鬼臼毒素对人K562白血病细胞的作用研究

采用MTT法和流氏细胞仪技术,研究了天然药物鬼臼毒素（podophyllotoxin）对人慢性髓细胞性白血病K562细胞凋亡及细胞周期的影响。结果表明,鬼臼毒素对K562细胞的IC50是79.19unol。L^-1;C以IC50药物浓药作用人K562细胞24h,细胞凋亡率达到31.96%,G0-G1期峰前有亚二倍林峰出现,此结果说明鬼臼毒素能快速有效地诱导K562细胞发生凋亡。     

天花粉蛋白对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的 通过建立荷U14小鼠宫颈癌模型,从个体水平初步探索天花粉蛋白(TCS)对荷瘤小鼠体内抗肿瘤活性.方法 建立荷U14小鼠宫颈癌模型,TCS治疗,检测抑瘤率、脾指数、流式细胞术分析T细胞亚群.结果 TCS治疗组,脾指数明显高于阴性对照组,C JD+;8较阴性对照组、CTX组明显减少(P<0.05);与正常组比较无显著性差异.TCS组的C JD+;4/C JD+;8较阴性对照组、正常组明显增大(P<0.05);与CTX组比较无显著性差异.结论 在体内,当TCS的剂量为0.2 mg/kg时,具有一定的免疫调节和增强体液免疫功能作用.     

复方菝葜抑瘤作用的实验研究

目的：在S180荷瘤鼠上观察复方菝葜的抑癌机理。方法：将S180腹水瘤小鼠随机分为4小组，即正常对照组、模型对照组、治疗组和预防给药组，用复方菝葜灌胃给药，观察该方对S180荷瘤鼠体内外抑瘤作用、免疫功能、抗氧化方面的影响。结果：复方菝葜有较好的抑制体内外实验性肿瘤的作用。结论：复方菝葜可能是通过增强机体免疫力、提高SOD活力和清除自由基来抑制肿瘤生长并延长荷瘤鼠生存时间的。     

掌叶大黄多糖对K562细胞杀伤作用的研究

掌叶大黄属蓼科植物 ,主要成分为游离蒽醌类衍生物和糖类。大量研究已证实蒽醌类衍生物可通过抑制肿瘤细胞的呼吸和物质代谢 ,抑制 DNA、 RNA和蛋白质的生物合成达到抗癌作用 [1] ;姚文兵等 [2 ] 报道波叶大黄多糖可通过刺激小鼠免疫功能对 S180 细胞生长有间接抑制作用。金槿实等 [3]证实 RPP对 SGC-790 1、QGY- 770 3、SPC- A- 1细胞具有细胞毒作用 ,本文报道了掌叶大黄多糖 ( Rheum Palmatum Polysa-cchride.RPP)对体外培养 K562细胞的杀伤作用。1　材料与方法1.1　细胞株及主要试剂　 RPP由长春医学高等专科学校天然药物化…     

清毒饮对白血病瘤株K562增殖动力学的影响

目的：通过观察清毒饮对白血病瘤株K562增殖动力学的影响，探讨清毒饮治疗血液肿瘤的疗效机理。方法：血清药理学方法进行细胞毒试验及增效试验，MTT法检测A590值，以每组测得先密度平均值，作为药物效应值，计算细胞存活率。结果：清毒饮低、中、高3个剂量组在细胞毒效价上存在量效与时效差异，清毒饮配合阿霉素共同作用于K562瘤株，同样存在量效与时效差异。结论：清毒饮对K562细胞增殖动力学确有较大影响，是配合化疗的有效药物。     

桑寄生不同萃取部位的体外抗白血病作用研究

目的 确定寄生在木麻黄树上的桑寄生体外抗白血病作用的活性部位.方法 采用溶剂法,将中药材桑寄生用95％乙醇和水分别提取,得到的乙醇提取物用石油醚、乙醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇依次萃取,得到极性由小到大的5个萃取部位,与桑寄生水提物,一共6个不同部位作用于人白血病细胞k562与HL60,采用MTT法,观察桑寄生不同萃取部位对人白血病细胞K562、HL60的增殖抑制作用.结果 桑寄生乙醚部位、醋酸乙酯部位和正丁醇部位体外抗白血病作用显著,是桑寄生体外抗白血病细胞的活性部位.结论 首次确定了桑寄生的乙醚部位、醋酸乙酯部位和正丁醇部位是桑寄生体外抗白血病细胞的活性部位.     

冬凌草乙素对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及机制研究

目的:探讨冬凌草乙素(ponicidin,PON)对白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法:以不同浓度的PON(10~50μmol.L-1)作用于体外培养的K562细胞24,48,72 h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,收集药物作用72h后的细胞Annexin V染色并通过流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞凋亡时的形态学变化。应用免疫印迹法(Western blot)检测caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP的表达水平,并对MAPKs(mitogen-acti-vated protein kinase)信号转导通路相关蛋白(p-P38,p-ERK和p-JNK)以及PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)/AKT信号通路中的p-AKT,p-P85蛋白的表达水平进行检测。结果:30μmol.L-1以上的PON可显著抑制细胞的生长,并呈现出明显的量-效与时-效关系,FCM检测结果表明,不同浓度的药物作用72 h后,随药物浓度的增加细胞凋亡率逐渐升高,50μmol.L-1的PON作用不同时间后在瑞氏-姬姆萨染色下可见典型的核浓缩及核碎裂等细胞凋亡现象。Western blot检测结果表明,药物作用48 h后caspase-3被活化出现17 kD的亚单位,同时PARP被裂解出现89 kD的亚单位片段。Western blot检测结果进一步显示药物作用48 h后MAPKs信号途径中p-P38,p-ERK和p-JNK蛋白的表达水平无明显变化,而PI3K/AKT信号通路中的p-AKT,p-P85蛋白的表达水平则随着药物浓度增加而逐渐下降。结论:PON可以通过诱导白血病K562细胞调亡而发挥体外抗白血病作用。PON对K562细胞的诱导凋亡作用机制与caspse-3的活化以及降低PI3K/AKT信号通路中p-AKT及p-P85蛋白的表达水平有关,而与MAPKs信号通路中的相关调节蛋白无关;这些研究结果为进一步研究冬凌草素的抗白血病作用提供了有力的实验依据和技术平台。     

丹参酮Ⅱ_A对白血病K562细胞的体外诱导凋亡作用研究

目的研究丹参酮ⅡA对人急性白血病K562细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度的丹参酮ⅡA(10~50μmol/L)作用于体外培养的K562细胞24、48、72 h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,并对50μmol/L的药物作用不同时间后亚G1期细胞进行检测。应用免疫印迹法(Western blotting)检测Caspase-3及其裂解底物多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)的表达水平,并对凋亡调节蛋白Fas、Bax、Bcl-2、Bak、Bid的表达水平进行检测。结果 20μmol/L以上的丹参酮ⅡA可显著抑制K562细胞的生长、诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系;FCM检测结果表明50μmol/L丹参酮ⅡA作用不同时间后,亚G1期细胞(凋亡细胞)逐渐增多。20μmol/L以上的丹参酮ⅡA作用48 h后Caspase-3逐渐被活化出现17 000的亚单位,Caspase-3的作用底物PARP被活化裂解出现89 000的亚单位片段,而且Caspase-3的激活以及PARP的裂解可被Caspase-3的特异性抑制剂z-DEVD-FMK所阻断,促凋亡蛋白Fas以及Bax的表达水平明显升高,而凋亡抑制蛋白Bcl-2及其他促凋亡蛋白Bak和Bid的表达水平则无明显变化。结论丹参酮ⅡA可以通过诱导白血病K562细胞凋亡而发挥体外抗白血病作用,上调促凋亡蛋白Fas和Bax的表达水平及激活Caspase-3可能是丹参酮ⅡA诱导白血病K562细胞发生凋亡的重要作用机制之一。     

梁金菇多糖对K562细胞的促凋亡作用研究

目的研究LJPS的抗肿瘤作用及机制。方法：采用MTT法观察LJPS对K562细胞的增殖抑制．用普通光镜．荧光显微镜、电镜、FCM、DNA电泳等技术检测细胞凋亡．用RT--PCR检测bcl-2mRNA的表碉结果：LJPS对K562细胞有明显抑制增殖并诱导细胞凋亡的作用．DNA电泳出现片段化梯形带．F(、Ⅵ检测示细胞阻滞于G1期．出现凋亡峰．LJPS诱导K562细胞凋亡中下调bcl-2mRNA表达。结论LJPS对K562细胞的抑制增殖、促进凋亡的作用与其下调Bcl-2mRNA表达有关。     

麦门冬汤的抑瘤作用

目的:研究麦门冬汤对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用.方法:用小鼠H22荷瘤模型来观察麦门冬汤高、中、低各剂量组对荷瘤动物的抑瘤率、体重变化、脾指数的影响.结果:麦门冬汤各组对荷瘤小鼠体重的影响,与正常组比较无统计学意义(P＞0.05);化疗组体重与各组比较,则显著下降(P＜0.01);麦门冬汤高剂量(含生药1.67 g/mL)对H22荷瘤小鼠有显著的抑瘤作用(P＜0.01);麦门冬汤各剂量组都能增加脾脏重量,并提高脾指数(P＜0.01).结论:麦门冬汤对H22荷瘤小鼠有抑瘤作用,并能提高其免疫机能.     

芒果苷诱导白血病K562细胞凋亡机制的研究

目的研究芒果苷诱导慢粒白血病细胞系K562细胞凋亡的机制。方法采用RT-PCR检测芒果苷(25~200μmol/L)处理(24、48、72、96h)后K562细胞中bcl-2 mRNA、bax mRNA、survivin mRNA基因表达变化;采用Western blotting方法检测K562细胞BCR/ABL融合蛋白质P210水平。结果芒果苷作用K562细胞后,P210蛋白质水平下调,并呈时间及剂量依赖性,bax基因表达显著上调,bcl-2基因表达轻度下调,survivin mRNA基因表达下调。结论芒果苷诱导K562细胞凋亡的机制可能是通过下调BCR/ABL融合蛋白质P210、bcl-2和sur-vivin mRNA基因表达及上调bax基因表达来实现的。     

人工引流熊胆研究概况

 我国科学工作者自80年代初，开展了活体熊的胆囊造瘘术获取胆汁的研究，并获得成功，从 而为改变传统的杀熊取胆，保护熊资源，找到了新的出路。本文就引流熊胆的生产工艺、外观性状及其鉴 别、化学研究、药理与毒性研究等方面作了概要介绍，并就研究及发展中存在的问题进行了讨论．     

芒果苷磺酸钠抗白血病的实验研究

目的 观察芒果苷磺酸钠体内外抗白血病的作用.方法 采用MTT法,观察不同浓度芒果苷磺酸钠对K562细胞生长的影响;建立小鼠K562白血病模型,考察芒果苷磺酸钠对K562白血病小鼠的生命延长率.结果 不同浓度的芒果苷磺酸钠在不同时间对K562细胞均有抑制作用, 并随浓度升高和作用时间延长而抑制作用增强,但其抑制作用稍弱于同浓度的芒果苷;芒果苷磺酸钠能明显提高K562白血病小鼠的生命延长率. 结论芒果苷磺酸钠有较好的体内外抗白血病作用.     

引流熊胆与熊胆药理作用比较的研究

对引流熊胆和熊胆进行了药理作用的比较。结果表明,引流熊胆在抗炎、解热、镇静、抗惊厥、解痉、抑菌等作用方面与熊胆相似。     

茅莓及其总皂苷对K562白血病细胞体内外作用的实验研究

目的:从体内和体外实验探究茅莓及其总皂苷的抗白血病肿瘤效应。方法:应用已建立的荷白血病瘤裸鼠模型,观察不同浓度茅莓水煎液治疗荷白血病瘤裸鼠后瘤体体积、重量、组织病理的影响;半固体琼脂培养观察不同浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562细胞株集落生长的影响;MTT法观察不同浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562细胞株的增殖作用的影响。结果:低中高剂量茅莓水煎液(0.5g/mL,1g/mL,2g/mL)治疗荷瘤裸鼠后,瘤重分别为(0.95±0.13)g、(0.49±0.09)g和(0.33±0.01)g,抑瘤率分别为57.55%、75.40%和87.16%,抑制效应呈剂量依赖性方式;HE染色治疗组瘤体内可见多个坏死灶,瘤细胞肿胀、破裂,细胞核溶解、消失;琼脂半固定集落培养发现不同浓度含药血清及茅莓总皂苷均能抑制K562细胞株集落形成,抑制效应呈剂量依赖性方式,其中终浓度为10%和20%的含药血清抑制集落形成率为(21.6±2.2)%和(48.8±1.2)%,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05),20 mg/L茅莓总皂苷抑制集落形成率为(22.5±1.9)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且当浓度增加至150mg/L时,无集落形成;MTT示不同浓度的含药血清及茅莓总皂苷均能抑制K562细胞株的增殖,呈剂量依赖性方式,其中20%的含药血清可明显抑制K562细胞增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),20mg/L浓度的茅莓总皂苷能明显的抑制K562增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:茅莓水煎剂对荷白血病瘤裸鼠瘤体生长有明显抑制作用,且一定浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562集落形成和增殖均有明显的抑制作用,为临床用药提供了一定的理论依据。     

通莲汤对荷瘤裸鼠的抑瘤作用及机制研究

目的:探讨复方通莲汤对胃癌MGC803细胞荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,为其临床应用提供实验依据。方法:胃癌细胞株MGC803接种于裸鼠右前肢皮下。模型组ig生理盐水溶液10 mL·kg-1,阳性对照组ig消癌平片1.80 g·kg-1的药液10 mL·kg-1,复方通莲汤高、中、低剂量组分别ig 1.50,0.75,0.37 g·kg-1的药液10 mL·kg-1,各组连续给药3周,再连续观察3周,6周内连续测定裸鼠瘤体体积,最后脱臼处死全部裸鼠,分离瘤组织,计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤组织PCNA表达。结果:通莲汤抑制瘤体生长与时间呈正相关,开始给药后第4周达抑瘤峰值;通莲汤高剂量组瘤重(1.55±0.68)g,抑瘤率为(58.40±1.56)%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);通莲汤可显著抑制PCNA表达(P<0.05)。结论:通莲汤可抑制裸鼠人胃癌MGC803细胞移植瘤生长,其抑瘤机制与下调肿瘤细胞PCNA蛋白表达有关。     

肿节风总黄酮促进白血病K562细胞凋亡的效应及机制研究

目的:研究肿节风总黄酮促进人白血病K562细胞凋亡的效应及分子机制。方法:用系列浓度的肿节风总黄酮干预K562细胞24、48、72 h后,化学发光法检测细胞活力计算IC_(50),并依此将细胞分为空白对照组、肿节风总黄酮25、50、100μg/mL剂量组进行实验。AO-EB染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果:肿节风总黄酮能够明显降低K562细胞存活率,且呈时间和剂量依赖关系,24、48、72 h的IC_(50)分别为(64.90±5.16)μg/mL、(50.60±4.00)μg/mL、(34.90±2.46)μg/mL。与空白对照组相比,50、100μg/mL的肿节风总黄酮明显促进K562细胞凋亡。Western blot实验显示,与空白对照组相比,肿节风总黄酮100μg/mL剂量组Caspase-3蛋白表达显著下调;肿节风总黄酮50和100μg/mL剂量组Cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调,Bcl-2的蛋白表达显著下调;Bcl-2/Bax比值明显减小,Cleaved Caspase-3/Caspase-3比值明显增大。结论:肿节风总黄酮能有效促进K562细胞凋亡,其机制可能与其下调Bcl-2、Caspase-3蛋白,上调Cleaved Caspase-3蛋白的表达有关。     

SS熊胆眼药水刺激性研究

目的:构建滴眼液刺激性体外评价方法,筛查SS熊胆眼药水刺激性原因并采取适宜方法解决。方法:采用兔角膜上皮细胞毒性试验(SIRC-MTT)对4种熊胆滴眼液进行评价,将结果与临床刺激性评分进行相关性分析,运用SIRC-MTT筛查SS熊胆眼药水的刺激性原因并进行解决。结果:相关系数为0.961,说明SIRC-MTT能较好评价熊胆滴眼液眼刺激性;造成熊胆眼药水刺激性较强的原因为羟苯乙酯与熊胆原液的共存;采用减少羟苯乙酯用量(调整至0.04%)、添加羧甲基纤维素钠(0.2%～0.25%)均能增加角膜上皮细胞存活率。结论:SIRC-MTT是SS有效的体外刺激性评价方法;降低羟苯乙酯用量和添加羧甲基纤维素钠均能降低熊胆眼药水的刺激性。     

灵芝多糖联合低剂量顺铂抑瘤作用及对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的研究灵芝多糖与顺铂联合用药对荷瘤小鼠的肿瘤生长情况及其免疫功能的影响。方法Balb／c小鼠腋下接种小鼠肺癌细胞株Lewis5×10^6个细胞,待肿瘤至100min^3分组给药。分为对照组、灵芝多糖组（1次／2d,40mg／kg,灌胃）、顺铂组（1次／2d,2mg／kg,腹腔注射）和联合用药组（等剂量的顺铂和灵芝多糖）。每3天测量一次肿瘤的体积,30d后解剖,检测荷瘤小鼠的肿瘤大小、脾脏的变化,脾脏和外周血中免疫细胞的变化以及相关免疫细胞的功能。结果灵芝多糖可有效增加小剂量顺铂的抗肿瘤效果,提高荷瘤小鼠的存活率,使小鼠外周血中Th细胞向Thl转化,增加细胞免疫功能,并增加骨髓来源DC细胞表面CDllc分子的表达（与对照组比较灵芝多糖组从1．06％升至4．59％,与顺铂比较,联合用药组从2．8％升至7．21％）,提高抗原提呈能力。结论灵芝多糖可以提高荷瘤小鼠的免疫功能,与小剂量顺铂联合用药后,具有协同抗肿瘤生长作用,且可提高小鼠存活率。