Fmr1基因敲除雄性小鼠生长指标的变化

目的对出生后0~56d的清洁级FVB小鼠和Fmr1基因敲除雄性小鼠的体重和体长指标进行分析比较,同时比较出生后28d的睾丸大小变化。方法挑选10周龄FVB小鼠和Fmr1基因敲除小鼠各20只(雌、雄各半),采取1∶1同居,全同胞兄妹近交繁殖,测定雄性子代生长发育指标,进行统计分析。结果出生后0~56d清洁级Fmr1基因敲除雄性小鼠体重与体长的增长与FVB小鼠差异无统计学意义(t=0.93,t=1.24,P>0.05),但出生后28d的FVB小鼠和Fmr1基因敲除雄性小鼠睾丸大小差别有统计学意义(t=4.12,P<0.05)。结论 Fmr1基因敲除不影响雄性小鼠正常的体重和体长的发育,但出生后28d的Fmr1基因敲除小鼠有巨睾征。     

初次交配日龄对NIH小鼠繁殖性能的影响

目的为系统研究不同初配日龄对NIH小鼠繁殖性能的影响。方法本试验按初配日龄分为4组,50、60、70、85 d各30对小鼠,记录了每对小鼠第1～6胎的繁殖性能。结果 70、85 d组在产仔数、离乳数、离乳率、出生及离乳仔鼠平均体重与50 d组有显著或极显著差异(P0. 05,P0. 01);与60 d组比在出生仔鼠平均体重、离乳数有显著差异(P0. 05);各组胎间隔无差异性(P0. 05); NIH小鼠第2～3胎平均产仔数与第1胎比具有明显升高(P0. 05),第5～6胎显著下降(P0. 05);第3～4胎离乳数与第1胎相比有差异性(P0. 05);出生仔鼠平均体重、离乳率随胎次增加而增加(P0. 05,P0. 01),离乳仔鼠平均体重无显著差异(P0. 05)。结论 NIH小鼠在70～85日龄初配繁殖性能较好,第2～3胎繁殖性能稳定,建议繁殖至第6胎。     

Fmr1基因敲除对小鼠生长发育的影响

目的：Fmr1基因敲除对小鼠生长发育的影响.方法：挑选10周龄FVB小鼠和Fmr1基因敲除小鼠各20只（雌、雄各半）,采取1∶1同居,全同胞兄妹近交繁殖,测定子代生长发育指标,进行统计分析.结果：Fmr1基因敲除小鼠体质量与体长分别为：0 d,（1.25.4±0.21）g,（38.99±1.74）mm;21 d,（8.17±2.26）g,（122.81±11.42）mm;60 d,（22.93±2.93）g,（180.19±7.46）mm;FVB小鼠体质量与体长分别为：0 d,（1.33±0.23）g,（40.53±3.05）mm;21 d,（7.75±1.56）g,（118.73±7.85）mm;60 d,（21.11±1.99）g,（176.43±5.73）mm.两个品系的小鼠体质量与体长的增长差异无统计学意义（P〉0.05）.结论：Fmr1基因敲除不影响小鼠正常的生长发育.     

FOXO3A基因敲除小鼠繁殖鉴定及骨髓造血干细胞表型初步分析

目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交配,选育出杂合型雌鼠和杂合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄两雌同笼合养方式进行繁育获得纯合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾标号,剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定,鉴定获得100 bp/186 bp两条条带的为杂合型小鼠(FOXO3A+/-),鉴定获得186 bp条带的为纯合型小鼠(FOXO3A-/-),鉴定获得100 bp条带的为野生型小鼠(FOXO3A+/+,WT);采用流式细胞术对鉴定出的野生型和纯合型小鼠进行骨髓细胞分型分析。结果 FOXO3A基因敲除小鼠已成功繁殖鉴定,子代基因敲除纯合型小鼠与杂合型小鼠长势正常,与野生型FVB/N小鼠相比外观、生长发育未见明显差异;已得到一定数量的纯合型小鼠用于后续实验;骨髓细胞计数结果显示,FOXO3A基因敲除纯合型小鼠骨髓有核细胞计数与野生型小鼠相比[(6. 167±1. 424) vs.(10±1. 732)],未见明显差异(P=0. 1625);流式分析结果显示:FOXO3A基因敲除小鼠骨髓中造血祖细胞(lin-scal-1~-ckit~+,HPC)比例明显升高(P0. 05),造血干细胞(lin-scal-1~+ckit~+,HSC)比例没有明显差异;造血干细胞和造血祖细胞数目未发现有明显差异(P0. 05)。结论经基因型鉴定已成功获得FOXO3A基因敲除小鼠。初步探讨FOXO3A基因敲除对小鼠骨髓细胞计数及分型未见明显影响,FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞的影响需要进一步的实验加以证明。     

SRC-3基因敲除小鼠的饲养繁殖及鉴定

目的繁殖和鉴定SRC-3基因敲除小鼠.方法将所引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,一旦获得雄性纯合子,就将其与雌性杂合子交配,依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠.结果SRC-3杂合子小鼠的饲养和繁殖均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠.结论正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得SRC-3基因敲除纯合子小鼠的有效途径.     

ZBTB20基因敲除小鼠出生后肝脏甲胎蛋白基因持续高表达的病理学意义

目的探讨出生后肝脏甲胎蛋白(AFP)基因异常高表达在ZBTB20基因敲除小鼠生长发育障碍、严重低血糖和未成年死亡等表型中可能的病理作用。方法将ZBTB20单基因敲除小鼠与AFP单基因敲除小鼠杂交,建立ZBTB20与AFP的联合基因敲除小鼠模型,观察并监测其与ZBTB20单基因敲除小鼠在生长发育、存活率及血糖水平上的差异。结果 ZBTB20/AFP双基因敲除小鼠繁殖成功后,通过观察和监测发现其在生长发育、生存率及血糖代谢等方面与ZBTB20单基因敲除小鼠相比无明显差异。结论 ZBTB20单基因敲除小鼠生长发育障碍、严重低血糖和未成年死亡等表型与其AFP基因出生后异常开放无显著关系。     

KM小鼠外部形态数量性状与肥满度的关系

随机抽取我国不同地区六个群体 2 8、5 6和 112日龄的 KM小鼠 ,称其体重 ,并对其全长、头长、体长和尾长进行测量 ,计算肥满度。发现 KM小鼠外部形态数量性状随生长发育时间延长而增加 (P<0 .0 5 ) ,其中 2 8和 5 6日龄增长最快。头长和体重在性别上的差异出现较早(2 8日龄 ) ,而体长和尾长出现较晚 (112日龄 )。逐步回归分析发现 ,年龄和体长对肥满度皆呈负性作用 ,全长和体重呈正性作用 ;对肥满度协同作用最大的数量性状 ,雌性为头长和体重 ,雄性为体重和体长。提示在优化我国 KM小鼠时可因性别差异选择不同的外部形态数量性状参数KM…     

类固醇受体辅活化子-1基因敲除小鼠的繁殖与筛选

目的 繁殖和鉴定SRC-1基因敲除小鼠.方法 将所引进的雄性野生型小鼠和雌性SRC-1基因敲除小鼠进行交配繁殖,繁殖成功后其子代均为杂合子,杂合子和杂合子再交配就可以得到野生型、杂合型及纯合子3种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,一旦获得雌性和雄性纯合子,其子代就均为纯合子.结果 SRC-1小鼠的饲养和繁殖均获得成功,亦成功获得了较多的SRC-1基因敲除纯合子小鼠.结论 正确的饲养繁殖以及筛选方法,可以获得较多的SRC-1基因敲除纯合子小鼠.     

共伴侣蛋白FKBP51在高脂诱导肥胖中的作用

目的 通过FKBP51基因敲除小鼠模型和细胞脂肪分化模型,探究FKBP51在高脂诱导肥胖中的机制。 方法 4周龄雄性野生型和FKBP51基因敲除小鼠以普通或高脂饲料单只单笼喂养6周,每周记录小鼠体重和饮食量,应用MM-100代谢笼系统,监测各组小鼠24 h内氧气消耗量、二氧化碳产生量、呼吸交换率和产热量的变化,对上述小鼠肝脏组织进行油红O染色,同时检测肝脏和脂肪组织代谢相关基因的表达情况。同时对取自野生型和FKBP51基因敲除小鼠的永生化成纤维细胞(MEF)进行脂肪诱导分化,观察FKBP51缺失对脂肪分化的影响。 结果 高脂饮食诱导后,两种基因型小鼠饮食量无明显变化,但与野生型小鼠相比,FKBP51基因敲除小鼠体重明显减轻,肝脏中脂滴减少。FKBP51基因敲除小鼠在基础和高脂诱导条件下,氧气消耗量、二氧化碳产生量、呼吸交换率以及产热量均高于野生型小鼠,肝脏中糖异生相关酶PEPCK、G6Pase等表达上调,脂肪中能量代谢相关基因UCP-1等表达上调。此外,FKBP51基因缺失的MEF诱导脂肪分化,细胞内脂滴明显少于野生型MEF细胞。 结论 FKBP51基因在脂肪合成和能量代谢方面起着重要作用,因此FKBP51基因缺失小鼠能够抵制高脂诱导的肥胖。     

Nrf2基因敲除小鼠的饲养繁殖及基因型鉴定

目的 繁殖和鉴定Nrf2基因敲除小鼠.方法 将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功的子代有3种基因型小鼠,即野生型、杂合子以及纯合子小鼠,从繁殖成功的小鼠尾巴中提取基因组DNA,用PCR法鉴定小鼠的基因型.结果 Nrf2杂合子小鼠的繁殖和饲养均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠.结论 正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得Nrf2基因敲除纯合子小鼠的有效途径.     

α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝脏炎症的影响研究

目的 探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠肝脏炎症的影响。方法 2014年6月-2015年5月,选取40只SPF级雄性6周龄C57BL/6J小鼠和40只SPF级雄性6周龄α7nAChR基因敲除小鼠,采用随机数字表法分为C57普通饲料组、C57高脂高糖组、基因敲除普通饲料组、基因敲除高脂高糖组,每组20只。C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予普通饲料喂养,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予高脂饲料喂养同时饮用20%果糖饮用水,喂养24周,建立NASH小鼠模型;小鼠饲养期间定期称量体质量,并且尾静脉取血检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）水平。21周时 C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予400 μg/kg烟碱腹腔注射;C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,均1次/d,共3周。24周后处死小鼠,眼球取血,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清炎性细胞因子白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,观察小鼠肝脏外观变化及肝脏湿重,肝脏病理切片染色观察炎症程度和脂肪变性情况。结果 第12、15、18、21、24周时,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高（P＜0.05）;第12、15、18、21、24周时,基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较C57高脂高糖组升高（P＜0.05）。C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清ALT、AST、TG、TC水平,第24周时血清IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高（P＜0.05）;基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清ALT、AST水平,第16、24周时血清TG、TC水平,第24周时血清IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较C57高脂高糖组升高（P＜0.05）。病理切片苏木素-伊红（HE）、油红染色结果显示：C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠炎症程度和脂肪变性均不明显,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠在第8周开始出现轻微炎症和脂肪变性,以小脂滴为主,到第16、24周,炎症和脂肪变性逐渐加重,脂肪变性以中、大滴为主,基因敲除高脂高糖组小鼠肝脏组织炎症程度和脂肪变性均明显重于C57高脂高糖组小鼠。结论 α7nAChR基因敲除能够明显加重NASH小鼠的肝脏炎症。     

小鼠缺血性心力衰竭模型的建立及超声评价

目的：探讨国产昆明白化（KM）小鼠缺血性心力衰竭模型的建立及无创经胸超声方法评价心力衰竭和心室重构的可行性。方法：100只雄性KM小鼠随机分为心力衰竭组和对照组，心力衰竭组80只采用开胸手术结扎左冠状动脉建立急性心肌梗死模型，对照组为同期开胸假手术组，除不结扎冠状动脉外，余同心力衰竭组。采用15MHz高频超声分别于术后1、2和4周行经胸检查，比较2组各器官重量、左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室短轴缩短率（FS）、Aws、Awd、Pws、Pwd、HR和梗塞面积比（IS）。结果：（1）心力衰竭组手术成功率为91．2％（73／80），4周存活率为82．2％（60／73）。（2）心力衰竭组术后1、2和4周LVESD、LVEDD较术前及对照组明显增加（P均 〈0．05），左心室内径于2周时增加最为明显，4周时保持稳定；FS于术后2周较术前及对照组显著降低（P均〈0．05）；Aws术后4周较术前及对照组显著减小（P均〈0．05）；（3）心力衰竭组术后4周体重较对照组明显降低，心脏、左心室及心房的重量较对照组显著增加，肝脏重量较对照组显著减轻（P均〈0．05）。结论：国产远交系KM小鼠缺血性心力衰竭模型与近交系小鼠实验结果接近，采用无创经胸超声的方法评价心力衰竭和心室重构切实可行，可模拟临床缺血性心力衰竭。     

Fmrl基因敲除小鼠血清雌性激素含量的比较研究

目的测定不同周龄和超排前后雌性Fmrl基因敲除FVB小鼠和背景FVB小鼠血清生殖激素雌二醇（R）、孕酮（P）、促黄体生成激素（LH）和促卵泡生成激素（FSH）含量，比较不同周龄和不同状态下敲除基因动物的血清性激素水平，研究敲除基因对动物的发育和生殖生理等方面的影响。方法用放射免疫分析法测定上述动物不同周龄和超排前后血清E2、P、LH和FSH的含量，测定Fmrl基因敲除小鼠不同周龄时的超排卵数，进行统计学分析。结果6周龄的雌性Fmrl基因敲除小鼠与FVB小鼠比较，LH、FSH值差异无显著性（P〉0．05），E2的P值差异有显著性（P〈0．05）。lO周龄的两组动物间血清生殖激素水平和超排卵数均差异无显著性（P〉0．05）。lO周龄Fmrl基因敲除小鼠的超排卵数与6周龄动物比较差异有显著性（P〈0．05）。结论敲除Fmrl基因对动物雌性激素的分泌有影响，该基因与动物的生殖生理有一定的关联。     

水通道蛋白4基因敲除对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的影响

目的：评价水通道蛋白4（AQP4）在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化中的作用。方法：采用博莱霉素3 mg/kg气管内注射诱导AQP4基因敲除（AQP4-/-）小鼠发生肺纤维化,以野生型小鼠为对照,造模后第3、7、14、28天处死动物,检测肺系数、血清转化生长因子 β1（TGF β1）、肿瘤坏死因子 α（TNF α）水平和肺组织羟脯氨酸含量,作肺组织病理切片行HE染色和Masson染色观察肺部炎症及纤维化程度。结果：造模第14天,野生型小鼠肺系数增高为野生型对照小鼠的19倍（1269 ± 605与680 ± 082,q=4204,P<005）;AQP4-/-小鼠肺系数增高为AQP4-/-对照小鼠的23倍（1405 ± 582与605± 058,q=5172,P<001）,但与野生型小鼠比较,AQP4基因敲除对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化过程中肺系数增高无明显影响（P>005）。小鼠肺组织羟脯氨酸含量随造模时间逐步增加,造模第28天,野生型小鼠肺组织羟脯氨酸含量增加为对照的155倍［（085 ± 022）μg/mg与（055 ± 014）μg/mg,q=4313,P<005］;AQP4-/-小鼠肺组织羟脯氨酸含量增加为对照的14倍［（084 ± 013）μg/mg与（060 ± 014）μg/mg,q=4595,P<005］,但与野生型小鼠比较,AQP4基因敲除对小鼠肺纤维化过程中肺组织羟脯氨酸含量增加无明显影响（P>005）。造模后,小鼠血清TGF β1、TNF α水平有增加趋势,但这两个指标在野生型和AQP4-/-小鼠间差别无统计学意义（均P>005）。肺组织病理学检查结果表明AQP4基因敲除对博莱霉素诱导的小鼠肺部炎症和纤维化无明显影响。结论：AQP4基因敲除对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化未产生明显影响。     

雌激素受体基因ERβ调控小鼠脊柱线性生长

目的 初步研究ERβ在青春期脊柱线性生长中的调控作用.方法 取相当于人青春前期的5周龄昆明小鼠36只,其中18只雌性小鼠,18只雄性小鼠.应用随机数字表进行随机分组,将雌雄小鼠各分为3组,分别为ERβ RNAi组、空白对照组和阴性对照组.通过尾静脉注射转染ERβ RNAi逆转录病毒载体和阴性对照组逆转录病毒载体,进行基因沉默的在体实验.各组小鼠均在相同条件下分笼喂养.分别于在体动物实验的当天、2周、4周和6周时测量各组小鼠身长、体重.于第6周时麻醉下处死小鼠,测量各组小鼠第一腰椎高度.应用SPSS16.0软件统计分析各组间差异的显著性.结果 在雌性小鼠组中,ERβ RNAi组小鼠身长在第2次和第3次测量时的增加值明显高于空白对照组和阴性对照组;ERβRNAi组小鼠体重增加值小于空白对照组和阴性对照组;ERβ RNAi组小鼠身长/体重比在第2次和第3次测量时的增加值明显大于空白对照组和阴性对照组;差异有统计学意义(P＜0.05);6周后测量ERβ RNAi组小鼠第1腰椎高度明显大于阴性对照组和空白对照组(P＜0.0).而在雄性小鼠中,以上各检测指示均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ERβ基因沉默后,促进雌性小鼠脊柱生长.据此可以反向推断,雌激素与ERβ特异性结合,抑制雌性脊柱生长.     

水通道蛋白1基因敲除小鼠的饲养繁殖与基因型鉴定

目的 繁殖和基因型鉴定水通道蛋白1（aquaporin-1，AQP-1）基因敲除小鼠。方法 将所引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖，繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型，提取每只小鼠尾部基因组DNA，用PCR法进行鉴定，一旦获得雄性纯合子，将其与雌性杂合子交配，依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结果AQP-1基因敲除杂合子小鼠的饲养和繁殖及鉴定均获得成功，并得到较多的基因敲除纯合子小鼠。结论正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从亲代杂合子小鼠中获得AQP-1基因敲除纯合子小鼠的有效途径。     

水通道蛋白3基因敲除小鼠的饲养繁殖及鉴定

目的: 繁殖和鉴定水通道蛋白3(AQP-3)基因敲除小鼠。方法: 将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型,提取每种基因型小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,将其雄性纯合子与雌性杂合子交配,依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结果: AQP-3杂合子小鼠的繁殖和饲养均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠。结论: 正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得AQP-3基因敲除纯合子小鼠的有效途径。     

FMR1基因敲除小鼠的繁殖及基因鉴定

目的繁殖和鉴定脆性X智力低下蛋白基因敲除小鼠。方法引进FMR1基因敲除小鼠,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,获得的雄性纯合子子代小鼠与杂合子雌鼠进行交配。结果 FMR1基因敲除小鼠的饲养和繁殖获得成功,获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结论正确的饲养繁殖以及鉴定方法是获得FMR1基因敲除纯合子小鼠的有效途径。     

活疫苗及其生产基质中Sendai病毒RT-PCR检测方法的研究

对我国六个主要单位饲养的KM小鼠的体重及10种脏器重量进行测定,并计算其脏器重量系数。结果显示,六个KM小鼠群体间体重及10种脏器重量均有差异（P＜0．05）,在屏障环境下饲养的KM小鼠群体的体生长及大部分脏器发育比较快;而脾脏和肾上腺发育显得较为缓慢,与其它5个群体相比存在极显著性差异。作者认为,加速我国KM小鼠的标准化研究迫在眉睫。     

利钠肽受体-A基因敲除小鼠的繁育与鉴定

目的:繁殖和鉴定NPR-A基因敲除小鼠.方法:将所引进的雄性野生型和雌性NPR-A基因敲除杂合子小鼠进行交配繁殖,可以得到野生子、杂合子及纯合子3种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行基因型鉴定.结果:NPR-A基因敲除小鼠的饲养和繁殖均获得成功,成功获得了较多的NPR-A基因敲除纯合子小鼠.结论:雌、雄性NPR-A基因敲除杂合子小鼠交配是繁育NPR-A基因敲除纯合子子鼠的较好方法;用PCR方法能够精确鉴定NPR-A基因敲除纯合子子鼠.