儿童原发性肾病综合征外周血TGF-β_1及IL-18mRNA检测的临床意义

目的探讨外周血TGF-β1及IL-18 mRNA表达水平在儿童原发性肾病综合征(PNS)的临床诊断分型及病情评估中的作用。方法采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对77例PNS患儿及30例健康对照儿童外周血单个核细胞(PBMC)中TGF-β1和IL-18 mRNA表达水平进行检测。结果激素敏感型肾病综合征(SSNS)患儿中,在激素治疗0(治疗前)、1、4周时,单纯型肾病患儿血PBMC中TGF-β1及IL-18 mRNA的水平低于肾炎型肾病患儿,差异有统计学意义(P均0.05)。在激素治疗0周时,SSNS患儿TGF-β1 mRNA的水平低于激素耐药型肾病综合征(SRNS)患儿,差异有统计学意义(P0.05)。随着激素治疗时间的延长,各组患儿TGF-β1 mRNA的水平均呈逐渐下降趋势。SRNS患儿中,在激素治疗0、1周时,单纯型肾病患儿血PBMC中IL-18 mRNA的表达水平低于肾炎型肾病患儿,差异有统计学意义(P0.05)。SSNS患儿中,活动期组TGF-β1及IL-18 mRNA水平均高于缓解组,差异有统计学意义(P0.01)。结论 PNS疾病初期,检测患儿血清PBMC中TGF-β1、IL-18 mRNA表达水平,对评估患儿疾病的活动情况、临床鉴别单纯型肾病与肾炎型肾病及临床早期预测激素耐药有一定意义。     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞糖皮质激素受体β表达

目的　探讨原发性肾病综合征 (NS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内糖皮质激素受体 β(GRβ)mR NA表达与激素 (GC)治疗效应的关系。方法　RT PCR法检测NS患儿PBMC糖皮质激素受体α(GRα)和GRβmRNA表达水平。结果　GC不敏感NS组PBMC内GRβmRNA表达显著高于GC敏感组 (P <0 .0 1) ;GC敏感性与GRβmRNA表达之间呈明显负相关 (r=2 2 .75　P <0 .0 1)。结论　NS患儿外周血PBMC内GRβmRNA不适当表达增加 ,可能是GC治疗不敏感的原因之一     

外周血转化生长因子-β_1白介素-18mRNA表达与儿童原发性肾病综合征激素耐药关系探讨

目的探讨检测外周血转化生长因子(TGF)-β1和白介素(IL)-18 mRNA表达水平对于儿童原发性肾病综合征(PNS)激素耐药的临床意义。方法对2012年11月至2013年10月天津市儿童医院PNS组患儿分别在激素治疗前、治疗1周、治疗4周取血,纳入正常对照组儿童取血。通过RT-PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中TGF-β1和IL-18mRNA的表达水平。结果在激素治疗前、1周、4周时,激素敏感型肾病综合征(SRNS)组TGF-β1和IL-18 m RNA的水平均高于激素耐药型肾病综合征(SSNS)组(P0.05)。正规激素治疗1周、4周后,SSNS组TGF-β1和IL-18 mRNA的水平随时间均逐渐下降(P0.05)。SRNS组经正规激素治疗1周时,TGF-β1mRNA的水平比激素治疗前降低(P0.05)。与治疗1周时比较,SRNS组治疗4周时,IL-18 m RNA降低(P0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析,PBMC中TGF-β1、IL-18 m RNA在诊断SRNS的ROC曲线下面积0.89和0.68。诊断临界点分别为0.44和0.13,其对应灵敏度分别为82.6%和65.2%,特异度分别为83.3%和72.2%。结论在儿童PNS开始激素治疗的1~4周,PBMC中TGF-β1、IL-18 mRNA的表达水平持续增高,提示PNS患儿有发生激素耐药的风险。在激素应用前,当PBMC中TGF-β1mRNA的表达量≥0.44时应警惕PNS患儿出现激素耐药。     

原发性肾病综合征患儿外周血GRα、GRβ的表达及临床意义

目的探讨糖皮质激素受体α(GRα)和β(GRβ)在原发性肾病综合征(PNS)中的作用及其介导耐药的可能机制。方法选择15例糖皮质激素(GC)敏感型PNS(SSNS)患儿和15例GC耐药型PNS(SRNS)患儿,以及10例健康对照儿童,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组外周血单个核细胞(PBMC)中GRα和GRβ mRNA的表达,并分析其与24 h尿蛋白定量(24 hUTP)及肾脏病理积分的关系。结果 PNS患儿PBMC中GRα和GRβ均有表达,并以GRα为主;三组间GRα mRNA的表达无差异(P>0.05);而SRNS组GRβ mRNA、GRα/GRβ水平均高于SSNS和对照组(P均<0.05)。GRβ mRNA的表达与24 hUTP和病理积分呈正相关(P<0.05),即GRβ mRNA的表达越高,病理积分越高,病理损伤越大。结论 GRβ mRNA可以作为监测PNS患儿病情以及预后的指标。针对SRNS患儿PBMC中GRβ升高,增加激素受体敏感性,有望为SRNS的治疗提供新的思路。     

原发性肾病综合征患儿血清白细胞介素-13与激素耐药的相关性

目的 探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿血清IL-13蛋白水平及外周血单个核细胞(PBMC) IL-13 mRNA表达与激素耐药的相关性,以期阐明IL-13在PNS激素耐药中的可能机制.方法 分别采用ELISA及RT-PCR法测定40例健康儿童及39例激素敏感型肾病综合征(SSNS)、27例激素耐药型肾病综合征(SRNS)患儿血清IL-13蛋白水平及PBMC中IL-13 mRNA表达水平.采用双缩脲法检测上述患儿24 h尿蛋白.全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(Chol)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、总蛋白(TP)、清蛋白(Alb).采用SPSS 13.0软件比较各组间差异.结果 1.与健康对照组比较,治疗前SSNS、SRNS患儿血清IL-13蛋白水平及PBMC中IL-13 mRNA表达均明显增高(Pa<0.05);与SSNS患儿比较,SRNS患儿血清IL-13蛋白水平及PBMC中IL-13 mRNA 表达均增高(Pa<0.05);SSNS、SRNS患儿血清Alb、TP、Chol、TG水平及24 h尿蛋白量比较均无统计学意义(Pa>0.05),SRNS患儿血清中LDL水平较SSNS患儿高(P<0.05).2.经正规激素治疗8周后,SRNS组血清IL-13蛋白水平及PBMC中IL-13 mRNA表达均高于SSNS组及健康对照组(Pa＜0.05);SSNS组血清IL-13蛋白水平及PBMC中IL-13 mRNA表达与健康对照组比较均无显著性差异(Pa>0.05).3.治疗后SSNS组IL-13蛋白水平及PBMC中IL-13 mRNA 表达量较治疗前均明显下降(Pa<0.05).而治疗前、后 SRNS组IL-13蛋白水平及PBMC mRNA 表达量均无明显变化(Pa>0.05).结论 PNS 激素耐药与 IL-13蛋白水平及PBMC mRNA表达明显升高有关,IL-13的过度分泌在SRNS的发生、发展中发挥一定作用.调节血清IL-13蛋白水平及表达可能是治疗SRNS的新途径.     

多药耐药基因在肾病综合征患儿外周血单个核细胞中的表达研究

目的 探讨肾病综合征(NS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中多药耐药基因(MDR1)的表达与不同激素(GC)效应患儿的关系.方法 收集2007年5月-2008年2月收治的原发特发性肾病(PNS)患儿47例,按照GC对患儿的效应分为GC敏感组(SSNS)、GC耐药组(SRNS)两组,根据GC敏感患儿临床疗效又分为非频反复组(NFR)和频反复(FR)及GC依赖(SD)组(简称FR&SD)两组,采用荧光定量PCR方法检测NS患儿的外周血中PBMC中MDR1 mRNA表达水平,以12例健康正常儿童为对照.结果 GC治疗后NS患儿PBMC中MDR1 mRNA的表达均高于正常对照组,而SRNS组PBMC中MDR1 mRNA的表达高于SSNS组;且FR&SD组患儿MDR1 mRNA的表达量要比NFR更高;SSNS患儿MDR1 mRNA的表达与缓解时间、复发次数、病程呈正相关.尤其是FR&SD组患儿MDR1 mRNA的表达与其缓解时间呈正相关(r=0.796,P<0.01).结论 GC治疗后NS患儿MDR1的高表达与GC耐药、GC依赖和复发有关.     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞内GR α和GR β表达的意义

目的　探讨原发性肾病综合征 (INS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内两种糖皮质激素受体 (GR)亚型———GRα和GRβ表达水平与糖皮质激素治疗效应之间的关系。方法　应用免疫细胞化学方法、WesternBlot和凝胶电泳迁移率变化方法 (EMSA) ,分别检测不同激素效应INS患儿和正常对照组儿童GRα和GRβ免疫阳性的PBMC数目、PBMC细胞内GRα和GRβ蛋白质表达和GR DNA连接活性。结果　 (1)INS患儿PBMC内同时有GRα和GRβ的表达 ,并以GRα表达为主。 (2 )激素敏感型INS患儿GRα阳性的PBMC细胞数为 (5 0 0± 4 5 ) ,激素抵抗型INS患儿为 (4 7 0± 5 5 ) ,两组相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;而激素抵抗型INS患儿GRβ阳性PBMC细胞数 (2 2 0± 3 5 )明显高于激素敏感型INS患儿 (7 5± 2 0 ) (P <0 0 1)。 (3)WesternBlot实验结果显示 ,激素抵抗型INS患儿PBMC核内GRα蛋白量明显低于激素敏感型INS患儿 ,而GRβ蛋白量却明显高于激素敏感型患儿。(4 )激素抵抗型INS患儿的GR DNA连接能力明显低于激素敏感型患儿。结论　INS患儿PBMC内GRα和GRβ表达比例失调、GRβ表达亢进可能与糖皮质激素抵抗的发生有关     

原发性肾病综合征患儿外周血单个核细胞膜P-糖蛋白170表达的意义

目的 探讨P-糖蛋白(P-gp)170在肾病综合征(NS)患儿糖皮质激素(GC)耐药中的作用及其介导耐药的可能机制.方法 选取24例初发未应用GC的NS患儿为病例组,根据随访结果将其分成GC敏感型NS组 (SSNS组)和GC耐药型NS组(SRNS组).10名健康体检儿童为健康对照组.将健康对照组和病例组的外周血单个核细胞(PBMC)均予地塞米松(Dex)处理,培养后分别在0 h、12 h、24 h、36 h不同时间点进行检测,同时以不加Dex作为空白对照,Western blot法检测SSNS组和SRNS组患儿PBMC膜P-gp170的表达量,并结合临床资料进行比较.结果 1.SSNS组空白对照各时间点PBMC膜表面P-gp170表达量比较差异无统计学意义(P>0.05),与健康对照组空白对照比较,该组各时间点P-gp170的表达量较高(P<0.05);Dex处理SSNS组患儿PBMC膜表面P-gp170表达随培养时间延长而渐降低(P<0.05),与Dex处理健康对照组比较,各时间点P-gp170的表达量较高(P<0.05);与SSNS组患儿空白对照比较,Dex处理SSNS组患儿PBMC膜表面各时间点P-gp170表达量较高(P<0.05).2.SRNS组患儿空白对照PBMC膜表面P-gp170表达随培养时间不同而无明显变化,不同时间点比较差异无统计学意义(P>0.05),与健康对照组空白对照比较,该组表达量升高(P<0.05),Dex处理SRNS组患儿PBMC膜表面P-gp170表达随培养时间的不同而无变化,各时间点P-gp170的表达量差异无统计学意义(P>0.05);与SRNS组患儿比较,SSNS组患儿空白对照各时间点P-gp170表达均较低(Pa<0.05),Dex处理SSNS组患儿各时间点P-gp170表达均较低(Pa<0.05);与SRNS组患儿空白对照比较,Dex处理SRNS组患儿各时间点PBMC膜表面P-gp170表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 1.健康儿童和NS患儿PBMC均有P-gp170表达,NS状态下可有P-gp170表达增高.2.SRNS患儿 PBMC膜P-gp170表达增高可能与GC耐药有关,P-gp170表达增高可能介导了部分NS患儿GC耐药.3.NS患儿PBMC膜P-gp170表达增高与GC应用有关,GC可能参与诱导P-gp170表达变化.     

糖皮质激素对原发性肾病综合征患儿血清细胞因子的影响

目的探讨糖皮质激素(激素)对原发性肾病综合征(PNS)患儿血清IL-1-、6、转化生长因子-β1(TGF-β1)和TNF-α的影响。方法将PNS患儿25例分为激素治疗前和治疗后2组,比较3种不同病理类型血清细胞因子水平,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测其血清IL-1-、6、TGF-β1及TNF-α水平。结果激素治疗前后PNS患儿血清IL-1-、6、TGF-β1、TNF-α水平差异有显著性(P<0.01)。微小病变型肾病(MCD)、膜性增生性肾小球肾炎(MsPGN)、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)3种不同病理类型血清IL-1-、6、TNF-α水平治疗前后差异无显著性(P>0.05);MCD治疗前后血清TGF-β1水平明显低于MsPNG、FSGS(P<0.01),治疗前MsPNG血清TGF-β1水平与FSGS差异无显著性(P>0.05),治疗后FSGS血清TGF-β1水平高于MsP-NG(P<0.01)。结论激素对PNS患儿血清多种细胞因子有抑制作用;不同病理类型PNS TGF-β1表达水平不同;FSGS表达最高,对激素治疗反应最差。     

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目的探讨糖皮质激素受体α(GRα)和糖皮质激素受体β(GRβ)在原发性血小板减少性紫癜(ITP)糖皮质激素抵抗中的分子生物学机制。方法选择2003-01—2005-12在深圳市儿童医院血液内科住院的ITP患儿30例,将患儿分为2组:激素敏感组(18例)和激素抵抗组(12例),另选10例正常儿童作对照。应用RT-PCR法检测激素敏感组、激素抵抗组ITP患儿及10例正常儿童外周血单个核细胞GRα和GRβmRNA的表达水平,以探讨GRα和GRβ与ITP糖皮质激素抵抗的关系。结果(1)对照组、激素敏感组和激素抵抗组3组之间GRαmRNA的表达[分别为(0.75±0.17)、(0.70±0.15)、(0.73±0.16)]差异无显著性,P>0.05;(2)对照组和激素敏感组的GRβmRNA[分别为(0.13±0.03)、(0.15±0.04)]差异亦无显著性,P>0.05,但激素抵抗组的GRβmRNA水平[为(0.39±0.12)]显著高于对照组和激素敏感组,P<0.01,差异具有统计学意义。结论ITP患儿糖皮质激素抵抗可能与GRβmRNA的表达亢进有关。     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞内GRα和GRβ表达的意义

目的探讨原发性肾病综合征(INS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)内两种糖皮质激素受体(GR)亚型--GRα和GRβ表达水平与糖皮质激素治疗效应之间的关系.方法应用免疫细胞化学方法、WesternBlot和凝胶电泳迁移率变化方法(EMSA),分别检测不同激素效应INS患儿和正常对照组儿童GRα和GRβ免疫阳性的PBMC数目、PBMC细胞内GRα和GRβ蛋白质表达和GR-DNA连接活性.结果(1)INS患儿PBMC内同时有GRα和GRβ的表达,并以GRα表达为主.(2)激素敏感型INS患儿GRα阳性的PBMC细胞数为(50.0±4.5),激素抵抗型INS患儿为(47.0±5.5),两组相比差异无显著意义(P>0.05);而激素抵抗型INS患儿GRβ阳性PBMC细胞数(22.0±3.5)明显高于激素敏感型INS患儿(7.5±2.0)(P<0.01).(3)WesternBlot实验结果显示,激素抵抗型INS患儿PBMC核内GRα蛋白量明显低于激素敏感型INS患儿,而GRβ蛋白量却明显高于激素敏感型患儿.(4)激素抵抗型INS患儿的GR-DNA连接能力明显低于激素敏感型患儿.结论INS患儿PBMC内GRα和GRβ表达比例失调、GRβ表达亢进可能与糖皮质激素抵抗的发生有关.     

肾病综合征患儿肾组织原位血管紧张素转换酶mRNA表达与激素疗效关系的研究

目的　探讨肾病综合征 (NS)患儿肾脏局部肾素 血管紧张素系统 (RAS)、激素耐药、肾脏病理损害程度之间的关系 ,阐述激素耐药的部分机制。方法　 85例原发性NS患儿按激素敏感型NS(SSNS)、激素依赖型NS(SDNS)、激素耐药型NS(SRNS)分成 3组 ,选 6例行肾切除的肾肿瘤患儿的正常肾组织作为对照组。采用原位杂交的方法检测 4组患儿肾脏原位血管紧张素转换酶 (ACE)mRNA的表达水平 ;评分法半定量评估肾脏的病理损害程度。分析NS患儿肾组织ACEmRNA表达水平、激素反应性、肾脏的病理损害程度间的关系。结果　①在肾小球和小管间质区域的ACEmRNA表达水平均为SRNS组 >SSNS组 >对照组 (P <0 0 1)。②SRNS、SDNS、SSNS肾小球病理损害的评分分别为 :6 6 7± 2 4 3,4 6 8± 2 30 ,4 4 2± 2 87(P <0 0 1) ;小管间质病理损害评分分别为 :10 4 8± 3 77,7 2 0± 2 79,4 2 5± 1 4 8(P <0 0 1)。③肾组织ACEmRNA的表达与肾小球和小管间质病理损害程度呈正相关 ,相关系数分别为 0 4 82 ,0 85。结论　SRNS型NS患儿肾组织ACEmRNA表达增强 ,并且与肾脏的病理损害程度密切相关     

原发性肾病综合征患儿外周血单个核细胞多药耐药基因1及P-糖蛋白170的表达

目的检测原发性肾病综合征(PNS)患儿不同时间点外周血单个核细胞(PBMC)多药耐药基因1(MDR1)及其产物P-糖蛋白170(P-gp170)的表达,探讨MDR1及P-gp170在PNS患儿糖皮质激素(GC)耐药中的作用及介导耐药的可能机制。方法选择在苏州大学附属儿童医院住院的30例PNS患儿为研究对象,根据随访结果分为2组:激素耐药型肾病综合征(SRNS)组和激素敏感型肾病综合征(SSNS)组,每组各15例。选取10名健康体检儿童作为健康对照组。分3个时间点采集其外周血标本:发病初未用GC时,足量GC治疗4周后,病情缓解停用GC 2个月后或病情不缓解但泼尼松减量至<0.5 mg.kg-1.d-1时。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PNS患儿不同时间点PBMC MDR1 mRNA的表达。流式细胞仪(FCM)检测PNS患儿不同时间点PBMC P-gp170的表达水平。结果健康对照组儿童和PNS患儿PBMC均有MDR1 mRNA及P-gp170表达。PBMC MDR1 mRNA与P-gp170的表达呈高度正相关(r=0.853,P<0.05)。SRNS组患儿3个时间点的PBMC MDR1 mRNA及...     

小儿肾脏病研究室肾病综合征患儿外周血单个核细胞内GR α和GR β表达的意义

目的 探讨原发性肾病综合征(INS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)内两种糖皮质激素受体(GR)亚型--GR α和GR β表达水平与糖皮质激素治疗效应之间的关系. 方法 应用免疫细胞化学方法 、 Western Blot和凝胶电泳迁移率变化方法 (EMSA),分别检测不同激素效应INS患儿和正常对照组儿童GR α和GR β免疫阳性的PBMC数目、PBMC细胞内GR α和GR β蛋白质表达和GR-DNA连接活性. 结果 (1) INS患儿PBMC内同时有GR α和GR β的表达,并以GR α表达为主.(2) 激素敏感型INS患儿GR α阳性的PBMC细胞数为(50.0±4.5),激素抵抗型INS患儿为(47.0±5.5),两组相比差异无显著意义(P>0.05);而激素抵抗型INS患儿GR β阳性PBMC细胞数(22.0±3.5)明显高于激素敏感型INS患儿(7.5±2.0)(P<0.01).(3) Western Blot实验结果显示,激素抵抗型INS患儿PBMC核内GR α蛋白量明显低于激素敏感型INS患儿,而GR β蛋白量却明显高于激素敏感型患儿.(4) 激素抵抗型INS患儿的GR-DNA连接能力明显低于激素敏感型患儿. 结论 INS患儿PBMC内GR α和GR β表达比例失调、GR β表达亢进可能与糖皮质激素抵抗的发生有关.     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞转化生长因子β的变化及其意义

目的探讨转化生长因子β(TGF β)在小儿原发性肾病综合征(INS)中的变化及其意义.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及原位逆转录多聚酶链反应(In Situ-RT PCR)方法,分别检测了30例健康儿童和35例原发性肾病综合征患儿活动期(35例)与缓解期(25例)外周血单个核细胞(PBMC)在内毒素(LPS)刺激下TGF β蛋白水平和TGF β mRNA表达的变化;同时观察激素治疗中PBMC的TGF β的变化.结果 (1) INS (单纯型和肾炎型)患儿活动期TGF β蛋白水平 (247±26)ng/L和TGF βmRNA表达(0.57±0.18)明显高于缓解期和对照组(P均<0.01);而缓解期TGF β蛋白水平(125±16)ng/L和TGF β mRNA表达(0.30±0.12)与对照组比较差异也有显著性 (P＜0.05).(2) INS活动期肾炎型与单纯型比较,TGF β蛋白水平[(275±26 )ng/L、(220±18)ng/L]差异有显著性(t=6.45,P＜0.01),mRNA表达(0.58±0.15、0.55±0.16)差异无显著性;肾炎型和单纯型与对照组比较差异均有显著性(P均<0.01).(3)激素敏感型治疗后TGF β蛋白水平和mRNA表达明显低于治疗前(P＜0.01);而激素耐药型则变化不明显(P＞0.05);除治疗前mRNA两型差异无显著性外,激素耐药型无论是治疗前还是治疗后都明显高于激素敏感型(P均<0.01).结论 TGF β在INS的发病机制中发挥着重要作用,测定PBMC中TGF β蛋白水平的变化及mRNA表达可作为观察病情活动状态的一个免疫学指标,具有一定的临床意义.     

白细胞介素18在激素耐药型肾病综合征外周血单个核细胞中的表达及意义

目的：通过研究原发性肾病综合征（PNS）患儿血清白细胞介素18（IL-18）水平及其在外周血单个核细胞（PBMC）中的表达,探讨IL-18在激素耐药型肾病综合征（SRNS）发生、发展中的可能机制。方法：采用ELISA法及RT-PCR法测定40例正常儿童及39例激素敏感型肾病综合征（SSNS）、27例 SRNS血清IL-18蛋白水平及PBMC mRNA表达。双缩脲法检测24 h尿蛋白量。全自动生化分析仪检测血清总胆固醇（T-Ch）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白(LDL)、总蛋白（TP）及白蛋白（Alb）含量。结果：①与正常对照组相比,治疗前SSNS、SRNS血清IL-18蛋白水平及PBMC IL-18 mRNA表达均明显增高（P<0.05）;与SSNS相比,SRNS上述指标均增高（P<0.05）;SSNS及SRNS之间血清Alb,TP,T-Ch,TG水平及 24 h 尿蛋白量差异无显著性（P>0.05）,SRNS血清LDL水平较SSNS高（P<0.05）。②治疗后SRNS组血清IL-18蛋白水平及PBMC IL-18 mRNA表达均高于SSNS组及正常对照组（P<0.05）;SSNS 组与正常对照组比较差异无显著性（P>0.05）。③治疗后SSNS组血清IL-18蛋白水平及PBMC IL-18 mRNA表达较治疗前明显下降（P<0.05）。而SRNS 组治疗前、后无明显变化（P>0.05）。结论：PNS 激素耐药与 IL-18血清水平及PBMC mRNA表达明显升高有关,IL-18 的过度分泌在SRNS的发生发展中发挥一定作用。［中国当代儿科杂志,2009,11（5）：337-340］     

肾病综合征患儿肾组织P-糖蛋白170表达的研究

目的检测P-糖蛋白170(P-gp170)mRNA及蛋白在糖皮质激素(GC)敏感和耐药型肾病综合征(NS)患儿肾组织中的分布、表达变化,初探NS患儿肾组织P-gp170表达在GC耐药中的作用。方法2005-09—2006-04在中南大学湘雅二医院住院的初发特发性肾病(INS)患儿34例,按照GC对患儿的疗效分为GC敏感组(SSNS)和GC耐药组(SRNS),分别以免疫组织化学和原位杂交方法检测患儿肾组织P-gp170蛋白及mRNA的表达,6例正常肾组织为对照。结果正常对照组肾组织及NS患儿肾组织中均有P-gp170蛋白及mRNA的表达;正常对照组及NS患儿肾小球均无P-gp170蛋白及mRNA的表达,其蛋白及mRNA均主要表达于肾小管及肾间质,肾小管近端表达多于远端(P<0.01);免疫组化和原位杂交结果均显示SSNS阳性信号表达多于对照组,而SRNS又高于SSNS(P均<0.01);P-gp170蛋白与mRNA的表达成显著正相关(r=0.87,P<0.05)。结论肾脏本身即可合成、分泌P-gp170;P-gp170在正常肾小管的表达可能与某些代谢物质的转运有关;NS患儿肾小管P-gp170表达增高可能与NS本身的状态有关,或者是GC通过诱导P-gp170的表达增高而导致GC耐药;P-gp170表达上调可能为GC耐药的机制之一;检测肾组织P-gp170的表达水平有助于预测NS患儿GC反应差异性。     

血小板生成素和转化生长因子-β_1在儿童血液病中的研究

目的探讨血液病儿童血清和骨髓上清液中TGF-β1、TPO的水平及其临床意义。方法采用ELISA法测定急性特发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病患儿血清及骨髓上清液中TGF-β1、TPO水平。结果ITP患儿血清TPO水平高于对照组,但差异无显著性(P>0.05),TGF-β1水平明显高于对照组(P<0.01),骨髓上清液中TPO和TGF-β1水平均高于对照组(P均<0.01);AA患儿血清和骨髓TPO水平显著增高,与健康对照组比较具有显著性差异(P<0.01),ALL患儿TPO水平虽低于AA组,但仍明显高于对照组(P<0.01);AA组血清TGF-β1水平与正常对照组比较无显著性差异,ALL患儿血清及骨髓上清液中TGF-β1水平较对照组显著降低(P<0.01),CR后血清中和骨髓中TGF-β1水平上升,CR前后TGF-β1水平比较具有显著性差异(P<0.01)。结论TGF-β1、TPO在儿童血液病的病理生理过程中发挥重要作用,动态检测TGF-β1水平可为ALL患儿病情评估、预后估计提供客观依据。     

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目的 观察原发性肾病综合征(PNS)患儿泼尼松治疗前后CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)的变化,阐明肾上腺糖皮质激素治疗儿童PNS的免疫机制.方法 选择2004-2007年在深圳市儿童医院住院治疗的初发PNS患)L42例,其中激素敏感型32例,激素耐药型10例.同期25例健康体检儿童作为对照组.流式细胞术检测泼尼松治疗前后外周血CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD4+CD25+Tr的比例,荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测泼尼松治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)叉头型基因P3(Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTL-4)和糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)基因mRNA的表达.结果 与对照组比较,PNS患儿外周血CD3+CD4+CD8-T细胞、CD3+CD4-CD8+T细胞、CD4+CD25+Tr比例无明显改变(P>0.05).激素敏感型PNS患儿CD4+CD25+Tr比例在泼尼松治疗后明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);激素耐药型PNS患儿CD4+CD25+Tr比例在泼尼松治疗前后无明显改变(P>0.05).激素敏感型PNS患儿在泼尼松治疗后PBMC细胞Foxp3、CTLA-4和GITR基因mRNA的表达明显增高;而激素耐药型PNS患儿泼尼松治疗前后Foxp3、CTLA-4基因表达无明显改变,仅GITR表达明显增高.结论 泼尼松等肾上腺糖皮质激素类药物可通过上调激素敏感型PNS患儿CD4+CD25+调节性T细胞的表达发挥免疫治疗作用.     

血小板生成素和转化生长因子-β1在儿童血液病中的研究

目的 探讨血液病儿童血清和骨髓上清液中TGF-β1、TPO的水平及其临床意义.方法 采用ELISA法测定急性特发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血、急性淋巴细胞白血病患儿血清及骨髓上清液中TGF-β1、TPO水平.结果 ITP患儿血清TPO水平高于对照组,但差异无显著性（P＞0.05）,TGF-β1水平明显高于对照组（P＜0.01）,骨髓上清液中TPO和TGF-β1水平均高于对照组（P均＜0.01）;AA患儿血清和骨髓TP0水平显著增高,与健康对照组比较具有显著性差异（P＜0.01）,ALL患儿TPO水平虽低于AA组,但仍明显高于对照组（P＜0.01）;AA组血清TGF-β1水平与正常对照组比较无显著性差异,ALL患儿血清及骨髓上清液中TGF-β1水平较对照组显著降低（P＜0.01）,CR后血清中和骨髓中TGF-β1水平上升,CR前后TGF-β1水平比较具有显著性差异（P＜0.01）.结论 TGF-β1、TP0在儿童血液病的病理生理过程中发挥重要作用,动态检测TGF-β1水平可为ALL患儿病情评估、预后估计提供客观依据.