唾液外泌体在头颈恶性肿瘤中的研究进展

唾液外泌体是细胞通过主动分泌作用产生并排出胞外的圆形杯状囊泡,其内含有大量信息分子,参与和调节多种信号通路,在细胞间的信息交流以及物质传递方面发挥着极其重要的作用。唾液外泌体不仅可作为疾病诊断的标记物,还可能作为药物载体应用于疾病的治疗。本文主要就现阶段唾液外泌体的研究进展及其在头颈恶性肿瘤中的作用进行综述。     

外泌体在变态反应性疾病中的研究进展

外泌体是晚期内体起源的一种具有脂质双层膜结构的封闭囊泡,可以携带和分泌细胞内的蛋白质、核酸等并转运至受体细胞,是信号转导和细胞间通讯的重要载体,在多种生理和病理过程中发挥重要作用。近年来的研究发现,外泌体可以调节免疫应答、传递炎症信号、释放细胞因子,在变态反应性疾病中起关键作用。由于外泌体存在于多种体液中,有望在疾病早期筛查、疗效评估及预后分析中提供帮助。因此,本文就外泌体在变态反应性疾病中的研究进展进行综述,希望为疾病的诊治和预防提供新的思路和有效靶点。     

外泌体调控鼻息肉发病机制的研究进展

鼻息肉作为耳鼻咽喉科的常见疾病,人群发病率约为1%～4%。鼻息肉的组织学特征表现为血管内皮间隙增大,导致大量血浆蛋白漏出,组织呈现高度水肿的状态。外泌体作为一种纳米级囊泡,能运载多种蛋白质、mRNA、miRNA等物质,通过影响鼻腔菌群多样性,调节血管生成及通透性,分泌多种特定蛋白质等方式调控鼻息肉的发生发展。本文综述外...     

外泌体在变应性鼻炎发病机制中的研究进展

变应性鼻炎是一种常见的慢性气道炎症性疾病。外泌体是由膜包绕的纳米级囊泡,其可通过旁分泌等途径在细胞间传递信息并调节受体细胞功能,还可参与变应性鼻炎的炎症反应,诱导炎症细胞的迁移。本文拟从外泌体的结构和功能入手,阐述其在变应性鼻炎发病机制中的作用,期待为探寻变应性鼻炎的诊断及治疗提供支持。     

外泌体在甲状腺癌的研究进展

外泌体是一种直径50~140 nm的细胞外囊泡,包含DNA、RNA、蛋白质等多种内容物,几乎来源于所有类型的细胞。外泌体存在于血液、乳汁、尿液,通过传递生物活性分子在细胞间通讯中起着关键作用。论文综述外泌体的概况、功能及应用,总结外泌体miRNAs和circRNAs对甲状腺癌的影响及作为一种新型生物标志物的潜能。     

外泌体调控鼻息肉发病机制的研究进展[综述]

鼻息肉作为耳鼻咽喉科的常见疾病,人群发病率约为1%～4%。鼻息肉的组织学特征表现为血管内皮间隙增大,导致大量血浆蛋白漏出,组织呈现高度水肿的状态。外泌体作为一种纳米级囊泡,能运载多种蛋白质、mRNA、miRNA等物质,通过影响鼻腔菌群多样性,调节血管生成及通透性,分泌多种特定蛋白质等方式调控鼻息肉的发生发展。本文综述外泌体调控鼻息肉的发病机制,旨在为鼻息肉的临床诊治提供新思路。     

外泌体环状RNA与肿瘤发生、发展及转移研究进展

外泌体是细胞分泌的一种具有双层膜结构的微小囊泡,含有丰富的蛋白质、脂质和核酸等多种生物活性物质,可作为信号因子参与包括增殖、侵袭、转移等多种肿瘤细胞过程。环状RNA（circRNA）是一类具有共价闭环结构的新型非编码RNA,稳定性高、表达丰富、功能多样,近年来引起学界广泛关注,成为生物医学领域研究的热点。研究发现circRNA在外泌体中富集并且发挥着特定的功能,本文对外泌体circRNA在肿瘤领域的研究进展做一综述。     

微小RNA-5688在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

目的　分析miRNA-5688在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用实时定量PCR方法检测鼻咽癌患者组织及癌旁组织中miRNA-5688的表达水平,分析其与病理特征及预后的关系。结果　鼻咽癌患者癌组织中miRNA-5688表达（2.34±0.61）明显低于癌旁组织（7.53±1.18）（P <0.05）。不同性别、年龄的鼻咽癌患者癌组织中miRNA-5688表达比较差异均无统计学意义（P 均＞0.05）,但不同分化程度、T分级、N分级、TNM分期及是否发生淋巴结转移的患者癌组织中miRNA-5688表达差异均有统计学意义（P 均<0.05）。生存曲线结果显示,miRNA-5688低表达组的平均生存时间明显短于miRNA-5688高表达组（P <0.05）,平均生存时间分别为28.5个月和36.3个月。结论　miRNA-5688与鼻咽癌的发生、发展及预后有密切关系,是鼻咽癌潜在的治疗靶点及生物标志物。     

细胞外囊泡在头颈部肿瘤中的研究进展

肿瘤的增殖和转移能力是由肿瘤微环境(TME)中细胞间的“相互对话”介导的。细胞外囊泡(EVs)是细胞主动分泌、可以介导细胞间通信的一种囊泡状小体,几乎来自所有类型的细胞,是癌细胞及其微环境之间的关键信号介质,在实现TME细胞间物质转运和信息传递方面发挥着重要作用。肿瘤细胞来源的EVs可以通过激活多种信号通路改变靶细胞生理状态,影响肿瘤微环境等方式参与肿瘤细胞的增殖与迁移。EVs在头颈部肿瘤(HNCs)中的分子机制和临床应用尚处于早期阶段,有待进一步研究。以头颈肿瘤的TME为研究重心,阐明EVs复杂的信号网络参与介导肿瘤增殖、侵袭转移、血管生成和肿瘤耐药的相关机制。     

负向调控鼻咽癌微小RNA-9表达促进紫外线介导的活性氧损伤

目的 探讨负向调控鼻咽癌细胞微小RNA-9(micro RNA-9,miR-9)表达对紫外线介导的活性氧损伤的调节作用.方法 应用脂质体Lipofectamine 2000转染抑制鼻咽癌细胞miR-9表达,转染抑制对照剂作为参照.应用紫外线照射45 min后,二氯二氢荧光素双醋酸盐检测两组细胞紫外线诱导的活性氧变化;Annexin V-FITC法检测细胞凋亡和碱性彗星实验检测细胞DNA损伤差异;并观察谷胱甘肽在调节紫外线活性氧损伤中的作用.结果 抑制CNE-2细胞miR-9表达后,miR-9抑制组和抑制对照组细胞在紫外线照射的活性氧水平平均(-x±s,下同)分别为26 895 ±218和15 765±927,两者差异有统计学意义(t=39.754,P＜0.001);紫外线照射后miR-9抑制组DNA损伤和凋亡率分别为28.0％±10.0％和8.0％±0.9％,显著大于抑制对照组的23.6％±9.2％和4.5％±0.8％;并且miR-9抑制组细胞中谷胱甘肽的表达低于抑制剂对照组,含量分别为(1.87±0.15) μmol/L和(9.85 ±0.15) μmol/L(t=-48.832,P＜0.001).负向调控CNE-1细胞表达抑制了谷胱甘肽的表达和增加了紫外线介导的活性氧水平.结论 鼻咽癌细胞中,负向调控miR-9能够促进肿瘤细胞对紫外线介导的活性氧损伤.     

血清microRNA-329水平与鼻咽癌发生发展的相关性分析

目的　探究血清microRNA-329水平与鼻咽癌发生发展的相关性进行研究。方法　对2009~2011年200例鼻咽癌患者的血清进行采集,并收集患者的相关临床资料,作为研究组;200例正常人的血清,作为正常对照组。采用microRNA芯片技术对两组的血清microRNA水平进行检测。通过单因素分析及多因素logistic非条件性分析的方式对microRNA-329与患者的各项临床指标进行检验。本研究同时对组织中的microRNA-329的表达进行检测,与血清microRNA-329水平进行对比。结果　相比于正常体检人群,鼻咽癌患者的血清microRNA-329水平相对表达率为（18.01±2.25）%,表达水平明显低于健康对照者,呈现明显的低表达。鼻咽癌患者血清microRNA-329水平与肿瘤分化程度、是否发生转移、肿瘤分期及5年内复发与否具有明显的相关性,且结果具有统计学差异,低血清microRNA-329水平、是否发生转移、5年内复发均为鼻咽癌患者较差预后水平的独立危险因素,OR值大于1。在鼻咽癌患者的鼻咽癌组织中microRNA-329水平显著低于癌旁组织 中的microRNA-329水平,且结果具有统计学差异。结论  血清microRNA-329的低表达水平与鼻咽癌患者不良预后密切相关血清microRNA-329可以作为一种预测鼻咽癌患者预后效果的标记物。     

喉鳞癌铁死亡的验证及M2巨噬细胞源性外泌体的调控研究

目的:验证喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）铁死亡的变化以及探讨M2巨噬细胞来源的外泌体对喉癌铁死亡的调控作用。方法:收集哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉头颈外科2018年9月至2021年4月诊治的32例喉鳞癌和邻近非癌组织标本,其中男性26例,女性6例,年龄43~79岁。通过免疫组化和反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测组...     

叶酸受体1在鼻咽癌细胞抵抗紫杉醇化疗药物中的作用

目的 研究叶酸受体1(folate receptor 1,FOLR1)在鼻咽癌细胞和永生化正常鼻咽细胞(NP69)中表达的差异,及FOLR1的表达与鼻咽癌紫杉醇耐药的相关性,为FOLR1介导的肿瘤靶向治疗及耐药逆转提供实验依据.方法 利用基因芯片技术,反转录聚合酶链反应(RT-PCR),Western blot和免疫细胞化学技术检测FOLR1在永生化正常鼻咽细胞(NP69),鼻咽癌细胞系(CNE-1)及紫杉醇耐药细胞系(CNE-1/Taxol)中表达的差异;利用小干扰RNA(siRNA)技术抑制CNE-1/Taxol中FOLR1的表达后,观察其耐药能否逆转.结果 基因芯片结果 显示CNE-1/Taxol中FOLR1的表达为2636.0,CNE-1的表达为176.0;RT-PCR和Western blot结果 显示FOLR1在NP69中无表达,而在CNE-1及CNE-1/Taxol中呈阳性表达,并且与耐药指数呈正相关(r2=0.8719);免疫细胞化学结果 也证实了FOLR1在鼻咽癌CNE-1/Taxol中高表达;利用siRNA技术抑制CNE-1/Taxol中FOLR1的表达后,耐药细胞对紫杉醇的敏感性显著增加,其IC50值降低了59.6%(t=6.92,P<0.001).结论 实验结果 提示FOLR1的表达与鼻咽癌发生及紫杉醇耐药密切相关.FOLR1基因将可能成为鼻咽癌治疗及紫杉醇耐约逆转的靶分子之一.     

Aurora-A促进鼻咽癌化疗抵抗的机制研究

目的　探讨丝/苏氨酸蛋白激酶Aurora-A促进鼻咽癌化疗抵抗的机制。方法　应用Western blot和Q-PCR检测鼻咽癌组织及癌旁正常组织中Aurora-A的表达水平。选取Aurora-A高表达的鼻咽癌细胞系CNE2，添加Aurora-A激酶抑制剂60 nm VX 680处理8小时后，加入浓度为10 μg/ml的顺铂处理24小时，收集细胞通过流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时WB和Q-PCR检测细胞凋亡相关信号通路蛋白的表达情况。结果　Aurora-A在鼻咽癌组织中表达水平明显高于癌旁正常组织，相对于正常鼻咽细胞NP69，Aurora-A在不同鼻咽癌细胞中表达显著升高且在CNE2中表达最高；相对于未处理CNE2，添加顺铂或/和Aurora-A抑制剂VX680处理的CNE2细胞能显著促进鼻咽癌细胞凋亡及p-AKT、p21及Cleaved-Caspase-3的表达。结论　Aurora-A通过p-AKT/p21/Cleaved-Caspase-3通路促进鼻咽癌的化疗抵抗。     

前庭神经鞘膜瘤外泌体对小鼠耳蜗基底膜的影响研究

目的 研究前庭神经鞘膜瘤（vestibular schwannoma, VS）外泌体对小鼠耳蜗基底膜的影响,探讨其在VS患者听力下降中的潜在作用。方法 收集2020年9月至2021年6月于上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科手术治疗的6例Ⅱ、Ⅲ期中小型VS患者的肿瘤组织及临床资料,根据AAO-HNS听力分级分为听力好组（Good Hearing, GH）和听力差组（Poor Hearing, PH）;采用超速离心法提取VS原代细胞上清中的外泌体,通过Western-blot、透射电镜、纳米流式鉴定外泌体;免疫荧光染色技术探究VS外泌体对小鼠耳蜗基底膜毛细胞形态及数量的影响。结果 在一定浓度下,PH组外泌体造成小鼠基底膜毛细胞数量减少,细胞形态异常,细胞排列紊乱;而GH组外泌体对毛细胞的形态及数量几乎无影响;当外泌体浓度下降,PH组外泌体仅造成毛细胞出现极少数量的丢失。结论 VS外泌体具有不同程度的耳毒性,对小鼠耳蜗毛细胞的损伤具有浓度依赖性。     

喉癌细胞来源外泌体通过微小核糖核酸-21-5p促进巨噬细胞M2极化的作用及机制研究#br#

目的　研究喉癌患者术前及术后血清来源外泌体及其微小核糖核酸-21-5p（miR-21-5p）的变化,探讨喉癌细胞通过miR-21-5p促进巨噬细胞M2极化的机制。方法　收集正常人群血清以及喉癌患者术前和术后1个月及6个月血清样本,分离外泌体,纳米流式细胞仪揭示粒子粒径和数量,BCA和Western blot分析外泌体的含量和标记分子表达。建立人喉癌细胞系AMC-HN-8和巨噬细胞共培养体系以及外泌体处理巨噬细胞体系,流式分析巨噬细胞极化情况,qRT-PCR检测外泌体和细胞中miR-21-5p水平。结果  喉癌术前和术后1个月及术后6个月血清来源外泌体CD9、CD63和CD81阳性表达,术前喉癌血清来源外泌体数量和蛋白浓度均高于对照组,而患者术后血清来源外泌体数量和蛋白浓度均比术前低。细胞水平发现AMC-HN-8与巨噬细胞共培养或者其来源外泌体处理巨噬细胞均降低了M1型巨噬细胞比例,提升M2型细胞比例。分子水平检测发现术前喉癌血清来源外泌体中miR-21-5p水平升高,术后则明显下降,AMC-HN-8与巨噬细胞共培养或其来源外泌体处理巨噬细胞均能升高巨噬细胞中miR-21-5p水平。抑制AMC-HN-8中miR-21-5p水平,其分泌的外泌体中miR-21-5p也受到抑制,处理巨噬细胞后,巨噬细胞中miR-21-5p水平和M2型细胞比例下降,而M1型细胞比例有所恢复。结论  喉癌患者血清外泌体含量以及miR-21-5p水平较高,喉癌细胞可通过外泌体传递miR-21-5p作用于巨噬细胞,促进巨噬细胞M2极化。     

EB病毒在鼻咽癌发生中的作用

目的 :探讨鼻咽癌 (NPC)组织及患者外周血白细胞和血清中EB病毒DNA的分布及其与NPC的关系。方法 :采用多聚酶链反应 (PCR)检测 39例NPC组织 (NPC组 1)中EB病毒DNA ,2 4例NPC患者 (NPC组 2 )外周血白细胞及血清中EB病毒DNA ,2 0例慢性鼻咽炎组织 (对照组 1)中EB病毒DNA ,10例头颈部其他部位肿瘤患者 (对照组 2 )和 10例慢性鼻咽炎患者 (对照组 3)外周血白细胞及血清中EB病毒DNA ;同时采用免疫酶法检测NPC组 2、对照组 2和对照组 3血清中EB病毒VCA IgA抗体效价。 结果 :NPC组 1EB病毒DNA阳性率为 71.8% (2 8/ 39) ,对照组 1阳性率为 15 .0 % (3/ 2 0 ) ,其差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NPC组 2外周血白细胞中EB病毒DNA阳性率为 4 1.6 7% (10 / 2 4 ) ,对照组 2阳性率为 10 .0 0 % (1/ 10 ) ,对照组 3外周血白细胞中EB病毒DNA为阴性 ,NPC组 2分别与对照组 2和对照组 3比较 ,差异均有统计学意义 (均P <0 .0 5 ) ;NPC组 2、对照组 2和对照组 3血清中EB病毒DNA均为阴性 ;NPC组 2血清中EB病毒VCA IgA抗体效价分别与对照组 2和对照组 3比较 ;差异均有统计学意义 (均P <0 .0 1)。结论 :NPC组织中检测出EB病毒DNA的阳性率较高 ,外周血白细胞中阳性率较低 ,血清中未能检测出EB病毒DNA ,说明EB病毒从癌组织—→外     

miR-30c对鼻咽癌CNE-1细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 观察miR-30c对鼻咽癌CNE-1细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法 过表达miR-30c质粒载体转染CNE-1细胞,同时设立空质粒载体转染阴性对照组和无处理的空白对照组。荧光定量PCR检测miR-30c表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果 鼻咽癌组织中miR-30c的表达量为0.23±0.05,显著低于癌旁非肿瘤鼻咽组织的0.37±0.08（P <0.01）。过表达miR-30c组表达量（0.46±0.12）显著高于空白对照组（0.17±0.03）和阴性对照组（0.18±0.04）（P 均<0.01）。在24、48、72小时过表达miR-30c组OD值显著低于空白对照组和阴性对照组（P 均<0.01）。过表达miR-30c组G1期细胞比例（90.36±10.23）% 显著高于空白对照组（74.46±9.14）%和阴性对照组（75.25±9.23）%（P <0.01）。过表达miR-30c组凋亡细胞比例（31.06±5.12）%显著高于空白对照组（3.18±0.72）%和阴性对照组（3.56±0.78）%（P <0.01）。结论 过表达miR-30可以现在抑制鼻咽癌细胞增殖、细胞周期以及诱导细胞凋亡。     

颅外-颅内血管搭桥术在鼻咽癌放疗后颈内动脉爆裂治疗中的应用

目的:总结分析颅外-颅内血管搭桥术治疗鼻咽癌患者放疗后颈内动脉爆裂大出血的效果.方法:回顾性分析9例鼻咽癌放疗后出现颈内动脉爆裂并接受颅外-颅内血管搭桥手术患者的临床资料.分析颅外-颅内血管搭桥术围手术期卒中和死亡率、生存时间、总体生存率及再出血率.结果:9例鼻咽癌放疗后患者平均年龄53.5岁,病理类型均为非角化性鳞状...