五倍子对兔眼结膜成纤维细胞的抑制作用（Ⅱ）

为进一步探讨五倍子对活体眼结膜成纤维细胞增生的抑制作用及其对眼组织的毒性作用，对制成青光眼滤过术模型的兔眼及另一组健康兔眼，结膜下注射五倍子提取液，结果五倍子组术后结膜滤过泡的形成维持时间优于对照组（Ｐ＜０．０１）。五倍子组的手术区组织病理改变比对照组轻，药物毒性试验结果显示五倍子对角膜内皮细胞密度无影响，与对照组比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５），五倍子不引起角膜上皮缺损，房水清晰无混浊，眼球各组织结构无改变。结果提示五倍子对手术伤口的成纤维细胞增生具有显著的抑制作用，可以提高青光眼滤过术的成功率，而且对眼球组织无毒性作用。     

丹参,青木香对成纤维细胞产生基质的抑制作用

本文报告丹参、青木香、车前草、秋水仙素和地塞米松对体外培养的成纤维细胞合成基质的作用。发现加有丹参、青木香、秋水仙素或地塞米松各组细胞的~3H-羟脯氨酸掺入值、胶原合成率及纤维连结素产量均显著低于对照组;而加有车前草组细胞的胶原合成率和纤维连结素产量均近似或高于对照组。提示丹参和青木香能直接有效地抑制成纤维细胞合成基质。     

兔眼角膜、结膜成纤维细胞的培养

目的 建立眼角膜、结膜细胞体外培养的方法。方法 采用组织块培养法培养兔眼角膜基质及结膜成纤维细胞。结果 结膜成纤维细胞在培养10天以后可以形成单层细胞。眼角膜成纤维细胞在培养瓶中培养2周后可形成单层；24孔板培养3d后细胞贴壁生长旺盛，10d形成单层。结论 眼角膜、结膜成纤维细胞组织块培养法是可行的，但在24孔培养板上眼角膜成纤维细胞比在培养瓶中贴壁快而且容易生长。     

兔角膜成纤维细胞的两种培养方法

角膜组织细胞培养中有关成纤维细胞培养的报道极少，而成纤维细胞在许多角膜疾病、外伤及角膜手术的修复及愈合过程中起着重要的作用。近年来，随着准分子激光屈光性角膜切削术（ＰＲＫ）被广泛接受，关于角膜成纤维细胞在ＰＲＫ后角膜愈合过程及并发症形成过程中所起的重...     

胎兔与成兔皮肤瘢痕成纤维细胞基因差异表达

目的探讨胎兔及成兔皮肤瘢痕成纤维细胞基因表达变化的待征及其可能的生物学意义。方法建立动物模型,收集胎兔及成兔皮肤瘢痕组织进行成纤维细胞培养,用基因芯片技术检测胎兔及成兔皮肤瘢痕成纤维细胞的基因表达变化规律。结果基因芯片高通量地揭示了胎兔及成兔皮肤瘢痕成纤维细胞的基因表达变化的信息,差异表达基因有98个,其中下调的基因有36个,上调的基因有62个,涉及十大类基因。结论胎兔及成兔皮肤瘢痕成纤维细胞的基因图谱存在差别,这些基因的异常表达,可能参与胎儿皮肤无瘢痕愈合及成人皮肤瘢痕愈合的形成过程。     

环孢素A壳聚糖纳米微粒抑制兔结膜成纤维细胞增生的作用

目的研究自制的环孢素A壳聚糖纳米微粒[CS（CsA）-NP]对兔结膜成纤维细胞（RCFs）增生的抑制作用。方法取第4～6代培养的兔结膜成纤维细胞,分别加入CS（CsA）-NP、环孢素A（CsA）原药、壳聚糖纳米微粒（CS-NP）及平衡盐溶液,用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测对RCFs的抑制作用。结果 CS（CsA）-NP、CsA原药、CS-NP以质量浓度和时间依赖方式抑制RCFs的增生。对RCFs的抑制作用CS（CsA）-NP组显著强于CsA原药组及CS-NP组（均P〈0.01）。结论 CS（CsA）-NP可缓慢释放药物,能有效抑制RCFs的增生,随时间延长,作用显著强于CsA原药,可作为缓释药物载体。     

酶消化法原代培养兔结膜成纤维细胞及进行传代培养的体会

目的 用酶消化法原代培养兔眼结膜成纤维细胞并进行传代培养。方法 取兔眼结膜，加入胰蛋白酶及乙二胺四乙酸二钠直接消化后放入孵箱培养，并通过改进后的传代培养技术将原代培养成功的成纤维细胞进行传代，观察细胞的生长情况。结果 原代培养7～9d成纤维细胞在培养基中长成单层且分布均匀。传代培养后3～4d成纤维细胞铺满培养基，即可再传代。结论 酶消化法原代培养兔眼结膜成纤维细胞比常规的组织块培养法更快促使细胞长成单层，且贴壁细胞分布更均匀。运用改进后的传代培养技术可以使成纤维细胞的增殖和纯化更加方便快捷。     

兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的培养及冻存

目的 探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。 方法 分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,-80℃冻存。结果 兔眼结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞可以在体外成功培养,结膜上皮细胞呈圆形或多角形,成纤维细胞呈长梭形;冻存细胞1个月后复苏成功率达80%。结论 组织块法和混合消化法培养可成功获得结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞。     

兔声带成纤维细胞的体外分离培养、鉴定与标记

目的探讨体外培养兔声带成纤维细胞（Vocal Fold Fibroblasts,VFFs）的培养及标记方法。方法消化培养法分离、培养兔声带成纤维细胞,倒置显微镜观察其生长和形态特征,并传代、鉴定。增强型绿色荧光蛋白腺病毒载体（Ad-EGFP）标记体外培养的VFFs,取12只新西兰兔,以1×100万/0.1ml分别注入损伤模型左侧声带,观察注入VFFs的生长情况。结果兔声带成纤维细胞可以在体外原代和传代培养,具有成纤维细胞的典型形态。波形蛋白免疫荧光染色阳性,Ad-EFGP可以成功转染VFFs。将VFFs诸如声带后15d,组织学切片未发现成活细胞。结论用消化培养法可成功获得VFFs,Ad-EGFP是一种理想的示踪标记物。     

羊膜对兔眼小梁切除术后成纤维细胞增殖抑制作用的定量研究

目的 :应用细胞增殖指标核仁组成区相关嗜银蛋白 (AgNORs) ,研究兔眼滤过道纤维细胞 (Fb)增殖规律及羊膜的抗增殖作用 ,并对其临床意义进行探讨。方法 :作兔眼高眼压模型 ,行双眼小梁切除术 ,一眼植入羊膜 ,另一眼作为对照而不植入羊膜。分别于术后的 3、7、15、30d取兔眼滤过道组织作切片 ,作Ag NORs及HE染色 ,比较羊膜植入眼和对照眼FbAgNORs染色颗粒数量及HE染色后纤维组织增生情况。结果 :①不同手术区羊膜植入眼FbAgNORs颗粒数量显著低于对照眼 (P <0 0 1) ,羊膜抑制率为 5 1 4 %～73 7% ;②HE染色观察 ,羊膜植入眼纤维组织增生轻微 ,而对照眼组织增生明显。结论 :羊膜植入巩膜瓣下可有效抑制咬切口 ,巩膜瓣下及结膜瓣下Fb增殖活性 ,并且未见明显毒副作用。     

表皮生长因子对角膜成纤维细胞生长的影响

目的　研究表皮生长因子 (EpidermalGrowthFactor,EGF)对角膜成纤维细胞生长的影响。方法　通过含不同浓度EGF的培养基培养角膜成纤维细胞 ,分别于 2 4、48和 72h用 0 .5 %台盼蓝法对每组进行细胞活力的测定。结果　 0 .1、1.0mg/L的EGF在细胞培养 48、72h后对细胞生长有一定的促进作用 (P <0 .0 5 ) ,但在 2 4h时对细胞生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。浓度为 0 .0 1mg/L的EGF对角膜成纤维细胞生长无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论　一定浓度的EGF对角膜成纤维细胞的生长具有促进作用     

石棉纤维诱导的细胞因子对肺成纤维细胞作用的研究

用肺泡灌洗法获取兔肺巨噬细胞，进行体外培养，取其上清液分别用同位素掺入法和ＭＴＴ比色法测定上清液中炎性细胞因子ＴＮＦ和ＩＬ－６的活性。并将上清液与人胚肺成纤维细胞（ＷＩ－３）培养，并用抗ＴＮＦ抗体和ＩＦＮγ进行成纤维细胞增殖和胶原合成抑制试验。结果显示，石棉纤维能刺激ＡＭ释放ＴＮＦ和ＩＬ－６，其活性分别为１１９８Ｕ／ｍ，１５１１Ｕ／ｍｌ，均主于ＴｉＯ２对照组。浓度与效应之间有剂量反应关系。石棉纤维     

五倍子瘢痕膏水溶液对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响

目的探讨五倍子瘢痕膏治疗瘢痕疙瘩的作用机制。方法采取瘢痕疙瘩成纤维细胞原代培养,用四甲基偶氮唑盐比色法测定不同浓度药物对原代培养的第4~8代瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。结果各不同浓度的药物组对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖都有一定的抑制作用(P<0.01),并且有时间和剂量依赖。对体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞周期研究表明,各药物组S期的细胞百分比显著高于对照组,其间有显著性差异(P<0.01);而各药物组G2 M期细胞百分比却明显低于对照组,其间有显著性差异(P<0.01),并且这种对S期的阻滞作用和对G2 M期细胞的抑制作用随药物浓度的增加而增强(P<0.05)。结论不同浓度的五倍子瘢痕膏水溶液对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖都有一定的抑制作用,其重要的作用途径是使瘢痕疙瘩成纤维细胞S期的细胞数上升,出现S期阻滞,分裂期的细胞数下降,从而抑制了瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并且这种抑制作用有一定的时间和剂量依赖。     

兔眼角膜成纤维细胞原代培养

目的:建立眼角膜成纤维细胞体外培养的方法。方法:采用全角膜组织培养法培养兔角膜成纤维细胞。结果:在培养皿中培养1天后细胞开始贴壁,6天有新生细胞分出,形成梭形的成纤维细胞。传代细胞经4-6天可形成密集的成纤维细胞,细胞呈纤维状,呈漩涡形排列,排列整齐,局部细胞相互平行,第4、5代生长情况良好,细胞生长旺盛,细胞呈密集漩涡形排列。结论:眼角膜成纤维细胞全角膜组织培养法是可行的。     

电穿孔介导外源基因转染兔成体成纤维细胞的初步研究

目的采用电穿孔方法,介导质粒载体pEGFP-cl转入兔成体成纤维细胞,探讨建立电穿孔介导外源基因转染兔成体成纤维细胞的基本条件。方法电穿孔介导质粒载体pEGFP—cl转入7．10代兔耳成体成纤维细胞系GG,研究不同电压、电容、DNA剂量,孵育温度的条件下,观察细胞存活数,流式细胞仪测试GFP的含量。结果以PBS作为电击基础液、细胞浓度2×10^6个／ml,电压250V、电容700μF,DNA用量30μg时,兔耳成纤维细胞的转染率和存活率最佳。且电击前冰浴10min,电转染后37℃孵育10min有利于提高细胞的转染率和存活率。结论在合适电压、电容、DNA剂量条件下,电转染提供了外源基因转染兔耳成体成纤维细胞适用性;电转染前的一定时间冰浴和电转染后一定温度孵育可使电转染效率得到改善。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是近年来研究较为热门的生物因子,为具有多种功能的多肽生长因子,能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞的增殖,是体内重要的创伤愈合因子之一。bFGF有主动诱导分化和加速生长作用,可以促进牙周膜成纤维细胞的分化和增殖,促进牙周组织的修复和再生。     

干扰素对人皮肤成纤维细胞抑制作用的体外观察

干扰素对人皮肤成纤维细胞抑制作用的体外观察李英春，陈壁，汤朝武（￥第四军医大学西京医院烧伤科，西安７１００３３）关键词干扰素，成纤维细胞，皮肤中图号Ｒ６１９．６皮肤成纤维细胞（Ｆｂ）通过合成胶原等细胞外基质（ＥＣＭ）成分在维持真皮结缔组织稳定性和参与...     

Cbfal基因转移对原代培养的兔皮肤成纤维细胞的影响

目的 探讨核心结合因子al（core binding factor al，Cbfal）基因转移对原代培养免皮肤成纤维细胞的影响作用。方法 胰酶消化法培养兔皮肤成纤维细胞，兔采用脂质体转染技术转染原代培养的兔皮肤成纤维细胞，RT—PCR检测成骨标志基因Ⅰ型胶原（Ⅰ collagen）、骨钙素（osteoclcin，OCN）、骨唾液蛋白（bone sialoprotein，Bsp）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、Cbfal的表达。结果 兔皮肤成纤维细胞在Cbfal基因转染后出现OCN、Bsp、ALP的表达，Ⅰ Collagen表达增强。结论Cbfal基因转移兔皮肤成纤维细胞可改变原代培养的兔皮肤成纤维细胞的表型，向成骨表型转化。     

抑制成纤维细胞增残的方药与实验研究

成纤维细胞在不同组织部位的导演增残及细胞外基质的过度分泌,可引起各种结缔组织增生疾病的发生,随着对各种结缔组织增生性疾病的实验研究的深入,人们认识到一些中药及其提取物有抑制成纤维细胞增残和过度分泌基质作用,可以有效地阻止增生性结缔组织疾病的发生,发展,从而达到治疗作用,为研究中医药治疗成纤维细胞增残引起民的结缔组织增生性疾病,提供了客观的科学理论依据,现对近10年来有关中药的单方和复方对成纤维细胞的增残的抑制实验研究进展作一综述.