苦参碱对胃癌细胞培养基上清液诱导的人脐静脉内皮细胞增殖及迁移的抑制作用

目的:研究苦参碱(Matrine)对人胃癌细胞SGC-7901培养基上清液诱导的人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖及侵袭能力的影响.方法:人胃癌细胞SGC-7901培养基上清液诱导人脐静脉内皮细胞ECV-304细胞增殖,不同浓度苦参碱干预后,MTT法检测内皮细胞增殖抑制率;采用Transwell共培养模型观察苦参碱对SGC-7901诱导血管内皮细胞ECV-304迁移的抑制作用.结果:15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml、240μg/ml苦参碱干预48小时,ECV-304增殖抑制率分别为(20.8±1.3)%、(25.1±2.2)%、(40.9±1.1)%,(62.9±2.2)%,(77.2±1.9)%;呈剂量依赖(P<0.05).对照组和苦参碱浓度在2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml时内皮细胞迁移细胞数分别为350.8±51.3、230.0±13.7、144.1±12.6、 53.6±4.9,呈剂量效应关系.结论:苦参碱可抑制人胃癌细胞诱导的人脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力.     

刺梨和金荞麦提取物抑制内皮细胞生长和血管生成

[目的]探讨刺梨提取物（CL）、金荞麦提取物（FR）对人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖及凋亡的影响以及对鸡胚尿囊膜血管新生的影响。[方法]IC30浓度CL/FR单独或两药的1/2IC30浓度联合作用于ECV-304细胞,MTT法检测ECV-304细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测ECV-304细胞早期凋亡细胞比例;RT-PCR和Western blot法分析Ki-67及Bax、Bcl-2 mRNA/蛋白表达的变化。计算经100μg/mlCL、100μg/mlFR、CL50μg/ml＋FR50μg/ml联合作用后的7日龄鸡胚尿囊膜血管抑制率。[结果]IC30CL、IC30FR和1/2（IC30CL＋IC30FR）对ECV-304细胞的抑制率分别为30.87%±1.2%,32.93%±1.4%和43.67%±1.5%。CL、FR单独应用或联合使用均可明显抑制ECV-304细胞生长,呈剂量依赖性,且诱导凋亡。与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2 mRNA/蛋白表达率均有显著降低,而Bax mRNA/蛋白表达均显著增高。CL、FR单独或联合应用均可抑制鸡胚尿囊膜新生血管的生长,以CL作用更明显。[结论]CL和FR单药及联合应用都具有抑制ECV-304细胞增殖和诱导凋亡的效用,两药联合比单药更明显。两药单用和联合都可明显抑制鸡胚尿囊膜血管生成。     

奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株（Eca-109）抑制作用机制的研究

目的研究奈达铂（NDP）联合顺铂（DDP）对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化。结果NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50（NDP）＋1/2IC50（DDP）对Eca-109细胞的抑制率分别为（41.9±4.1）%、（47.4±2.9）%和（52.5±0.9）%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因（蛋白）表达显著降低,而Bax基因（蛋白）表达显著增高。结论1/2IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。     

FR/CL体外干预人胃癌细胞株SGC-7901及人肺癌细胞株A549生长

目的 研究金荞麦提取物FR联合刺梨提取物CL对人胃癌细胞株SGC-7901及人肺癌细胞株A549增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测FR、CL对SGC-7901、A549细胞的增殖抑制率;流式细胞术分析早期凋亡细胞比; RT-PCR、Western blot分析Ki-67及Bax、Bcl-2表达的变化.结果 FR、CL单药均可明显抑制SGC-7901、A549细胞的生长,呈剂量依赖性;两药IC_(30) 浓度联合呈增效效应; IC_(30) 浓度FR、CL单药和1/2 IC_(30) (FR)+1/2 IC_(30) (CL)联合对SGC-7901细胞的抑制率分别为(33.89±0.22)%、(30.86±1.17)%和(44.25±0.50)%,对A549细胞的抑制率分别为(30.91±1.72)%、(29.07±1.41)%和(43.62±2.15)%.流式细胞术结果表明,对照组、FR组、CL组、联合组细胞早期凋亡比例依次增加,两单药组及联合组与对照组之间、联合组分别与两单药组之间的差异均具统计学意义(P<0.05);与单药组比较,联合组Ki-67、Bcl-2 mRNA/蛋白表达率有显著降低,而Bax mRNA/蛋白表达显著增高.结论 FR、CL均可抑制人胃癌细胞株SGC-7901细胞、人肺癌细胞株A549的增殖和诱导其凋亡,且联合应用存在增效效应.     

融合基因CDglyES重组腺病毒对卵巢癌细胞抑制作用的体外研究

  目的  构建含CDglyES融合基因的重组腺病毒,体外观察其对人卵巢癌细胞的直接抑制作用及其对血管内皮细胞生长的抑制作用。  方法  用细菌内同源重组方法构建腺病毒穿梭质粒prAdCDglyES。采用脂质体介导转染293包装细胞,扩增获取重组腺病毒rAdCDglyES。采用MTT法观察rAdCDglyES对卵巢癌细胞SKOV-3生长抑制的影响,同时观察其表达产物抑制脐静脉血管内皮细胞ECV-304增殖的作用。  结果  纯化的rAdCDglyES滴度是1×1013.3 TCID50/L,其对SKOV-3细胞生长抑制率是（83.1±6.3）%,与对照组rAd-LacZ（24.1±13.2）%相比有显著性差异（P < 0.01）。浓缩的转染rAdCDglyES的细胞培养上清液抑制ECV-304细胞增殖,抑制率是（78.7±1.6）%,而同样浓缩的转染rAd-CD的细胞培养上清液抑制率是（23.9±9.7）%,二者有显著性差异（P < 0.01）。  结论  研究结果表明重组腺病毒rAdCDglyES具有体外直接和间接抑制人卵巢癌细胞效能。      

苦参碱逆转人乳腺癌MCF-7/ADR细胞株耐药性及对PI3 K/AKT信号通路下游因子的影响

目的：探索苦参碱对人乳腺癌耐药株MCF-7/ADR多药耐药性逆转的作用机制及对PI3K/AKT信号通路下游因子的影响。方法：采用MTT法检测不同浓度苦参碱和MK2206作用MCF-7/ADR细胞24h后的生长抑制率,以抑制率为10%左右为检测标准;用荧光定量RT-PCR、Western blot检测不同浓度苦参碱作用MCF-7/ADR细胞24h后Bcl-2、Bax、Caspase-3、PARP、GSK-3β、p65六种基因mRNA和蛋白的相对表达量。结果：荧光定量RT-PCR结果显示0.6、1.2g/L的苦参碱处理组与空白对照组相比,随着苦参碱浓度的提高,PI3K/AKT信号通路下游作用因子Bcl-2基因和p65基因的相对表达量逐渐降低,Caspase-3基因的相对表达量变化不显著,而Bax基因、GSK-3β基因及PARP基因的相对表达量逐渐增高;相同抑制率的苦参碱组（0.6g/L）和MK2206组（0.05μmol/L）相比,两组降低基因表达量的差异不明显,苦参碱组更能增加Bax、PARP和GSK-3β基因的相对表达量并且能够明显减低p65基因的相对表达量。Western blot结果显示0.3、0.6、1.2g/L三组不同浓度苦参碱干预组与空白对照组相比,随着苦参碱浓度的提高Bcl-2和p65蛋白表达量逐渐降低,Bax、PARP和GSK-3β蛋白表达量逐渐增高,Caspase-3蛋白表达量变化不明显;相同抑制率的苦参碱组（0.6g/L）和MK2206组（0.05μmol/L）相比,苦参碱组更明显。结论：苦参碱可能是通过作用AKT靶基因启动PI3K/AKT信号转导通路中下游相关凋亡因子而发挥逆转乳腺癌多药耐药的作用。     

131I-Angiostatin抑制小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的观察血管抑素(angiostatin,AG)、131I和131 I标记的血管生成抑制素(131I-AG)对人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响及其对小鼠Lewis 肺癌移植瘤的治疗效果.方法用131 I标记AG,得到4种不同浓度的131 I-AGa(含131 I 0.74 GBq/L、AG 0.5 μg/mL)、b(含131 I 0.74 GBq/L、AG 16 μg/mL)、c( 含131 I 1.48 GBq/L、AG 0.5 μg/mL)、d(含131 I 1.48 GBq/L、AG 16 μg/mL);采用MTT法观察AG、131I 和131 I-AG对ECV304细胞增殖的影响.将28只荷Lewis 肺癌的C57BL/6雄性小鼠(右前肢皮下移植瘤直径10 mm)分成4组,分别腹腔注射131 I-AG(含131 I 11.1 MBq、AG 12.5 mg/kg)、AG(12.5 mg/kg)、131I(11.1 MBq) 和生理盐水各0.3 mL,治疗2次,间隔7 d,观察肿瘤体积和质量的变化.结果1)在0.5～64 μg/mL浓度下,AG对ECV304细胞生长抑制率为(7.3±3.5)%～(41.9±4.3)%(与0浓度AG比较,P＜0.01);a、b、c、d 4种浓度的131 I-AG对ECV304细胞的抑制率分别为(23.9±2.8)%、(58.2±3.9)%、(39.1±4.1)%和(78.4±5.4)%,与AG和131 I相比,抑制率明显提高(P＜0.01).2)动物实验显示,131I-AG、AG、131I对小鼠Lewis 肺癌移植瘤的抑瘤率分别为72.9%、46.7%和19.2%.结论131I-AG在体外能明显抑制内皮细胞的生长,在体内能明显抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长,其抑制作用强于单纯的等浓度的AG和131 I,提示131 I-AG在实体瘤的治疗中有潜在的应用前景.     

苦参碱和顺铂联合应用对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖抑制作用的研究

[目的]观察苦参碱和顺铂单药及联合应用对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖的抑制作用。[方法]采用MTT法（四甲基偶氮唑蓝比色法）,利用中效原理判断药物联合应用的效应。[结果]苦参碱与顺铂联合应用对骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制作用加强,低浓度（≤1．0mg／ml）苦参碱与顺铂联合应用时两者为拮抗作用,〉1．5mg／ml苦参碱与顺铂合用时为相加作用。在苦参碱浓度〉2．0mg／ml联合用药的抑制率接近95％。顺铂以20μg／ml的浓度作用于MG-63细胞48h．增殖抑制率是86．7％,而顺铂以5μg／ml的浓度与2mg／ml的苦参碱联合作用48h,增殖抑制率是92．6％,说明苦参碱和顺铂联用可使顺铂在小剂量时即有较好的杀伤作用。[结论]苦参碱和顺铂联合应用可使顺铂在小剂量时有较好的作用,从而避免了顺铂的毒副作用。     

Caspase-3在苦参碱诱导鼻咽癌CNE2细胞凋亡中的作用

目的：探讨苦参碱对鼻咽癌CNE2细胞生长和凋亡的影响以及Caspase-3在其中的作用。方法：将不同浓度（0、0.25、1.00、4.00g/L）的苦参碱分别作用于体外培养的CNE2细胞48h;采用MTT法检测细胞的存活与增殖,采用Annexin-Ⅴ和PI双染法测定细胞凋亡,采用Westernblot法检测细胞中Caspase-3蛋白的含量。结果：在苦参碱1.00和4.00g/L浓度作用下,CNE2细胞存活和增殖受到影响,其存活率分别为对照组的65.1%和50%,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P均〈0.05）;且CNE2细胞的凋亡频率明显增加,分别达到15.78%和28.44%,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P均〈0.05）。苦参碱1.00和4.00g/L浓度组细胞的Caspase-3蛋白水平分别为1.22±0.34和1.69±0.46,均比对照组0.87±0.26明显增高（P均〈0.05）。结论：苦参碱能够引起鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制和凋亡增加,并对Caspase途径有激活作用。     

褪黑素对肺癌A549细胞诱导的血管内皮细胞增殖的影响

目的探讨褪黑素在体外共培养条件下对肺腺癌A549细胞诱导血管内皮细胞增殖的影响及相关机制。方法建立肺腺癌A549细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVECS）ECV-304共培养模型,实验共分成四组：Con组(对照组),nM组(褪黑素终浓度1 nM/L),μM组(褪黑素终浓度1 μM/L),mM组(褪黑素终浓度1 mM/L)。采用BrdU法观察不同浓度褪黑素对血管内皮细胞（ECV-304）增殖的影响,细胞迁移实验观察褪黑素对血管内皮细胞活力的抑制作用,ELISA法检测褪黑素对肺腺癌细胞VEGF蛋白表达的影响。结果低浓度的MLT(1 nM/L)对HUVECs增殖无明显影响,但高浓度 MLT(1 mM/L)明显抑制HUVECs增殖,并有浓度依赖倾向; 高浓度的褪黑素明显降低肺腺癌A549细胞培养液中VEGF的表达。 结论高浓度的褪黑素可以抑制肺腺癌细胞诱导的血管内皮细胞的增殖及迁移,其作用机制可能与褪黑素抑制肺腺癌细胞VEGF的表达有关。     

阿帕替尼抑制白血病细胞株Nalm6增殖及诱导凋亡的实验研究

目的 阿帕替尼(Apatinib)为新一代小分子血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)酪氨酸激酶抑制剂,对多种实体肿瘤细胞有杀伤作用.本研究探讨Apatinib对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞株Nalm6增殖抑制及诱导凋亡的作用.方法 CCK8法检测不同浓度Apatinib对Nalm6细胞的增殖抑制作用,Annexin V/PI法检测不同浓度Apatinib诱导Nalm6细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法法检测Apatinib处理后Bcl-2、Bcl-xL和PARP蛋白的表达变化.结果 CCK-8细胞毒性实验结果显示,Apatinib对Nalm6细胞具有明显的增殖抑制作用,呈剂量及时间依赖性,作用48 h后,2.5、5、10、20和40 μmol/L的Apatinib对Nalm6细胞的增殖抑制率分别为(3.78±1.01)％、(13.36±1.42)％、(25.80±2.83)％、(44.40±7.74)％和(64.07±6.66)％,经多个独立样本非参数检验Kruskal-Wallis H分析,各浓度的Apatinib均能诱导Nalm6细胞凋亡,与对照组(3.61±0.91)％比较差异有统计学意义,x2[13.500,P=0.009;作用72 h后,2.5、5、10、20和40 μmol/L的Apatinib对Nalm6细胞的增殖抑制率分别为(4.57+2.38)％、(20.26+4.06)％、(39.27±1.57)％、(65.19±4.45)％和(85.54±3.37)％,经检验各浓度的Apatinib均能抑制Nalm6细胞增殖,与对照组比较差异有统计学意义,x2=13.500,P=0.009.48和72 h的IC50分别为(24.39±0.05)和(13.18±0.08) μmol/L.凋亡实验显示,Apatinib能增加Nalm6细胞凋亡率,并呈剂量依赖性,作用48 h后,对照组和10、20、30、40 μmol/L Apatinib组对Nalm6细胞的凋亡率分别为(3.61±0.91)％、(5.28±1.29)％、(5.9±0.85)％、(10.18±1.48)％和(15.23±3.69)％,经检验各浓度的Apatinib均能诱导Nalm6细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义,x2=12.433,P=0.014;作用72 h后,对照组和10、20、30、40 μmol/L Apatinib组对Nalm6细胞的凋亡率分别为(3.8±1.10)％、(5.33±2.08)％、(10.10±2.86)％、(12.15±1.43)％和(25.61±3.63)％,经检验各浓度的Apatinib均能诱导Nalm6细胞凋亡,与对照组比较差异有统计学意义,x2 =12.233,P=0.016.蛋白质印迹法结果显示,Apatinib作用Nalm6细胞24、48 h后均能下调Bcl-2和Bcl-xl的表达,切割PARP蛋白.结论 Apatinib能抑制Nalm6细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和Bcl-xl有关.     

血栓弹力图对胶质瘤患者凝血功能的检测及其参数与Ki-67表达的相关性

目的:探讨血栓弹力图（TEG）检测胶质瘤患者凝血功能的应用价值及其参数与Ki-67表达的相关性。方法:选取我院2015年1月至2018年5月收治的62例胶质瘤患者及同期50例院内体检健康者作为对照组进行TEG测定。分别对比胶质瘤组、高级别胶质瘤组与对照组的TEG结果。对胶质瘤组的TEG参数和Ki-67做相关分析。结果:胶质瘤组R值、K值、α角度值、MA值、CL30值、CI值分别为4.52±2.75、1.58±1.31、62.35±15.34、59.48±13.91、95.82±5.78、2.29±2.72。CL30值与对照组相比有统计学差异（P<0.05）,R值、K值、α角度值、MA值、CI值则无统计学差异（P>0.05）。高级别胶质瘤患者的R值、K值、α角度值、MA值、CL30值、CI值分别为4.41±2.01、1.48±0.97、64.47±13.72、60.31±11.39、95.09±4.83、2.41±1.45。其中K值、CL30值较对照组小,α角度值、MA值和CI值较对照组大（P<0.05）。相关分析发现R值、CI值与Ki-67系数无明显相关性（P>0.05）;K值、CL30与Ki-67呈负相关（P<0.05）;α角度值、MA值与Ki-67呈正相关（P<0.05）。结论:胶质瘤患者可有凝血功能紊乱。高级别胶质瘤患者可呈高凝状态及相对纤溶亢进。TEG可用来观察胶质瘤凝血状态的变化并作为判断预后的参考依据,且其参数与Ki-67表达有一定相关性。     

硼替佐米对骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖和凋亡影响的研究

目的 探讨硼替佐米对骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖和凋亡的影响.方法 采用20、40、60、80和100 nmol/L的硼替佐米处理骨髓瘤细胞株RPMI8226(处理组),以不含硼替佐米的细胞作为对照(对照组).采用MTT法检测硼替佐米对RPMI8226细胞的增殖抑制作用,采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率,采用RT-PCR和Western Blot技术检测细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、c-myc及PI3K/AKT信号通路相关蛋白Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达水平.结果 不同浓度的硼替佐米均可抑制RPMI8226细胞的增殖,且呈剂量效应;20、40、60、80和100 nmol/L硼替佐米处理组的RPMI8226细胞凋亡率分别为(11.80±0.56)%、(19.45±1.25)%、(36.82±2.26)%、(43.56±3.50)%和(56.62±5.02)%,均高于对照组的(8.02±0.45)%,差异均有统计学意义(P﹤0.05).处理组c-myc、β-catenin及Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均低于对照组,且随硼替佐米浓度的增加而下降;而Bax的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,且随硼替佐米浓度的增加而升高.结论 硼替佐米可抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖,促进其凋亡,作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路和PI3K/AKT信号通路有关.     

百里醌对犕犌犆-803细胞增殖和凋亡影响机制探讨

目的：百里醌（thymoquinone,TQ）是具多种生物活性的天然生物单体,参与多种肿瘤细胞增殖、凋亡及转移过程。MGC-803细胞株为常见的低分化胃黏液腺癌细胞。本研究探讨 TQ 对胃癌 MGC-803细胞增殖和凋亡的影响及其可能的信号通路。方法以终浓度分别为0、10、25、50、75、100和125μmol／L TQ 处理 MGC-803细胞12、24和36 h, MTT 法检测其对增殖的影响,Hoechst 染色观察细胞凋亡,蛋白质印迹法分析 Bax、Bcl-2、survivin、Cyclin D1、caspase-3、caspase-9、PTEN、AKT、P-AKT、聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（poly ADP-ribose polymerase,PARP）、cleaved caspase-3及cleaved caspase-9的表达,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果 MTT 结果显示,10～125μmol／L TQ 抑制胃癌MGC-803细胞,呈现明显的剂量-时间依赖性。流式结果显示,0、25、50和75μmol／L TQ 作用 MGC-803细胞24 h,凋亡率分别为（1．59±1．04）％、（4．26±0．35）％、（8．37±0．67）％和（21．73±1．71）％,F ＝209．76,P ＜0．001;G2／M 期细胞分别为（4．18±1．09）％、（6．81±0．28）％、（8．68±0．15）％和（12．26±1．46）％,F＝80．388,P ＜0．001。蛋白质印迹结果显示,PTEN 信号通路相关蛋白 PTEN 及凋亡相关蛋白 Bax、cleaved caspase-3及 cleaved caspase-9表达上调,抑凋亡相关蛋白 Bcl-2、caspase-3、caspase-9、survivin 和 PARP 表达下降。结论PTEN 信号通路参与 TQ 抑制胃癌 MGC-803细胞增殖、诱导其凋亡的过程。     

条件复制腺病毒携带白细胞介素24增强Hela细胞放射敏感性

目的:观察条件复制性腺病毒(ZD55)携带白介素24（ZD55-IL-24）单独与联合放射治疗对宫颈癌Hela细胞的治疗效果。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞,分成PBS组、放射治疗组、ZD55-IL-24组、ZD55-IL-24联合放射治疗组。采用MTT法检测细胞生长抑制率,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞活性氧ROS水平,Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达。结果:MTT法显示PBS组、放射治疗组、ZD55-IL-24组、ZD55-IL-24联合放射治疗组抑制率分别为（7.28±1.99）%、（45.16±4.12）%、（33.23±2.63）%、（85.27±2.03）%,ZD55-IL-24联合放射治疗组细胞抑制率大于其他三组（P<0.05）。Annexin V-FITC/PI双染法显示ZD55-IL-24联合放射治疗组细胞凋亡率为（72.82±4.57）%,与PBS组（7.40±0.74）%,放射治疗组（33.60±3.27）%,ZD55-IL-24组（24.66±5.36）%相比,差异有统计学意义（P<0.05）。流式细胞仪检测PBS组、放射治疗组、ZD55-IL-24组、ZD55-IL-24联合放射治疗组细胞ROS率分别为（8.37±1.27）%、（27.97±2.22）%、（21.60±1.12）%、（43.57±2.61）%,ZD55-IL-24联合放射治疗组与其他三组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。Western blot显示ZD55-IL-24联合放射治疗组Bax蛋白表达明显增加,Bcl-2蛋白明显减少,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:条件复制性腺病毒携带白介素24可增强宫颈癌Hela细胞放射敏感性。     

Inhibition of tumor growth in vitro by a combination of extracts from Rosa roxburghii Tratt and Fagopyrum cymosum

Objective: Traditional Chinese herbal medicines have a very long history. Rosa roxburghii Tratt andFagopyrum cymosum are two examples of plants which are reputed to have benefits in improving immuneresponses, enhancing digestive ability and demonstrating anti-aging effects. Some evidence indicates that herbalmedicine soups containing extracts from the two in combination have efficacy in treating malignant tumors.However, the underlying mechanisms are far from well understood. The present study was therefore undertakento evaluate anticancer effects and explore molecular mechanisms in vitro. Methods: Proliferation and apoptosiswere assessed with three carcinoma cell lines (human esophageal squamous carcinoma CaEs-17, human gastriccarcinoma SGC-7901 and pulmonary carcinoma A549) by MTT assay and flow cytometry, respectively, afterexposure to extract from Rosa roxburghii Tratt (CL) and extract from Fagopyrum cymosum (FR). IC30 of CL andFR were obtained by MTT assay. Tumor cells were divided into four groups : control with no exposure to CLor FR; CL with IC30 CL; FR with IC30 FR; CL+FR group with 1/2 (IC30 CL + IC30 FR). RT-PCR and Westernblot analysis were used to detect the expression of Ki-67, Bax and Bcl-2 at mRNA and protein levels. Results:Compared with the CL or FR groups, the combination of CL+FR showed significant inhibition of cell growthand increase in apoptosis; the mRNA and protein expression levels of Ki-67 and Bcl-2 in CL+FR group wereall greatly decreased, while the expression of Bax was markedly increased. Conclusions: These results indicatethat the synergistic antitumor effects of combination of CL and FR are related to inhibition of proliferation andinduction of apoptosis.     

土槿皮乙酸诱导大鼠神经胶质瘤C6细胞株凋亡

目的:研究土槿皮乙酸诱导大鼠神经胶质瘤C6细胞株凋亡及其机制.方法:采用MTT法检测0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L不同终浓度PAB对C6细胞增殖能力的影响,激光扫描共聚焦显微镜观察AO/EB荧光染色后细胞的凋亡情况,流式细胞术检测碘化丙啶(PI)染色后细胞周期的变化,免疫组化法测定C6细胞的凋亡相关蛋白Bcl-2的表达.结果:MTT结果显示,PAB呈时间剂量依赖性抑制C6细胞的生长.PAB处理24、48和72 h后,对C6细胞的半效致死剂量(IC50)分别为39.811、23.306和7.360 μmol/L.5.0、10.0、20.0 μmol/L PAB作用C6细胞72 h后的凋亡率分别为(50.5±0.7)%、(63.5±2.3)%和(80.0±1.2)%,与对照组(12.0±1.6)%比较均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测结果显示5.0、10.0、20.0 μmol/L不同浓度PAB作用C6细胞72小时后,随着浓度的增加,G2/M期细胞逐渐增多,分别为(29.84±6.215)%,(34.58±1.187)%和(70.23±6.325)%,与对照组(7.79±0.570)%相比,后两组差异有统计学意义(P<0.05).C6细胞中Bcl-2蛋白阳性表达率随药物剂量的增大而减小.结论:PAB可抑制大鼠神经胶质瘤C6细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期、下调Bcl-2表达为其可能的作用机制.     

淫羊藿苷逆转耐甲氨蝶呤肺癌A549细胞转移表型

目的:研究中药淫羊藿苷(icariin,ICA)作用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)耐药肺癌A549细胞后对细胞转移表型的影响,初步探讨ICA逆转A549/MTX耐药细胞转移表型的作用机制及对肺癌的治疗价值.方法:采用MTT法检测ICA对A549/MTX耐药细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC_(50)).采用双层软琼脂克隆形成实验检测A549/MTX 组和A549/MTX+ICA组细胞的克隆形成率,并观察其集落形态.细胞划痕实验检测A549/MTX组和A549/MTX+ICA组细胞的迁移能力.Transwell小室实验检测细胞侵袭能力的变化.结果:MTT结果显示,无毒剂量的ICA与MTX联合应用后A549/MTX细胞的IC_(50)值为35.50±1.85 μmol/L,比单独应用MTX(同等剂量)后A549/MTX细胞的IC50值(52.17±2.25 μmol/L)有了一定程度的下降.软琼脂实验发现,A549/MTX+ICA组细胞克隆形成率为0.94±0.09,小于A549/MTX组细胞的1.56±1.07(P<0.05).划痕实验显示,72 h后A549/MTX组细胞的迁移能力大于A549/MTX+ICA组细胞(P<0.05).Transwell实验显示,A549/MTX组细胞的穿膜细胞数明显多于A549/MTX+ICA组细胞(P<0.05),说明A549/MTX+ICA组细胞的侵袭浸润能力小于A549/MTX组细胞.结论:中药ICA具有逆转A549/MTX耐药细胞转移表型的作用.