CTGF和TGF-β1在实验性矽肺肺组织中的表达及其意义

[目的]研究结缔组织生长因子(CTGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)在二氧化硅所致矽肺大鼠肺组织中的表达.[方法]矽肺组大鼠20只气管灌注石英粉尘制作模型,对照组大鼠20只以灭菌生理盐水代替,45d后观察大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法观察肺组织中CTGF和TGF-β1的蛋白表达情况.[结果]CTGF和TGF-β1在矽肺组肺组织中的表达量均高于对照组大鼠,且差异有统计学意义(P<0.05);CTGF和TGF-β1表达量间无直线相关关系(P>0.05).[结论]CTGF和TGF-β1可能参与了矽肺的发生发展.     

TGF-β1和TGF-βⅡ型受体酵母表达载体构建

  目的  研究截短型人肝细胞生长因子突变体（tvNK1）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导人肝星状细胞LX-2纤维化的影响。  方法  把经PCR和双酶切的小分子泛素相关修饰蛋白（SUMO）和tvNK1的融合基因SUMO-tvNK1插入原核表达载体pET28a,诱导表达和Ni²⁺亲和层析纯化SUMO-tvNK1;进一步经SUMO蛋白酶Ulp1水解和Ni²⁺亲和层析纯化tvNK1,MTT法观察其对TGF-β1诱导LX-2纤维化细胞增殖的影响,qPCR及蛋白印迹（WB）检测其对I型胶原蛋白（col1α1）和α – 平滑肌球蛋白（α-SMA）蛋白表达的影响。  结果  宿主菌Rosetta/pET28a-SUMO-tvNK1在37 ℃经1 mmol/L IPTG诱导5 h获得SUMO-tvNK1的可溶性表达,将超声破碎后上清液经Ni²⁺亲和层析成功获得SUMO-tvNK1,进一步经Ulp1水解和Ni²⁺亲和层析纯化tvNK1,SDS-PAGE鉴定其分子量约为22.0 kDa,MTT显示20和40 ng/mL的tvNK1能明显抑制TGF-β1活化的人肝星状细胞LX-2增殖,qPCR及WB显示20和40 ng/mL的tvNK1能显著抑制活化的LX-2细胞中Col1α1和 α-SMA在mRNA和蛋白水平表达。  结论  SUMO蛋白可用于制备tvNK1,其能抑制TGF-β1活化的LX-2细胞增殖并具有抗纤维化作用,为进一步体内外功能研究打下基础。     

AcSDKP对大鼠矽肺纤维化转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的抑制

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠肺内转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 将大鼠随机分为6组.每组10只.对照组大鼠支气管内灌注1.0 ml生理盐水,矽肺模型对照1组4周后处死,矽肺模型对照2组8周后处死;矽肺模型组大鼠予SiO2混悬液50 mg/ml,矽肺模型1组4周后处死,矽肺模型2组8周后处死;抗纤维化治疗组(治疗组):支气管内灌注SiO2混悬液50mg/ml,4周后给予AcSDKP 800 μg/(kg·d),至第8周处死;预防治疗组给予AcSDKP800μg(kg·d)48h后,支气管内灌注SiO2混悬液50mg/ml,8周后处死.HE染色进行形态学观察;采用免疫组织化学法检测TGF-β1与CTGF的蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TGF-β1与CTGF的mRNA表达.结果 治疗组TGF-β2及CTGF蛋白表达分别为0.244±0.016、0.241±0.017,明显低于矽肺模型1组和矽肺模型2组;治疗组TGF-β1 mRNA及CTGF mRNA表达水平明显低于矽肺模型1组和矽肺模型2组,差异均有统计学意义(P<0.05);预防治疗组TGF-β1和CTGF蛋白表达和mRNA表达水平明显低于矽肺模型2组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AcSDKP能减轻实验性矽肺纤维化大鼠肺组织中的TGF-β1与CTGF表达水平.     

补肾活血中药对肾小球肾炎大鼠肾组织TGF-_1及CTGF表达影响

目的探讨补肾活血中药对肾小球肾炎大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β_1）及结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法选取6月龄Wister健康雄性大鼠40只,对其中30只大鼠建立肾小球肾炎大鼠模型,并将此30只造模成功的大鼠随机分为模型组、中药组和盐酸贝那普利组,每组10只,选取另10只未建模大鼠作为对照组;对照组和模型组均给予等量生理盐水灌胃,中药组给予补肾活血中药灌胃,盐酸贝那普利组给予西药盐酸贝那普利灌胃,治疗8周后,测定各组24h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐水平,处死后采用免疫荧光化学法检测TGF-β_1和CTGF蛋白相对表达量。结果干预过程中模型组有1只大鼠死亡;模型组、中药组和盐酸贝那普利组大鼠24h尿蛋白分别为（96.58±10.32）、（49.76±9.82）和（50.30±10.02）mg/24h,血尿素氮分别为（10.82±0.59）、（5.98±0.57）和（6.03±0.52）mmol/L,血肌酐分别为（33.54±5.32）、（17.89±5.17）和（17.96±5.03）μmol/L,均高于对照组的（10.38±2.17）mg/24h、（4.01±0.37）mmol/L、（2.55±0.71）μmol/L（均P< 0.05）,且中药组和盐酸贝那普利组24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐水平均低于模型组（均P< 0.05）,而中药组和盐酸贝那普利组各指标水平差异均无统计学意义（均P> 0.05）;模型组、中药组和盐酸贝那普利组大鼠TGF-β_1免疫荧光相对含量分别为（5.296±0.124）、（0.568±0.156）和（1.697±0.468）,CTGF免疫荧光相对含量分别为（5.347±1.285）、（1.485±0.466）和（1.078±0.327）,均高于对照组的（0.035±0.007）和（0.017±0.004）（均P< 0.05）,且中药组和盐酸贝那普利组TGF-β_1和CTGF免疫荧光相对含量均低于模型组（均P< 0.05）,中药组TGF-β_1免疫荧光相对含量低于盐酸贝那普利组（t=7.237,P< 0.001）,而2组CTGF免疫荧光相对含量差异无统计学意义（P> 0.05）。结论补肾活血中药可明显降低肾小球肾炎大鼠实验室相关指标,抑制TGF-β_1和CTGF表达水平。     

多囊卵巢综合征患者体内TGF-β_1、CTGF含量及意义

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血及腹腔液中TGF-β1、CTGF含量。方法:选择因不孕症就诊本院的PCOS患者血清标本30例(PCOS组),因丈夫原因行人工授精女性血清标本26例作为对照组;另选PCOS诊断明确、手术治疗的患者腹腔液标本18例,以月经周期和排卵正常的子宫肌瘤患者的腹腔液标本14例作为对照组。ELISA方法检测血清及腹腔液中TGF-β1、CTGF含量;化学发光法检测血清激素水平,并进行相关性分析。结果:P-COS组外周血清及腹腔液中TGF-β1、CTGF的含量高于对照组(P<0.05);血清T与TGF-β1及CTGF的含量变化均呈正相关(r=0.771,r=0.668),血清LHFSH与TGF-β1呈正相关(r=0.763)。结论:TGF-β1、CTGF可能在P-COS患者卵巢间质纤维化形成中起重要作用。     

TGF-β1和CTGF在蛛网膜下腔出血患者脑脊液中的表达水平变化及意义

目的 研究探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)在蛛网膜下腔出血(SAH)后表达水平的变化及其意义.方法 采用双抗体夹心法,测定38例蛛网膜下腔出血和38例健康对照者脑脊液TGF-β1、CTGF的表达水平.结果 病例组脑脊液TGF-β1、CTGF浓度1 d都明显升高(P＜0.05),3 d下降,10 d再次升高,并持续到14 d(P＜0.05),而且二者的升高呈正相关关系.结论 蛛网膜下腔出血后脑脊液中TGF-β1、CTGF的表达均呈双时项,二者的持续高水平表达与蛛网膜下腔出血后交通性脑积水的发生密切相关.     

Smad4、TGF-β1、TGF-βR1在乳腺癌细胞中的表达和意义

目的探究Smad4、转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-β受体1((TGF-βR1)在乳腺癌细胞中的表达和意义。方法选取2014年1月-2016年1月在该院确诊为乳腺浸润性导管癌并行手术治疗的女性患者60例,收集其标本作为观察组。另取正常乳腺组织20例作为对照组。采用免疫组化技术检测组织中的Smad4、TGF-β1和TGF-βR1,比较乳腺浸润性导管癌和正常乳腺组织中上述指标的表达差异及影响表达的因素。结果观察组TGF-β1和TGF-βR1的阳性表达率高于对照组,Smad4阳性表达率低于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。Smad4、TGF-β1和TGF-βR1在乳腺癌中的表达与年龄无关,而同分化程度和TNM分期有关,分化程度低、TNM分期高的标本TGF-β1和TGF-βR1的阳性表达程度高于分化程度高、TNM分期低的标本;分化程度低、TNM分期高的标本Smad4的阳性表达程度低于分化程度高、TNM分期低的标本,差异均有统计学意义(均P0.05)。TGF-β1和TGF-βR1在乳腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.647,P0.05),而Smad4与TGF-β1、TGF-βR1的表达均呈负相关(r=-0.329和-0.426,均P0.05)。结论 TGF-β1和TGF-βR1在乳腺浸润性导管癌组织中表达显著增加,而Smad4表达下降,表达程度均与分化程度和TNM分期有关。     

TGF—β1和CTGF在冠心病患者血清中的表达及意义

目的：研究血清转化生长因子-B1（transforminggrowthfactor-β1,TGF--β1）和鲒缔组织生长因子（connectivetissuegrowthfactor,CTGF）在冠心病（coronaryatheroscieroticheartdisease,CHD）患者中表达的意义及与冠脉病变程度的关系。方法：CHD患者按临床类型分为SAP组、UAP组、AMI组,按冠脉造影结果分为单支、双支、三支病变组,另选50例健康者为对照组。结果：血清TGF--0l水平在SAP组、UAP组及AMI组低于正常对照组,UAP组、AMI组均低于SAP组;血清CTGF水平在SAP纽、UAP纽厦AMI纽高于对照纽,蛆间比较差异有统计学意义;TGF-β1水平三支、双支纽均低于单支组;CTGF水平三支、双支、组均高于单支痛变组。结论：冠心病患者血清TGF—β1、CTGF水平能够反映冠脉病变的严重程度,可作为,临床观察和评定冠状动脉病变发展的指标。     

TGF-β1、Smads在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的通过比较卵巢子宫内膜异位囊肿(巧克力囊肿)患者异位囊壁、子宫在位内膜和其他卵巢良性肿瘤患者子宫内膜的组织学特点及分子生物学特征,探究TGF-β1、Smads在子宫内膜异位症(EMs)患者的表达和意义。方法募集行腹腔镜或宫腹腔镜联合术的巧克力囊肿患者,取其卵巢异位症囊壁组织作为卵巢异位症囊壁组,留取其子宫内膜组织作为子宫在位内膜组;同期行宫腹腔镜联合术的其它卵巢良性肿瘤患者,取其子宫内膜组织作为子宫内膜对照组。采用Masson染色、免疫组织化学法分别检测三种组织中纤维化形成和TGF-β1、Smads的表达情况。结果 (1)Masson染色显示,卵巢异位症囊壁组可见大量的纤维化沉积,子宫在位内膜组、子宫内膜对照组均未见明显纤维化蓝染。(2)卵巢异位症囊壁组TGF-β1、p-Smad2/3表达水平分别为(0.039±0.024)和(0.035±0.014)均高于子宫内膜对照组(0.018±0.012和0.023±0.004),差异有统计学意义(P<0.05);子宫在位内膜组p-Smad2/3表达水平(0.034±0.011)高于子宫内膜对照组(0.023±0.004)(P<0...     

NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在矽肺肺纤维化大鼠模型中的表达及意义

目的探讨NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在矽肺肺纤维化大鼠模型中的表达情况及意义。方法选择健康SPF级Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组,分别为高(100 mg/ml)、中(50 mg/ml)、低(25 mg/ml)浓度SiO2染尘组和正常对照组,每组20只。各组分别在SiO2染尘后7 d、14 d、28 d、56 d处死5只大鼠,观察肺组织肺泡炎程度及肺纤维化程度,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织中IL-1β、IL-18、TGF-β1含量,Western Blot法检测大鼠肺组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,各染尘组大鼠7 d、14 d、28 d、56 d的肺泡炎评分、纤维化程度明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与正常对照组比较,各染尘组大鼠7 d、14 d、28 d、56 d的IL-1β、IL-18、TGF-β1浓度明显升高(P<0.01);与正常对照组比较,各染尘组大鼠肺组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达在7 d、14 d、28 d、56 d均升高(P<0.01);低、中、高浓度SiO2染尘组内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18和TGF-β1表达量在7 d、14 d和28 d间两两比较,差异均有统计学意义(P<0. 05),均呈随着染尘时间的增加而升高的时间-效应关系。结论NLRP3及其下游因子Caspase-1、IL-1β、IL-18、TGF-β1在矽肺肺纤维化大鼠模型肺组织中高表达,提示NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴可能与矽肺肺纤维化有密切的关系,在矽肺形成过程中发挥了作用。     

TGF-β1在宫颈鳞状细胞癌组织中表达的意义

目的:观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达情况,探讨其与宫颈癌发生发展的关系,明确其表达的意义。方法:应用免疫组化SP法检测40例宫颈鳞状细胞癌组织(病理分级Ⅰ~Ⅲ级)中TGF-β1蛋白的表达,与正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织中的表达作定量比较。结果:①正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织中TGF-β1表达位于上皮细胞的胞浆内,两组表达水平无显著性差异(P>0.05);宫颈鳞状细胞癌中TGF-β1表达位于癌细胞的胞浆内。②宫颈鳞状细胞癌中TGF-β1表达水平明显上升,与正常宫颈组织及慢性宫颈炎组织比较有极显著性差异(P<0.01)。③随着宫颈癌病理分级的增加,TGF-β1表达水平逐步上升,有显著性差异(P<0.05)。结论:本研究提示宫颈鳞状细胞癌的发生发展可能与TGF-β1的高表达有关。     

水通道蛋白1在矽肺大鼠肺组织中的表达及意义初探

目的探讨水通道蛋白1(AQP1)在矽肺肺组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学、免疫荧光、Western blot等方法检测矽肺模型大鼠肺组织AQP1分布及表达。结果正常对照组和生理盐水组大鼠肺组织中AQP1表达差异无统计学意义,矽肺模型大鼠肺组织中AQP1表达较正常对照组和生理盐水组减低。结论矽肺模型大鼠肺组织中AQP1表达降低,提示AQP1可能在矽肺的发病过程中具有一定的作用。     

TGF-1和TGF-Ⅱ型受体酵母表达载体构建

目的 克隆人转化生长因子β1（TGF-β1）和4个受体基因片段,构建酵母表达载体,为应用酵母双杂交筛选与TGF-β1相互作用的TβRⅡ区域提供技术支持。方法 提取人血液中RNA,逆转录转为cDNA,PCR扩增TGF-β1和4 个受体（TβRⅡ-A、TβRⅡ-B、TβRⅡ-C、TβRⅡ-D）基因片段,双酶切后,分别插入酵母双杂交表达载体pGBKT7和pGADT7;经过PCR扩增、双酶切和DNA测序鉴定后,构建质粒pGBKT7-TGF-β1和pGADT7-TβRⅡ-A、pGADT7-TβRⅡ-B、pGADT7-TβRⅡ-C和pGADT7-TβRⅡ-D。结果 成功扩增TGF-β1基因（1 200 bp）和TβRⅡ-A（453 bp）、TβRⅡ-B（366 bp）、TβRⅡ-C（276 bp）和TβRⅡ-D（165 bp）基因片段,经PCR、双酶切和DNA测序鉴定插入到酵母双杂交载体序列正确。结论 成功构建pGBKT7-TGF-β1和pGADT7-TβRⅡ-A、pGADT7-TβRⅡ-B、pGADT7-TβRⅡ-C和pGADT7-TβRⅡ-D酵母双杂交表达载体。     

急性心肌梗死病人TGF-β1和IGF-1与心功能的关系

近年来的研究表明转化生长因子-β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)血清水平与急性心肌梗死的发生、病变程度、心功能以及预后有关，但是国内外研究结果差异较大。     

TGF-β受体在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)受体(TβRⅠ、TβRⅡ)在子宫内膜癌组织中的表达情况、与临床病理参数之间的关系及其与膜细胞骨架连接蛋白ezrin、血管内皮生长因子受体-1(flt-1)等的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测79例子宫内膜癌和12例转移灶组织中TβRⅠ和TβRⅡ蛋白的表达,选择不典型增生14例,单纯、复合性增生20例以及正常增生期子宫内膜组织15例作为对照,并在子宫内膜癌中检测了ezrin和flt-1。结果:TβRⅠ和TβRⅡ在子宫内膜癌组织中的表达低于正常增生期子宫内膜组织(P<0.05,P<0.01),并且深肌层浸润组的表达低于无肌层浸润及浅肌层浸润组(P=0.000,P=0.008),中、低分化癌中的表达低于高分化癌(P=0.003,P=0.000)。子宫内膜癌中,TβRⅠ与ezrin呈负相关(P=0.001),TβRⅡ与flt-1呈负相关(P=0.003)。结论:TβRⅠ、TβRⅡ表达下降可能参与了子宫内膜癌的发生和演进过程。     

NF-κB和TGF-β1在阿霉素肾病模型中的检测与病理意义

目的观察阿霉素大鼠肾病模型中核因子-KB(NF-κB)和转化生长因子β1(TGF-β1)的浓度与病理变化的意义,探讨其参与肾病综合征的发病机制。方法 40只大鼠随机分成两组:对照组、模型组,每组共20只。模型组采用尾静脉注射阿霉素方法建立阿霉素肾病模型。检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血清肾功能指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变。采用免疫学方法(ELISA)检测NF-κB和TGFβ浓度的变化。结果①模型组于第2、4、6周尿蛋白定量均高于同期对照组,差异有统计学意义(p<0.01)。第2、4、6周时模型组血尿素氮及肌酐水平均高于同期对照组(p<0.01)。②肾组织病理学提示随时间延长,肾病病理进展。③模型组第2、4、6周NF-κB和TGF-β1浓度结果均高于同期对照组(p<0.01)。结论 NF-κB和TGF-β1浓度增高是肾小球硬化发生发展的重要因素,两者共同促进细胞外基质(ECM)的积聚,造成肾小球硬化。阻断NF-κB和TGF-β1可能成为延缓肾小球硬化的治疗手段。     

PTEN和TGFβ-1蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨宫颈癌、原位癌及正常宫颈组织中PTEN和TGF-β1蛋白的表达及意义. [方法]采用免疫组化Envision法检测宫颈癌组织56例、原位癌24例、正常宫颈组织20例中FFEN和TGF-β1的表达水平. [结果]宫颈癌组织中的PTEN和TGF-β表达明显低于原位癌和正常宫颈组织,差异有统计学意义(X2=18.76,P<0.01;X2=15.04.P<0.01),PTEN在宫颈原位癌、官颈鳞癌I～Ⅱ期和官颈鳞癌Ⅲ期中的表达差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌高分化和中低分化程度与淋巴结转移间差异都有统计学意义(P<0.05);TGF-β1在官颈原位癌、宫颈鳞癌I-Ⅱ 期和宫颈鳞癌Ⅲ期中以及宫颈癌高、中低分化程度间差异无统计学意义,在有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P<0.05). [结论]PTEN蛋白的表达缺失与宫颈癌的发生、发展过程有关,TGF-β1表达与宫颈癌的侵袭转移有关.检测宫颈癌中PTEN和TGF-β1蛋白表达对宫颈癌早期诊断和判断预后有一定价值.     

染矽尘小鼠肺组织中转化生长因子β1表达的免疫组织化学检测

目的　观察染矽尘小鼠肺组织转化生长因子 β1(TGF β1)蛋白水平的改变 ,研究其在矽肺发病中的意义。方法　采用暴露式气管内注入法给小鼠一次性染矽尘 (0 .2g/kg)。染尘后第 1、3、5、7、14、2 8天每组各处死 8只小鼠 ,取肺组织 ,用免疫组织化学技术检测TGF β1在小鼠肺组织蛋白水平的表达。结果　对照组小鼠肺组织中免疫组化染色呈弱阳性 (± ) ,可见少量TGF β1蛋白 ;染尘组小鼠肺TGF β1表达明显增强 ,免疫组化染色结果为 +～ +++,染尘后第 7～ 14天达高峰。染尘组小鼠肺出现TGF β1表达阳性肺泡巨噬细胞 ,第 5天达高峰 ,其阳性肺泡巨噬细胞百分率为 93.4 %± 2 .8% ,与对照组 (42 .2 %± 12 .0 % )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　TGF β1在矽肺早期的发生、发展过程中可能有重要作用。     

转化生长因子-β1在大肠癌组织中的表达

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在大肠癌分化、转移中的作用.方法应用免疫组织化学方法检测42例大肠癌手术标本的TGF-β1的蛋白表达.结果⑴低分化大肠癌组织中TGF-β1的蛋白表达水平明显高于高分化组,差异有显著性(P＜0.01 ) ;⑵伴有淋巴转移和肝转移的大肠癌组织中TGF-β1蛋白表达水平显著增高,差异有显著性 (P＜0.05).结论 TGF-β1大肠癌的分化、转移密切相关,TGF-β 1蛋白表达的增强是大肠癌预后不良的一个标志.     

子痫前期胎盘中TGF-β1的表达及意义

目的:检测胎盘组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的定位及表达水平,初步评估TGF-β1与子痫前期发病的关系及在子痫前期中的作用。方法:应用免疫组化法检测正常妊娠组14例和子痫前期组36例的胎盘组织中TGF-β1的定位及半定量检测TGF-β1在滋养细胞中的表达。结果:TGF-β1主要表达于滋养细胞,部分表达于蜕膜细胞,偶见于胎盘绒毛血管内皮细胞及间质。子痫前期组滋养细胞中TGF-β1表达较对照组增高(P<0.05),并随病情的发展而增高,轻、重度存在显著性差异(P<0.05)。结论:①TGF-β1的增加可能与子痫前期的发生及子痫前期的部分病理生理变化有关。②TGF-β1表达随病情发展而增高,提示可能与子痫前期严重程度有关。