单克隆抗-HBc抗体亲和层析纯化大肠肝菌合成的HBcAg转化为 HBeAg的研究

本文报道了用单克隆抗-HBc抗体亲和层析柱大量纯化大肠杆菌合成的HBcAg。经单克隆抗-HBc抗体亲和层析柱一步纯化的HBcAg,它的比活性从94.12单位/mg蛋白提高到12851.40单位/mg蛋白,提高了136.54倍。纯化的HBcAg紫外光谱分析证明是单一的蛋白成分。免疫电镜观察结果证明,纯化的大肠杆菌来源的乙肝病毒核心抗原相似于肝脏来源的乙肝病毒核心抗原的典型形态和大小。 亲和层析纯化的E-HBcAg,用SDS和2-巯基乙醇处理后,纯化的E-HBcAg转化为E-HBeAg。转化的E-HBeAg能被杭-HBe抗体特异性地完全中和。而不被抗-HAV、抗-HBs、正常人血清、小牛血清中和。但是,它能部分的被纯-HBc抗体中和。     

抗乙型肝炎核心抗体独特型抗体[抗(抗-HBc)Id]的研究——Ⅰ.兔抗鼠单克隆抗-HBc独特型的研究

本文用小鼠单克隆抗HBcIgG及其Fab片段免疫家兔制备出了特异性的抗独特型抗体(抗Id),抗Id针对的部位与抗体的抗原结合位点密切相关。应用这种抗Id在同种小鼠的抗-HBc中检出了交叉反应独特型(Idx),而在人、猴、马、豚鼠和鸡,鸽的抗-HBc血清中未能检出相应的Idx。我们的研究还表明用IgG Fab片段来免疫制备抗Id较用IgG全分子效果好。此外,我们建立了两种特异检测抗Id的ELISA方法,应用它们可以排除抗同种型和同种异型抗体的干扰,对免疫过程中动物产生抗Id的水平进行观察。     

抗乙型肝炎核心抗体的独特型抗体的研究——Ⅰ.兔抗鼠单克隆抗-HBc独特型的研究

本文用小鼠单克隆抗HBcIgG及其Fad片段免疫家兔,制备出了特异牲的抗独特型抗体(抗Id),抗Id针对的部位与抗体的抗原结合位点密切相关。应用这种抗Id在同种小鼠的抗-HBc中检出了交叉反应独特型(Idx),而在人、猴、马、豚鼠、鸡和鸽的抗-HBc血清中未能检出相应的Idx。我们的研究还表明用IgG Fab片段来免疫制备抗Id较用IgG全分子效果好。此外,我们建立了两种特异检测抗Id的ELISA方法,应用它们可以排除抗同种型和同种异型抗体的干抚,对免疫过程中动物产生抗Id的水平进行观察。     

用基因工程HBcAg制备抗-HBc单克隆抗体的研究

本文探索了用基因工程HBcAg研制抗-HBc单克隆抗体,获得成功。本文用基因工程HBcAg经单克隆抗-HBc制备的亲和层析柱进一步纯化后,免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与Sp2/0瘤细胞在50％PEG(MW 4,000)作用下进行杂交融合,经三次有限稀释克隆化后,选出一株分泌抗-HBc单克隆抗体杂交瘤细胞株,培养上清用兔抗鼠血清作双扩检测免疫球     

用基因工程HBcAg制备抗-HBc单克隆抗体的研究

近年来,日益认识到HBcAg是肝细胞的重要靶抗原,使用抗-HBc载以药物作导向治疗的研究正在进行,为使导向精确,获取不含任何抗人肝细胞成份的抗-HBc是必需解决的问题,以尸肝HBcAg免疫所获单克隆抗-HBc显然不能满足这一条件,为此,本文探索了用基因工程HBcAg研制抗-HBc单克隆抗体,获得成功,报告如下。     

亲和层析纯化重组人源性抗HBsAg Fab抗体

目的：纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAg Fab抗体，建立稳定、适于生产应用的纯化工艺。方法：以原核表达的重组人源性抗HBs scFv免疫BALB／c小鼠，经杂交瘤技术制备大量分泌mAb的杂交瘤细胞株14F7。将该细胞株注入小鼠腹腔制备mAb腹水，经辛酸沉淀纯化后，制备亲和层析柱。纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAg Fab抗体。结果：用抗scFv mAb亲和层析柱纯化的重组人源性抗HBsAg Fab的纯度可达95％以上，回收率可达70％～85％。结论：人源性抗HBs scFv制备mAb作为亲和层析的介质，可有效地从酵母发酵上清中纯化重组人源性抗HBsAg Fab，适用于大规模生产重组人源性抗HBsAg Fab。     

单克隆抗转化细胞及抗淋巴细胞抗体对移植物排斥的改善

用抗转化单核细胞单克隆抗体抑制排斥反应对19例肾移植病人进行了治疗。在这些病人中,11例是接受不同的1-单型活体的肾脏,其中9例已有抗类固醇排斥反应。在8例接受死者肾脏的病人中,6例发生了抗类固醇反应,其中4例由于二次排斥反应而进行了治疗。尽管这些排斥反应都比较严重,治疗后,在10例接受活体肾脏及7例接受死者肾脏的病人,     

抗轮状病毒的单克隆中和抗体

血清学研究表明,在不同种轮状病毒间不仅有型特异抗原,而且有一至数种群共同抗原。作者用杂交瘤技术建立了抗人轮状病毒、猴轮状病毒和牛轮状病毒的单克隆抗     

脂多糖亲和层析柱吸附抗脂多糖抗体的研究

吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome，GBS)是一种自身免疫病，临床采用的血浆交换虽可去除患者血浆中抗空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni，Cj)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)抗体等致病因子，但存在多种不足。利用亲和层析的纯化功能，我们制作了LPS亲和层析柱，并对它的功能进行了检测。     

乙型肝炎血清IgA型抗-HBc和肝组织内HBcAg的免疫学研究

<正> 本文报告乙型肝炎患者血清内IgA型抗-HBc测定与血清HBeAg和肝组织内HBcAg的关系,并探讨其临床意义。 材料和方法 一、病例选择:50例乙型肝炎均为经血清学和肝活检证实的青壮年住院病人。诊断标准按1984年全国肝炎会议的诊断标准。其中,急性肝炎(急肝)7例,慢性迁延性肝炎(慢迁肝)8例,慢性活动性肝炎(慢活肝)28例,慢性活动性肝炎合并肝硬化(肝硬化)7例。 二、IgA抗-HBc和HBeAg检测:ELISA     

小鼠单克隆IgA抗霍乱弧菌抗体的纯化及特性鉴定（文摘）

小鼠单克隆ＩｇＡ抗霍乱弧菌抗体的纯化及特性鉴定（文摘）［英／ＳｏｍａｎＣＴ…ＪＩｍｍｕｎｏｌ１９９３；１５０（８）（ｐａｒｔⅡ）：６５３］作者介绍了一种体外产生和纯化单克隆抗体ＩｇＡ的方法。具体步骤是，在空心纤维反应器中以无蛋白塔基而生产两株抗霍乱弧...     

亲和层析纯化精子膜抗原的方法及精子抗体的检测

采用超声波粉碎、NP 40提取与两种互补式免疫亲和层析柱相结合的新提纯方案。结果获得了高纯度精子膜抗原 ,对经两种市售试剂盒检测的阳性标本 36份、阴性标本 2 4份进行检测 ,结果一致 ,正常人血清标本A值≤ 0 0 8。初步临床应用显示不孕症患者中 ,血清阳性率 2 3 5 2 % ,精浆阳性率 7 5 7% ,与郑州华美公司试剂盒的阳性符合率达 10 0 %。     

抗人胰腺癌单克隆小分子抗体基因的构建

鼠单克隆抗体用于人体的诊断和治疗时,人体会产生抗鼠蛋白抗体和对鼠单抗的排斥反应,因而影响使用效果。近年来随着生物工程技术的发展,人们试图通过人-鼠嵌合抗体及小分子抗体的研究以解决单克隆抗体在治疗中存在的免疫反应问题。抗体的最     

兔抗单克隆个体基因型抗体的制备鉴定

利用具有抑制恶性疟原虫生长能力的94D_1株单克隆抗体(McAb)免疫家兔。得到抗血清后,经Seharose 4 B—正常BALB/c小鼠IgG固相反复吸附3次以上,以除去其抗同种型和同种异型抗体,然后再经Sepharose4 B—9~4D_1株McAb亲和层析柱提纯,得到抗9_4D_1个体基因型抗体。这种抗体经免疫双扩散、IFA封闭试验、SPRIA等方法鉴定,证明具有较高的特异性。在双扩散中,仅与9_4D_1株McAb产生沉淀线;在IFA封闭试验中,能抑制     

全人单克隆抗核抗体的制备和鉴定

目的 本研究旨在从系统性红斑狼疮(systemmic lupus erythematosus,SLE)患者外周血淋巴细胞中获得自身抗体,并从中鉴定筛选出抗核抗体.方法 利用人B细胞杂交瘤技术制备SLE患者来源的全人单克隆自身抗体,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbenk assay,ELISA)方法测定阳性杂交瘤细胞上清抗体浓度,并以HEp-2细胞为底物,采用间接免疫荧光法鉴定筛选出抗核抗体.结果 共获得48株稳定分泌IgG型全人单克隆自身抗体的杂交瘤细胞株,其中12种细胞上清抗体浓度大于1 500 ng/mL,占25％,通过免疫荧光鉴定从中筛选出3种抗核抗体,荧光核型分别为周边型、斑点型和核仁型.结论 全人单克隆自身抗体的制备及抗核抗体的筛选鉴定,为开发新型单克隆抗体药物以及研究SLE的致病机制奠定了良好的实验基础.     

制备大鼠单克隆抗独特型抗体的免疫方案

抗独特型抗体是研究免疫调节的强有力的试剂,而且作为抗肿瘤和抗传染病的疫苗也有着潜在的意义。比较了三种制备大鼠单克隆抗独特型抗体的免疫方案。即先用750μg 纯化的抗恶性疟原虫单克隆抗体作为免疫原。以腹腔和皮下多点免疫雄性Wistar大鼠,基础免疫3次后,接着用以下、三种免     

抗乙肝病毒核心抗体的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

用单克隆抗体HBc免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选到1C12、2G12两株分泌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株,经鉴定属于IgG2a亚类。经ELISA独特型结合试验,抗原—抗体结合抑制试验进行鉴定,证实为抗乙肝病毒核心