精子DNA碎片对4080例体外受精出生子代的影响研究

正传统精液常规分析检测对男性不育的诊疗存在局限性,而精子质量的功能性检测在不育诊疗中起着越来越重要的作用。目前认为,精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)不但是不育男性的重要检测指标,而且对体外受精(VF)的治疗结果有着重要的预测作用。文献报道显示,精子的DFI与受精率、有效胚胎率、囊胚率、妊娠率以及妊娠早     

精子DNA碎片指数对有流产史患者IVF临床结局的影响

<正>精子DNA碎片指数(sperm DNA fragmentation index,DFI)是指发生DNA链断裂的精子占全部精子的百分率。有研究表明,精子DNA损伤将影响精子的受精能力、卵裂率以及着床率,成为导致不孕不育的重要因素之一,在女性不孕和反复流产中有近20%患者配偶存在精子DNA损伤且DFI 30%[1]。在一些反复流产患者中,其配偶的DFI显著高于正     

精子DNA碎片指数与精液参数相关性的初步研究

目的研究精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)与精液参数的关系以及精子DFI在评价男性生育力方面的应用价值。方法收集3020例男性患者精液标本,采用吖啶橙染色配合流式细胞仪技术检测DFI,同时通过计算机辅助精液分析系统(CASA)检测精子浓度、前向运动精子百分率(PR,%)、精子总活力[PR+NP(非前向运动精子)%]、精子总数和精液量(用称量法测定精液体积)。结果精子浓度与DFI值无明显关系(r=0.003,P0.05)。精液量和DFI值有明显关系(r=0.078,P0.01),精子总活力和DFI值有明显关系(r=-0.447,P0.01)。PR和DFI值有明显关系(r=-0.444,P0.01),精子总数和DFI值有明显关系(r=0.069,P0.01),差异均具有统计学意义。结论精子DNA碎片指数与精液量、精子总数存在明显正相关,与精子总活力、前向运动精子百分率呈明显负相关。在一定程度上反映了精液参数可以为评价精子DNA完整性提供参考。     

精子DNA碎片指数与年龄和精液参数的相关性及其对IVF-ET的影响

目的:探讨不育男性精子DNA碎片指数(DFI)与年龄和精液其他参数的相关性及其对IVF-ET的影响。方法:(1)6 162例精液样本来自2017年7月至2018年12月在中山大学附属江门医院生殖医学中心就诊的不育男性,利用计算机辅助精液分析系统(CASA)分析精子浓度和前向运动精子百分率,采用改良巴氏染色法结合人工显微镜检测计算正常形态精子百分率,并使用精子染色质结构分析法结合流式细胞术计算精子DFI。6 162例患者按精子DFI分为DFI≤15%、15%DFI30%、DFI≥30%3组,分析精子DFI与患者年龄、精子浓度、前向运动精子百分率和正常形态精子百分率的相关性;(2)回顾2015年1月至2018年12月接受IVF治疗,且在新鲜周期移植胚胎的1 206对不孕不育夫妇的临床资料,按精子DFI分为DFI≤10%、10%DFI≤20%、20%DFI≤30%、DFI30%4组,对比受精率、卵裂率、胚胎形成率、妊娠率等关键指标。结果:(1)精子DFI与患者年龄呈密切的正相关(r=0.508,P0.05),与精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率均呈不密切的负相关(r分别为-0.155、-0.111、-0.315,P0.05)。(2)当DFI20%时,IVF临床妊娠率显著下降;当DFI30%时,IVF可利用胚胎率也显著下降,且生化妊娠率明显上升。(3)精子DFI对IVF总受精率、正常受精率、总卵裂率、正常卵裂率、优质胚胎率无显著性影响。结论:不育男性精子DFI与年龄呈正相关性,与精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率呈不同程度的负相关性,且显著影响IVF-ET结局,是重要的精液参数。     

精子DNA碎片率对常规体外受精-胚胎移植结局的影响

目的 探讨精子DNA碎片率对常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响.方法 选取2010年1月到2010年7月间在本中心实施IVF的221对不孕夫妇,采用改良上游法优选精子,部分用于体外受精,部分采用精子染色质扩散法(the Sperm Chromatin Dispersion,SCD)分析DNA碎片率.根据精子DNA碎片指数(the DNA Fractionation Index,DFI)将患者分为两组:DFI＜15%组(A组)和DFI≥15%组(B组).比较两组受精率、胚胎可用率、优质胚胎率和妊娠率.结果 A组受精率、可用胚胎率分别为69.52%和61.81%,高于B组66.82%和57.91,差异无统计学意义:优质胚胎率A组为24.89%,显著高于B组16.98%(P＜0.05).妊娠率和胚胎种植率A组为40.12%和26.02%,B组为38.98%和25.22%,差异无统计学意义.结论 改良上游法优选精子的DNA碎片率对于常规IVF-ET的受精率、可用胚胎率无显著影响,但碎片率高的精子所得到的优质胚胎率下降,提示在常规IVF-ET周期前检查精子DNA碎片率具有临床应用价值.     

精子DNA损伤与不明原因复发性流产的关系

目的:探讨不明原因复发性流产与男方精子DNA损伤的关系。方法:精子DNA断裂损伤检测采用精子染色质扩散试验(sperm chromatin dispersion,SCD),以DNA断裂指数(DNA fragmentation index,DFI)表示。分别测定不明原因复发性流产(试验组,56例)男方与无流产史(对照组,31例)男方精子的DFI。结果:试验组DFI(11.0%～56.9%)高于30%的有21例(37.5%),对照组DFI(10.0%～36.8%)高于30%的有8例(25.8%)。复发性流产组的男方精子DFI均数比对照组精子DFI高(29.4%vs 25.5%),且差异显著(P<0.05)。结论:不明原因复发性流产可能与精子DNA损伤存在一定关系。     

植入前遗传学筛查在高精子DNA碎片指数不育夫妇行ICSI中的应用

目的:探讨植入前遗传学筛查(PGS)对高精子DNA碎片指数(DFI)不育夫妇的辅助生殖妊娠结局的应用价值。方法:选取2015年4月至2016年10月精子DFI≥15%行ICSI治疗的男性不育患者60例作为病例组,其中行PGS-ICSI治疗的患者30例作为高DFI-PGS组,未行PGS检测的患者30例作为高DFI-ICSI组;另选取DFI15%行ICSI治疗的30例患者作为低DFI-ICSI组。比较高DFI-ICSI组与低DFI-ICSI组正常受精率、优质胚胎率、囊胚形成率、胚胎种植率的差异;比较高DFI-PGS组与高DFI-ICSI组女方年龄,男方年龄、精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、FSH、LH、T、精子DFI、核蛋白不成熟精子百分率,正常受精率、优质胚胎率、囊胚形成率、胚胎种植率差异。结果:高DFI-ICSI组与低DFI-ICSI组相比,正常受精率[(65.38±24.62)%vs(73.00±17.00)%]、优质胚胎率[(62.41±25.97)%vs(73.00±22.10%)]、囊胚形成率[(62.55±25.21)%vs(64.30±18.60)%]均无统计学差异(P均0.05),胚胎种植率[31.25%vs 52.50%]有统计学差异(P0.01)。高DFI-PGS组与高DFI-ICSI组相比,女方年龄,男方年龄、精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、FSH、LH、T、精子DFI、核蛋白不成熟精子百分率,正常受精率[(69.76±15.82)%vs(65.38±24.62)%]、优质胚胎率[(64.42±30.75)%vs(62.41±25.97)%]、囊胚形成率[(67.53±19.24)%vs(62.55±25.21)%]均无统计学差异(P均0.05),两组间胚胎种植率(60.97%vs 31.25%)差异有统计学意义(P0.01)。结论:对于精子DFI≥15%的不育患者,行单纯ICSI治疗并不能提高其胚胎种植率;而行PGS可以显著提高患者胚胎种植率。     

精子DNA完整性与体外受精-胚胎移植临床结局的相关性研究

目的 探讨精子DNA完整性与精液参数及体外受精-胚胎移植（IVF-ET）/卵胞浆内单精子注射（ICSI）临床结局的关系.方法 选择2008年6月～2009年6月在解放军105医院生殖医学中心接受IVF/ICSI治疗的179对不育夫妇作为研究对象,采用吖啶橙试验（AOT）对116例实施IVF和63例实施ICSI治疗的男性患者进行精子DNA完整性分析,根据精子DNA碎片指数（DFI）将患者分为DFI≤30%组和DFI＞30%组,比较两组间精液参数、受精率、卵裂率、优胚率、胚胎冷冻率、着床率和临床妊娠率.结果 DFI ＞30%组精子畸形率显著高于≤30%组（P＜0.01）,但两组间精子密度、活动率、前向运动精子（a＋b）均无显著性差异（P＞0.05）;DFI＞30%组IVF和ICSI的优胚率、ICSI的胚胎着床率和临床妊娠率均显著低于DFI≤30%组（P＜0.01,P＜0.05）.结论 精子DNA完整性与精子形态密切相关,精子DNA损伤在IVF/ICSI过程中对胚胎质量有负面影响,并显著影响ICSI的胚胎着床率和妊娠率,建议行ICSI前应对精子DNA完整性进行评估.     

精子DNA完整性检测在男性不育诊断中的应用价值

目的分析精子DNA完整性与精液主要参数的相关性,探讨其在男性不育诊断中的临床应用价值.方法收集2010年6月至2012年2月在门诊就诊的465例男性患者的精液标本,参照第5版《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》严格标准进行精液常规及精子形态学分析,然后采用精子染色质扩散法检测精子DNA完整性,计算DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI),按DFI值分为3组,分别为A组DFI≤15%(n=183)、B组15%0.05).结论精子DNA完整性检测结合精液常规分析有助于评估男性精液质量及生育力.     

精子染色质完整性对IVF/ICSI临床结局的预测价值

目的:通过分析精子染色质完整性与体外受精胚胎移植(IVF-ET)、卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)结局之间的关系,探讨精子染色质完整性检测在辅助生殖技术(ART)中的预测价值。方法:采用精子染色质结构分析试验(SCSA)方法检测187个ART周期中精子的染色质完整性,以精子DNA损伤指数(DFI)为参数,分为高DFI组(DFI≥30%)和低DFI组(DFI<30%),两组中根据采用不同的体外受精方式分为IVF亚组和ICSI亚组。分别比较高DFI组、低DFI组中IVF亚组和ICSI亚组间受精率、卵裂率、D2天胚胎质量、D3天胚胎质量、临床妊娠率差异性。结果:在高DFI组中,行ICSI治疗的夫妇临床妊娠率显著高于行IVF治疗的夫妇,具有统计学意义;在行IVF治疗的夫妇中,比较高DFI组与低DFI组的各临床结局,未见统计学差异;在行ICSI夫妇中,比较高DFI组与低DFI组的各临床结局,未见统计学差异。结论:精子染色质完整性影响辅助生育技术的结局,在选择辅助生殖技术方案时,可作为常规精液检查的一个补充。     

不育患者精子DNA链损伤类型的研究及临床意义

目的:观察精子DNA单、双链损伤(SSB、DSB)在男性不育中的特征,探讨DSB与男性不育的关系,为男性不育的诊疗提供新的观察指标与思路。方法:选择男性不育患者60例以及同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性30例作为对照组,分析两组精子DNA损伤及精液主要参数的差异。精子浓度及活力采用计算机辅助精子分析系统,精子存活率分析采用低渗膨胀试验,精子形态采用Diff-Quik染色法,精子DNA损伤采用双尾彗星实验。结果:双尾彗星实验检测精子DNA完整性共有9种彗星模型。不育患者精子DNA损伤指数(DFI)为(33.8±13.1)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(19.2±11.4)%、SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(56.8±32.4)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(23.9±13.4)%、DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(70.8±19.5)%;与对照组比较[分别为(16.3±7.9)%、(14.9±7.6)%、(91.4±27.8)%、(6.1±2.7)%、(37.4±11.3)%)],SSB-DFI无显著性差异(P0.05),DSB-DFI、DFI和DSB-DFI/DFI显著高于对照组(P均0.01),SSB-DFI/DFI显著降低于对照组(P0.01)。绘制ROC曲线,DSB-DFI/DFI、DSB-DFI及DFI诊断男性不育最佳截断值分别为39.5%、15.85%和18.65%,ROCAUC、敏感度和特异性分别为(0.969,98.3%,90.0%)、(0.912,86.7%,80.0%)、(0.861,90.0%,70.0%)。不育组精子SSB-DFI及SSB-DFI/DFI与精液常规参数均无相关关系(P均0.05),DFI与前向运动精子百分率、精子存活率及正常形态精子百分率呈负相关(P0.05或P0.01),与精子浓度无相关关系(P0.05),精子DSB-DFI及DSB-DFI/DFI与精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率及正常形态精子百分率均呈负相关(P0.05或P0.01)。结论:影响男性不育的DAN损伤因素可能是DSB,而与SSB相关性不大,精子DNA链的损伤类型对男性生殖能力的评估有较大的参考价值。     

流式细胞术检测精子DNA损伤的标准化与质量控制初步研究

目的:对流式细胞术检测精子DNA损伤的标准化和质量控制进行初步研究.方法:随机选取精液样本,观察酸变性时间,吖啶橙(AO)染色时间,精液样本冷藏、冷冻及反复冻融对精子DNA碎片指数(DFI)结果的影响.结果:随着酸变性时间延长,精子DFI逐渐增高,与酸变性30 s相比,酸变性至2 min时DFI即显著增加(P＜0.05...     

精子DNA碎片指数和精子畸形率对ICSI临床结局的影响

目的:通过评估ICSI治疗前的精子畸形率(SMR)和精子DNA碎片指数(DFI),探讨精子DFI和SMR对卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕结局的影响。方法:共入组79对因少弱精子症实施第一周期ICSI治疗的不孕夫妇,在进入治疗周期前3⁶个月,评价精子浓度、前向运动精子百分率、SMR及DFI。主要观察SMR和DFI与ICSI结局参数的关系。结果:79例少弱精子症患者DFI正常51例,异常28例,异常组的DFI值明显升高(14.18%vs 41.47%);巧合的是,SMR正常组同样为51例,异常组28例,异常组的SMR值亦明显升高(87.88%vs98.46%)。按DFI正常(DFI≤25%)与异常(DFI>25%)分组,或按SMR正常(≤96%)与异常(>96%)分组,组间的双方年龄、女方BMI、获卵数、移植胚胎数等基本情况差异无统计学意义。DFI正常和异常组间,SMR正常和异常组间的受精卵子数、可移植胚胎数、早期流产率无显著差异;异常组生化妊娠率(43.5%vs 61.5%)和临床妊娠率(39.1%vs 56.4%)降低,但差异无统计学意义(P=0.19及0.10)。精子DFI与SMR呈显著正相关(r=0.231,P<0.05)。结论:精子DFI增高(>25%),与按严格标准检测的SMR增高(>96%)男性行ICSI治疗,生化妊娠率和临床妊娠率降低,但与正常者比较未发现有统计学差异,可能与样本量小有关,有必要深入研究。     

运用吖啶橙试验对302例不育症患者精子DNA完整性的评估

目的 探讨吖啶橙试验在精子DNA完整性评估中的应用价值.方法 选择男性不育症患者302例.通过吖啶橙试验(AOT)与计算机辅助精液分析(CASA)检测DFI(精子DNA损伤指数,即精液标本中存在DNA损伤的精子所占的比率)和精液常规参数.结果 所有302例不育患者中,DFI异常者72例,占23.84%.共260例患者精液常规参数异常,其中DFI异常50例,占19.23%;42例患者精液常规参数正常,DFI异常22例,占52.38%.畸形率异常组,DFI异常率为51.06%(24/47);活动率低下组,DFI异常率为38.65%(63/163);精子密度低下组,DFI异常率为36.67%(22/60).精子活动率和精子密度与DFI均呈负相关,r分别为-0.297,-0.217,P均<0.01;精子畸形率与DFI呈显著正相关,P<0.01,r=0.352.结论 评估精子DNA完整性在不育症临床上有重要作用,吖啶橙试验能够满足这一需要,值得推荐.     

精子DNA完整性对体外授精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的 探讨精子DNA完整性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的影响。方法 采用染色质扩散实验(SCD)对接受203个周期IVF-ET治疗的男方精液进行精子DNA完整性检测。因女方卵巢反应差取消10个周期,剩余193个周期。根据精子DNA碎片指数(DFI)是否超过30%和是否药物治疗分为3组:DFI异常组55例(DFI30%),DFI正常组(DFI30%)78例和DFI治疗组60例,其中DFI治疗组指患者DFI30%,经药物治疗3个月,降至30%以下。比较DFI与受精率、2PN受精率、卵裂率及优胚率的相关性;比较3组间的种植率、妊娠率和流产率。结果 精子DFI与受精率、2PN受精率及卵裂率均无显著相关性(P0.05),与优胚率具有显著负相关(P0.05)。DFI正常组和DFI治疗组(治疗后DFI30%)的种植率及妊娠率均高于DFI异常组,差异有统计学意义(P0.05)。DFI正常组与DFI治疗组的种植率及妊娠率差异均无统计学统计(P0.05)。3组流产率表现相当,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 精子DNA完整性对受精率、2PN受精率及卵裂率无影响,对优胚率、种植率及妊娠率有负面影响,药物改善精子DNA完整性后可提高优胚率、种植率及妊娠率。     

精子DNA完整性与精液参数的相关性研究

目的 探讨精子DNA完整性与精液参数之间的相关性.方法 收集2009年3月至2009年7月在解放军105医院生殖中心就诊的220例男性患者的精液标本,采用吖啶橙荧光染色法(AOT)检测精子核DNA碎片指数(DFI).按DFI值分为DFI≤30%、30%50%3组,对DFI与各项精液参数的相关性进行分析.结果 精子活率、活力力、正常形态率随DFI值的升高逐渐降低,各组间均有显著性差异(P<0.05);DFI与精子活率、活动力、正常形态率均呈显著负相关(P<0.05),与精液量及密度无显著相关性.结论 精子DNA损伤可导致精子形态学异常和活力下降,精子DFI是评估男性生育力的一个较好的参考指标.     

精子DNA碎片对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的比较不同精子DNA碎片指数(DFI)时胚胎发育和妊娠结局的差异,探讨精子DNA碎片对辅助生殖结局的影响。方法回顾性分析2016年10月至2018年12月在本院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的年龄小于37岁且卵巢储备功能正常的1 041例患者的临床资料,根据男方入院时生育力评估检测的DFI值分为4组:DFI10%组(n=277)、10%≤DFI20%组(n=480)、20%≤DFI30%组(n=183)及DFI≥30%组(n=101),比较各组患者的年龄、获卵数、胚胎受精率、优质胚胎率及妊娠率和流产率等。结果 4组间获卵数、MⅡ卵率及卵裂率比较无显著性差异(P0.05)。10%≤DFI20%组的受精率(81.04%)显著低于DFI10%组(83.39%)和20%≤DFI30%组(83.59%)(P0.05)。优质胚胎率随着DFI升高呈现下降趋势,DFI10%组(44.87%)显著高于10%≤DFI20%组(41.21%)及DFI≥30%组(37.51%)(P0.05)。4组间的临床妊娠率及流产率比较均无显著性差异(P0.05)。结论对于年龄小于37岁、接受IVF的女性患者,DFI的升高会对优质胚胎率产生不良影响,但对临床妊娠结局未见明显影响。     

男性不育患者精子DNA完整性与精浆氧化应激水平的关系及其对体外受精的影响

目的:探讨男性不育患者精子DNA完整性与精液常规参数、精浆氧化应激水平的关系,以及对体外受精(IVF)结局的影响。方法:采用精子染色质扩散法(SCD)检测433个IVF周期中精子DNA损伤性,根据精子DNA碎片指数(DFI)的不同,分为低DFI组(DFI30%)、高DFI组(DFI≥30%),比较2组精子浓度、前向运动精子百分率、快速前向运动精子百分率、精浆丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAC)水平及受精率、卵裂率、优胚率的差异。结果:高DFI组与低DFI组比较,前向运动精子百分率及快速前向运动精子百分率显著降低[(29.2±16.8)%vs(48.6±16.7)%、(9.4±6.6)%vs(19.0±9.1)%,P0.01],高DFI组精子浓度与低DFI组相比差异无显著性[(52.3±32.4)×106/ml vs(51.4±30.9)×106/ml,P0.05];高DFI组精浆中的MDA含量明显高于低DFI组[(2.28±0.26)nmol/L vs(0.95±0.18)nmol/L,P0.01],高DFI组精浆中的TAC含量明显低于低DFI组[(10.2±3.5)U/L vs(33.2±7.9)U/L,P0.01];高DFI组IVF受精率明显低于低DFI组[(58.9±30.0)%vs(77.2±25.0)%,P0.01],两组间卵裂率[(70.7±35.6)%vs(80.4±15.6]、优胚率[(40.4±31.3)%vs(41.7±29.4)]比较差异均无显著性(P均0.05)。结论:精子DNA损伤与氧化应激有关,同时精子DNA损伤可降低IVF受精率,影响IVF结局。     

不育患者精子DNA损伤和精液常规参数关系分析

目的探讨男性不育患者的精子DNA碎片率(DFI)与精液参数间相关性及精子DFI评价男性生育力方面的应用价值。方法精液标本均取自不育患者,以WHO精液分析标准行精液检测,根据结果分为精液参数正常组、弱精子症组、少精子症组、少弱精子症组。用染色质扩散实验法(SCD)检测精子DFI。结果精液参数正常组与参数异常组(包括弱精子症组、少精子症组和少弱精子症组)间的DFI有明显的差异(P0.05),不育组间DFI也存在差异(P0.01)。DFI与精子活动率、前向运动精子率存在明显的负相关性(r=-0.575,r=-0.547,P0.01),与精子浓度之间无相关性(r=-0.049,P0.05);精子DFI评价精液参数的ROC曲线下面积(AUC)达0.693,其阈值为19.5%(特异性:89.3%,敏感性:41.8%)。结论随着男性精液质量的下降,精子DFI明显升高,提示精子DNA损伤可能是引起男性不育的重要原因之一。精子DFI19.5%时,精液质量参数有进一步降低的趋势和风险。精子DFI的检测对评估男性生育能力有重要的临床意义。     

鱼鳔补肾丸改善男性精子DNA碎片指数的120例临床观察

目的探讨临床应用鱼鳔补肾丸改善男性精子DNA完整性的效果。方法 120例男性精子DNA碎片率(DFI值)高于25%的男性患者连续给予口服鱼鳔补肾丸,于口服30d、60d、90d时复查精子DNA完整性及精液常规参数,比较DFI及精子活力的改善。结果连续口服30d、60d、90d鱼鳔补肾丸后,检测患者精子各种参数指标分析,可见随着服用时间增加DFI持续性下降,DNA完整性提高比较差异均有统计学意义;a级精子百分率、(a+b)级精子百分率、精子活动率也有持续提高,对a级精子百分率、(a+b)级精子百分率、精子活动率提升的有效率与治疗前比较差异亦有统计学意义;服用不同天数后DFI值治疗有效率呈持续性提高。结论鱼鳔补肾丸可以明显降低不育患者精子DFI值,通过修复损伤精子DNA提高精子质量,从而改善男性患者的生育能力。