率均显著高于高分化组(P均<0.05)。结论p53及cmyc基因mRNA过度表达可能参与了人肝细胞癌的发生发展过程。     

肝细胞癌中P27蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的　探讨肝细胞癌 (HCC)中P2 7蛋白表达与细胞凋亡的关系。方法　应用免疫组化S P法和DNA末端标记技术TUNEL法检测 86例HCC中P2 7蛋白的表达和细胞凋亡情况。结果　P2 7蛋白在肝癌组织中阳性率为 37.2 % (32 / 86 )。P2 7蛋白阳性组的细胞凋亡指数 (AI)均数为 6 .72‰ ,阴性组为 2 .83‰ ,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　HCC中P2 7蛋白表达与细胞凋亡有密切关系 ,促进细胞凋亡可能是其抑癌机制之一。     

Survivin和Caspase-3在肝细胞癌中表达的相关性及其生物学意义

目的研究Survivin和Caspase-3在肝细胞癌中表达的相关性及其生物学意义。方法利用组织芯片和免疫组织化学技术检测70例肝细胞癌及其癌旁肝组织、15例肝硬化及10例正常肝组织中Survivin和Caspase-3蛋白的表达。结果在HCC中Survivin蛋白的阳性率和阳性强度明显高于癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织（P〈0．01）；Survivin蛋白的表达强度与HCC的分化程度及肿瘤的大小明显相关（P〈0．01），分化愈差和肿瘤愈大，Survivin蛋白的表达愈强。Caspase-3蛋白在HCC中的表达率和表达强度明显低于癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织（P〈0．01），HCC分化愈差和肿瘤愈大，Caspase-3蛋白表达愈弱（P〈0．01）。统计学分析显示在Hcc、癌旁肝组织及肝硬化组织中survivin和caspase-3蛋白的表达强度呈明显负相关（P〈0．01）。结论在HCC的发生和发展过程中存在survivin蛋白表达水平的改变；Survivin蛋白可能通过抑制caspase-3蛋白的活性抑制细胞凋亡和促进细胞增殖．加速细胞的恶性转化和Hcc的发生。     

AIP1在肝细胞癌中的表达及其与EMT的相关性研究

目的:研究肌动蛋白相互作用蛋白1(AIP1)在人肝细胞癌(HCC)中的表达情况,并探究其表达与上皮间质转化(EMT)的相关性.方法:选取6个肝癌细胞系和正常的肝细胞系L02,以及40对HCC组织和配对的癌旁非瘤肝组织标本,通过qRT-PCR检测AIP1 mRNA的表达,western blot检测AIP1蛋白的表达,最后采用免疫组织化学染色(IHC)验证组织中AIP1的表达并分析其表达与EMT标志物的关系.结果:肝癌细胞系中AIP1的mRNA和蛋白表达水平都显著高于正常肝细胞系L02.同样在新鲜冰冻的组织标本中,肝癌组织中AIP1的mRNA和蛋白表达都显著高于相应的癌旁非瘤肝组织,且通过IHC得到了进一步的证实.最后,IHC结果发现AIP1的上调可能与肝癌的EMT现象相关.结论:AIP1在肝癌中的表达发生上调,并可能通过促进肝癌的EMT而促进肝癌的侵袭转移.     

HBx蛋白表达和ROS水平与肝细胞癌的关系及其意义

[摘要] 目的 探讨乙型肝炎病毒X （HBx）蛋白表达和活性氧（ROS）水平与肝细胞癌的关系及其意义。方法 选取肝细胞性肝癌（肝癌）标本42例为实验对象,每例标本均选取癌和癌旁组织;同时选取肝外伤或肝血管瘤正常肝组织标本20例为正常对照组。采用SABC法检测组织中的HBx蛋白,用流式细胞仪检测ROS水平。结果 HBx蛋白在正常肝组织中阴性;在癌及癌旁组织中的阳性例数分别为31例（73.8%）和35例（83.3%）,差异无显著性（P＞0.05）;肝癌组织细胞内ROS荧光强度明显高于癌旁组织和正常组织(P<0.05),癌旁组织细胞内ROS荧光强度明显高于正常组织（P<0.05）;癌组织和癌旁组织中HBx蛋白（+）者的ROS水平均明显高于HBx蛋白（-）者（P＜0.05）。结论 HBx蛋白的表达与ROS水平明显相关,HBx可能通过ROS的积累导致肝癌的发生。     

肝癌患者高表达神经细胞黏附分子 L1预后差

目的：神经细胞黏附分子 L1(L1 CAM)在肝癌中的表达及其与临床预后的关系。方法对110例肝癌样本用Western blot 及 qRT-PCR 方法检测 L1CAM 蛋白和 mRNA 的表达,分析了 L1CAM 表达与肝癌患者总体生存率的关系。结果肝癌组织 L1CAM 蛋白、mRNA 表达水平显著高于对应非肿瘤组织(P <0.01);在中-低分化肝癌患者 L1CAM 表达量高于高分化肝癌患者(P <0.01);L1CAM mRNA 的表达与肿瘤的分化程度、TNM 分期密切相关(P <0.05);采用 Kaplan-Meier 法生存分析,高表达 L1CAM 患者预后差(P <0.01)。结论L1CAM 与肝癌的发生、发展具有相关性,或许可作为评估肝癌患者预后的指标之一。