Rab11-FIP4通过IGF1R调控结直肠癌细胞迁移和侵袭

目的:探讨Rab11家族相互作用蛋白4(Rab11-FIP4)在结直肠癌发生发展中的作用、临床意义及相关机制。方法:通过免疫组化、Western blot及RT-qPCR比较结直肠癌组织与相应的癌旁组织中、正常环境及缺氧条件下直肠癌细胞中Rab11-FIP4的表达水平;应用免疫组化染色评分将临床病例分为Rab11-FIP4高表达组(n=61)和Rab11-FIP4低表达组(n=39),通过Kaplan-Meier生存分析比较两组的总生存时间与复发时间;构建Rab11-FIP4过表达慢病毒,感染结直肠癌细胞株HCT116和LoVo,采用CCK-8法、集落形成实验和Transwell实验检测Rab11-FIP4过表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响。免疫共沉淀实验检测Rab11-FIP4与胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)的相关性;人类磷酸激酶抗体阵列测定探讨Rab11-FIP4高表达的结直肠癌细胞中受IGF1R影响的信号通路;组织微阵列及双萤光素酶报告基因分析Rab11-FIP4与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的关系。结果:Rab11-FIP4在结直肠癌组织中高表达(P<0. 0...     

IncRNA RAB11B-AS1对结直肠癌SW480细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响

目的 探讨IncRNA RAB11B-AS1对结直肠癌SW480细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及可能机制.方法 qRT-PCR方法检测34例结直肠癌组织及相应的癌旁组织、人正常结肠黏膜上皮细胞NCM460与人结直肠癌细胞株SW480中IncRNA RAB11B-AS1的表达水平.构建稳定过表达RAB11B-AS1的S...     

lncRNA RAB11B-AS1对结直肠癌SW480细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响

目的探讨lncRNA RAB11B-AS1对结直肠癌SW480细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及可能机制。方法 qRT-PCR方法检测34例结直肠癌组织及相应的癌旁组织、人正常结肠黏膜上皮细胞NCM460与人结直肠癌细胞株SW480中lncRNA RAB11B-AS1的表达水平。构建稳定过表达RAB11B-AS1的SW480细胞系,MTT方法检测SW480细胞的增殖能力变化;流式细胞术检测SW480细胞凋亡率;Transwell检测SW480细胞侵袭能力变化,划痕实验检测SW480细胞迁移能力变化;Western blot检测SW480细胞中细胞周期蛋白1(cyclin D1)和CDK6的表达水平。结果 RAB11B-AS1在结直肠癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P0.01);在SW480中的表达显著低于NCM460细胞(P0.01)。RAB11B-AS1过表达后,SW480细胞的增殖、侵袭与迁移能力显著降低,凋亡率显著升高,cyclin D1与CDK6的蛋白表达降低(P0.01)。结论 lncRNA RAB11B-AS1在结直肠癌组织中表达降低,过表达RAB11B-AS1能够抑制SW480细胞的增殖、迁移与侵袭,并促进凋亡。     

PXMP4促进结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨过氧化物酶体膜蛋白4(peroxisomal membrane protein 4,PXMP4)对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 采用生物信息学分析65例配对结直肠癌组织中PXMP4 mRNA的表达.应用免疫组化检测112例配对结直肠癌组织中PXMP4的表达,并进行临床病理相关分析;利用RT-P...     

基因沉默PRDX1 表达对人结直肠癌SW480 细胞侵袭迁移的影响

目的:探讨RNA 干扰过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDX1)表达对人结直肠癌SW480 细胞侵袭转移能力的影响。方法:筛选RNA 干扰PRDX1 的慢病毒质粒,与阴性对照慢病毒质粒分组转染结直肠癌SW480 细胞,转染后的SW480 细胞可分为PRDX1 基因沉默组(si-PRDX1)和阴性对照组(Vector)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测两组细胞中PRDX1 mRNA 和蛋白表达;采用Transwell 侵袭和迁移实验检测基因沉默PRDX1 表达对结直肠癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot 检测两组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)家族部分蛋白表达水平。结果:基因沉默PRDX1 表达可有效抑制结直肠癌SW480 细胞中PRDX1 mRNA 和蛋白水平的表达,与阴性对照组相比(Vector),差异均具有统计学意义(P<0.01),说明基因沉默PRDX1 的SW480 细胞系构建成功;Transwell 侵袭和迁移实验显示si-PRDX1组细胞的侵袭及迁移能力较对照组均明显降低(P<0.01);Western blot 结果显示,与Vector 组相比,si-PRDX1 组细胞中组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达明显增加,而MMP-2 及MMP-9 的表达显著下降,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:基因沉默人结直肠癌SW480 细胞的PRDX1 表达可有效抑制细胞的侵袭、迁移及转移能力,其机制可能会通过调控TIMP-2、MMP-2 及MMP-9 的表达介导。     

miR-486-3p通过直接靶向BIK调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的:探讨miR-486-3p对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调节作用.方法:采用q-PCR法测定结直肠癌细胞株SW620和正常结肠细胞系NCM-460中miR-486-3p和BIK表达,荧光素酶报告试验测定miR-486-3p的直接作用靶点,将结直肠癌细胞株SW620分为NC组、miR-486-3p模拟物组、m...     

miR-4792通过结合BACE1调节胰腺癌增殖、迁移和侵袭

目的 探究miR-4792对胰腺癌增殖、 迁移和侵袭的影响.方法 下载GSE59856和GSE71533数据集,取上调表达的交集基因miR-4792,构建稳定过表达miR-4792的胰腺癌细胞系PANC-1、SW1990,采用CCK-8实验和Transwell小室实验检测细胞增殖、 迁移和侵袭能力,通过裸鼠皮下种植瘤模...     

circUBE2D2 靶向 miR-376a-3p 调控结直肠癌 SW620 细胞的增殖、迁移及侵袭

目的 探讨 circUBE2D2 对结直肠癌 SW620 细胞增殖、 迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。 方法 收集 2020 年 1 月至 2020 年 5 月大连大学附属新华医院肛肠外科收治的 45 例结直肠癌患者的癌组织及 其相应癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测 circUBE2D2、 miR-376a-3p 的表达量; 以人结直肠癌细胞 SW620 为研究对象, 随机分为 si-NC 组、 si-circUBE2D2 组、 miR-NC 组、 miR-376a-3p 组、 si-circUBE2D2 + anti-miR-NC 组和 si-circUBE2D2 + anti-miR-376a-3p 组; CCK-8 法、 平板克隆形成实验、 划痕实验与 Transwell 实验分别检测细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测 miR-376a-3p 过表达对野 生型载体 WT-circUBE2D2 的荧光素酶活性; Western 印迹法检测上皮型钙黏蛋白 (E-cadherin)、 神经型钙 黏蛋白 (N-cadherin) 蛋白表达量。 结果 与癌旁组织比较, 结直肠癌组织中 circUBE2D2 的表达量升高 (P< 0. 05), miR-376a-3p 的表达量降低 (P< 0. 05); 与 si-NC 组比较, si-circUBE2D2 组细胞活力、 划痕愈 合率和 N-cadherin 蛋白水平降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋 白水平升高 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-376a-3p 组细胞活力、 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平 降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05); miR-376a-3p 过表达可抑制野生型载体 WT-circUBE2D2 的荧光素酶活性 (P< 0. 05); 与 si-circUBE2D2 + anti-miR-NC 组比较, si-circUBE2D2 + anti-miR-376a-3p 组细胞活力、 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋白水平降低 (P< 0. 05)。 结论 干扰 circUBE2D2 表达可通过靶向调控 miR-376a-3p 表达而降低结直肠癌细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭 能力。     

lncRNA PSMA3-AS1 靶向 miR-3619-5p 调控宫颈癌 SiHa 细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

目的 探讨 lncRNA PSMA3-AS1 调控宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭的分子机制。 方法 收集 2020 年 3 月至 2021 年 6 月西安医学院第二附属医院收治的 42 例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测宫颈癌组织、 癌旁组织、 人宫颈上皮永生化细胞 H8、 与人宫颈癌细胞系 SiHa、 HeLa、 Caski 中 lncRNA PSMA3-AS1、 miR-3619-5p 的表达量; 以 SiHa 细胞为研究对象, 分组为: si-NC 组、 si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 miR-NC 组、 miR-3619-5p 组、 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组; MTT 法与 Transwells 实验分别检测每组 SiHa 细胞的增殖活力、 迁移及侵袭能力; 双 荧光素酶报告实验检测 miR-3619-5p 过表达对野生型载体 lncRNA PSMA3-AS1-WT、 突变型载体 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 荧光素酶活性的影响; Western 印迹检测 MMP2、 MMP9 蛋白表达量。 结果 宫颈癌组织中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量比癌旁组织增加 ( P < 0. 01), miR-3619-5p 的表达量比癌旁组织减少 ( P < 0. 01); 与 H8 细胞比较, SiHa、 HeLa、 Caski 细胞中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量升高 (P< 0. 01), miR-3619-5p 的表达量降低 (P< 0. 01); 与 si-NC 组比较, si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋 白水平降低 (P< 0. 05), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-3619-5p 组细胞活力 和 MMP2、 MMP9 蛋白水平降低 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); miR-3619-5p 过表达可抑 制 lncRNA PSMA3-AS1-WT 的荧光素酶活性 (P< 0. 01), 而未能影响 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 的荧光素酶活 性; 与 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组比较, anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋白水平升高 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数增多 (P< 0. 01)。 结论 干扰 lncRNA PSMA3- AS1 表达可通过促进 miR-3619-5p 而降低宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭能力。     

白蛋白结合型紫杉醇调控SLC25A25-AS1对肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨白蛋白结合型紫杉醇是否调控SLC25A25-AS1影响肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭.方法 将A549细胞分为对照组、低剂量药物组、中剂量药物组、高剂量药物组、高剂量药物+si-NC组、高剂量药物+si-SLC25A25-AS1组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法、集落形成实验检测细胞增殖;划痕实验和Tran...     

LncRNA DSCAM-AS1通过靶向miR-627-3p调控皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和迁移

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)唐氏综合征细胞粘附分子反义1(DSCAM-AS1)靶向miR-627-3p对人皮肤鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响和分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DSCAM-AS1和miR-627-3p在人永生化表皮细胞HaCaT和3种皮肤鳞状细胞癌细胞(SCC13...     

LncRNA-WTAPP1敲除抑制结肠癌细胞生长和运动能力以及裸鼠移植瘤的增生

目的 旨在研究LncRNA-WTAPP1敲除对结肠癌细胞生长和运动能力以及裸鼠移植瘤的增生的影响.方法 选择结肠癌SW480细胞进行研究.将shRNA1-WTAPP1,shRNA2-WTAPP1和shRNA3-WTAPP1用Lipofectamine 2000转染到SW480细胞.选择转染,shRNA2-WTAPP1的...     

SOX12 Promotes Thyroid Cancer Cell Proliferation and Invasion by Regulating the Expression of POU2F1 and POU3F1

PurposeSOX12 is overexpressed in many cancers, and we aimed to explore the biological function and mechanism of SOX12 in thyroid cancer.Materials and MethodsWe first analyzed the expression of SOX12 in thyroid cancer using data in The Cancer Genome Atlas. Immunohistochemistry and qRT-PCR were performed to identify SOX12 expression in thyroid cancer tissue and cells. Thyroid cancer cells were transfected with small interfering RNA targeting SOX12, and cellular functional experiments, including CCK8, wound healing, and Transwell assays, were performed. Protein expression was examined by Western blot analysis. A xenograft model was developed to evaluate the effect of SOX12 on tumor growth in vivo.ResultsSOX12 expression was increased in thyroid cancer tissue and cells. SOX12 promoted cell proliferation, migration, and invasion and accelerated tumor growth in vivo. The expression of PCNA, Cyclin D1, E-cadherin, Snail, MMP-2, and MMP-9 was affected by SOX12 knockdown. Bioinformatic analysis showed that SOX12 could interact with the POU family. SOX12 knockdown inhibited the expression of POU2F1, POU2F2, POU3F1 and POU3F2, and SOX12 expression showed a positive correlation with POU2F1, POU3F1, and POU3F2 expression in clinical data. POU2F1 and POU3F1 were able to reverse the effect of SOX12 knockdown on thyroid cancer cells.ConclusionSOX12 affects the progression of thyroid cancer by regulating epithelial-mesenchymal transition and interacting with POU2F1 and POU3F1, which may be novel targets for thyroid cancer molecular therapy.     

Glucose-Regulated Protein 94 Mediates the Proliferation and Metastasis through the Regulation of ETV1 and MAPK Pathway in Colorectal Cancer

Colorectal cancer (CRC) is a worldwide health problem. Glucose-regulated protein 94 (GRP94) is known as an important endoplasmic reticulum-stress response protein that shows correlation with aggressive cancer behavior. However, the role of GRP94 in CRC is still unclear. Our results showed that silencing GRP94 (GRP94-KD) reduced cell proliferation, invasion and migration of CRC cells and suppressed tumorigenesis in the xenograft mouse model. Rescue assay showed that ETV1 overexpression reversed the effect of GRP94 on cell proliferation and migration. In the molecular mechanism, we found that knockdown of GRP94 inhibited the level of MAPK pathway, including ERK/p-ERK, JNK/p-JNK, and p38/p-p38 signals. Cyclooxygenase-2 and epithelial-mesenchymal transformation biomarkers, such as N-cadherin, vimentin, and β-catenin were suppressed in GRP94 knockdown cells. Treatment of specific inhibitors of MAPK pathway showed that ERK/p-ERK, and p38/p-p38 inhibitors significantly influenced ETV1 expression as compared to JNK/p-JNK inhibitor. Our results indicated that silencing GRP94 repressed the ability of EMT process, cancer cell proliferation, metastasis, and CRC tumorigenesis. Therefore, GRP94 may play an important role in CRC by regulating ETV1 and MAPK pathway.     

靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移

目的构建靶向daintain/AIF-1的siRNA表达载体pRNAT-H1.1-daintain/AIF-1(pRNAT-DT),研究靶向daintain/AIF-1的siRNA对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和迁移的影响。方法设计合成靶向dain-tain/AIF-1的siRNA模板双链,将其克隆入siRNA空载体pRNAT-H1.1,用脂质体法导入乳腺癌细胞MDA-MB-231中;RT-PCR和Western印迹方法检测daintain/AIF-1以及cyclinD1的表达;MTT方法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Trans-well细胞板检测细胞迁移。结果针对序列1和序列2的siRNA表达载体pRNAT-DT均能有效抑制daintain/AIF-1的表达。靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制细胞增殖和cyclinD1表达,阻滞细胞周期由S期向G2/M期转变。同时,daintain/AIF-1表达的下调抑制了细胞的迁移。结论靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移。     

Genetic and Pathologic Changes associated with Lymphovascular Invasion of Colorectal Adenocarcinoma

Lymphovascular invasion (LVI) is a biological manifestation of aggressive behavior in colorectal cancer. This study sought to identify and examine the association between genetic and pathologic alterations implicated in this invasive tumor progression. We consecutively recruited 81 and 79 colorectal cancer patients with and without LVI, respectively. Biological changes were evaluated by clinicopathological parameters together with CEA and E-cadherin expressions using immune staining. Allelic loss or MSI was examined using 10 microsatellite markers on chromosomes 10, 16, 18, and TGFβRII, possibly associated with colorectal cancer. The germline mutation of BMPR1A and SMAD4 was also sought. Tumor stage and lymph node metastasis were significantly greater in patients with LVI tumor than without it (P < 0.001). Decreased CEA expression was closely correlated with allelic loss or MSI at D16S421, D18S46, and D18S474 (P = 0.004–0.047). Allelic loss at D10S14 was specific to LVI tumors (P = 0.007). Using multivariate analysis, allelic loss at D18S46 significantly correlated with histological differentiation (P = 0.02). In addition, allelic loss and MSI at D18S474, histological differentiation, and expression of CEA and E-cadherin were closely associated with the progression of LVI (P = 0.005–0.049). However, no germline mutation in BMPR1A or SMAD4 was detected in all patients regardless of LVI status. In summary, in a subset of colorectal cancers, histological differentiation and expression of CEA or E-cadherin appear to determine aggressive behavior such as LVI. These changes are closely associated with chromosomal alterations at 10q22–23, 16q22 and 18q21, which carry several tumor suppressor genes.