滋阴清热方对缺乏淋巴增殖基因狼疮鼠CD4~＋CD25~＋T细胞亚群及Foxp3表达的影响

目的：探讨滋阴清热方对缺乏淋巴增殖基因狼疮鼠CD4＋CD25＋T细胞亚群及Foxp3表达的影响。方法：选用自发性系统性红斑狼疮（SLE）模型MRL/lpr小鼠40只,随机平均分为4组,即模型组、滋阴狼疮方治疗组（中药组）、强的松治疗组（西药组）、滋阴清热复方＋强的松治疗组（中西药组）。另选用昆明小鼠10只作为对照组。连续用药10周后,流式细胞仪分析外周血CD4＋CD25＋T细胞亚群的百分比及CD4＋CD25highT细胞与CD4＋CD25intT细胞的比率,RT-PCR检测T细胞Foxp3 mRNA的表达。结果：各组外周血CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25highT细胞和CD4＋CD25intT细胞占CD4＋T细胞的百分比组间比较,无统计学差异（P〉0.05）,而CD4＋CD25highT细胞与CD4＋CD25intT细胞的比率和T细胞Foxp3 mRNA表达水平,模型组与对照组比较,明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,各治疗组均高于模型组（P〈0.05）,尤其是中西医结合组（P〈0.01）。结论：中药滋阴狼疮方可上调MRL/lpr狼疮鼠Foxp3 mRNA表达水平,从而调节CD4＋CD25＋T细胞亚群比率,发挥对SLE的免疫治疗作用。     

梅毒血清固定患者外周血CD4~+CD25~+ Treg和CD4~+CD25~+Foxp3~+ Treg的表达及意义

目的检测并比较梅毒血清固定患者与治疗后快速血浆反应素环状卡生试验(RPR)转阴患者外周血CD4+CD25+Treg以及CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达情况。方法运用流式细胞术检测40例梅毒血清固定患者(实验组)和40例治疗后RPR转阴的梅毒患者(对照组)外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达水平并进行比较。结果实验组患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占外周血CD4+T细胞总数的(11.90±0.64)%,对照组为(9.09±0.28)%,2组比较差异有统计学意义(t=4.01,P0.001);实验组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占外周血CD4+T细胞总数的(6.25±0.28)%,对照组为(3.37±0.24)%,2组比较差异有统计学意义(t=7.90,P0.001)。结论血清固定梅毒患者外周血中抑制性CD4+CD25+Treg细胞的比例明显高于RPR转阴梅毒患者,且其中大部分为具有抑制活性的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞亚群,推测这类Treg细胞在CD4+T细胞中所占的比例增加与梅毒患者血清固定有一定关系。     

胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞的表达及临床意义

目的：研究胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T（Treg）细胞的表达,并探讨其临床意义。方法：通过免疫荧光术及流式细胞仪检测20例胃癌患者及20例结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋ CTLA-4^＋T细胞。结果：胃癌组、结肠癌组与健康献血者比较外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞显著增多,CD4^＋T细胞显著减少;胃癌、结肠癌患者之间其外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞、CD4^＋CD25^＋high Treg细胞、CD4^＋T细胞及CD4^＋CTLA-4^＋T细胞无显著差异。结论：胃肠道癌肿患者外周血CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Treg细胞显著高于健康献血者,这可能与胃肠道癌肿患者的免疫抑制和肿瘤的进展相关。     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

健脾护齿方对伴放线放线杆菌超声提取物作用下CD4^＋CD25^＋调节性T细胞免疫抑制功能的影响

目的：探讨健脾护齿方对伴放线放线杆菌（actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa）超声提取物作用下CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcells,Tregs）免疫抑制功能的影响。方法：免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Tregs并进行体外培养,将300μg/mlAα超声提取物和不同剂量健脾护齿方药液加入培养液中,72h后收集细胞及上清液,Real-Time PCR法测定培养细胞Foxp3 mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10,TGF-β水平。结果：Aa超声提取物能够显著上调CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3 mRNA的表达,增强其免疫抑制作用,但不影响CD4^＋CD25^＋Tregs分泌IL-10和TGF-β;健脾护齿方抑制Aa超声提取物上调CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3mRNA表达的作用,并且Foxp3 mRNA表达的抑制作用与健脾护齿方剂量之间呈剂量—效应关系。结论：健脾护齿方有抑制Aa超声提取物上调CD4^＋CD25^＋Tregs免疫抑制功能的作用,这种抑制效应可能与Foxp3基因表达的下调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。     

芪白平肺胶囊联合孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CD4~+、CD25~+调节性T细胞表达的影响

目的观察芪白平肺胶囊联合孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CD4~+CD25~+Foxp3调节性T细胞表达的影响。方法采用随机数字表法将患者94例随机分为两组,对照组在常规治疗的基础上给予孟鲁司特钠治疗,观察组在对照组的基础上给予芪白平肺胶囊治疗。观察两组治疗前后第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1占FVC的百分比(FEV1/FVC%)、呼吸困难评分(MMRC)、动脉血氧分压(Pa O2)、二氧化碳分压(Pa CO2)水平、外周血Th17、CD4~+CD25~+Treg和CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平。结果治疗后观察组FEV1、FEV1/FVC、Pa O2、CD4~+CD25~+Treg、CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平均高于对照组(P0.05),MMRC评分、Pa CO2、Th17、Th17/CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平均低于对照组(P0.05)。结论芪白平肺胶囊联合孟鲁司特可改善AECOPD患者肺功能,提高血氧饱和度,下调Th17表达和上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg表达可能是其重要作用机制。     

安子合剂对ACA阳性先兆流产患者CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg细胞免疫调节的影响

目的:观察安子合剂对ACA阳性先兆流产患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞免疫调节的影响。方法:选取ACA阳性先兆流产患者为治疗组(27例),给服中药安子合剂,125ml,2次/日,连服4周;选取正常孕妇为对照组(15例)。检测患者治疗前后及正常孕妇外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例,并测定患者治疗前后血清ACA指标、B超检查胚胎发育情况等。结果:治疗组患者治疗前CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例显著低于正常妊娠对照组(P<0.01);治疗后,其细胞比例显著高于治疗前(P<0.01)。27例患者中20例ACA阳性的转阴率达85.00%,7例ACA定量滴度较治疗前显著下降(P<0.01)。保胎的成功率达92.59%。结论:ACA阳性先兆流产患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例低于正常妊娠妇女,存在免疫调节异常;安子合剂治疗ACA阳性先兆流产的作用机理之一与增加CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例、调节妊娠期机体免疫功能有关。     

紫癜清颗粒对HSP患者CD4~+ CD25~+ Tregs细胞的影响

目的探讨紫癜清颗粒对过敏性紫癜(HSP)患者的临床疗效及外周血CD4+CD25+调节性T细胞、其转录因子FOXP3表达的影响。方法纳入60例确诊为HSP患者,随机分为两组,治疗组予以紫癜清颗粒(A组),对照组予以激素联合抗组胺药物(B组);两周为1个疗程,共观察4周,随访半年,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Treg、转录因子FOXP3的表达,同期选10例健康人作为正常对照。结果治疗组有效率与对照组相当(P0.05),但复发率较对照组减低(P0.01);A、B组治疗前外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+表达比例较健康对照组明显降低(P0.01);紫癜清颗粒治疗后患者外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+比例增高,与对照组治疗后患者外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+的表达相比,无统计学意义(P0.05),但表达比例较对照组高。结论 1治疗组总有效率为93.33%,对照组总有效率为96.66%,说明中药汤剂紫癜清颗粒与西医传统治疗方案激素联合抗组胺药物疗效相当,但其复发率及临床副作用较西药治疗都明显减少;2A、B组治疗前CD4+CD25+Treg的表达低于正常,说明调节性T细胞可能参与了HSP的发病,而治疗后CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+的表达增高,可能是紫癜清颗粒治疗HSP有效的原因。     

益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨益气解毒方对中晚期鼻咽癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞的影响。方法用流式细胞仪检测18例经益气解毒方加常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(观察组)及l5例常规治疗的中晚期鼻咽癌患者(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Th17细胞比例,RT-PCR法检测Foxp3 mRNA和ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白细胞介素-6(IL-6)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果观察组患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例和Foxp3 mRNA的相对表达量均低于对照组(P0.05),而Th17细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均高于对照组(P0.05);观察组患者血清IL-6水平高于对照组(P0.05),而TGF-β水平低于对照组(P0.05)。结论益气解毒方可影响中晚期鼻咽癌CD4+CD25+调节性T细胞的比例与功能,增强Th17细胞的分化,其机制可能是通过调节IL-6和TGF-β水平而逆转鼻咽癌免疫耐受。     

靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响

目的观察青黛及其有效成分靛玉红对溃疡性结肠炎（UC）小鼠脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3表达的影响,探讨其治疗uc的作用机制和靶点。方法将50只BABL／c小鼠随机分为正常组、模型组、靛玉红组、青黛组和5-ASA组。除正常组外,其余小鼠采用自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液5天,制备DSS诱导的UC小鼠模型。于造模后第5天开始,予各组小鼠给药治疗7天。观察各组小鼠一般状况及结肠组织病理学改变,同时检测脾脏CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达变化。结果与正常组比较,模型组小鼠CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达显著减少（P〈0．01）;各治疗组CD4CD25Treg细胞Foxp3的表达较模型组升高（P〈0．01）。结论青黛及其有效成分靛玉红可通过上调CD4CD25Treg细胞Foxp3表达以防治UC。     

再生胶囊对再生障碍性贫血大鼠外周血CD4~+、CD25~+调节性T细胞及细胞因子IL-10、TGF-β_1的影响

目的:探讨再生胶囊对再生障碍性贫血大鼠外周血CD4+、CD25+调节性T细胞(Treg)、核转录因子Foxp3表达及细胞因子IL-10、TGF-β1的影响。方法:将80只SD大鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组和再生胶囊组,每组20只。除空白组外,其余各组大鼠予60Co-γ联合腹腔注射环磷酰胺和氯霉素建立再生障碍性贫血大鼠模型。于造模第7天再生胶囊组给予再生胶囊[0.216 g/(kg·d)]灌胃,模型组和空白组予等体积的生理盐水灌胃,阳性对照组予环孢素[3 mg/(kg·d)]灌胃,各组均干预30 d。检测大鼠外周血白细胞数(WBC)、网织红细胞数(Ret)、血红蛋白数(Hb)及血小板数(PLT),骨髓有核细胞数(粒系比例、红系比例、淋巴细胞比例、巨核细胞数),细胞因子IL-10和TGF-β1浓度,Treg细胞比例和单个核细胞Foxp3 mRNA表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、IL-10浓度、TGF-β1浓度、Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达量降低,淋巴细胞比例升高(P0.05)。与模型组比较,再生胶囊组和阳性对照组大鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、IL-10浓度、TGF-β1浓度、Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(P0.05)。与阳性对照组比较,再生胶囊组大鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、IL-10浓度、TGF-β1浓度、Treg细胞比例、Foxp3mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(P0.05)。结论:再生胶囊能通过促使再生障碍性贫血大鼠外周血Treg细胞数和FOXP3表达量增多,产生抑制性细胞因子IL-10和TGF-β1,恢复自身免疫耐受平衡,改善骨髓造血衰竭。     

芍药甘草汤对MRL／Lpr小鼠CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的影响

目的：观察芍药甘草汤对MRL／Lpr狼疮小鼠及其脾细胞CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的影响。方法：10周龄系统性红斑狼疮（SLE）模型——转基因MRL／Lpr小鼠与C57BL／6正常小鼠各40例同步对照,探讨经科学煎煮,不同浓度芍药甘草汤（高、中、低浓度分别为：0．6、0．3、0．15g／ml／d）对小鼠狼疮症状、生存率以及脾细胞CD25^＋CD4^＋Foxp3^＋Treg的影响。结果：高浓度芍药甘草汤可以明显减缓疾病的发生、减轻SLE症状、延长病鼠生存期;治疗后较治疗前有效提高CD25^＋／CD4^＋（％）（11．80±4-0．98VS17．18±0．62）、Foxp3^＋／CD4^＋（％）（3．32±0．70VS5．50±0．73）（P〈0．05）的比例。结论：芍药甘草汤对小鼠无急性毒害;高浓度制剂能明显延长病鼠生存期;提高CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg比例可能是药物发挥免疫调节作用的作用机制之一。该方剂能安全有效用于治疗系统性红斑狼疮小鼠活动期。     

慢性特发性血小板减少性紫癜治疗前后调节性T细胞及其FOXP3表达的变化

目的：探讨桑椹三仙胶对慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）患者外周血调节性T（Treg）细胞及FOXP3表达的影响。方法：采用流氏细胞术测定桑椹三仙胶治疗前后CITP病人及正常对照组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）在外周血中的表达及CD4＋CD25＋FOXP3＋在CD4＋CD25＋Treg的比例。结果：CITP组疗前CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的比例及CD4＋CD25＋FOXP3＋在CD4＋CD25＋Treg的比例较正常对照组均明显降低,具有显著性差异（P〈0.01）;桑椹三仙胶治疗后CD4＋CD25＋Treg水平与治疗前相比明显提高,具有显著性差异（P〈0.01）,CD4＋CD25＋FOXP3＋也有所提高,但与疗前比较无显著性差异（P〉0.05）。治疗后CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25＋FOXP3＋表达水平虽有所上升,但未恢复正常,与正常组比较,仍有显著差异（P〈0.01）。结论：CITP患者CD4＋CD25＋Treg细胞的免疫抑制作用受损可能参与了CITP的发病,桑椹三仙胶可能通过提高CD4＋CD25＋Treg细胞及其抑制性标志物的表达,进而抑制异常的免疫状态发挥其治疗作用。     

再生复血汤对再生障碍性贫血小鼠外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及Foxp3 mRNA的影响

目的探讨再生复血汤对再生障碍性贫血(AA)小鼠外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞(Treg)及核转录因子Foxp3 mRNA的影响。方法将72只小鼠随机分成空白组,模型组,阳性对照组,再生复血汤高、中、低剂量组,每组12只。除空白组外,其余各组小鼠予~(60)Co-γ联合腹腔注射环磷酰胺和氯霉素建立AA小鼠模型。造模第7天再生复血汤高、中、低剂量组分别给予再生复血汤10、5、2.5 g/(kg·d)灌胃,模型组和空白组予等体积的生理盐水灌胃,阳性对照组予环孢素3 mg/(kg·d)灌胃,各组均干预30天。检测小鼠外周血白细胞数(WBC)、网织红细胞数(Ret)、血红蛋白数(Hb)及血小板数(PLT)、骨髓有核细胞数(粒系比例、红系比例、巨核细胞数,淋巴细胞比例)、Treg比例和单个核细胞Foxp3mRNA表达量。结果与空白组比较,模型组外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、Treg比例、Foxp3 mRNA表达量降低,淋巴细胞比例升高(均P0.05)。与模型组比较,各干预组小鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、Treg比例、Foxp3 mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(均P0.05)。与再生复血汤低剂量组比较,再生复血汤中、高剂量组和阳性对照组外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、Treg比例、Foxp3 mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(均P0.0 5),且再生复血汤高剂量组优于再生复血汤中剂量组和阳性对照组(均P0.05)。结论再生复血汤能通过促使AA小鼠外周血单个核细胞Foxp3 mRNA表达,使得Treg比例升高,诱导AA小鼠恢复自身免疫耐受,并且呈现剂量依赖性。     

狼疮方对体外扩增小鼠CD4^＋CD（25）^＋调节性T细胞的影响

目的：狼疮方对体外扩增小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞数量的影响。方法：免疫磁珠法分离狼疮方治疗组与未治疗组小鼠CD4＋CD2＋5T细胞;通过流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞Foxp3表达情况;用抗CD3和抗CD28包被的微珠来进行刺激,体外扩增小鼠的CD4＋CD25＋调节性T细胞;用CFSE法检测CD4＋CD25＋调节性T细胞体外抑制CD4＋CD2-5T细胞的增殖情况。结果：经抗CD3和抗CD28包被的微珠刺激后,在TGF-β1和IL-2存在的环境中CD4＋CD25＋T细胞数量明显升高,扩增后的CD4＋CD25＋T细胞高表达Foxp3。与此同时,经狼疮方处理后的小鼠CD4＋CD25＋T细胞扩增后数量增加133.3±18.9倍,未经狼疮方处理的对照细胞数量增加104.7±10.8倍,两者比较有显著性差异（P〈0.05）。狼疮方治疗组与未治疗组中分离的CD4＋CD2＋5T细胞和扩增的CD4＋CD25＋T细胞对CD4＋CD2-5T细胞的增殖皆有明显抑制作用,荧光强度分别为32.1±4.8,33.1±4.9,30.1±3.8,32.9±4.2。结论：狼疮方有助于提高小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞的扩增效率,扩增的CD4＋CD25＋调节性T细胞表达Foxp3,具有体外免疫抑制功能。     

安胎汤对先兆流产大鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞免疫调节的影响

目的:从CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞变化角度探讨安胎汤对先兆流产大鼠的影响及作用机制。方法:将大鼠雌雄以2∶1的比例配对后筛选出孕鼠48只,以缩宫素及针灸合谷、三阴交穴的方法建立先兆流产模型,随机分为6组,分别为正常妊娠组、安胎汤低剂量组、安胎汤中剂量组、安胎汤高剂量组、黄体酮组及先兆流产大鼠模型组。于妊娠第13天取大鼠外周血后即用流式细胞仪检测CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞百分率,然后处死大鼠,计数双侧子宫着床点数及活胎数。结果:安胎汤可提高先兆流产孕鼠胚胎吸收率和CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞百分率,降低胚胎吸收率(P0.01)。结论:安胎汤通过调节先兆流产大鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞百分率达到保胎目的,且疗效与剂量相关。     

犀角地黄汤对免疫性血小板减少症模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞及Th17细胞的影响

目的探讨犀角地黄汤对免疫性血小板减少症(ITP)模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞(Treg)、Th17细胞及相关细胞因子的影响。方法将48只大鼠随机分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组及犀角地黄汤低、中、高剂量组,每组8只。除正常组外,其余组均采用腹腔注射兔抗大鼠血小板血清(APS)建立ITP模型,于造模开始后第7天开始,各给药组灌胃给予相应剂量药物,连续14 d。采用血细胞计数仪检测造模前、灌胃前、灌胃结束后各组大鼠外周血中血小板数目;灌胃结束后,采用流式细胞术检测各组大鼠Treg、Th17细胞比例,采用实时荧光定量PCR法检测淋巴细胞Foxp3 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、IL-35水平。结果灌胃结束后,与模型组比较,犀角地黄汤各剂量组大鼠血小板数目明显上升(P均0.05),外周血淋巴细胞中Treg所占比例、Foxp3 mRNA相对表达量及IL-35水平均明显上升(P均0.05),而Th17细胞所占比例及IL-17水平均明显下降(P均0.05),且具有剂量依赖性;犀角地黄汤高剂量组各指标与醋酸泼尼松组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论犀角地黄汤可能通过上调ITP大鼠外周血中Treg细胞表达,下调Th17细胞表达,维持Treg/Th17平衡,进而调节相关细胞因子IL-17、IL-35的表达发挥抗血小板减少作用。     

加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症气虚证临床研究

目的:观察加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症(ITP)的疗效,探讨中药复方制剂对ITP患者Treg/Th17免疫紊乱调控的有效干预机制。方法:将符合标准的60例慢性ITP患者随机分为中药组和激素组各30例,中药组予加味归脾合剂治疗,激素组予泼尼松治疗,记录治疗前后ITP患者血清中细胞因子Treg细胞、Th17细胞以及Treg/Th17比值,Foxp3mRNA、RORγt mRNA、Foxp3/RORγt比值检测结果及外周血血小板计数。结果 :(1)血小板计数:中药组和激素组治疗后均有所上升,与治疗前比较差异有统计学意义(P0.01),组间比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)Treg/Th17:中药组与激素组治疗前与正常对照组比较,Treg细胞、Th17细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、RORγt mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值差异均有统计学意义(P0.05);治疗后中药组Treg细胞表达与Treg/Th17比值、Foxp3mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值检测均高于激素组,组间比较差异有统计学意义(P0.05);Th17和RORγtmRNA表达,组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:加味归脾合剂可有效提升血小板计数及Treg细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、Foxp3/Ro RγT比值,其上调Treg细胞及Foxp3mRNA表达,从而改善Treg/Th17免疫功能紊乱,健脾益气统血是治疗ITP气虚证的主要机制之一。     

抗痨合剂对耐多药肺结核患者Th17/Treg的影响

目的:观察基于养阴清肺法组方的抗痨合剂对耐多药肺结核患者Th17/Treg细胞的影响。方法:采用前瞻性研究方法,选取丽水地区2012年1月—2017年12月耐多药肺结核患者87例,随机分为对照组与观察组。对照组予以常规西药抗结核治疗方案,观察组在对照组的基础上强化期辅以抗痨合剂治疗。采用流式细胞术、ELISA法检测两组强化期治疗前后Th17、Treg细胞的含量及相关细胞因子水平。结果:两组患者完成6个月强化期治疗的耐多药肺结核患者共计71例,其中对照组33例,观察组38例。研究结果显示,观察组患者外周血Th17细胞含量、Th17/Treg值与对照组比较均升高,差异有统计学意义(P 0. 05),观察组耐多药肺结核患者Treg细胞的含量低于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05);观察组耐多药肺结核患者外周血中IL-17的水平与对照组比较显著升高,差异有统计学意义(P 0. 05),而TGF-β水平与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:抗痨合剂可能是通过上调耐多药肺结核患者体内Th17水平,下调Treg水平,改善Th17/Treg的平衡状态,从而发挥抗结核治疗作用。     

薏苡仁酯对胶原诱导性关节炎小鼠Foxp3+CD4+CD25+调节性 T 细胞影响的研究

目的研究薏苡仁酯对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)小鼠外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响,探讨薏苡仁酯类风湿关节炎治疗中的可能机制。方法从25只小鼠随机选取5只为正常组,剩余20只小鼠进行CIA造模。造模成功后随机分为造模对照组10只及薏苡仁酯组10只。薏苡仁酯组予薏苡仁酯注射液25 m L/kg,正常组及造模对照组注射生理盐水25 m L/kg,均每天腹腔内注射1次。共用药21天。用药后对各组关节炎进行评分,计算关节炎指数,并应用流式细胞术测定小鼠外周血Foxp3+CD4+CD25+Treg比例。结果与正常组比较,造模对照组关节炎指数明显升高(P0.01),薏苡仁酯组较造模对照组小鼠关节炎指数明显下降(P0.01)。与正常组比较,造模对照组Foxp3+CD4+CD25+Treg水平均明显下降(P0.01),薏苡仁酯组较造模对照组用药后Foxp3+CD4+CD25+Treg水平明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论薏苡仁酯能上调CIA小鼠Foxp3+CD4+CD25+Treg比例,可能在CIA的发病中具有一定的免疫调节作用。