氧化应激损伤对内耳毛细胞内游离钙离子和钙调蛋白表达的影响

目的通过分析氧化应激损伤的内耳毛细胞内游离Ca~(2+)浓度和钙调蛋白(CaM)表达水平,探讨感音性耳聋的氧化应激损伤机制。方法采用不同浓度(50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)双氧水染毒培养内耳毛细胞,24 h后检测细胞过氧化氢酶(CAT)活性,Fluo-3 AM荧光探针定量检测细胞内Ca~(2+)浓度,免疫荧光法分析CaM表达水平。结果氧化损伤的毛细胞CAT活性明显下降,随着染毒浓度的增加下降更明显(F=689.9,P0.01);氧化损伤毛细胞游离Ca~(2+)浓度随着染毒浓度的增加而增加(F=716.107,P0.01);氧化损伤的毛细胞CaM表达水平明显增加,50μmol/L和100μmol/L H_2O_2染毒组随浓度增加表达增强,但200μmol/L H_2O_2染毒组表达水平有所回落(F=732.727,P0.01)。结论氧化应激损伤导致毛细胞内游离Ca~(2+)浓度和CaM表达增加诱发细胞凋亡是多类型感音性耳聋的重要发病机制,严重的氧化应激损伤可抑制细胞CaM表达。     

SIRT1在氢醌诱导TK6细胞凋亡中的作用

目的构建TK6细胞的沉默信息调节因子1(SIRT1)基因沉默细胞株(TK6-sh SIRT1),初步探讨SIRT1在氢醌诱导TK6细胞凋亡中的作用。方法应用慢病毒介导的RNA干扰技术构建TK6细胞的SIRT1沉默细胞株,并用q PCR和Western blotting联合鉴定干扰效果,比较两种细胞的一般生物学特性(细胞形态、细胞增殖能力和细胞周期分布)。用不同浓度HQ(2.5~40μmol/L)处理TK6和TK6-sh SIRT1细胞48 h后,以CCK-8法检测细胞存活率;以流式细胞术检测细胞周期及凋亡的改变。结果成功筛选出稳定表达的人淋巴母细胞SIRT1缺陷细胞株,与TK6正常细胞株相比,TK6-sh SIRT1细胞中SIRT1在m RNA和蛋白表达水平分别下降了84.6%和94.5%,且生长速度加快了6.57 h,增殖指数增加了11.8%,差异均有统计学意义(P0.05),但细胞形态未出现明显改变。经HQ短时间处理后:两种细胞存活率均呈剂量依赖性降低;相同染毒剂量条件下,TK6-sh SIRT1细胞的存活率均明显低于TK6细胞(P0.05),细胞早期凋亡率高于TK6细胞(P0.05)。结论 SIRT1缺陷可增加TK6细胞对HQ的敏感性。     

miR-377对子痫前期胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo凋亡和氧化应激的影响及MAPK/ERK信号通路在其中的作用

目的探讨miR-377对子痫前期胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo凋亡和氧化应激的影响,分析MAPK/ERK信号通路在其中的作用。方法将培养的HTR-8/SVneo细胞分为4组,分别为对照组、过氧化氢(H_(2)O_(2))组、miR-377模拟物组和miR-377+U0126组。对照组不进行转染;H_(2)O_(2)组以250μmol/L的H_(2)O_(2)作用24 h;miR-377模拟物组和miR-377+U0126组通过脂质体Lipo-fectamine3000将H_(2)O_(2)作用24 h后的HTR-8/SVneo细胞转染miR-377模拟物,miR-377+U0126组转染miR-377模拟物前1 h,加入浓度为20μmol/L的U0126处理HTR-8/SVneo细胞,转染48 h后进行后续实验。应用实时荧光定量PCR检测miR-377的表达,应用CCK-8实验检测HTR-8/SVneo细胞增殖情况,应用比色法检测HTR-8/SVneo细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,应用酶标法检测HTR-8/SVneo细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,应用Transwell法检测HTR-8/SVneo细胞迁移数量,应用流式细胞仪检测HTR-8/SVneo细胞凋亡情况,应用Western blot检测MEK1/2、ERK1/2、P-MEK1/2、P-ERK1/2蛋白表达。结果miR-377在H_(2)O_(2)组和对照组中的表达量分别为(1.02±0.09)和(0.31±0.04),H_(2)O_(2)组中miR-377的表达量显著低于对照组(t=19.073,P<0.05)。48、72、96 h时,3组HTR-8/SVneo细胞增殖能力比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。H_(2)O_(2)组和miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移能力明显低于对照组(均P<0.05),miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移能力明显高于H_(2)O_(2)组(均P<0.05);H_(2)O_(2)组和miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞凋亡率明显高于对照组(均P<0.05),miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞凋亡率明显低于H_(2)O_(2)组(P<0.05);H_(2)O_(2)组和miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞中MDA水平明显高于对照组(均P<0.05),miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞中MDA水平明显低于H_(2)O_(2)组(P<0.05);H_(2)O_(2)组和miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞中SOD和GSH-Px水平明显低于对照组(均P<0.05),miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞中SOD和GSH-Px水平均显著高于H_(2)O_(2)组(均P<0.05);H_(2)O_(2)组和miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞中MEK1/2和ERK1/2磷酸化水平明显低于对照组(均P<0.05),miR-377模拟物组HTR-8/SVneo细胞中MEK1/2和ERK1/2磷酸化水平显著高于H_(2)O_(2)组(均P<0.05);与miR-377模拟物组相比,miR-377+U0126组中HTR-8/SVneo细胞迁移能力显著降低,凋亡率和MDA水平显著升高,SOD和GSH-Px水平显著降低(均P<0.05)。结论miR-377通过激活MAPK/ERK信号通路减弱了子痫前期HTR-8/SVneo细胞的凋亡和氧化应激。     

番茄红素对人肝L02细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的探索番茄红素(Lyc)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人肝L02细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法以H_2O_2诱导的L02细胞氧化损伤为模型,通过测定不同浓度番茄红素预处理后L02细胞的生存率以确定最佳处理浓度;通过测定细胞活性氧(ROS)水平、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、细胞内丙二醛(MDA)水平,培养液上清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)活性等指标观察番茄红素对细胞氧化损伤的保护作用;通过检测细胞核蛋白中的核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达量及其靶基因血红素加氧酶1(HO-1)和辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶1(NQO1)的mRNA表达水平等指标,观察番茄红素对Nrf2的核转位及其下游靶基因的激活作用。结果 10μmol/L番茄红素可显著提高H_2O_2培养条件下L02细胞的生存率,提高细胞内SOD、GSH-Px酶活性,降低胞内MDA含量及培养液中的ALT、AST、LDH酶活性(P0.05),并能提高细胞核蛋白的Nrf2含量及Nrf2靶基因HO-1和NQO1表达水平(P0.05)。结论番茄红素可通过促进Nrf2的核转位、增强其下游抗氧化基因的表达从而对H_2O_2诱导的L02细胞氧化损伤起保护作用。     

SIRT2抑制剂AGK2对硫代乙酰胺诱导的L02细胞线粒体保护作用

目的探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)的选择性抑制剂AGK2对硫代乙酰胺(TAA)诱导的L02肝细胞的线粒体保护作用及相关机制。方法体外培养人源性肝细胞系L02细胞, 以不同浓度SIRT2抑制剂AGK2作为干预药物, CCK8检测不同浓度的AGK2对L02细胞活性的影响, 选取适宜的浓度为AGK2干预组。正常组不予以任何药物干预;造模组给予90 mmol/L TAA进行造模;低、中、高剂量AGK2组在造模2 h前分别加入1、2、4 μmol/L AGK2。CCK8检测各组细胞活性。倒置光镜下观察细胞形态变化。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内异柠檬酸脱氢酶(IDH1)、苹果酸脱氢酶(MDH1)、SIRT2和裂变蛋白1同系物(FIS1)的蛋白相对表达量。共聚焦激光扫描显微镜下观察各组细胞SIRT2的表达情况。荧光显微镜下观察各组细胞线粒体膜电位。结果当AGK2的浓度为1、2、4 μmol/L时, 细胞的存活率分别为98.05%、95.76%、91.65%, 与正常组相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。当AGK2浓度为8、16、32、64、128 μmol/...     

锰暴露诱导BV2小胶质细胞环氧合酶2表达变化

目的 观察锰暴露诱导BV2小胶质细胞活化过程中COX2分子表达的变化。方法 实验中BV2细胞分3组,为对照组,50μM锰暴露组和100μM锰暴露组,分别处理12h,24h和48h。免疫荧光化学染色方法观察BV2细胞锰暴露24h后的活化情况,荧光实时定量PCR（qRT-PCR）和Western Blot法分别检测COX2分子mRNA和蛋白表达水平的改变。结果 免疫荧光化学染色结果显示,锰暴露24h后BV2小胶质细胞形态发生改变,细胞胞体变大变圆,突起变短或消失,活化细胞占总细胞数的比例增加（P<0.05）;实时定量PCR结果显示,锰暴露12h和24h后COX2mRNA水平增加（P<0.05）;Western Blot结果显示,锰暴露24h和48h后COX2蛋白表达水平增加（P<0.05）。结论 锰暴露能够诱导BV2细胞COX2分子表达增加,COX2可能参与了锰诱导小胶质细胞活化的过程。     

氟化钠对大鼠成骨肉瘤细胞UMR-106成骨活性标志物的影响

目的研究氟化钠(Na F)对大鼠成骨肉瘤细胞UMR-106成骨活性标志物的影响。方法体外培养的UMR-106细胞,分别以0,500,1 000,2 000μmol/L Na F处理24h、48h、72h。应用实时荧光定量PCR法检测各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、I型胶原蛋白(Col I)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)mRNA的表达;采用磷酸苯二钠法及蛋白免疫印迹法检测各组ALP活性和Col I、Runx2蛋白表达。结果 Na F处理UMR-106细胞24h后,各浓度Na F均能刺激BGP基因表达;与对照组比较,Na F浓度高于1 000μmol/L时,ALP、Runx2、BMP-2基因表达减弱;Na F处理72h后,500μmol/L组ALP、Runx2、BGP基因表达上调;Na F处理48h、72h后,当Na F浓度高于1000μmol/L时,ALP、Runx2、BMP-2表达及Ⅰ型胶原的合成随着Na F浓度的增高,抑制作用逐渐增强。UMR-106细胞及细胞培养液中ALP活性在24h 2 000μmol/L组及48h,72h 1 000μmol/L组明显升高,随着Na F浓度的升高,UMR-106细胞Col I蛋白的表达呈下降趋势。Runx2蛋白在2 000μmol/L组降低,差异有统计学意义。结论氟化钠对成骨肉瘤UMR-106细胞成骨活性具有双向作用,与氟化钠剂量及细胞因子间联合作用有关。     

黄芪多糖缓解HepG2细胞胰岛素抵抗模型的分子机制研究

目的观察黄芪多糖(AP)对HepG2细胞胰岛素抵抗模型的影响,从脂质代谢和氧化应激方面探讨其作用的分子机制。方法 HepG2细胞分为3组:对照组不进行干预处理;模型组加入200μL含胰岛素终浓度为10-6mol/L的细胞完全培养基,孵育48 h,建立胰岛素抵抗模型;AP组HepG2细胞胰岛素抵抗模型中加入最适浓度AP。24 h后,采用分光光度法检测3组细胞中H_2O_2浓度,采用RT-PCR法检测过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)的 RNA相对表达量。结果 AP可提高胰岛素抵抗模型中HepG2细胞存活率,呈一定的剂量依赖性,AP浓度为10μM时HepG2细胞的存活率最高,为(118.26±1.17)%。AP组、模型组和对照组HepG2细胞内H_2O_2浓度分别为(0.82±0.09)μM、(1.30±0.16)μM和(0.78±0.09)μM,AP组HepG2细胞中H_2O_2浓度较模型组降低(P0.05),与对照组差异无统计学意义(P0.05)。AP组、模型组和对照组HepG2细胞中PPARγ的m RNA相对表达量分别为0.96±0.04、0.51±0.05和1.00±0.11,AP组HepG2细胞中PPARγ的mRNA相对表达量较模型组升高(P0.05),与对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论在体外胰岛素抵抗模型中,AP能提高细胞存活率,降低细胞内H_2O_2浓度,增加PPARγ表达;AP可能影响脂质代谢途径以改善胰岛素抗体。     

鱼藤酮对PC12细胞凋亡及ERK1／2蛋白表达的影响

目的 观察鱼藤酮对PC12细胞凋亡以及细胞外信号调节酶1和2(ERK1/2)蛋白表达的影响,以深入探讨ERK1/2蛋白表达与鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡之间的关系.方法 通过建立PC12细胞鱼藤酮染毒模型,光镜下观察鱼藤酮对PC12细胞形态的影响;流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率的改变;Western蛋白印迹法和免疫组化法检测PC12细胞ERK1/2蛋白表达及定位情况.结果 鱼藤酮处理24 h后PC12细胞形态明显改变且凋亡率增加,20 μmol/LMEK抑制剂PD98059预处理1 h与单纯鱼藤酮染毒比较凋亡率没有显著性改变;磷酸化ERK1/2蛋白表达量随着鱼藤酮剂量的加大而增高,且活化的ERK1/2蛋白主要集中在胞浆内表达.结论 鱼藤酮体外作用可以诱导PC12细胞凋亡以及ERK1/2蛋白磷酸化表达增强.     

铅暴露对PC12细胞活力及DMT1表达影响

目的 探讨不同浓度、时间铅暴露对PC12细胞活力及DMT1表达的影响。方法 PC12细胞生长至对数期, 将其暴露于不同梯度(0、0.01、0.1、1、10、100 μmol/L)醋酸铅, 分别继续培养24、48、72 h;噻唑蓝法检测细胞活力, 逆转录-聚合酶链反应检测细胞二价金属离子转运体1(DMT1)mRNA的表达水平, Western blot检测DMT1蛋白表达水平。结果 铅暴露24 h时, 各剂量染铅组细胞活力无明显差异(P>0.05), 铅暴露48、72 h时, 细胞活力随染铅剂量增加而递减, 呈剂量效应关系(P<0.05);在铅暴露24 h时, DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达量随染铅浓度增加而升高(P<0.05), 铅暴露48 h时, 细胞DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达无明显变化(P>0.05), 在铅暴露72 h时, 细胞DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达水平随染铅浓度增加呈递减趋势(P<0.05);各组DMT1(-IRE)mRNA表达无明显改变(P>0.05)。结论 铅暴露可降低PC12细胞活力, 铅早期诱导PC12细胞DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达上调, 晚期使其表达量下降。     

宫颈癌患者放疗前后焦虑状态调查及分析

目的 探讨宫颈癌患者放疗前后焦虑状态的严重程度,为心理评估和心理治疗提供科学依据.方法 于2009年1～5月用焦虑自评量表对100例宫颈癌患者焦虑状态进行问卷调查.结果 宫颈癌患者放疗前后均存在不同程度的焦虑状态,放疗前焦虑发生率为86.7%,放疗后焦虑发生率为75.5%,放疗前焦虑得分为62.57±8.26,放疗后焦虑得分为52.74±7.36,放疗前的焦虑状态显著高于放疗后(t=8.77,P<0.05).结论 宫颈癌患者放疗前后存在不同程度的焦虑及焦虑状态,在放疗前后要为患者提供有效的心理咨询和心理治疗,尤其在放疗期间更要加强心理疏导,以促进患者早日康复并顺利渡过放疗期.     

西安交通大学附属儿童医院(西安市儿童医院)创建国家儿童区域医疗中心的实践探索

儿童健康事关家庭幸福和民族未来。加强儿童医疗卫生服务改革与发展,是健康中国建设和卫生健康事业发展的重要内容。西安交通大学附属儿童医院（西安市儿童医院）准确定位国家儿童区域医疗中心功能定位和职责任务,通过“引人才,带队伍,强专业”提高医疗质量;紧密依托高校,规范培训基地,促进人才培养;引进科研人才,建设重点实验室,加快科研转换;防治结合,防在治先,加强健康管理;建设智慧化医院,促进精细化管理,从而推动国家儿童区域性医疗中心的建设。     

聘用护士管理存在的问题及对策

聘用护士已成为护士人力资源的一支重要力量。文章以西安交通大学医学院第一附属医院为例,对聘用护士管理中存在的主要问题进行分析,并通过采取严格招聘程序、加强业务培训、健全考核制度、落实各种待遇、注重精神奖励等有效的措施,规范管理,从而稳定护理队伍,保证了临床护理工作的质量。     

患者满意度第三方评价的实施路径

开展第三方调查与评价是现代医院管理建设的一项重要内容。西安交通大学第一附属医院引入第三方调查与评价,连续3年探索患者满意度的测量方法。文章重点阐述医疗机构与第三方评价机构合作,开展患者满意度调查的实施路径,分析第三方调查与评价的关键问题,旨在更客观地了解患者满意度,有效提升医院管理与服务质量。     

多院区模态下突发公共卫生事件防控管理体系建设研究与实践: 以某三甲医院为例

公立医院是国家公共卫生应急管理体系建设中的重要支撑。西安交通大学第一附属医院通过实践分析应对重大突发公共卫生事件时“一院多区”发展模式在体系建设、保障机制等方面面临的机遇与挑战,以期为提升公立医院突发公共卫生事件综合处置能力,推动公立医院高质量发展提供借鉴。     

如何圆满完成呼吸与危重症医学科的规培任务

住院医师规范培训是医学生毕业后继续教育的重要组成部分,对于提高医疗技能有着极为重要的作用。西安交通大学第二附属医院是陕西省首批住院医师规范化培训基地,呼吸与危重症医学科是住院医师规范化培训的重点科室。该文从临床实践能力、基本科研能力、医德医风等方面分析如何高效地完成呼吸与危重症医学科的规培任务。     

医学生心理状况的追踪调查

目的:评定同一批医学生1年前后的心理健康状况。方法:于2003年对西安交通大学医学院1、2年级的本科生用症状自评量表(SCL-90)进行了测试,1年后对这批学生进行了复查。结果:基线调查有24.5%的医学生存在各种明显的心理健康问题,1年后明显下降为14.8%。与常模相比1年前学生除了躯体化,人际关系敏感和偏执因子低于常模外,其余的各因子都高于常模;而1年后只有抑郁,焦虑,恐怖和精神病性因子稍高于常模,其余因子都低于常模;且前后相比,后期9个因子都低于前期。结论:基线调查时医学生存在各种心理卫生问题,1年后心理卫生问题明显减轻。     

胎盘部位滋养细胞肿瘤的病例资料分析

目的 分析胎盘部位滋养细胞肿瘤的临床特征、病理学特点、治疗及预后.方法 分析西安交通大学第一附属医院收治的1例胎盘部位滋养细胞肿瘤患者的临床资料,并以"胎盘部位滋养细胞肿瘤"为主题词查阅中国知网(CNKI)及PubMed等数据库进行文献复习.结果 该患者继发于足月妊娠女婴后,持续阴道排液8月,接受了全子宫切除术,术后病理回报:胎盘部位滋养细胞肿瘤伴血管浸润,遂接受了7次化疗(2次联合化疗,5次EMA-CO方案化疗).随访14个月未发现复发或转移的征象.结论 胎盘部位滋养细胞肿瘤发病率低、临床表现缺乏特异性,确诊常依靠组织病理学检查.其首选的治疗方式为手术,有高危因素者术后宜选择EMA-CO或EMA-EP方案进行化疗.     

维生素D缺乏儿童热性惊厥临床特点分析

目的分析维生素D缺乏患儿热性惊厥的发病特点。方法收集2015年1月-2017年4月收治入院的热性惊厥患儿134例,分为维生素D缺乏组和维生素D正常组,比较两组患儿的发病特点。结果维生素D缺乏患儿热性惊厥发病年龄更小、住院时间更长、血钙含量更低、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比、C-反应蛋白(CRP)更高、血培养阳性率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论维生素D缺乏患儿更易发生急性呼吸道感染诱发热性惊厥,因此临床应该引起重视。     

机械取栓治疗急性缺血性脑卒中预后的评估

目的探讨机械取栓治疗急性缺血性脑卒中的预后。方法选取我院2016年1月至2017年7月收治的急性缺血性脑卒中患者128例,将机械取栓治疗者设为组1共42例,内科保守治疗者设为组2共86例。分析比较两组间预后指标:治疗24 h后△NIHSS评分等级,治疗1个月后mRS评分等级,颅内出血例数及住院天数。结果性别、年龄、高血压史、糖尿病史、吸烟史、卒中史、发病到治疗时间、入院时NIHSS评分、颅内病变部位、颅内病变血管这些因素在两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);两组之间△NIHSS评分比较有统计学意义(P<0.05),组1显效率(19.1%)高于组2(12.8%),组1有效率(21.4%)高于组2(7.0%),组1无效率(59.5%)低于组2(80.2%);两组治疗1个月后mRS评分等级比较有统计学意义(P<0.05),组1恢复优的比率(16.7%)高于组2(11.6%),组1恢复良的比率(38.1%)高于组2(25.6%),组1恢复差的比率(40.5%)低于组2(58.1%),组1死亡率(4.8%)和组2(4.7%)大致相仿。颅内出血比率及住院天数在两组之间比较无统计学意义(P>0.05)。结论在急性缺血性脑卒中治疗中,机械取栓的预后较内科保守治疗预后好。