BRF2 基因在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测TFIIB相关因子2(TFIIB-related factor 2,BRF2)基因在人食管鳞状细胞组织、癌旁组织及正常食管组织中的表达,分析BRF2在食管鳞状细胞癌发生、发展及预后中的意义。方法:选取2007年1月至2008年1月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的食管鳞状细胞患者74例,应用RT-PCR和免疫组化方法检测食管鳞状细胞组织、癌旁组织和正常食管组织中BRF2 mRNA和蛋白表达水平。结果:食管鳞状细胞癌及其癌旁组织中BRF2 mRNA表达水平明显高于正常食管组织。食管鳞状细胞组织、癌旁组织和正常食管组织中BRF2蛋白表达阳性率分别为54.5%、32.5%和7.5%,癌组织、癌旁组织中BRF2蛋白的阳性率均显著高于正常食管组织(P<0.05)。随着食管鳞状细胞分化程度升高,BRF2蛋白阳性率显著下降,Ⅲ期和Ⅳ期食管鳞状细胞组织中BRF2蛋白阳性率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(72.7%,73.3%vs 35.7%,34.8%,P<0.05),且生存3年以下的食管鳞状细胞癌患者BRF2表达明显高于3年以上者(69.2%vs 38.2%,P<0.05),吸烟患者预后BRF2蛋白阳性率明显高于非吸烟患者(61.1%vs 30.4%,P<0.05)。结论:食管鳞状细胞癌组织高表达BRF2蛋白,BRF2 mRNA和蛋白与患者不良预后相关,可能作为食管鳞状细胞预后判断的参考指标之一。     

长链非编码RNA SNHG3在食管鳞状细胞癌中的表达及其对ECA-109细胞迁移和侵袭的影响

  目的  探究长链非编码RNA SNHG3在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）组织中的表达及其对ECA-109细胞迁移和侵袭的影响。  方法  收集安阳市肿瘤医院2011年6月到2014年6月收治的60例ESCC患者癌及对应癌旁组织样本，采用qRT-PCR检测ESCC癌与癌旁组织、ESCC细胞ECA-109和人正常食管上皮细胞HEEC中lncRNA SNHG3的表达水平，分析ESCC患者组织中lncRNA SNHG3的表达与ESCC患者临床特征的关系。采用siRNA-SNHG3质粒转染ECA-109细胞，以敲降lncRNA SNHG3的表达水平。采用Kaplan-Meier法分析lncRNA SNHG3表达与患者预后的关系。采用Transwell实验检测ECA-109细胞的迁移和侵袭能力。采用qRT-PCR和Western blot实验检测ECA-109细胞中SNAIL和TWIST的mRNA及蛋白的表达水平。  结果  ESCC肿瘤组织中lncRNA SNHG3的表达水平显著高于癌旁组织（P < 0.05），ECA-109细胞中lncRNA SNHG3的表达水平显著高于人正常食管上皮细胞HEEC（P < 0.05）。ESCC患者组织中lncRNA SNHG3的表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况显著相关（P < 0.05）。siRNA-SNHG3质粒转染ECA-109细胞后，lncRNA SNHG3的表达水平显著降低（P < 0.05）。lncRNA SNHG3的高表达与ESCC患者预后不良显著相关。敲降lncRNA SNHG3后，ECA-109细胞的迁移和侵袭能力显著降低（P < 0.05），SNAIL和TWIST的mRNA及蛋白的表达水平显著降低（P < 0.05）。  结论  lncRNA SNHG3在ESCC肿瘤组织和细胞中高表达，通过调控SNAIL和TWIST蛋白的表达，促进ECA-109细胞的迁移和侵袭。      

Bmi-1蛋白在食管鳞状细胞癌中表达及临床意义

  目的  观察Bmi-1蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达, 探讨Bmi-1与食管鳞状细胞癌的相关性。  方法  应用免疫组织化学法检测南京医科大学附属淮安第一医院2005年1月至2006年2月间168例食管鳞状细胞癌组织和30例正常食管黏膜组织Bmi-1蛋白的表达。  结果  食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中Bmi-1蛋白的阳性表达率分别为66.1%(111/168)、23.3%(7/30), Bmi-1蛋白阳性表达率在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中差异具有统计学意义(P < 0.001), Bmi-1蛋白表达与食管鳞状细胞癌组织学分级、TNM分期和淋巴结转移具有相关性(P=0.016, P=0.004, P < 0.001), Bmi-1阴性组的5年生存率显著优于Bmi-1阳性组(P < 0.001)。  结论  Bmi-1表达异常在食管鳞状细胞癌发生发展中具有重要作用, 检测Emi-1的表达对判断食管鳞状细胞癌的预后具有重要意义。      

Gli1在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨Hh信号通路关键因子Gli1在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及临床意义,并分析其与预后的关系.方法:食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管组织各88例,采用免疫组织化学法检测Gli1的表达,另用Western-blot方法检测其中30例ESCC的Gli1的表达,Pearson卡方检验分析Gli1表达与临床病理特征之间的关系.单因素Kaplan-Meier法分析Gli1表达与预后的关系.Cox比例风险回归评估Gli1表达与预后的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织中Gli1的表达在蛋白水平明显高于食管正常鳞状上皮,Gli1在ESCC中免疫组化阳性表达率为71.59％ (63/88),Gli1在癌旁正常食管鳞状上皮中免疫组化阳性表达率为6.82％ (6/88),差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot法证实Gli1蛋白在ESCC组织中表达上调,与癌旁正常食管组织中的表达比较,差异有统计学意义(P ＜0.001).Gli1高表达与肿瘤病理分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).单因素分析Kaplan-Meier法提示Gli1阳性表达组与阴性表达组生存率之间的差别有统计学意义(Log-rank test,P=0.005).结论:食管鳞状细胞癌中Gli1的表达比较普遍,与ESCC的预后密切相关,可作为预测转移潜能和预后判断的有价值的指标.     

长链非编码RNA SPRY4-IT1在食管鳞癌中的表达及对细胞生长的影响

  目的  探讨长链非编码RNA SPRY4-IT1与食管鳞状细胞癌（ESCC）的临床病理及预后的相关性,以及对细胞生长的影响。   方法  收集2008年1月至2009年12月南京医科大学附属南京医院肿瘤外科50例ESCC手术切除标本（包括癌组织和癌旁组织）,荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测50例ESCC中SPRY4-IT1的表达情况,分析其与临床病理及预后的关系,用小干扰RNA（siRNA）干扰SPRY4-IT1后MTT法检测其对细胞生长的影响,流式细胞检测对细胞凋亡和周期的影响。  结果  45例（90%）标本中SPRY4-IT1呈阳性表达,SPRY4-IT1在癌组织中的表达量显著高于癌旁组织（t=5.377,P < 0.01）。SPRY4-IT1的相对表达水平与肿瘤大小、临床分期相关（P均 < 0.05）。SPRY4-IT1在ESCC细胞株中表达量高于正常食管上皮细胞。KYSE30细胞中干扰SPRY4-IT1的表达后可明显减慢细胞生长,阻滞细胞周期并促进细胞凋亡（P < 0.01）。  结论   SPRY4-IT1在ESCC组织中显著高表达,并且能促进ESCC细胞生长,可能成为ESCC诊断和判断预后的重要分子标记物。      

无齿E3泛素蛋白连接酶同源物在食管鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的 探讨无齿E3泛素蛋白连接酶同源物（DTL）在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及与预后的关系。方法 收集TIMER2数据库资料,分析DTL在食管癌组织中的mRNA表达水平。采用免疫组化染色法检测95例ESCC组织和癌旁正常组织中DTL的蛋白表达情况,分析DTL表达情况与ESCC患者临床特征的关系,并分析ESCC患者预后的影响因素。结果 TIMER2数据库分析结果显示,食管癌组织中DTL mRNA表达水平高于正常食管组织,差异有统计学意义（P﹤0.05）。ESCC组织中DTL阳性表达率为56.8%(54/95),明显高于癌旁正常组织的35.8%(34/95),差异有统计学意义（P﹤0.01）。不同病灶数目及组织学分级ESCC患者的ESCC组织中DTL表达情况比较,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。DTL阳性表达的ESCC患者总生存期明显短于DTL阴性表达患者,差异有统计学意义（P﹤0.01）。多因素分析结果显示,DTL阳性表达是ESCC患者预后的独立危险因素（P﹤0.01）。结论 DTL在ESCC中高表达,且与ESCC的发生发展密切相关,可能是ESCC潜在的预后分子标志物。     

Foxol与Ki-67在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

  目的  探讨Foxol和Ki-67蛋白在食管鳞状细胞癌组织及食管正常鳞状上皮组织中的表达及其临床意义。  方法  采用免疫组织化学SP法, 检测食管鳞状细胞癌(36例)组织及食管正常鳞状上皮(12例)组织中Foxo1和Ki-67蛋白的表达情况。  结果  Foxol蛋白在食管鳞状细胞癌及食管正常鳞状上皮组织中的阳性表达率分别为75.00%、16.67%, 而Ki-67的阳性表达率分别为83.33%、0。Foxol和Ki-67在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于食管正常鳞状上皮(P < 0.01)。Foxol蛋白的表达随肿瘤分化程度增高而显著增高(P < O.01), 而Ki-67的表达随肿瘤分化程度增高而降低(P=0.107)。Foxol和Ki-67蛋白的表达与其他临床病理特征无明显相关性(P > 0.05)。  结论  在食管鳞状细胞癌中, Foxol及Ki-67蛋白表达明显高于食管正常鳞状上皮组织, 且随肿瘤分化程度的增高Foxol的表达显著升高, 而Ki-67的表达则显著降低。提示Foxol和Ki-67在食管鳞状细胞癌肿瘤细胞分化过程中发挥着不同作用, 其作用机制不同。      

lncRNA DGCR5 在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨长链非编码RNA DiGeorge 综合征临界区基因5（digeorge syndrome critical region gene 5,DGCR5）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancinoma,ESCC）组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法：利用生物信息学方法对TCGA数据库中ESCC数据集的DGCR5 表达进行分析。收集2016 年8 月至2017 年3 月河北医科大学第四医院手术切除60 例ESCC患者的癌及癌旁组织标本,用qPCR检测ESCC组织中DGCR5 的表达水平,分析DGCR5 表达与ESCC患者临床病理特征和预后的相关性。结果：TCGA数据库分析结果显示,DGCR5 在ESCC组织中的表达水平显著高于正常食管组织（P<0.01）。ESCC组织中DGCR5 表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。DGCR5 表达水平与ESCC患者TNM分期和淋巴结转移呈显著性相关（均P<0.05）。Kaplan-Meier 单因素分析显示,高表达DGCR5 的ESCC 患者2 年生存率显著低于低表达DGCR5 患者（P<0.05）。结论：DGCR5 在ESCC组织中呈高表达状态,共表达与TNM分期、淋巴结转移及预后不良密切相关,可能成为ESCC早期诊断及预后判断的分子标志物。     

EZH2和H3K27me3在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 分析EZH2和H3K27me3在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）组织中的表达及与食管鳞状细胞癌临床病理指标之间的关系,并评价其表达对食管鳞状细胞癌患者预后的意义。方法 利用免疫组织化学法检测65例ESCC患者癌组织及相应的癌旁组织中EZH2及H3K27me3的蛋白表达,分析两者表达与ESCC患者临床病理学指标之间的相关性,并分析两者之间表达的相关性。利用Kaplan-Meier方法及Log rank检验分析两者表达与食管癌生存率之间的关系。结果 癌旁组织中EZH2和H3K27me3蛋白阳性表达率分别为44.6%和26.2%,ESCC组织中分别为70.8%和47.7%,EZH2和H3K27me3蛋白表达均与ESCC患者的组织学分级及淋巴结转移状态呈正相关关系,且EZH2和H3K27me3蛋白表达之间存在正相关关系。EZH2和H3K27me3表达阳性的ESCC患者五年总生存率均明显低于EZH2和H3K27me3表达阴性的患者;EZH2和H3K27me3双阳性的ESCC患者五年总生存率明显低于EZH2和H3K27me3单阳性和双阴性的ESCC患者。Cox回归结果显示,淋巴结转移、组织学分级、EZH2和H3K27me3表达是ESCC患者的独立预后因素。结论 EZH2和H3K27me3在ESCC中均高表达,并与ESCC患者的组织学分级和淋巴结转移状态相关,可能是ESCC患者的不良预后因子。     

ChREBP在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)的表达及其与预后的关系。方法 采用免疫组织化学法检测2009年1月至2010年12月90例ESCC组织及对应癌旁组织中ChREBP的表达水平，分析ChREBP在ESCC及癌旁组织中的表达差异；同时进一步分析ChREBP表达与ESCC临床病理特征及预后的关系。结果 ESCC组织的免疫组化评分中位数为1.90(1.50,2.10),癌旁组织为0.50(0.21,0.90),差异有统计学意义(P=0.000)。ESCC组织中ChREBP的低表达率为20.7%(18/87),低于癌旁组织的89.3%(75/84);ESCC组织中ChREBP的中表达率为67.8%(59/87),高于癌旁组织的10.7%(9/84);ESCC组织中ChREBP的高表达率为11.5%(10/87),而癌旁组织中无ChREBP高表达。ESCC组织中ChREBP的中、高表达率显著高于癌旁组织(P<0.001)。ESCC组织中ChREBP表达与组织分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05),低分化、合并淋巴结转移的癌组织中ChR...     

人食管鳞癌组织中RIZ1基因表达水平的研究

  目的  研究RIZ1基因mRNA及蛋白在人食管鳞癌中的表达。  方法  以48例人食管鳞癌组织、相应癌旁及正常组织为研究对象, Real-time PCR法检测RIZ1基因mRNA表达情况; 55例癌组织及相应正常组织采用免疫组织化学法检测RIZ1蛋白的表达情况。  结果  统计结果显示人食管鳞癌组织中RIZ1 mRNA的表达量显著低于正常食管组织(P < 0.01), 癌旁组织中的表达量也显著低于正常食管组织(P < 0.01), 但癌组织与癌旁组织的表达量无显著性差异(P=0.067)。RIZ1蛋白在癌组织中阳性表达率为29.1%(16/55), 在正常食管组织中阳性表达率为76.4%(42/55), 差异具有统计学意义(P < 0.01)。  结论  人食管鳞癌组织中RIZ1基因不仅在mRNA转录水平, 而且在蛋白表达水平明显减低。提示RIZ1表达降低可能与食管鳞癌的发生有关, RIZ1在食管鳞癌的发生过程中起到抑制作用。RIZI可能是食管鳞癌的潜在抑制基因。      

ALC1蛋白在食管鳞癌中的表达及其对细胞增殖?侵袭?迁移的影响

  目的  探讨ALC1（amplified in liver cancer 1）在食管鳞癌组织中的表达及与临床病理特征及总生存率关系,检测过表达ALC1基因对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。  方法  采用免疫组织化学方法检测245例食管鳞癌组织及癌旁组织中ALC1蛋白的表达,并探讨其与食管鳞癌患者性别、年龄、分化程度、浸润深度、TNM分期、远处淋巴结转移关系及总生存率关系;采用MTT法、克隆形成实验、Transwell实验及细胞划痕实验等观察高表达ALC1基因在食管癌细胞中的增殖、侵袭及迁移作用。  结果  ALC1蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（41.6% vs. 21.2%,P < 0.05）;ALC1的高表达与肿瘤的浸润深度、TNM分期和淋巴结转移明显相关（P < 0.05）。ALC1高表达的食管鳞癌患者总生存率低。ALC1基因能够促进KYSE30食管癌细胞过度增殖、侵袭和迁移。  结论  ALC1表达升高可能与食管鳞癌的发生、发展相关,导致总生存率下降,高表达的ALC1基因增强KYSE30食管癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,检测ALC1可能为食管癌预后判断提供依据。      

干细胞因子HIWI在食管鳞癌中的表达及其与临床预后的关系

  目的  检测干细胞因子HIWI在食管鳞癌组织中的表达情况, 分析其表达与临床病理及预后的关系, 为食管癌的早期诊断和预后提供理论依据。  方法  采用免疫组织化学法检测HIWI在153例食管鳞癌组织中的表达情况, 并结合食管鳞癌患者10年随访资料, 分析其表达与临床病理及预后的关系。  结果  免疫组织化学结果显示, HIWI食管鳞癌细胞胞质和胞核中均有表达, 其在食管鳞癌细胞胞浆的表达水平与肿瘤的浸润深度(P=0.035, χ2=8.589)和组织学分级(P=0.011, χ2=9.075)呈正相关。Kaplan-Meier生存分析显示, 肿瘤细胞胞质高表达HIWI的患者的总生存情况明显差于胞浆低表达HIWI的患者(P < 0.001, χ2=17.05)。  结论  干细胞因子HIWI在食管鳞癌细胞中有不同程度的表达, 且其在胞质中的表达水平是影响食管鳞癌预后的独立因素。       

AJUBA调控MST1 YAP1和TAZ因子促进食管鳞状细胞癌细胞体外增殖 迁移和侵袭

  目的  探讨AJUBA在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）细胞中表达以及是否通过调控MST1、YAP1和TAZ因子影响细胞增殖、侵袭和迁移。  方法  采用Western blot 法检测AJUBA 蛋白在食管癌细胞系KYSE30、KYSE150与KYSE450中的表达水平,构建shRNA 干扰载体AJUBA转染至KYSE150食管癌细胞系;通过体外克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验探究AJUBA对KYSE150细胞的增殖、周期、迁移和侵袭能力的影响。采用RT-PCR和Western blot检测MST1、YAP1和TAZ mRNA和蛋白的表达;核质分离实验检测AJUBA、YAP1和TAZ蛋白表达情况。  结果  稳定干扰AJUBA基因后,平板克隆实验结果显示,与阴性对照组相比,shAJUBA组的细胞克隆形成数量明显减少,差异具有统计学意义（P<0.001）;流式细胞周期实验结果显示,shAJUBA组中的细胞阻滞于G₀/G₁期,G₂/M期与S期细胞显著减少（P<0.05）;划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,与AJUBA空染组相比,shAJUBA组细胞迁移能力和侵袭能力均明显减弱（P<0.001）;RT-PCR与Western blot实验结果显示,shAJUBA组细胞中的MST1、YAP1、TAZmRNA与蛋白表达水平均显著降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。核质分离实验结果提示AJUBA蛋白在正常食管鳞状上皮细胞株（SHEE）细胞核中表达,而在KYSE150细胞胞质与胞核中表达;YAP1和TAZ蛋白在SHEE细胞中不表达,在KYSE150细胞质与细胞核中表达,上述结果差异均具有统计学意义（均P<0.05）。  结论  AJUBA促进食管癌细胞的增殖、侵袭与迁移,可能与激活MST1、YAP1、TAZ因子的表达而影响食管鳞状细胞癌进展有关。      

ROR-γ在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义分析

  目的  探讨视黄酸受体相关孤儿受体-γ（retinoic acid receptor-related orphan receptor-γ,ROR-γ）在三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）中的表达及临床意义。  方法  采用Oncomine网站数据库分析乳腺浸润性癌与癌旁组织中ROR-γ mRNA的表达差异,通过Kaplan-Meier Plotter网站评估ROR-γ mRNA在乳腺癌不同分子亚型中的表达预后意义。收集2011年1月至2014年12月收治于天津医科大学肿瘤医院的269例TNBC患者的组织标本和临床病理资料,采用免疫组织化学染色法（immunohistochemistry,IHC）检测TNBC组织中的ROR-γ蛋白表达,并探讨其与患者临床病理特征、预后的关系。  结果  Oncomine和Kaplan-Meier Plotter网站分析结果显示,乳腺浸润性癌组织中的ROR-γ mRNA表达显著高于癌旁组织（P<0.000 1）。相较于其他分子亚型,ROR-γ在TNBC中的预后意义更为显著,且与不良预后相关。IHC检测结果显示,ROR-γ蛋白在TNBC组织中的表达高于癌旁组织,ROR-γ在TNBC中的高表达率为18.2%（49/269）。ROR-γ高表达的患者具有较高的发病年龄（P=0.001）、已绝经状态（P＜0.001）、高肿瘤Ki-67指数（P=0.001）和淋巴结转移（P=0.003）。ROR-γ高表达是TNBC患者无病生存期（P=0.031）和总生存期（P=0.029）的独立影响因素。  结论  ROR-γ在TNBC组织中高表达,并与肿瘤的增殖活跃、淋巴结转移和患者不良预后相关,或可作为潜在的预后标志物,为TNBC的诊疗提供新的参考。      

NPRAP蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

  目的  探讨NPRAP在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与患者预后的关系。  方法  本文应用免疫组化检测70例NSCLC标本(其中35例具有配对的淋巴结转移标本)中NPRAP的表达及其与临床病理因素之间的关系。另选30例新鲜肺癌及癌旁正常肺组织用于NPRAP的mRNA和蛋白检测。  结果  与正常肺组织相比, NPRAP的mRNA和蛋白在肺癌组织中表达显著增高, 且NPRAP的高表达与肺癌的高分期及淋巴结转移密切相关(P < 0.05)。  结论  NPRAP的阳性表达与非小细胞肺癌患者的不良预后显著相关, NPRAP在肿瘤的发生发展过程中可能具有重要作用。      

EphB4及其配体EphrinB2在食管鳞癌中表达及其与血管生成的关系

  目的  探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在食管鳞癌组织中的表达及其与血管生成的关系。  方法  应用免疫组织化学Envision plus法检测60例食管鳞癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达和VEGF的表达, 采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测60例食管鳞癌和10例癌旁食管组织中EphB4、EphrinB2和VEGF mRNA的相对含量, 并分析EphB4、EphrinB2和VEGF的表达的相关性。  结果  食管鳞癌组织中EphB4、EphrinB2、VEGF mRNA和蛋白的表达均高于癌旁正常食管黏膜, 差异有统计学意义（P < 0.05）。EphB4 mRNA和EphrinB2 mRNA表达正相关（r=0.541, P < 0.05）, EphB4 mRNA、EphrinB2 mRNA均和VEGF mRNA表达正相关（r=0.642, r=0.582;P均 < 0.05）。  结论  EphB4和EphrinB2在食管鳞癌中高表达, 与血管生成密切相关。