实验性脊髓损伤后N—甲基—D—天门冬氨酸受体的变化及其意义

兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）已被证明在中枢神经系统的创伤中具有神经毒性作用。为进一步揭示其受体机制，本实验用大鼠脊髓突触质膜作受体制剂，［＾３Ｈ］ＣＰＰ作标记配基，建立体外Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体分析的方法，并以Ａｌｌｅｎ脊髓损伤模型分析了脊髓损伤后ＮＭＤＡ受体的改变。结果表明脊髓ＮＭＤＡ受体亲和力（Ｋｄ）为３．５１±０．２６ｎＭ，最大结合数量为６６２．８２±４７．５９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白     

脊髓损伤后N—甲基—D—天门冬氨酸受体及其mRNA的变化

脊髓损伤后Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸受体及其ｍＲＮＡ的变化叶晓健李明李家顺赵定麟贾连顺⒇近年来的研究已经表明脊髓损伤触发了一系列相关的化学、代谢和生理改变，最终导致迟发性组织坏死〔１〕，而创伤后兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）的释放及其与相应受体反应似乎是这些继...     

实验性脊髓损伤后腺苷A1受体的变化

目的：观察大鼠脊髓损伤后腺苷A1受体的变化。方法：腹侧压迫法造成T13脊髓中度损伤,分别于伤前,伤后10min,1h,4h,24h取伤段脊髓制备成膜受体,采用特异性A1受体放射性配基（[3H]CHA)结合,Scatchard分析法测定A1受体的最大结合数（Bmax)及解离常数Kd值,结果：脊髓损伤后,代表A1受体亲和力的解离常数Kd值无明显改变,而最大结合数在伤后1h显著升高,4h达最高峰,24h仍显著高于伤前水平,结论：脊髓损伤后A1受体结合数的增高可能是脊髓损伤后的一种保护反应。     

转基因细胞移植对损伤脊髓天门冬氨酸受体的影响

[目的]研究腺病毒介导的脑源性神经生长因子(brainderivedneurotrophinfactor,AxCABDNF)转基因细胞移植和大剂量甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓组织N甲基D天门冬氨酸(NMDA)受体的影响。将成年大鼠分为4组,A组单纯脊髓损伤组;B组脊髓损伤+AxCABDNF基因转染的成肌细胞移植组;C组脊髓损伤+甲基强的松龙组;D组脊髓损伤+细胞移植+甲基强的松龙组。应用后1、3、7、14d,采用[3H]标记的地卓西平马来酸盐([3H]MK801)放射性配基分析法检测大鼠损伤后脊髓NMDA受体的变化。[结果]发现各组[3H]MK801放射性配基分析最大结合容量都有不同程度的减少,其减少程度顺序是A组>B组>C组>D组。表明应用甲基强的松龙(MP)和BDNF转基因细胞移植可以通过影响脊髓NMDA受体减轻脊髓继发性损伤。     

急性脊髓损伤患者外周血白细胞糖皮质激素受体的变化及其意义

目的：探讨急性脊髓损伤患者外周血白细胞糖皮质激素受体的变化及其意义。方法：采用放射配体结合法测定２０例急性脊髓损伤患者和２３例正常成人外周血白细胞上糖皮质激素受体结合位点。结果：急性脊髓损伤患者受体结合位点数明显低于正常成人组。结论：急性脊髓损伤患者外周血白细胞上糖皮质激素受体结合位点数明显减少,提示该受体可能在大剂量糖皮质激素治疗过程中起一定作用。     

N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后大鼠损伤脊髓凋亡的影响

[目的]探讨大鼠脊髓损伤后N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801胚胎脊髓移植后对大鼠脊髓细胞凋亡的影响.[方法]将动物分为大鼠脊髓半切洞损伤后,分为应用胚胎脊髓和MK-801治疗组(A组),大鼠脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组(B组),单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组(C组).手术后1、3、7、14 d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测(TUNEL),以及Bcl-2蛋白免疫反应表达的测定(免疫组化法).采用计算机图像分析技术,进行定量分析.[结果]A、B、C三组中均发现凋亡细胞及BCL-2蛋白免疫反应阳性细胞,图像分析发现,细胞凋亡率为:C＞B＞A,Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为:A＞B＞C.[结论]大鼠脊髓损伤后应用NMDA受体拮抗剂MK-801和胚胎脊髓移植能抑制脊髓损伤后细胞凋亡.     

大鼠脊髓损伤后兴奋性氨基酸的变化及其对血流量的影响

采用Ａｌｌｅｎ＇ｓ打击法复制大鼠脊髓损伤（ＳＣＩ）模型，氨基酸微量检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）即谷氨酸（Ｇｌｕ）、天冬氨酸（Ａｓｐ）含量和脊髓灰质血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射ＥＡＡ受体激动剂Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）对ＳＣＢＦ的影响，探讨ＥＡＡ在ＳＣＩ中的作用。结果发现：ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降，２ｈ较１ｈ略有回升，４～８ｈ又进一步下降，第二次下降与第一次下降相差显著。伤后脊髓蛛网膜下腔注射ＮＭＤＡ明显加剧ＳＣＩ后脊髓缺血。Ｇｌｕ、Ａｓｐ伤后１０ｍｉｎ均明显升高，１～２４ｈＡｓｐ较对照组明显降低，８ｈ较２ｈ略有回升；Ｇｌｕ在伤后１０ｍｉｎ有所下降，但仍高于对照组，４ｈ、８ｈ较２ｈ略增加。ＥＡＡ变化与ＳＣＢＦ呈显著负相关。结果提示ＳＣＩ后ＥＡＡ的过度释放是ＳＣＩ后继发损伤的重要因素。     

急性脊髓损伤后促红细胞生成素受体的表达及其意义

目的探讨急性脊髓损伤后促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPO-R)在脊髓内的表达。方法Wistar大鼠69只,随机分为三组：正常对照组(5只,不手术,作为后两组的对照)、假手术组(仅行椎板切除术)和脊髓损伤组。根据术后时间点不同后两组又分为1h、6h、12h、24h、3d、7d、14d和28d八个亚组(每组4只)。采用RT-PCR、Western blot免疫印迹法和免疫组织化学染色法检测EPO及EPO-R的表达。结果正常对照组、假手术组和脊髓损伤组在各时相点均未发现有EPO表达。正常对照组、假手术组未发现EPO-R的表达,脊髓损伤组在伤后1h未见EPO-R mRNA和蛋白的表达,6h开始有表达,12h有明显的表达,至24h达到高峰,3d和7d时仍维持在高表达水平,未见减弱,14d开始下降,至28d时仍有EPO-R蛋白的表达。免疫组化显示EPO-R阳性细胞主要位于神经元、少突胶质细胞、血管内皮细胞和脊髓中央管内室管膜细胞。结论大鼠急性脊髓损伤后脊髓内大量表达EPO-R,这是外源性EPO与EPO-R结合产生神经保护作用的分子基础。     

家兔脊髓缺血损伤后谷氨酸受体活性变化

目的：探讨谷氨酸（Ｇｌｕ）及其受体（ＧｌｕＲ）在脊髓缺血过程中的量变特征在继发损伤中的作用及２氨基膦酸基戊酸（ＡＰＶ）的治疗作用。方法：选用体重２～２５ｋｇ的日本大耳白家兔７０只,用腰动脉分支阻断法建立脊髓缺血模型,用放射配基结合分析法检测脊髓缺血损伤后０５～２４ｈ期间及在缺血６０ｍｉｎ时用ＡＰＶ处理后脊髓神经细胞膜的ＧｌｕＲ活性（Ｂｍａｘ,ＫＤ）。结果：缺血６０ｍｉｎ后ＧｌｕＲ的最大结合量降低,亲和力升高,开始再灌流后最大结合量迅速升高,至２ｈ到达高峰,之后迅速下降,至再灌流４ｈ降至最低,此后缓慢回升,而亲和力在再灌流０５ｈ时继续升高,然后下降,再灌流２ｈ降至最低,此后趋势与最大结合量变化相反。ＡＰＶ在再流灌早期使受体活性增高,再灌流４ｈ后无显著性差异。结论：Ｇｌｕ通过其受体中介参与了脊髓缺血再灌流损伤,但在缺血再灌流过程中ＧｌｕＲ活性的变化可能具有不同的作用效应,同时也说明脊髓继发性损伤机制单以Ｇｌｕ兴奋性损伤是解释不了的。     

大鼠脊髓损伤后神经营养素及受体表达的变化

目的:观察神经营养素及受体在脊髓损伤后的表达变化。方法:SD大鼠30只,设正常组、假伤组、脊髓损伤组。Allen's法复制5g×10cm脊髓损伤模型。用免疫组化和免疫电镜方法观察各组神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)及其受体TrkA,TrkB,TrkC表达的变化。结果:正常大鼠脊髓神经营养素及其受体表达较少,损伤后表达明显增加。NGF和BDNF伤后1～7d持续高表达,NT-3、TrkA、TrkB和TrkC伤后1～3d表达较高,与正常组和假伤组相比,差异有显著性意义。结论:神经营养素及受体在急性脊髓损伤中表达增加,起保护性作用。     

胚胎脊髓不同移植方法对大鼠损伤脊髓N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

创伤后一个重要的继发性损伤是释放兴奋性氨基酸 (EAA) ,随后作用于N 甲基 D 天门冬氨酸受体 (NMDAR )。NMDAR是EAA受体的一种重要亚型 ,参与EAA释放的调节。近年来发现中枢神经系统损伤时NMDAR过度激活可引起神经细胞内Ca2 + 超载和Na+ 积蓄 ,由此产生细胞内高渗压和激活细胞内一系列钙依赖性酶学反应 ,导致神经细胞的凋亡和死亡[1] 。我们用胚胎脊髓、大网膜以及腺病毒介导的脑源性神经生长因子 (AxCA BDNF)基因转染的成肌细胞移植 ,应用免疫组织化学和氚标记的地卓西平马来酸盐 ( [3 H]MK 80 1)放射性配基分析 ,观察上…     

强啡肽对脊髓损伤后兴奋性氨基酸含量变化的影响与意义

为阐明脊髓损伤后病理因于强啡肽（Dyn）与兴奋性氨基酸（EAA）的关系，通过蛛网膜下腹内插管，在伤后20min给予不同剂量、不同种类Dyn，应用高效液相分析技术测定大鼠脊髓损伤后伤段脊髓组织中EAA含量的动态变化。结果显示，DunA使脊髓组织EAA含量显著增加，其增加的量和持续时间与DynA剂量有关，且有剂量依赖性，但不受阿片受体拮抗剂影响。相同剂量的非阿片受体激动剂DynA2－17和阿片受体激动剂DynA1-17对脊髓EAA的改变相似，DnyA1-8也产生显著的EAA改变，但程度较小。本实验结果对Dyn的病理作用包括非阿片受体途径的学说提供了进一步的支持，在非阿片途径中EAA的作用可能是最重要的。     

Nogo受体与脊髓损伤后神经再生的研究进展

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后轴突的再生极差,神经功能难以恢复。研究表明,SCI后髓磷脂相关抑制物是抑制中枢神经轴突再生的关键因素之一。Nogo受体（NgR）是3种髓磷脂相关轴突生长抑制蛋白作用的共同点。本文回顾了NgR及其相关蛋白的结构、功能及相关研究的进展,探讨了作用于NgR的信号机制及以NgR为靶点来提高脊髓损伤后轴突再生疗效的方案。指出以NgR为靶点来促进脊髓损伤后神经功能恢复具有光明的前景,但还需进一步的研究彻底了解NgR及其相关蛋白在抑制轴突再生方面的作用。     

实验性肝硬变形成过程中肝组织α_1－肾上腺素受体的定量研究

用放射配基结合分析法对Ｗｉｓｔａｒ大鼠四氯化碳性肝硬变形成过程中肝组织肾上腺素受体作了定量测定。实验分对照组（１０只）、肝纤维增生组（１３只）和肝硬变组（２０只）三组进行。与对照组相比，肝纤维增生组大鼠肝组织。受体的最大结合容量（Ｂｍａｘ）明显减少（１３２．８±２５．０ｆｍｏｌ／ｍｇ与９６．９±２０．８ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，Ｐ＜０．０１），平衡解离常数（Ｋｄ）明显增大（０．１６３３±０．０３２２ｎＭ与０．３０７９±０．０７８６ｎＭ，Ｐ＜０．０１）；肝硬变组的Ｂｍａｘ也显著下降（１３２．８±２５．０ｆｍｏｌ／ｍｇ与７１．９±１７．７ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，Ｐ＜０．０１），Ｋｄ值增大更为明显（０．１６３３±０．０３２２ｎＭ与０．４０１２±０．０９６５ｎＭ，Ｐ＜０．０１）。说明在肝硬变形成过程中，肝组织α＿１－受体的结合容量和亲和力受到了损害，后者在肝硬变患者儿茶酚胺的代谢紊乱及门静脉高压的形成中可能起着一定的作用。     

实验性脊髓损伤后内皮素与前列环素含量的变化及意义

目的：探讨脊髓损伤后脊髓组织中内皮素（ＥＴ）与前列环素（ＰＧＩ２）变化的相互关系与意义。方法：３６只大鼠随机分为６组，Ａｌｅｎｓ法中度量（５０ｇ·ｃｍ）损伤脊髓。测定伤段脊髓中内皮素与６－酮－前列腺素Ｆ１α含量。结果：内皮素含量在伤后３０ｍｉｎ显著升高，２ｈ急剧升高达到高峰，以后逐渐下降；６－酮－前列腺素Ｆ１α含量在伤后３０ｍｉｎ即升高，２ｈ达到较高水平，其升高程度较内皮素小，以后缓慢上升。结论：脊髓损伤早期内皮素含量的急剧升高和前列环素的相对不足可能与脊髓损伤后早期缺血的产生有关，内皮素可能通过多种途经参与脊髓损伤后的继发损伤     

神经生长因子对脊髓损伤后神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体和一氧化氮生成的影响

我们用原位杂交法通过检测神经生长因子 (ＮＧＦ)作用于损伤脊髓前后Ｎ 甲基 Ｄ 天门冬氨酸受体 (ＮＭＤＡＲ) 1及固有型一氧化氮 (ＮＯ)合酶 (ｎｃＮＯＳ)ｍＲＮＡ的表达变化来探讨ＮＧＦ保护损伤脊髓的机理 ,现报道如下。一、材料和方法1 .动物及分组 :Ｗｉｓｔａｒ大鼠 65只 ,体重 2 0 0～ 2 50 ｇ ,雌雄不分 ,随机分成 3组 :正常组 :5只 ,不作手术 ,作为测量脊髓ＮＭＤＡＲ1和ｎｃＮＯＳ的正常数值 ;生理盐水 (ＮＳ)组 :30只 ,经蛛网膜下腔导管注入生理盐水 ;ＮＧＦ组 :30只 ,经导管注入ＮＧＦ。2 .动物模型的建立 :以 1 0 ｇ× 2 .5ｃ…     

胚胎脊髓移植后大鼠损伤脊髓c-Jun免疫反应的变化及其意义

目的：研究大鼠胚胎脊髓移植后能否影响,c-Hun免疫反应的表达和脊髓损伤后大鼠功能的恢复,方法;将动物分为脊髓半切洞损伤加胚胎脊髓移植组（A组）和单纯脊髓板切洞损伤加明胶海绵填塞组（B组）,每个时相点每组6只动物,术只1,3,7,14和28天,应用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况,应用免疫细胞化学方法,c-Jun免疫反应的表达,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果：大鼠脊髓损伤后c-Jun免疫反应的表达A组明显高于B组,胚胎脊髓抑制后可使损伤脊髓高表达c-Jun 免疫反应持续到术后7天,增加的c-Jun免疫反应阳性细胞数目与神经功能的改善相平行。结论：胚胎脊髓移植后可使损伤脊髓高表达c-Jun,并促进大鼠功能恢复。     

PAF受体拮抗剂对脊髓损伤治疗作用及其机制的研究

试图探讨血小板活化因子受体拮抗剂ＢＮ５２０２１对脊髓损伤的治疗效果和机理。方法；采用Ａｌｌｅｎ打击法造成猫脊髓损伤，应用ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１治疗猫脊髓损伤，观察脊髓组织含水量，伊文思蓝含量，血流量，脊髓组织病理学变化及脊髓运动功能评定。     

血小板活化因子及其受体拮抗剂对脊髓损伤后脊髓血流量的影响

实验采用鞘内注射血小板活化因子（ＰＡＦ）及静脉注射ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１，观察其对猫脊髓损伤后伤区和邻近脊髓（Ｌ２－Ｌ４）血流量及血浆血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺１α（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α）比值（Ｔ／Ｋ值）的影响。     

血小板活化因子及其受体对颈髓损伤后血脊髓屏障损害的 …

探讨血小板活化因子及其受体对颈髓损伤后血脊髓屏障损害的的分子机制。方法：采用蛛网膜下腔注射ＰＡＦ及静脉注射ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１，应用地高辛标记ｃＤＮＡ探讨针原交技术检测颈髓损伤后颈髓血管内皮细胞细胞间粘附分子－１ｍＲＮＡ和