CD133、CD90在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测肝癌干细胞标志物CD133和CD90在原发性肝癌组织中的表达情况,分析其临床病理学意义.方法 取93例原发性肝癌和10例正常肝组织,采用免疫组织化学(SP法)染色检测CD133和CD90表达.结果 93例肝癌组织中,71例(76.3%)CD133表达阳性,阳性细胞百分数为(6.4±3.3)%,64例(68.8%)CD90表达阳性,阳性细胞百分数为(4.3±3.9)%,10例正常肝组织中未见CD133和CD90阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01);肝癌TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者CD133和CD90阳性细胞百分数[(8.1±3.7)%,(5.7±4.2)%]显著高于Ⅰ～Ⅱ期[(4.1±2.3)%,(2.3±1.9)%](P<0.01);Spearman相关分析显示,随病理组织学分级级别增高,CD133和CD90的表达增多(P<0.05);CD133与CD90在肝癌组织中的表达呈正相关(r=0.402,P<0.01).结论 肝癌组织中存在CD133和CD90阳性肝癌干细胞,其表达量与肝癌TNM分期和病理组织学分级呈正相关.     

肝细胞癌组织检测肿瘤干细胞标记物CD133和CD90的临床表达意义

目的探究肝细胞癌组织检测肿瘤干细胞标记物CD133和CD90的临床表达意义。方法资料随机选自2011年5月-2013年5月在本院诊治的肝细胞癌进行手术患者肝癌的组织标本38例作研究组，及同一例患者的癌旁组织标本38例作对照组，同时选取良性病患者正常的肝组织38例作参照组。分析三组标本的CD133和CD90的表达情况，及肝癌患者病理特征、预后情况。结果研究组CD133与CD90临床表达的水平，均比对照组及参照组高；研究组标本中CD133与CD90临床表达和癌组织的分化程度，胆管或静脉癌栓有无的临床病理特征存在明显相关性（P〈0．05）；研究组中CD133与CD90的阳性表达患者的生存率，均明显比阴性患者低（P〈0．05）。结论肿瘤干细胞标记物CD133与CD90于肝细胞癌组织生长、侵袭及转移中有重要作用，且能够预测肝癌患者预后生存情况，对CD133和CD90的临床表达进行研究，具有一定临床应用价值。     

子宫内膜异位症治疗前后CD19＋CD5＋B细胞变化的研究

目的研究子宫内膜异位症患者治疗前、后CD19＋CD5＋B细胞数量及分泌细胞因子的变化,为临床治疗提供实验依据。方法对本院35例子宫内膜异位症患者（实验组）,29例子宫肌瘤患者（对照组）行流式细胞术、Q—PCR检测患者外周血、腹腔冲洗液及子宫内膜组织中CD19＋CD5＋B细胞的数量及分泌细胞因子的检测,比较治疗前、后子宫内膜异位症患者外周血中CD19＋CD5＋B细胞数量以及分泌细胞因子的变化。结果子宫内膜异位症患者外周血、腹腔冲洗液及异位子宫内膜组织中CD19＋CD5＋B细胞的比例高于对照组[（13．1±1．9）％、（12．1±2．0）％、（11．7±1．7）％vs（2．9±0．8）％、（2．6±0．9）％、（2．8±1．1）％,P〈0．01],CD19＋CD5＋B细胞的IFN-1mRNA的表达水平高于对照组[（7．2±1．0）×10^3、（7．9±1．3）×10^3、（7．4±1．1）×10^3拷贝vs（1．9±0．7）×10^3、（2．2±0．8）×10^3、（2．0±0．5）×10^3拷贝],IL-10mRNA表达水平高于对照组[（6．4±0．9）×10^3、（6．8±1．2）×10^3、（6．1±0．8）×10^3拷贝vs（1．7±0．5）×10^3、（2．1±0．9）×10^3、（1．6±0．4）×10^3拷贝,P〈0．01]。治疗后,子宫内膜异位症患者外周血中CD19＋CD5＋B细胞数量低于治疗前[（13．1±1．9）％vs（7．3±1．2）％,t=16．12,P〈0．01],仍高于对照组[（2．8＋-0．7）％,t=18．51,P〈0．01],CD19＋CD5＋B细胞中的IFN-y mRNA的表达水平低于治疗前[（7．2±1．0）×10^3拷贝vs（3．3±0．6）×10^3拷贝,t=20．89,P〈0．01],仍高于对照组[（2．4±0．5）×10^3拷贝,t=6．702,P〈0．01],IL-10mRNA的表达水平低于治疗前[（6．4±0．9）×10^3拷贝vs（3．2±0．7）×10^3拷贝,t=17．53,P〈0．01],仍高于对照组[（2．1±0．4）×10^3拷贝,t=7．79,P〈0．01]。结论子宫内膜异位症中CD19＋CD5＋B细胞数量的增加,通过高分泌IFN-γ、IL-10,其参与了疾病的发生。     

肝癌患者外周血CD4^＋／CD25^＋调节T细胞分析

目的探讨肝癌患者外周血CD4^＋／CD25^＋调节T细胞（Treg）水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测63例原发性肝癌患者和30例健康人外周血CD4^＋／CD25^＋调节T细胞水平,并进行水平比较和分层分析。结果肝癌组外周血CD4^＋／CD25^＋调节T细胞水平（14．06±2．34）％,明显高于健康对照组（6．05±1．57）％（P〈0．05）;外周血CD4^＋／CD25^＋调节T细胞水平与肝癌病理类型无相关性（P〉0．05）;与临床分期密切相关,Ⅰ＋Ⅱ期亚组（8．31±1．43）％与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,而与Ⅲ期亚组（13．68±2．31）%、Ⅳ期亚组（18．50±2．98）％比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论肝癌患者外周血CD4^＋／CD25^＋调节T细胞水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肝癌患者预后的一项指标。     

系统性硬皮病患者外周血CD4^＋T细胞中CD40L表达水平的研究

目的研究系统性硬皮病（SSc）患者外周血CD4^＋T细胞中CIM0配体（CIMOL）的表达水平。方法应用密度梯度离心法分离26例SSc患者（女16例,男10例）和25例正常对照者（女15例,男10例）的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4^＋T细胞。RT—PCR检测CD4^＋T细胞中CD40L mRNA的表达水平;流式细胞术检测CD40L蛋白在CD4^＋T细胞中的表达水平。结果SSc女性患者CD4^＋T细胞中CD40L mRNA和CD40L蛋白的表达水平均显著高于正常女性对照组[5．61±1．86vs2．80±0．94,P〈0．01;（6．70±3．55）％vs（2．37±1．39）％,P〈0．05];SSc男性患者CD40L mRNA和CD40L蛋白的表达水平与正常男性对照组相比差异均无统计学意义[2．59±0．89vs1．92±0．56,P〉0．05;（2．06±1．09）％vs（2．13±0．87）％,P〉0．05]。结论女性SSc患者CD^＋T细胞中CD40L表达显著增高,而男性患者无明显改变,提示CD40L仅在女性SSc发病中起着重要的作用。     

人脑胶质瘤中MMP-9、CD133蛋白的表达及临床意义

目的 探讨人脑胶质瘤中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤干细胞标志物CD133蛋白的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测66例不同级别胶质瘤组织标本及15例正常脑组织标本中MMP-9、CD133蛋白表达.结果 人脑胶质瘤标本中MMP-9、CD133蛋白表达明显升高;CD133及MMP-9蛋白总的阳性细胞表达率随着胶质瘤病理级别的增加而增高（P〈0.01）;人脑胶质瘤中CD133蛋白的阳性细胞表达率和MMP-9蛋白阳性细胞表达率成正相关（P〈0.01）.结论 人脑胶质瘤中MMP-9、CD133蛋白的表达与脑胶质瘤的恶性程度密切相关;可能在脑胶质瘤的侵袭性生长、复发和转移过程中起协同作用.     

红细胞调控CD4／CD8的血细胞快速培养实验研究

目的利用系统免疫学血细胞培养系统模式,在体外研究红细胞调控CD4／CD8规律及其意义。方法22例人枸橼酸抗凝新鲜血（11例正常人和11例原发性肝癌患者）。全血细胞培养组（自然组）：0．2ml全血细胞悬液加0．3ml血浆和0．2ml生理盐水,白细胞培养组（分离组）：0．2ml白细胞悬液加0．3ml血浆和0．2m1生理盐水,充分混匀,37℃温育1小时,2000转／分离心5分钟,两管的白细胞CD4和CD8表达水平用PC-5酶标抗CD4单抗和FITC-酶标抗CD8单抗测定．红细胞调节率=（全血细胞培养组CD4或CD8或CD4／CD8水平-白细胞培养组CD4或CD8或CD4／CD8水平）÷白细胞培养组CD4或CD8或CD4／CD8水平。结果22例全血细胞培养组CD4／CD8水平（1．40±0．59）明显高于白细胞培养组（0．48±0．26）,t=6．6918,P〈0．01,正常人的白细胞培养组CD4／CD8水平（0．58±0．27）明显高于肝癌的白细胞培养组CD4／CD8水平（0．35±0．19,P〈0．01）,正常人CD4／CD8调节率（2．42±2．39）高于肝癌患者CD4／CD8调节率（2．07±1．27）。结论本实验研究属于系统免疫学和计算免疫学领域,正常人红细胞能高调节CD4／CD8水平,在原发性肝癌中,细胞免疫功能低下,表现CD4／CD8表达低水平与红细胞对CD4／CD8低调节率密切相关。     

CD44v6在非小细胞肺癌中表达及其临床意义

目的探讨CD44v6蛋白在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测65例原发性NSCLC和20例正常肺组织中CD44v6蛋白的表达水平。结果正常肺组织未见阳性表达，NSCLE组阳性表达率为69．2％，两组比较差异有显著性（P＜0．05）。其中鳞癌和腺癌的阳性表达率分别为78．1％和60．6％，差异无显著性（P＞0．05）。在NSCLC中，CD44v6在病理分级Ⅰ＋Ⅱ级和Ⅲ级的阳性表达率分别为63．6％和75．0％，两组间无显著差异（P＞0．05）。在TNM分期Ⅰ＋Ⅱ期和Ⅲ＋Ⅳ期阳性表达率分别为57．1％和83，3％；有无淋巴结转移组的阳性表达率分别为78．9％和55．6％。以上两组间比较差异均有显著性（P＜0．05）。结论CD44v6阳性表达与NSCLC的发生，临床进展及淋巴结转移密切相关，高表达者提示伴有淋巴结转移，临床已进入晚期。     

人肺腺癌肿瘤细胞免疫表型CDl33、CD34、CD44的实验研究

目的拟验证CDl33、CD34、CD44作为人肺腺癌肿瘤干细胞表面标记物的合理性。方法采集新鲜肺腺癌组织标本,利用两种体外培养方法扩增出贴壁细胞和悬浮细胞球两种肿瘤细胞,采用免疫荧光检测比较CDl33、CD34和CD44在两种培养细胞中表达的差异。结果悬浮球肿瘤细胞培养较贴壁肿瘤细胞生长速度慢、维持时间长且成功率高（72．5％VS47．5％,P〈0．05）。CDl33、CD34和CD44在悬浮细胞球中表达率和表达量明显高于贴壁肿瘤细胞（68．97％,82．76％,93．10％VS5．26％,15．79％,5．26％,P〈0．01）。结论CDl33、CD34和CD44可能作为分离人肺腺癌肿瘤干细胞的表面蛋白表标记组合。     

原发性肝癌组织中三种凋亡相关基因的表达及意义

目的探讨原发性肝癌组织中三种凋亡相关基因：XIAP、Smac及Caspases-3的表达及意义。方法应用免疫组化方法检测67例原发性肝癌组织中XIAP、Smac及Caspases-3的表达情况。结果XIAP、Smac及Caspases-3在正常肝组织中的阳性率分别为（5．9±1．0）％、（90．1±0．8）％和（87．7±1．1）％,在肝癌组织中的阳性率分别为（89．7±0．7）％、（53．21±1．3）％和（49．8±0．9）％,三者在不同性质组织问差异均有统计学意义（t=7．78,5．37,6．01,P〈0．05）;肝癌组织中XIAP与Caspases-3的表达呈负相关（r=-0．69,P〈0．05）,Smac与Caspases-3的表达呈正相关（r=0．67,P〈0．05）。结论XIAP、Smac通过影响Caspases-3的表达拮抗细胞凋亡过程,参与原发性肝癌的发生、发展。     

抗结核急性药物性肝损伤患者外周血CD_8~+T细胞上CD_(28)表达及意义

[目的]通过对抗结核急性药物性肝损伤患者外周血CD+8CD-28、CD+8CD+28细胞百分率检测,探讨其在抗结核急性药物性肝损伤中表达及意义。[方法]应用流式细胞术检测抗结核急性药物性肝损伤组42例、抗结核治疗肝功能正常组232例外周血中CD+8CD-28、CD+8CD+28细胞百分率;两组间均数的比较采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。[结果]抗结核急性药物性肝损伤组外周血CD+8CD-28细胞百分率低于抗结核肝功能正常组(12.2±7.7%和23.6±10.4%),两组间差异有统计学意义(t=4.782,P0.01);抗结核急性药物性肝损伤组CD+8CD+28细胞高于抗结核肝功能正常组(23.5±9.1%和10.2±6.7%),两组间差异有统计学意义(t=5.356,P0.01)[结论]抗结核急性药物性肝损伤外周血CD+8CD-28T细胞百分率减少,CD+8CD+28T细胞百分率增加;CD+8T细胞上CD28表达可作为抗结核急性药物性肝损伤免疫学检测标志。     

膀胱尿路上皮癌中TBX2与MDM2蛋白的表达及临床意义

目的研究膀胱尿路上皮癌中TBX2、MDM2蛋白的表达与膀胱尿路上皮癌患者各临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学Envision^TM二步法检测90例膀胱尿路上皮癌和20例正常膀胱黏膜组织中TBX2、MDM2的表达情况。结果在正常膀胱黏膜组织中TBX2、MDM2蛋白的表达阳性率为0，在膀胱尿路上皮癌中，TBX2的阳性率为65．6％（59／90），随着TBX2表达程度的增高，癌组织的分化程度越低、临床分期越晚、更易出现复发（P〈0．01）。MDM2的阳性率为31．1％（28／90），随着癌组织分化程度的降低，MDM2的阳性率升高（P〈0．01）；出现复发的膀胱尿路上皮癌中MDM2的阳性率为57．5％（23／40），无复发的膀胱尿路上皮癌中，MDM2的阳性率仅为10．0％（5／50），两者差异有统计学意义（P〈0．01）。pTNM分期Ta～T1期MDM2阳性率为0（0／52），T2～T3期MDM2阳性率为73．7％（28／38），MDM2阳性患者pTNM分期更晚（P〈0．01）。癌组织中TBX2的表达与MDM2呈正相关（r=0．487，P〈0．05）。结论TBX2及MDM2在膀胱尿路上皮癌中的高表达与肿瘤的侵袭及复发有关。     

重症肌无力患者的外周血CD8~+CD28~-T细胞的变化及意义

目的探讨CD8+CD28-T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用。方法采用流式细胞术对51例MG患者和35例健康对照者外周血中CD8+CD28-T细胞的构成比进行测定。结果 MG患者外周血中CD8+CD28-T细胞明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.01);病情未能控制的MG患者外周血中CD8+CD28-T淋巴细胞构成比显著低于正常对照组(P0.01);胸腺切除的MG患者CD4/CD8比值均低于胸腺未切除组(P0.05)。胸腺瘤B2型MG患者外周血CD8+CD28-T细胞构成比明显高于胸腺增生的MG患者以及胸腺正常MG患者,其差异有统计学意义(P0.01)。胸腺瘤B2型的MG患者外周血CD4/CD8比值低于胸腺正常的MG患者的(P0.05)。结论提示MG患者外周血中存在异常比例的CD8+CD28-T细胞,可能参与疾病的发生与发展。     

胃癌IMP3和GST-π的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨IMP3及GST-π在胃癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测49例胃癌及其癌旁正常黏膜组织中IMP3和GST-π的表达。结果（1）胃癌中IMP3的阳性表达率为81．63％（40／49）,其中（＋）18例、（＋＋）14例、（＋＋＋）8例,IMtr3的表达与胃癌组织学分型有关,差异有统计学意义（P〈0．01）;GST-π的阳性表达率为89．79％（44／49）,其中（＋）8例、（＋＋）18例、（＋＋＋）18例。GST-π在胃癌组织学分型中的表达差异也有统计学意义（P〈0．01）,并且肠型表达较强。IMP3和GST-π表达在胃癌患者的年龄、性别、淋巴结有无转移和临床分期等方面的差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）sperman等级相关分析显示胃癌中IMP3和GST-π的表达无明显相关性（P〉0．05）。（3）癌旁组织中,IMP3和GST-π不表达或仅弱表达,与癌组织相比差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论IMP3在胃癌的发生中可能起到一定的作用,并影响胃癌的分型;多耐药基因GST-π在肠型中高表达,提示高分化胃癌更易产生耐药。     

CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞抑制耐药肺结核患者机体细胞免疫研究

目的了解耐药肺结核患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞及其分泌的细胞因子转化生长因子β1（TGF β1）、白细胞介素-10（IL 10）的表达水平与非耐药肺结核患者和健康对照者的差异,并探讨其在抑制特异细胞免疫反应中的作用。方法应用流式细胞技术分别对30例健康成人（健康对照组）、39例非耐药肺结核患者（普通肺结核组）及35例耐药肺结核患者（耐药肺结核组）的外周血CD4+CD25+T淋巴细胞和CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞表达水平进行检测;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同组别人群外周血血清中TGF β1、IL 10水平。结果健康对照组成人外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞和CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞分别占CD4+细胞总数的(17.09±5.43)%和(0.78±0.88)%;普通肺结核组外周血中上述两种细胞分别占CD4+细胞总数的(22.12±3.43)%和(2.79±1.65)%;耐药肺结核组外周血上述两种细胞分别占CD4+细胞总数的(24.01±5.65)%和(4.51±1.47)%。耐药肺结核组外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞所占CD4+T淋巴细胞的比例较普通肺结核组高,但差异无统计学意义(P＞0.05);耐药肺结核组CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞的比例明显高于健康对照组及普通肺结核组 (P＜0.05),并且耐药肺结核组TGF β1［（4.15±1.39）ρ/ng·L-1］、IL 10［（872.17±269.75）μg/L］明显高于普通肺结核组［分别为（3.03±1.42）ρ/ng·L-1、（266.83±57.09）μg/L］和健康对照组［分别为（2.12±0.77）ρ/ng·L-1、（105.21±23.56）μg/L］ (P＜0.05)。结论CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞可能削弱结核病患者机体免疫系统对感染结核分枝杆菌的清除作用,是导致结核病感染慢性化且出现耐药的原因之一; TGF β1、IL 10可能参与抑制机体细胞免疫,与耐药结核病的形成和严重程度有一定相关性。     

Sema4D和HER-2在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Sema4D和人类表皮生长因子受体2（HER-2）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学sP法检测110例乳腺癌组织中Sema4D和HER-2的表达,并检测肿瘤微淋巴管密度（Microlymphtic vessel density,MLVD）。结果乳腺癌组织中Sema4D和HER-2蛋白的阳性表达率分别为71．82％（79／110）和33．64％（37／110）,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）：淋巴结转移阳性组的Sema4D阳性表达率和MLVD值显著高于淋巴结转移阴性组（P〈0．01）;Sema4D和HER-2阳性表达与组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及ER表达状态显著相关（P〈0．05）,而与肿瘤大小及PR表达状态无关（P〉0．05）。相关分析结果显示Sema4D与HER-2表达呈正相关（r=0．535,P〈0．01）;单因素生存分析显示,Sema4D高表达组的5年生存率（74．19％）高于低表达组（53．16％）,其差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Sema4D可能对乳腺癌的发生、发展起重要作用。