雷公藤甲素对局灶节段性肾小球硬化足细胞损伤的调控机制

目的:通过观察雷公藤甲素(TP)对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠及PAN致小鼠足细胞损伤模型中uPAR和TRPC6的表达影响,探讨TP对足细胞的保护作用.方法:将48只大鼠随机分为6组,Control组、Model组、TP-LD组、TP-MD组、TP-HD组和CSA组.除Control组外,其余各组均通过单侧肾切...     

辛通畅络法对局灶节段性肾小球硬化大鼠肾小球毛细血管袢及血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的:观察辛通畅络法中药复方肾络宁对局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠模型肾小球毛细血管袢及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型mRNA(AT1R mRNA)表达的影响。方法:采用左肾切除加阿霉素注射法诱发SD大鼠FSGS模型,依体质量随机分为3组,模型组、西药组和中药组(每组12只),另设对照组(12只)。西药组(按0.33 mg/100g)灌服贝那普利混悬液,中药组(按3.5 g/100g)灌服肾络宁,模型组及对照组灌服等量生理盐水,于治疗第12周末,检测血浆AngⅡ、肾组织AT1R mRNA的表达,以及肾小球毛细血管袢横截面积(μm~2)、肾小球毛细血管腔开放程度(μm)。结果:西药组、中药组血浆AngⅡ较模型组降低(P<0.05)。西药组、中药组肾组织AT1R mRNA较模型组升高(P<0.01)。中药组、西药组肾小球毛细血管袢横截面积、肾小球毛细血管腔开放程度较模型组增加(P<0.01,P<0.05)。结论:辛通畅络法复方肾络宁对局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病大鼠具有减轻肾小球毛细血管袢损害的作用,其机制可能与降低AngⅡ表达相关。     

艾灸对局灶节段性肾小球硬化大鼠肾脏病理的影响

目的观察艾灸对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型大鼠肾脏病理的影响。方法建立FSGS大鼠模型,将大鼠随机分为模型组、氯沙坦组、肾俞灸法各组、膈俞灸法各组,每组11只,另设正常组、假手术组,每组7只。氯沙坦组予氯沙坦灌胃,每日1次;肾俞灸法(短时、中时、长时)组和膈俞灸法(短时、中时、长时)组,分别按不同时长(10 min、20 min、30 min)予温和灸大鼠肾俞、膈俞,隔日1次;假手术组、模型组隔日作与灸法组相同的固定,干预12周。观察各组大鼠肾组织病理变化,分析肾小球硬化指数(GSI)、肾小球毛细血管直径、肾小球系膜基质面积、毛细血管襻横截面积及肾小球系膜基质相对面积。结果模型组、氯沙坦组和灸法各组大鼠肾组织均出现不同程度肾小球硬化。与模型组比较,各治疗组GSI、系膜基质相对面积降低(P0.01),毛细血管直径、襻横截面积升高(P0.01),氯沙坦组、膈俞长时组系膜基质面积降低(P0.05,P0.01)。结论艾灸可改善FSGS大鼠病理,抑制细胞外基质聚积,延缓肾小球硬化进展。     

红花对局灶节段性肾小球硬化大鼠细胞外基质的影响

目的：观察红花对局灶节段性肾小球硬化（FsGS）大鼠细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）的影响并探讨其部分作用机理。方法：30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和红花组。采用一侧肾切除加两次尾静脉注射阿霉素的方法复制FSGS大鼠模型,8周后观察各组大鼠肾组织病理。并用免疫组织化学染色方法评价纤维连接蛋白（FN）、层黏连蛋白（LN）的表达。结果：模型组肾组织出现局灶节段性肾小球硬化,免疫组织化学提示FN、LN在肾小球及小管中表达明显（P〈0．01）;红花组FN、LN表达明显降低（P〈0．01）。结论：红花能抑制FN和LN的表达,减少细胞外基质的合成及其在肾小球及小管间质中的过度沉积,延缓其病程进展。     

肾苏Ⅱ方对局灶节段性肾小球硬化大鼠Notch-P53通路及足细胞凋亡的影响

目的观察肾苏Ⅱ方对局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)大鼠肾脏功能、病理、足细胞数量、Notch-P53凋亡通路标志蛋白的影响。方法采用左肾切除加阿霉素注射法诱发SD大鼠FSGS模型,依体重随机分为3组,模型组、贝那普利组和肾苏Ⅱ方组,每组12只,另设对照组(12只)。贝那普利组予贝那普利[9.25 mg/(kg·d)]、肾苏Ⅱ方组予肾苏Ⅱ方[9.71 g/(kg·d)],对照组、模型组予等量生理盐水,均连续灌胃12周。检测大鼠肌酐(serum creatinine,SCr)、血清尿素氮(blood urine nitrogen,BUN)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、载脂蛋白A1(apolipoprotein-A1,Apo-A1)水平。观察肾小球硬化改变、足细胞数量分析、Notch-P53凋亡通路关键位点的Notch1、Hes-1、P53及Bad蛋白表达。结果与模型组比较,贝那普利组和肾苏Ⅱ方组治疗4、8、12周,HDL明显上升(P0.05);治疗8、12周,SCr明显下降(P0.05)、Apo-A1明显上升(P0.05);治疗12周,BUN、肾小球硬化指数、肾小球系膜基质相对面积、Notch1、Hes-1、P53、Bad蛋白明显减少(P0.05),足细胞数量明显增加(P0.05)。结论肾苏Ⅱ方可能通过调控Notch-P53通路,阻抑足细胞凋亡进程,进而延缓FSGS大鼠疾病进展。     

水蛭对局灶节段性肾小球硬化大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的:观察水蛭对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型大鼠肾脏基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)蛋白表达的影响.方法:采用单侧肾切除术后两次尾静脉注射阿霉素建立大鼠FSGS模型.实验动物分为正常组、假手术组、模型组、水蛭组4组.分别于给药后4周、8周末采用免疫组化二步法检测实验大鼠...     

复方积雪草胶囊对肾小球硬化症大鼠肾组织细胞外基质的影响

目的:探讨复方积雪草胶囊对局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)大鼠肾组织细胞外基质(ECM)的影响.方法:建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠FSGS模型,采用半定量病理分析法观察复方积雪草胶囊对肾组织ECM的影响,并生化检测尿蛋白、血脂、肾功能的变化.结果:FSGS大鼠经复方积雪草胶囊治疗8周后,肾组织ECM积聚减少(P＜0.01),血脂、肌酐、尿素氮和尿蛋白较模型组明显降低(P＜0.05～0.01),疗效优于尿毒清组.结论:复方积雪草胶囊可以抑制肾组织ECM积聚,改善肾功能,防治肾纤维化.     

水蛭对局灶节段性肾小球硬化大鼠肾组织转化生长因子和I型胶原表达的影响

目的:观察水蛭对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠肾组织TGF-β1和I型胶原表达的影响.方法:52只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、水蛭组,切除单肾和注射阿霉素进行造模,水蛭组给予水蛭0.9 g/(kg·d)灌胃,其他组灌胃等容积蒸馏水,灌胃8周.观察大鼠一般状态,于给药第4周、第8周免疫组化法检测大鼠肾组织...     

积雪草总苷对大鼠系膜细胞游离钙的影响

目的:观察积雪草提取物对大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖和钙离子的影响。方法:将血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用于肾小球系膜细胞,加入不同浓度的积雪草提取物,采用MTT法和Fura-2/AM荧光指示剂负载测定MC增殖和细胞内[Ca2 ]I的变化。结果:MC一经AngⅡ刺激后增殖显著,并且Ca2 浓度明显升高,而积雪草提取物对AngⅡ刺激下的MC增殖和Ca2 水平有抑制和降低作用,并呈一定的剂量依赖性。结论:积雪草提取物可能通过降低MC内Ca2 的水平,从而达到抑制MC增殖的目的。     

积雪草总苷抗DMN诱导大鼠肝纤维化的作用

目的 研究积雪草总苷抗实验性大鼠肝纤维化的作用。方法 采用二甲基亚硝氨(dimethylni-trosamine,DMN)腹腔注射6周,制备大鼠肝纤维化模型。动物随机分为6组(正常组、模型组、秋水仙碱组、积雪草总苷大、中、小剂量组)。于造模开始时同时给予积雪草总苷灌胃,实验结束后分别检测血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)含量,并作肝组织病理学观察。结果 积雪草总苷能改善肝功能,与模型组相比可明显降低血清ALT、AST、HA的含量(P<0．05)。肝组织病理学检查显示具有抗肝纤维化作用。结论 积雪草总苷对DMN诱导的大鼠慢性肝纤维化具有良好的治疗作用。     

积雪草颗粒对糖尿病肾病大鼠肾损伤的影响

目的：探讨积雪草颗粒（CTA）减轻糖尿病肾病（DN）大鼠肾损伤的效果及可能机制。方法：45只12周龄清洁级SD雄性大鼠,随机分为正常对照组（NC组）,糖尿病组（DN组）,糖尿病治疗组（DT组）,共治疗12周。12周后测定24小时尿微量白蛋白,心脏采血检测血糖（BG）、血肌酐（Scr）、糖化血红蛋白（HbA1c）;分离双肾,检测肾皮质中氧化产物丙二醛（MDA）、抗氧化指标超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。采用RT-PCR法检测各组大鼠肾皮质中GSH-Px、Cu-Zn SOD的mRNA表达。结果：与NC组比较,DN组大鼠BG、Scr较NC组均升高（P〈0.05）;DT组Scr较DN组下降（P〈0.05）。与NC组比较,DN组MDA水平显著增高,SOD、GSH-Px水平降低;肌酐清除率显著降低（P〈0.05）;与DN组比较,DT组MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px水平较高（P〈0.05）,差异有统计学意义（P〈0.05）。与NC组比较,DN组SOD、GSH-Px RNA表达水平显著增高;与DN组比较,DT组SOD、GSH-Px RNA水平明显增高（P〈0.05）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：CTA对糖尿病肾病大鼠有保护作用,其作用机制与抑制肾脏氧化应激有关。     

积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮和单胺类神经递质的影响

目的:探讨积雪草总苷抗抑郁症可能的作用机制.方法:采用荧光法检测积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮的影响;HPLC-ECD法检测积雪总苷对大鼠皮质、海马和下丘脑单胺类神经递质含量的影响.结果:积雪草总苷降低抑郁症大鼠的血清皮质酮水平,增加脑内5-HT,NE和DA及其代谢产物的含量.结论:积雪草总苷的抗抑郁活性与改善下丘脑-垂体-肾上腺轴功能和增加胺神经递质的水平有关.     

积雪草醇提物对2型糖尿病ZDF大鼠肝脏胰岛素抵抗的影响

目的:探讨积雪草醇提物对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)ZDF(Zucker diabetic fatty)大鼠肝脏胰岛素抵抗的作用机制。方法:6只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常组,成模的雄性ZDF(fa/fa)大鼠18只根据体重及随机血糖分层随机分为3组,模型组(生理盐水10 m L·kg~(-1)),二甲双胍(二甲双胍片0.18 g·kg~(-1)·d~(-1))组,积雪草(积雪草醇提物0.1 g·kg~(-1)·d~(-1))组。每2周监测大鼠体重,随机血糖(random blood glucose,RBG),空腹血糖(fasting blood glucose,FBG);给药6周后取材,检测大鼠空腹血糖及空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FINS),并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model of assessment for insulin resistence index,HOMA-IR)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)法检测各组大鼠肝脏组织中胰岛素受体2(insulin receptor substrate 2,IRS2),3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(3-phosphoinositide-dependent protein kinase1,PDK1)及葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2,GLUT2)mRNA的表达情况;免疫组化法观察肝脏中PDK1,IRS2蛋白表达情况。结果:与模型组比较,积雪草组及二甲双胍组均可显著改善ZDF大鼠体重,RBG,FBG水平及HOMA-IR(P0.01);积雪草组IRS2,PDK1及GLUT2 mRNA相对表达量及PDK1,IRS2蛋白表达水平显著增加(P0.01)。结论:积雪草醇提物能有效改善2型糖尿病ZDF大鼠肝脏胰岛素抵抗,其作用机制可能与胰岛素信号传导通路中IRS2,PDK1的表达及葡萄糖转运中GLUT2的表达相关。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞E—cadherin表达的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）诱导的NRK-52E细胞转分化过程中转分化标志物E-钙黏蛋白（E—cadherin）的表达情况及曲尼司特对其转分化过程的影响。方法应用TGF—β1（8mg／L）刺激NRK-52E细胞,分别分为阴性对照组、TGF—β1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞术和蛋白质印迹检测各组E—cadherin的表达情况。结果流式细胞术和蛋白质印迹检测结果表明,TGF—β1刺激后,NRK-52E细胞E—cadherin的表达均显著减低。结论曲尼司特能够抑制TGF—β1诱导的NRK-52E转分化,其机制可能与上调E—cadherin的表达有关。     

BMP7对CsA诱导的NRK-52E细胞EMT的影响

目的 观察骨形成蛋白7（BMP7）对环孢素A（CsA）诱导的NRK-52E细胞转分化的影响.方法 NRK-52E经培养传代后随机分为5组：无血清阴性对照组、CsA阳性对照组及BMP7低、中、高剂量干预组（rhBMP7终浓度分别为10,50,100μg/L）,每组设5个复孔.24h后采用Western blot分析各组细胞α-SMA和E-cadherin的表达情况,ELISA法检测各组细胞培养上清液中ColⅠ、Col Ⅵ浓度.结果 Western blot结果表明,BMP7能剂量依赖性降低α-SMA表达,同时上调E-cadherin表达.结论 BMP7可以逆转CsA诱导的肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化,从而减少细胞外基质的生成,发挥肾脏保护作用.     

Possible Involvement of Nitric Oxide Modulatory Mechanisms in the Neuroprotective Effect of Centella asiatica Against Sleep Deprivation Induced Anxiety Like Behaviour,Oxidative Damage and Neuroinflammation

Sleep deprivation (SD) is an experience of inadequate or poor quality of sleep that may produce significant alterations in multiple neural systems. Centella asiatica (CA) is a psychoactive medicinal herb with immense therapeutic potential. The present study was designed to explore the possible nitric oxide (NO) modulatory mechanism in the neuroprotective effect of CA against SD induced anxiety like behaviour, oxidative damage and neuroinflammation. Male laca mice were sleep deprived for 72 h, and CA (150 and 300 mg/kg) was administered alone and in combination with NO modulators for 8 days, starting five days before 72‐h SD exposure. Various behavioural (locomotor activity, elevated plus maze) and biochemical (lipid peroxidation, reduced glutathione, catalase, nitrite levels and superoxide dismutase activity), neuroinflammation marker (TNF‐alpha) were assessed subsequently. CA (150 and 300 mg/kg) treatment for 8 days significantly improved locomotor activity, anti‐anxiety like effect and attenuated oxidative damage and TNF α level as compared to sleep‐deprived 72‐h group. Also while the neuroprotective effect of CA was increased by NO antagonists, it was diminished by NO agonists. The present study suggests that NO modulatory mechanism could be involved in the protective effect of CA against SD‐induced anxiety‐like behaviour, oxidative damage and neuroinflammation in mice. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

局灶性脑缺血模型病理学改变及复方白术颗粒对其影响

目的:阐述局灶性脑缺血动物模型病理学改变及药物对其影响。方法:采用单侧大脑中动脉热凝闭法建立大鼠急性脑缺血模型。HE、Luxol 坚牢蓝 PAS 染色,光镜及电镜超微结构观察,并观察复方白术颗粒对大鼠实验性缺血性脑损伤的影响。结果:动物模型脑缺血区光镜可见神经细胞呈缺血性改变;电镜下神经元、神经纤维、神经突触及血脑屏障有不同程度病理改变;复方白术颗粒可减轻其损伤程度,同时减轻血脑屏障星形细胞足突、神经元胞浆及神经轴突、树突水肿。结论:建立了稳定的 Wistar 大鼠脑缺血动物模型,光镜、电镜有肯定的病理改变,复方白术颗粒对其缺血脑组织有保护作用。