核转录因子-κB对鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响及机制

目的测定沙土鼠前脑缺血再灌注后核转录因子-κB(NF-κB)的活化水平、凋亡相关基因Bcl-2、p53的表达、以及神经细胞凋亡水平,探讨N F-κB对神经细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用夹闭双侧颈总动脉60m in、再开放24h的方法,建立沙土鼠前脑缺血再灌注模型。以平行视交叉冠状平面为模板、取前脑切片。应用免疫组织化学方法,测定缺血再灌注组、缺血组及正常对照组NF-κB、Bcl-2、p53表达阳性细胞染色灰度值;应用原位缺口末端标记法(TUN EL),观察各组切片中神经细胞凋亡数。结果缺血再灌注后,N F-κB的活化水平明显增强,与缺血组及对照组比较差异显著;N F-κB活化水平与Bcl-2表达呈显著负相关,与p53表达及神经细胞凋亡数目呈显著正相关。结论缺血再灌注后24h,N F-κB的活化促进了神经细胞凋亡的发生;其可能的机制在于NF-κB通过调控凋亡相关基因,进而促进缺血再灌注后神经细胞的凋亡。     

核因子-кB的表达对TNF-α和IL-8的影响以及对溃疡愈合的作用

目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-8（IL-8）对溃疡愈合的影响。方法：用免疫组化方法观察黏膜内胃泌素（Gas）和核因子-кB（NF-кB）在溃疡3、8、25d时的表达;用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定TNF-α、IL-8在溃疡3、8、25d时的含量;并测定黏膜下炎细胞数、胃液量和胃液pH在溃疡3、8、25d时的量。结果：3d组的胃泌素积分光密度、核因子-кB积分光密度、TNF-α含量、IL-8含量、炎细胞数和胃液量高于8d组,8d组高于25d组;3d组的胃液pH低于8d组,8d组低于25d组。结论：胃酸分泌减少,导致炎症减弱,再通过某种机制引起NF-кB减少,进而使TNF-α和IL-8减少,TNF-α和IL-8减少又使炎细胞减少,导致溃疡逐渐愈合。     

芍药总苷调控巨噬细胞核因子-кB p65蛋白核转移作用的研究

目的:研究芍药总苷调控巨噬细胞核因子-кB(NF-кB)p65蛋白核的转移作用,探讨芍药总苷对NF-кB活化的影响.方法:原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖和芍药总苷作用后,用Western blot方法观察NF-кB亚基p65蛋白在胞浆和胞核的表达.结果:经脂多糖刺激后,p65蛋白在胞浆中表达显著减少,在胞核中表达显著增多;芍药总苷显著增加了脂多糖刺激后p65蛋白在胞浆中的表达,并减少了其在胞核内的表达.结论:芍药总苷可抑制NF-кB p65蛋白从胞浆向胞核的转移,提示其具有抑制NF-кB活化的作用.     

双黄连注射液对LPS诱导的人血管内皮细胞NF-кB活化的影响

目的检测中药复方双黄连注射液对细菌酯多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞核转录因子-κB(NF-κB)活化的抑制效应。方法用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞生长的作用,用Sandwich ELISA法及定量免疫细胞技术,检测双黄连注射液对细菌LPS刺激后的血管内皮细胞胞浆(IкB)及核内NF-κB含量变化的影响。结果较高浓度的双黄连注射液对血管内皮细胞的生长有抑制作用,其抑制强度与其浓度呈正相关;血管内皮细胞在LPS刺激下,胞浆内IκB蛋白的含量显著降低,核内NF-κB p65含量显著增高;双黄连注射液预处理后能显著抑制IкB的降解及NF-κB的表达,在亚细胞生长抑制浓度条件下,其抑制效应有统计学意义。结论双黄连注射液可负相调节细菌LPS介导的血管内皮细胞核转录因子-κB的活化。     

大鼠实验性脑外伤后核因子κB活化与细胞凋亡的关系研究

目的探讨大鼠实验性脑外伤后核因子κB(NF-κB)活化与细胞凋亡的关系。方法大鼠按实验要求分组,造成脑外伤后不同时间取材,以TUNEL法检测细胞凋亡的发生,以EMSA法检测NF-κB的活化。结果脑外伤后大鼠受创脑域内发生明显的细胞凋亡,同时伴有NF-κB的活化,NF-κB特异性抑制剂PDTC可显著增加凋亡的发生。结论 NF-κB具有保护大鼠脑外伤后细胞免于凋亡的作用,综合考虑NF-κB的活化及凋亡的发生,可为法医学判定脑损伤程度及时间提供依据。     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后NF-kB表达和细胞凋亡

目的:研究脑缺血再灌注后大鼠脑组织半暗区核因子(nuclear factor kappa B,NF-kB)基因表达的变化与神经细胞凋亡的关系。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉(M CAO)栓塞/再灌注模型,原位杂交法检测大鼠脑重度缺血(3h)及再灌注损伤不同时间点(2、3d)半暗区NF-kB表达;TUNEL法测定凋亡细胞。结果:脑缺血再灌注后,缺血半暗区NF-kB的表达明显升高(P<0.01)。凋亡细胞数量亦显著增加(P<0.01)。细胞凋亡的时程变化与NF-kB的表达基本一致。结论:局灶性重度脑缺血再灌注后可引起NF-K b表达的增加,参与缺血再灌注神经细胞损伤机制。     

类固醇对鼻息肉中核因子-κB活化的影响

目的研究糖皮质类固醇激素对鼻息肉中核因子-κB(NF-κB)活化的影响。方法收集2008年2月～2010年9月期间收住本院的准备行鼻息肉切除手术患者的息肉组织标本45例。激素治疗前取鼻腔内的息肉组织作为对照组,布地奈德喷雾剂(BUD)喷鼻,每次2喷,每日2次,治疗7天后行手术切除术,选取切取治疗前钳取组织附近的息肉组织作为治疗组。应用ELISA的方法检测治疗前鼻息肉和使用布地奈德喷鼻剂治疗过后的鼻息肉中的NF-κB的活化情况。结果使用布地奈德喷鼻剂治疗过后的鼻息肉组织匀浆NF-κB活化与治疗前比较明显降低(P<0.05)。结论糖皮质类固醇可抑制鼻息肉组织中NF-κB的活化。     

肿瘤坏死因子-α单抗干预核因子-κB活化对HepG2细胞增殖的影响

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α单抗干预核转录因子-κB（NF-κB）活化对肝癌细胞HepG2增殖的影响。方法体外培养人HepG2肝癌细胞并给予抗人TNF-α单克隆抗体．以流式细胞术和AnnexinV—FITC／PI双色标记法分别检测细胞周期时相和细胞凋亡的变化：以酶联免疫吸附法（ELISA）定量分析用药前后细胞培养液中TNF-α和核蛋白NF-κB的变化。结果单抗（5mg／L）作用后,肝癌细胞凋亡率为21．5％±4．1％明显高于对照5．6％±0．9％,q=10．07,P〈0．01。G0／G1为66．2％±1.3％明显高于对照59．0％±1．0％,q=10．98,P〈0．01,而S期细胞比例无明显改变。用药后细胞株NF-κB水平为（59．0±1．02）ng／mg核蛋白,明显低于对照（73．9±7．4）ng／mg核蛋白,q=18．92,P〈O．01,与培养液中明显降低的TNF-α水平呈显著正相关（r=-0．89,P〈0．01）,抑制效应呈浓度依赖性,高浓度时作用最明显（P〈0．01）。结论以TNF-α单体干预肝癌细胞中NF-κB活化,可使细胞凋亡增加,细胞周期阻滞在G0／G1期,肝癌细胞增殖明显抑制．     

姜黄素对肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-кB及细胞外信号调节激酶-1mRNA表达的影响

目的 探讨核转录因子-кB (NF-кB )及细胞外信号调节激酶(ERK) mRNA在CCl4致实验性肝纤维化大鼠肝组织中的表达及姜黄素(CUR)对它们的影响.方法 建立CCl4致大鼠实验性肝纤维化的模型,用免疫组织化学法比较正常组、模型组以及CUR组的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,用RT-PCR法比较各组肝组织NF-кB以及ERK-1 mRNA的表达.结果 NF-кB mRNA 及ERK-1mRNA的表达: 正常组分别为0.317±0.035和0.434±0.067,模型组分别为1.219±0.158和0.944±0.151,CUR组分别为0.912±0.274和0.736±0.293,CUR组与模型组比较,P值均＜0.05,差异有统计学意义.α-SMA的表达:CUR组为4.327±2.064,模型组为6.784±2.158,正常组为0.943±0.371,CUR组与模型组比较,P值均＜0.05 ,差异有统计学意义.结论 CUR可能通过抑制α-SMA的表达,减弱NF-кB诱导的肝星状细胞的活化以及抑制ERK-1的促肝星状细胞的增殖,从而起到抗大鼠肝纤维化的作用.     

磷脂酰肌醇3-激酶调控白介素-18诱导核因子-кB活化(英文)

目的:研究磷脂酰肌醇(PI)3-激酶在白介素18(IL-18)诱导核因子-кB(NF-кB)活化中的作用。方法:Lipofectin介导反义PI 3-激酶寡核苷酸转染HepG2细胞。用逆转录PCR法检测PI 3-激酶mRNA表达水平,以Sandwich ELISA法检测NF-кB的活化。结果:(1)反义PI 3-激酶寡核苷酸抑制PI 3-激酶mRNA表达。(2)IL-18诱导NF-кB活化。(3)反义PI3-激酶寡核苷酸呈时间(5-24h)和浓度(1-8mg/L)依赖性地抑制IL-18诱导的NF-кB活化。结论:PI 3-激酶调控白介素-18诱导的NF-кB活化。     

水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠肝脏核因子-κB及炎症因子表达的影响

目的观察水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠肝脏胰岛素敏感性的影响。方法大鼠随机分为3组:分别给大鼠静脉输注脂肪乳(脂肪乳组),脂肪乳+水杨酸钠(实验组)和生理盐水组,并在输注后2 h,进行清醒状态下扩展高胰岛素-正血糖钳夹术,检测肝脏组织中NF-κB及IL-6、TNF-α、SOCS-3 mRNA的表达。结果脂肪乳组大鼠钳夹稳态下,内生葡萄糖产物(EGP)较基础状态降低比率仅是生理盐水组大鼠的38%,水杨酸钠提高EGP降低幅度明显(P<0.01),改善了肝脏胰岛素敏感性。脂肪乳组肝细胞核NF-κB表达量是生理盐水组2.4倍,肝组织中IL-6、TNF-α及SOCS-3 mRNA表达较生理盐水组升高,输注水杨酸钠使核内NF-κB较输注脂肪乳下降40%,炎症因子表达相应降低(P<0.01)。结论水杨酸钠可抑制肝脏组织NF-κB活化,进而降低炎症因子蓄积,发挥改善肝脏胰岛素抵抗的作用。     

孟鲁司特对哮喘豚鼠气道淋巴细胞凋亡及核因子-κB活化的影响

目的:研究白三烯受体阻滞剂孟鲁司特(montelukast,MK)对哮喘豚鼠气道淋巴细胞(lymphocyte,LC)凋亡和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活化的影响及二者相关性,探讨MK阻滞哮喘气道炎症的可能机制。方法:以卵白蛋白致敏豚鼠制备哮喘模型。用密度梯度离心法分离并计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的淋巴细胞;采用TUNEL技术原位检测淋巴细胞凋亡;通过免疫细胞化学染色技术检测NF-κB胞核阳性的淋巴细胞。结果:与模型组相比,MK能显著降低哮喘豚鼠BALF中LC的数量,升高淋巴细胞凋亡率,降低NF-κB胞核阳性率。淋巴细胞凋亡异常与NF-κB激活增加呈显著负相关。结论:MK抑制气道淋巴细胞NF-κB的激活和促进淋巴细胞凋亡可能是其阻滞哮喘气道炎症的一个重要机制。     

黄芪提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后炎症因子及细胞凋亡的作用

目的研究黄芪提取物(EA)对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法采用线栓法大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以免疫组化法观察EA对缺血再灌注后大鼠脑组织中TNFα表达的影响、以放免法观察对IL1β水平的影响、以TUNEL法观察对脑组织细胞凋亡的影响。结果与模型组比较,EA(20、40、80mg·kg-1,ig)能减少TNFα的表达、降低IL1β水平和减少细胞凋亡数。结论EA对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织中TNFα及IL1β的升高和神经元的凋亡有明显的抑制作用。     

核转录因子-kB对鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响及机制

目的 测定沙土鼠前脑缺血再灌注后核转录因子-kB（NF-kB）的活化水平、凋亡相关基因Bcl-2、p53的表达、以及神经细胞凋亡水平，探讨NF-kB对神经细胞凋亡的影响及可能机制。方法 采用夹闭双侧颈总动脉60min、再开放24h的方法，建立沙土鼠前脑缺血再灌注模型。以平行视交叉冠状平面为模板、取前脑切片。应用免疫组织化学方法，测定缺血再灌注组、缺血组及正常对照组NF-kB、Bcl-2、p53表达阳性细胞染色灰度值；应用原位缺口末端标记法（TUNEL），观察各组切片中神经细胞凋亡数。结果 缺血再灌注后，NF-kB的活化水平明显增强，与缺血组及对照组比较差异显著；NF-kB活化水平与Bcl-2表达呈显著负相关，与p53表达及神经细胞凋亡数目呈显著正相关。结论 缺血再灌注后24h，NF-kB的活化促进了神经细胞凋亡的发生；其可能的机制在于NF-kB通过调控凋亡相关基因，进而促进缺血再灌注后神经细胞的凋亡。     

板蓝根多糖对NF-кB活性的作用

观察板蓝根多糖对核因子-кB(nuclearfactor Kappa B,NF-кB)核结合活性的影响.以内毒素(LPS)刺激J744.a.1小鼠的巨噬细胞株,可诱生出较高的NF-кB与DNA结合活性,分别采用LPS预刺激、LPS后刺激和LPS与板蓝根多糖同时刺激等3种方法对其处理,分离核蛋白,进行NF-кB与DNA结合活性测定,结果用光密度扫描定量分析.板蓝根多糖在3种情况下均可降低LPS刺激所致的NF-кB与DNA的结合活性升高.     

白介素-1受体相关激酶-2的反义寡脱氧核苷酸体外抑制白介素-1诱导的核因子-кB活化(英文)

目的:研究白介素-1受体相关激酶-2的反义寡脱氧核苷酸对核因子-кB的抑制作用。方法:脂质体介导反义白介素-1受体相关激酶-2寡脱氧核苷酸转染人胚肾293细胞。夹心酶联免疫吸附测定法检测核因子-кB的含量。结果:(1)白介素-1刺激人胚肾293细胞时,核因子-кB含量明显上升(上升幅度518.5％±2.1％)。(2)白介素-1受体相关激酶-2的反义寡脱氧核苷酸呈浓度(1-8μg)和时间(5-24h)依赖性地抑制白介素-1的作用。反义寡脱氧核苷酸4μg与细胞孵育8h,约70.7％±1.0％的NF-кB活性被抑制。吸光度由对照的0.834±0.01下降到0.244±0.008。结论:白介素-1受体相关激酶-2的反义寡脱氧核苷酸抑制白介素-1诱导的核因子-кB活化。     

丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠脂质代谢和核因子-κB的影响

目的：探讨丹皮酚对动脉粥样硬化（AS）大鼠脂质代谢和核因子-κB（NF-κB）的影响。方法：采用高脂饲料喂养和维生素D3腹腔注射的方法建立大鼠AS模型,分为正常组、模型组、辛伐他汀组（10 mg·kg-1）、丹皮酚高剂量组和低剂量组（20,10 mg·kg-1）,每组8只。灌胃给药4周后,各组取血清,测定血脂水平;取主动脉切片,光镜下作病变分级评分,免疫组化法检测NF-κB的表达。结果：丹皮酚高剂量组能改善AS大鼠的主动脉病变,与模型组比较有统计学意义（P〈0.05）;丹皮酚高、低剂量组可明显降低AS大鼠血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平（P〈0.05或P〈0.01）;丹皮酚可下调主动脉NF-κB表达,高剂量组IOD值（1.96±0.55）和低剂量组IOD值（2.50±0.80）与模型组（3.65±1.14）比较,差异均有统计学意义（P〈0.05或0.01）。结论：丹皮酚治疗大鼠AS的作用机制与调节脂质代谢、下调主动脉NF-κB的表达有关。     

N—乙酰半胱氨酸对急慢性吸烟大鼠肺组织和肺泡灌洗液中核因子—кB表达的影响

目的　探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对急慢性吸烟大鼠肺组织和肺泡灌洗液（BALF）中核因子-Κb(NF-Κb)表达的影响及机理。方法　将Wistar大鼠随机分成对照组6只，吸烟组30只，干预（吸烟+NAC）组30只。其中吸烟组和干预组中动物均动态观察1、2、7、14、60　D（各时间点6只）的肺组织和BALF细胞中NF-Κb的激活水平。运用Western-Blot免疫印迹电泳法，以抗NF-Κb抗体P50、P65作探针检测NF-Κb蛋白的表达量。结果　急慢性吸烟大鼠肺组织和BALF细胞中NF-Κb的表达以急性吸烟早期　D　1、2达最高，肺组织在d　1、2的NF-Κb活性分别为36.9±8.1和36.9±8.0，与对照组7.3±2.8比较，均有显著性的差异（P＜0.01）；在d　1、2，BALF细胞的NF-Κb活性分别为24.0±6.1和21.2±5.8，与对照组5.7±2.6比较，也均有显著性的差异（P＜0.01）。但吸烟7　D，NF-Κb的表达已有下降，并发现从急性吸烟7、14　D至慢性吸烟60　D，NF-Κb维持在比较稳定的低水平表达，与对照组相比均无显著差异(P＞0.05)。NAC对被激活的NF-Κb有明显的抑制作用，与各自吸烟组相比P＜0.01，而对低水平NF-Κb表达的抑制作用不明显。结论　NAC通过抑制急性吸烟早期被激活的NF-Κb，阻断炎前性细胞因子的启动，可能在气道炎症防治中起着一定的作用。     

缺血预处理对脑缺血耐受大鼠血管内皮生长因子和血管生成素-1表达的影响

目的探讨短暂性脑缺血预处理(IP)对脑缺血耐受大鼠血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)蛋白表达的影响。方法将99只Wistar大鼠随机分成IP组(45只)、非缺血预处理(NIP)组(45只)和假手术对照组(9只)。首先应用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,建立局灶性缺血预处理模型,然后分别在缺血预处理后第1,3,7,14,21天给予再次缺血2 h再灌注22 h处理,根据缺血-再灌注时间分别将NIP组及IP组再分成5个亚组,NIP组以假手术代替预缺血,假手术对照组两次均为假手术。采用TTC染色测定脑梗死体积,免疫组织化学法检测缺血侧皮层和纹状体VEGF和Ang-1蛋白的表达。结果 IP组大鼠第1,3,7d亚组脑梗死体积明显小于NIP组(均P<0.01),其中以IP组第3天亚组脑梗死体积减小最为明显。IP组第1,3,7天亚组VEGF蛋白表达水平显著高于NIP组(均P<0.05),其中以IP组第3天亚组最为明显。假手术对照组和NIP组均存在一定程度Ang-1蛋白表达,但IP组第7天亚组Ang-1蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论预缺血诱导VEGF及Ang-1蛋白表达增加,对脑缺血耐受的产生发挥重要作用。     

缬沙坦对自发性高血压大鼠肾脏核因子-κB蛋白表达的影响

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)肾组织NF-κB原位表达变化以及AT1受体阻断剂缬沙坦对其的影响。方法:16只SHR随机分成SHR组和SHR加缬沙坦药物干预组(1 mg.kg-1.d-1),另8只WKY大鼠为正常对照组。分别在实验第2、4、6、8周末测定大鼠尾动脉收缩压(SBP);实验结束取各组大鼠血浆测定血浆中肾素、血管紧张素II(AngII)水平;取出各组大鼠两侧肾脏组织,分别运用免疫组化原位测定肾组织中NF-κB蛋白表达,并进行半定量分析。结果:SHR组SBP和血浆中肾素活性以及AngII水平与WKY大鼠相比显著增高,缬沙坦治疗组SBP显著降低,但血浆中肾素活性以及AngII水平明显高于SHR组和WKY组。在蛋白水平,WKY组大鼠肾组织中NF-κB表达较低,SHR组肾小球和肾小管中NF-κB高度表达;使用缬沙坦干预后,NF-κB表达显著降低。结论:在蛋白水平对NF-κB表达的调控可能参与缬沙坦的降血压效应和肾保护作用。