Mn~(2+)对离体大鼠心脏缺钠—复钠损伤的作用

本实验用无钠液灌流大鼠心脏10分钟后再恢复钠的灌流,造成心脏缺钠—复钠损伤。在无钠灌流的同时应用Na~+—Ca~_(2+)交换抑制剂MnSO_4,明显减轻了无钠灌流时心脏的挛缩程度和组织损伤,促进了复钠灌流后心功能的恢复,显著抑制Ca~(2+)超负荷的发生。结果提示,通过Na~+—Ca~(2+)交换机制导致的细胞内钙超负荷是心脏缺钠—复钠损伤的重要发病环节。     

缺钠-复钠损伤与缺钙-复钙损伤

在离体大鼠心脏灌流模型上,无钠灌流10分钟后再恢复钠的灌流,导致心脏发生与钙反常相似的病理表现和组织损伤,严重心律紊乱,心功能低下,心脏挛缩,组织蛋白和细胞内酶漏出,心肌钙和钠超负荷,K~+/Na~+比值降低,心肌脂质过氧化产物增加,组织超微结构损伤。无钠灌流同时无钙灌流,心肌的损伤明显减轻,本文对Na~+/Ca~(2+)交换机制在再灌注损伤中的发病学意义进行了探讨。     

TTX通过JAK2/STAT3通路活化SOD减轻心肌细胞凋亡

目的:研究JAK2/STAT3信号通路在河豚毒素(Tetrodotoxin,TTX)心脏停搏液心肌保护中的作用.方法:24只Wistar大鼠随机均分为对照组、TTX组和TTX+AG490组,每组8只.对照组:开胸取左心室肌作为缺血前对照.TTX组:建立离体心脏Langendorff-Neely灌注模型,预灌注K-H缓冲液30rain后,灌注4℃ TTX心脏停搏液,停搏心脏并低温维持60 min,复灌K-H缓冲液60 min后,取左心室肌备用.TTX+AG490组:操作同℃组,但预灌和复灌时均在K-H缓冲液中加入JAK2抑制剂AG490(5μmol/L).分别采用免疫组化法、比色法和TUNEL法测定心肌组织中p-STAT3、SOD活性和MDA含量.以及心肌细胞凋亡指数(Apoptosis index,AI),并比较组间的变化.结果:与对照组相比,TTX组和TTX+AG490组p-STAT3表达量均明显增加(P<0.05);予以AG490处理后,p-STAT3表达量较TTX组明显下降(p<0.05 )与对照组相比,TTX组和TTX+AG490组SOD活性和MDA含量均明显增加(P<0.05);予以AG490处理后,SOD活性较TTX组显著降低(P<0.05),MDA含量却明显增加(P<0.05 ).经历缺血再灌注后,TTX组和TTX+AG490组心肌细胞AI明显高于对照组(P<0.05);与TTX组相比,TTX+AG490组AI显著增加(P<0.05).结论:JAK2/STAT3信号通路通过增强SOD活性,减轻膜脂质过氧化损伤,减少心肌细胞凋亡,介导TTX心脏停搏液对缺血心肌的保护作用.     

异搏定用于瓣膜替换术心肌保护的临床效果

本文在瓣膜替换术中观察了异搏定对缺血心肌的保护作用。165例分为两组。甲组84例用含异搏定1mg/L的冷钾停跳液经主动脉根部灌注。乙组81例,单用冷钾停跳液灌注作为对照。与对照组对比,结果显示:(1)心脏停跳快,缺血期心电活动消失完全;(2)心肌停跳前或复灌后室颤发生率显著低于对照组,术后循环功能稳定,对正性肌力药的需要量小,严重低排发生率低;(3)电镜检查结果提示心肌缺血后超微结构改变轻,尤其是线粒体的损伤少而轻。结论:异搏定与冷钾停跳液合用能加强缺血期的心肌保护作用,比单用钾停跳液为优,适用于瓣膜替换术的心肌保护     

大豆磷脂对受损家兔心肌细胞膜的影响

利用在体家兔心脏缺血模型,观察大豆磷脂对再灌注心肌细胞膜损伤的影响。结果表明大豆磷脂可增加心肌细胞膜磷脂含量,降低膜胆固醇和心肌游离脂肪酸含量,提高膜Na~+ 、K~+ -ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶和心肌SOD、GSH-Px活性,减少心肌MDA生成,降低血浆LDH活性。提示大豆磷脂对家兔再灌注心肌细胞膜损伤具有保护作用,其机制可能与外源性膜脂质的补充有关。     

心肌保护方法的实验研究

[目的]评价4种心肌保护方法的心肌保护作用.[方法]杂种犬20只,随机分成4组,分别使用4种心肌保护方法:冷晶体心停搏液灌注(G1)、冷血心停搏液灌注(G2)、常温血心停搏液连续灌注(G3)、含血利多卡因高钾心停搏液双向性灌注(G4).每组动物均经历120min心脏缺血和30min复灌.观察心脏停搏情况,心肌酶水平,心肌细胞内钙离子(Ca2 )、丙二醛(MDA)、及三磷酸腺苷(ATP)含量及心肌形态改变.[结果]①G3缺血后肌酸激酶同酶(CK-MB)升高无统计学意义;再灌注后Ca2 与缺血后Ca2 含量相比无显著性差异,并明显低于G1和G4;再灌注后ATP含量无进一步下降.②G1再灌注后MDA含量显著高于其他3组.③缺血及再灌注后心肌形态学改变在4组间无明显差异.[结论]常温血心停搏液连续灌注对减轻心肌酶泄漏和再灌注心肌Ca2 超负荷及ATP下降有明显优势;冷晶体心停搏液灌注对心肌能量保存效果较差,缺血-再灌注性损伤明显.     

激活线粒体钙激活钾通道加强心脏停搏液心肌保护作用的观察

目的:探讨线粒体钙激活钾通道(mitochondrial Ca2+-activated K+channels,mitoKCa)的激活是否加强改良St.Thomas心脏停搏液的心肌保护作用。方法:采用离体大鼠心脏灌流方法,全心停灌30 min和复灌60 min复制局部缺血/再灌注损伤模型;实验分单纯缺血复灌组、改良St.Thomas停搏液组、改良St.Thomas停搏液+NS1619组和改良St.Thomas停搏液+NS1619+Paxilline组,观察各组心室力学指标、冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及心肌含水量的变化。结果:与单纯缺血/复灌组比较,改良St.Thomas停搏液组左心室舒张末期压力抬高程度下降(P<0.01),做功增加(P<0.01),冠状动脉流量增加(P<0.05),心肌含水量减少(P<0.01),LDH释放减少(P<0.01);与St.Thomas停搏液组比较,线粒体钙激活钾通道激动剂NS1619能进一步降低St.Thomas停搏液灌注时LDH的释放(P<0.01),心肌含水量进一步降低,促进左心室功能的恢复(P<0.01);线粒体钙激活钾通道阻断剂Paxilline取消了NS1619的作用(P<0.05~P<0.01)。结论:线粒体钙激活钾通道的激活可加强心脏停搏液的心肌保护作用。     

猫心肌缺血再灌注对Ca2+┐ATPase活力及肌浆网钙摄取能力的影响

目的：观察猫心肌缺血再灌注过程中心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力、肌浆网钙摄取能力、线粒体丙二醛及心肌ＡＴＰ含量变化。方法：利用猫体外循环模型，心脏低温停搏６０ｍｉｎ后，恢复正常血液灌注６０ｍｉｎ。测定心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力、肌浆网钙摄取能力、心肌ＡＴＰ及线粒体丙二醛含量。结果：心脏缺血６０ｍｉｎ时，随着心肌ＡＴＰ含量的下降，Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力下降，而丙二醛含量仅有轻微增加；恢复灌注６０ｍｉｎ后，Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力进一步下降，同时丙二醛含量明显增加。结论：缺血期间心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力的下降主要与心肌能量储备降低有关，而复灌后Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力进一步下降，可能与复灌过程中氧自由基大量产生，使膜脂质过氧化有关     

金属硫蛋白对离体大鼠心肌细胞和蛋白重组脂质体Na~+—Ca~(2+)交换的影响

我们以前的工作发现,诱导大鼠内源性合成MT和外源性补充MT均显著缓解心脏的缺血—再灌注损伤和缺钙—复钙损伤,明显抑制细胞内钙超负荷的发生,但其作用机制还不清楚。本工作在离体成年大鼠心肌细胞和蛋白重组脂质体上观察MT对Na~+—Ca~(2+)交换的影响,探讨MT在维持细胞内钙稳态中的作用。     

心肌保护方法的实验研究

【目的】评价4种心肌保护方法的心肌保护作用。【方法】杂种犬20只，随机分成4组，分别使用4种心肌保护方法：冷晶体心停搏液灌注(G1)、冷血心停搏液灌注(G2)、常温血心停搏液连续灌注(G3)、含血利多卡因高钾心停搏液双向性灌注(G4)。每组动物均经历120min心脏缺血和30min复灌。观察心脏停搏情况，心肌酶水平，心肌细胞内钙离子(Ca^2 )、丙二醛(MDA)、及三磷酸腺苷(ATP)含量及心肌形态改变。【结果】①G3缺血后肌酸激酶同酶(CK—MB)升高无统计学意义；再灌注后Ca^2 与缺血后Ca^2 含量相比无显性差异，并明显低于G1和G4；再灌注后ATP含量无进一步下降。②G1再灌注后MDA含量显高于其他3组。③缺血及再灌注后心肌形态学改变在4组间无明显差异。【结论】常温血心停搏液连续灌注对减轻心肌酶泄漏和再灌注心肌Ca^2 超负荷及ATP下降有明显优势；冷晶体心停搏液灌注对心肌能量保存效果较差，缺血．再灌注性损伤明显。     

雷诺嗪对离体大鼠心肌缺血/再灌住损伤的保护作用

目的观察雷诺嗪对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为I/R、R10、R20三组(各8只)。将大鼠麻醉后开胸取出心脏,即刻连至Langendorff灌注装置,K-H液平衡灌注后停灌造成全心缺血,再用普通K-H液、分别含有10、20μmol/L雷诺嗪的K-H液复灌。分别记录各组缺血前、再灌注15、30、45、60 min的血流动力学指标;测量取缺血前及再灌注末1 min的冠脉液测定心肌乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK),留取心尖部组织,测定三磷酸腺苷(ATP)及Ca2+含量。结果缺血前三组血流动力学指标均无统计学意义(P>0.05);再灌注后R10组和R20组的左心室形成压(LVDP)和左心室内压最大上升/下降速率(±dp/dtmax)与I/R组相比均有统计学意义(P<0.05),R10和R20组比较差异有统计学意义(P<0.05);三组心率相比无统计学意义(P>0.05)。三组缺血前LDH、CK、ATP及Ca2+比较差异无统计学意义(P>0.05);再灌注末三组的LDH、CK均有增加的趋势,含有雷诺嗪组的LDH、CK活性明显低于其他组(P<0.05)。R10和R20组的ATP含量明显增高(P<0.05),且随雷诺嗪浓度的增加而增加;Ca2+含量明显下降(P<0.05),且随浓度的增加而降低。结论雷诺嗪对I/R心肌有保护作用,并在一定浓度范围内呈剂量依赖性。     

甘氨酸对离体缺血再灌注大鼠心脏的保护作用

目的 探讨甘氨酸对离体大鼠心脏缺血再灌注引起的心脏损伤的拮抗作用及其机制.方法 采用Langendorff心脏灌流技术.正常对照组持续灌流90 min;缺血再灌注组平衡30 min,停灌30 min,再灌30 min;甘氨酸组从停灌前15 min开始加入3 mmol/L甘氨酸,其他同缺血再灌注组.结果 甘氨酸处理使缺血再灌注所致心律失常持续时间缩短85%,丙二醛(MDA)含量降低61%,心肌凋亡细胞减少65%,Bcl-2表达增加140%,Bax表达减少68%.结论 甘氨酸减轻缺血再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡,此作用可能与其抗自由基、调节Bcl-2和Bax的表达有关.     

茶多酚改善大鼠缺血/再灌注心脏功能和能量代谢并抑制体外培养心肌细胞的钙内流

目的：探讨茶多酚对缺血/再灌注心脏损伤的保护作用,并研究心脏能量代谢和心肌细胞钙内流是否参与了心脏缺血/再灌注损伤的保护作用。方法在大鼠Langendorff离体心脏上实施缺血/再灌注各30 min,用一导管经压力换能器连接放大器记录心功能指标;用31P NMR技术测定心脏的能量代谢,全细胞膜片钳技术记录心肌细胞钙内流。结果与对照组比较,茶多酚（2.5 mg/L）能使缺血/再灌注心脏的心室发展压、左心室压最大收缩速率（+dp/dtmax）、左心室压最大舒张速率（-dp/dtmax）和冠脉流量显著增加（P<0.05）,并显著改善缺血/再灌注心脏的能量代谢,增加心肌ATP和PCr含量（P<0.05）。浓度为2.5和5.0 mg/L的茶多酚均能显著抑制培养心肌细胞的钙内流（P<0.01）。结论茶多酚对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用可能与其改善心肌能量代谢、抑制心肌细胞钙内流的作用有关。     

N-乙酰半胱氨酸对低温缺血再灌注未成熟兔心肌钙转运功能影响的研究

目的 对比观察附加0．4mmol／L N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine，NAC)心脏停搏液(NAC组)对低温缺血再灌注未成熟兔心肌钙转运功能的影响。方法 采用Langenolorff-Neeley离体左心做功模型，离体心脏缺血120min，再灌注60min；分离出缺血-再灌注未成熟左室心肌肌浆网，测定其总巯基(total sulfhydryl，TSH)、非蛋白巯基(non-protein sulfhydryl，NPSH)及丙二醛(malondialdelayde，MDA)，Ca2 -ATP酶活性及其钙摄取率(calclum uptake)。结果 NAC组，再灌注后心脏功能恢复明显优于ST组；NAC组TSH，NPSH含量也明显高于ST组，同时SR-MDA含量也明显低于ST组；NAC组肌浆网Ca2 -ATP酶活性经历缺血-再灌注后有所下降，但明显高于ST组；NAC组与ST组肌浆网钙摄取率在缺血-再灌注后略有下降，但无显著差异。结论 附加NAC可显著改善St.Thomas液对低温缺血再灌注未成熟心肌的钙转运功能。其机制与NAC提高缺血再灌注未成熟心肌的还原型巯基水平，增强心肌抗氧化损伤能力，减轻缺血再灌注对未成熟心肌肌浆网钙泵功能的抑制有关．     

家兔心肌组织α_1受体和细胞膜Ca~(2+)在心肌缺血/再灌注损伤时的变化

本研究以~3H哌唑嗪为特异的标记配基定量地检测了家兔心脏α_1受体及其在心脏缺血/再灌注损伤时的变化,并结合细胞膜内Ca~(2+)含量的变化及丹参对缺血心肌的保护作用,探讨了心肌/再灌注损伤的机理。结果表明,α_1受体随心肌缺血时间的延长而明显升高,40分钟时达正常对照的2倍以上,在此基础上再灌注4分钟,受体数目稍降,但仍保持在高水平。细胞膜的Ca~(2+)在缺血时的变化与α_1受体的变化平行(随时间而增高),但缺血40分钟再灌注4分钟时明显下降。预先耳缘静脉注射丹参制剂后,缺血40分钟再灌注4分钟,上述两种指标均与对照组无差异。提示丹参对心肌细胞膜具有明显保护作用。     

完全性缺血所致脑水肿机理的初步研究

利用“四血管”式模型,将兔分为未缺血、缺血30 min 后再灌30、180和360 min 四组,观察全脑和6个脑区含水量,PGI_2/TXA_2,Na+-K~+ATPase,Glu 的变化,与未缺血动物相比,全脑和除枕区外5个脑区含水量在再灌注时升高(P<0.05);PGI_2/TXA_2和 Na~+-K~+ATPase 下降(P<0.05);而 Glu 升高(P<0.01)。结果证明完全性缺血后再灌注早期脑水肿具有区域性;PGI_2/TXA_2 和 Na~+-K~+ATPase,Glu 均参与了脑水肿的形成。     

HOE642对缺血再灌注心肌的保护作用

目的：探讨HOE642对缺血再灌注心肌的保护作用。方法：以离体灌注的SD大鼠心脏为模型，40只大鼠随机分成4组：缺血再灌注对照组（Control）、缺血前给药组（HOE－Pr)、缺血期间给药组（HOE－Is）、复灌期给药组（HOE－Re），测定左室发展压、左室舒张末压、心律、心率、冠脉流量和心肌酶。结果：与Control组相比，HOE－Pr组在随后的缺血／复灌期间左室发展压显著增加，左室舒张末压减少，心律失常评分减少，冠脉流出液中的心肌酶含量降低，复灌早期的冠脉流量增加，但心率无明显差异；HOE－Is组左室舒张末压减少，心律失常评分减少，冠脉流出液中的心肌酶含量降低，但左室发压及心率较Control组无明显差异；HOE－Re组心脏各项指标与Control组相比无统计学差异。结论：HOE642对缺血再灌注心肌有保护作用，缺血前给药能充分发挥其心肌保护作用。     

镁对大鼠离体缺血再灌注心肌的作用

目的：观察在缺血再灌注5min后应用镁剂是否能对离体缺血再灌注心肌起到保护作用。方法：建立Langendorff离体心脏缺血再灌注模型，结扎冠状动脉左前降支，缺血20min，复灌60min，高镁组在复灌5min时应用浓度为2．4mmol／L、4．8mmol／L、8．4mmol／L的高镁K—H液灌注10min。观察心脏血流动力学指标，实验结束时测心肌匀浆MDA含量，免疫组化检测SOD的含量。结果：①复灌15min时三个高镁组LVSP、LVDP×HR、LV±dp／dtmax明显低于缺血再灌组。②复灌60min时三个高镁组各指标与缺血再灌组相比差异无显著性。③三个高镁组MDA含量明显低于缺血再灌组，SOD阳性表达明显高于缺血再灌组。结论：缺血再灌注5min应用高镁K—H液对缺血再灌注心肌的即时作用表现为抑制心脏的血流动力学，复灌结束测得的MDA含量说明镁对心肌有保护作用，体现为抗脂质氧化作用。     

牛磺酸及Mg~(2+)对缺血—再灌注心脏MDA含量和SOD活力的影响

本实难采用langendorff豚鼠心脏观察了牛磺酸及Mg2+对缺血-再灌损伤心脏的保护作用。实验发现：1）10－4mol／L的牛磺酸不仅能减少豚鼠缺血-再灌心肌组织内MDA（丙二醛）的含量，而且能显著增加SOD（超氧化物岐化酶）的活力；2）15mmol／L的Mg2+能减少心肌组织中MDA的含量，但SOD的活力改变不明显。提示抗脂质过氧化可能是半磺酸和Mg2+保护缺血-再灌注损伤心脏的途径之一。     

羟丁酸钠对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

对２０只ＳＤ大鼠离体Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ心脏，行全心缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍｉｎ的方法，研究羟丁酸钠对心肌缺血再灌注损伤的作用和机制。与对照组（ｎ＝１０）相比，缺血前期用含有羟丁酸钠３００ｍｇ／Ｌ的Ｋ－Ｈ液灌注心脏，于再灌注期的冠脉流量（ＣＦ）显著增加，而左室舒张末期压力（ＬＶＥＤＰ）明显下降，同时冠脉流出液中的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性和蛋白含量都显著降低；再灌末，心肌组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著高于对照组。提示：羟丁酸钠对离体心脏的缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能与相对提高了心肌组织内的ＳＯＤ活性有关。