氧化型辅酶Ⅰ抗辐射损伤作用及其量效关系的初步实验

目的 探讨氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)抗辐射损伤作用及其量效关系.方法 L02人正常肝细胞株加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中常规方法培养,X线照射后和在照射后即刻加入NAD+,采用MTT法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,观察X线照射对L02人正常肝细胞的辐射损伤,并观察NAD+对受照射L02肝细胞辐射损伤的影响作用及其与NAD+浓度的关系.结果 L02人正常肝细胞受X线照射后细胞损伤随照射吸收剂量的增大而加重,受照射后24 h细胞抑制作用最显著,细胞损伤多表现为细胞凋亡;加入NAD+可提高受照射细胞存活率,其作用在NAD+终浓度为100～1000μg/ml范围内与浓度呈正相关,在浓度大于1000 μg/ml后,加大浓度并不再显著增加受照射细胞的存活率.结论 NAD+具有一定的抗细胞辐射损伤作用,其作用在一定范围内与其浓度呈正相关关系.     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸对精子DNA碎片化指数的影响

目的研究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对精子DNA碎片化的作用,并探讨此过程中的分子生物学机制。方法在差异浓度NAD(0、1、10、100、1 000μmol/L)孵育下,观察最适宜的精子NAD孵育浓度;采用Bio Vsion公司生产的NAD/NADH定量试剂盒测定精子NAD水平;采用流式细胞仪观察精子DNA碎片率和染色质成熟度;采用实时定量PCR观察精子DNA单链修复酶PARP1和双链修复酶BRCA1的转录水平。结果 10μmol/L NAD孵育即能显著增加精子NAD含量。在精子内NAD水平显著升高的同时,精子DNA碎片率明显降低,然而精子染色质成熟度不受精子NAD水平的影响。精子内NAD水平能显著影响精子内DNA单链修复酶PARP1和双链修复酶BRCA1的转录水平。结论这些结果初步提示,精子内NAD水平可能通过调节DNA修复系统,参与精子DNA损伤修复。     

MDA、GSH-Px、NAD+/NADH氧化还原失衡与2型糖尿病关系的研究进展

2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)是一种多因素的代谢性疾病,其患病率增长迅速,但发病机制至今未明.研究表明,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)及氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotin...     

高浓度氧对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1表达的影响

目的探讨高浓度氧暴露对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸脱氢酶亚单位1（ND1）表达的影响。方法早产SD新生大鼠生后1d随机分为高氧组和空气组，高氧组持续暴露于≥85％氧气中，空气组置于同一室内常压空气中。分别取两组大鼠高氧或空气暴露后1、4、7、10和14d肺组织标本，采用免疫组织化学和Western blot方法检测ND1蛋白的表达，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-peR）检测ND1 mRNA的表达。结果①高氧组和空气组各时间点均有ND1蛋白表达；与空气组相比，高氧组在1、4和7dND1蛋白表达增高，随后其表达下降。②与同时间点空气组相比，高氧暴露后1、4和7dND1 mRNA表达显著增高（P〈0．05），其后ND1 mRNA表达逐渐下降，10d和14d时低于空气组，但两者相比差异无显著性意义（P〉0．05）。③ND1蛋白的表达变化趋势与ND1 mRNA的表达变化趋势一致。结论高氧导致早产大鼠肺组织ND1表达改变，提示ND1可能参与了高氧肺损伤的病理生理过程。     

冠心病患者氧化还原态状态及瑞舒伐他汀对患者氧化还原状态的影响研究

目的探讨冠心病患者氧化还原态状态及瑞舒伐他汀对患者氧化还原状态的影响。方法选择2015年12月至2017年3月河南省人民医院心内科收治的冠心病患者496例为冠心病组,选择同期接受冠状动脉造影检查结果正常者498例为对照组,按照随机数表法将冠心病组患者分为两组,各248例,分别在常规治疗基础上接受瑞舒伐他汀和依折麦布治疗12周。测定对照组受试者及冠心病组患者治疗前后血浆还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)水平,并根据Nernst方程计算NADPH/NADP+的氧化还原电位。结果冠心病组患者血浆NADPH水平低于对照组,NDPN+水平高于对照组,NADPH/NADP+氧化还原电位高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且患者氧化还原状态向氧化方向偏移。治疗12周后,瑞舒伐他汀组NADPH高于治疗前,NADP+低于治疗前,NADPH/NADP+氧化还原电位低于治疗前,差异有统计学意意义(P<0.05),且患者氧化还原状态向还原方向偏移;依折麦布组患者治疗后3项指标与治疗前相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论冠心病患者NADPH/NADP+氧化还原电位高,且氧化还原状态向氧化方向偏移,瑞舒伐他汀能够纠正冠心病患者的电位失衡状态。     

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1基因重组真核表达质粒的构建及其对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的构建含人还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-1(NOX1)基因重组真核表达质粒,探讨其对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库查找NOX1基因的mRNA序列,针对蛋白质编码区(CDS)设计引物,以人c DNA为模板扩增出NOX1基因全长CDS序列,经双酶切鉴定后,将NOX1基因与真核表达载体pc DNA3.1(+)连接,再经双酶切、测序鉴定。运用脂质体转染重组体pc DNA3.1(+)-NOX1至VSMC中,观察NOX1表达及VSMC凋亡情况。结果重组体中NOX1基因片段和载体DNA大小与预期一致。经BLAST(the basic local alignment search tool)比对,与NCBI数据库中的NOX1基因序列具有高度的同源性。pc DNA3.1(+)-NOX1能促进VSMC中NOX1蛋白高表达,并促使VSMC的凋亡。结论 NOX1基因重组真核表达质粒能促使VSMC凋亡,为阐明NOX1在主动脉夹层中的作用及分子机制研究奠定了基础。     

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶染色法术中快速诊断婴幼儿先天性巨结肠的价值

目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)酶组织化学染色法在术中快速诊断婴幼儿先天性巨结肠的价值。方法选取2015年1月至2017年3月新疆乌鲁木齐儿童医院收治的37例先天性巨结肠患儿术中切除的肠管为观察标本,以同期因坏死性小肠结肠炎行结肠造瘘术患儿的切除肠管标本作为实验对照,将先天性巨结肠患儿的肠管标本分为扩张段和痉挛段,进行常规冰冻连续切片,采用NADPH-d进行染色(NADPH-染色组),显微镜下观察神经丛及神经节细胞的染色情况,并与术中快速苏木精-伊红(HE)染色法(HE染色组)进行配对比较。结果 37例患儿中,NADPH-d染色诊断阳性36例(97.3%),阴性6例(2.7%);HE染色诊断阳性34例(91.9%),阴性3例(8.1%);2种染色方法均诊断阳性或阴性者分别为34例、1例,另2例NADPH-d染色诊断阳性者HE染色诊断为阴性;2种染色方法的诊断结果比较差异无统计学意义(χ~2=0.059,P>0.05)。NADPH-d染色组扩张段标本低倍镜下可见呈串珠状分布的神经丛样结构,高倍镜下可见细胞质着紫蓝色、细胞核空白无着色的细胞,HE复染显示串珠状分布的紫蓝色组织为肌间神经丛,黏膜下未见着紫蓝色的神经丛;高倍镜下可清楚分辨核大、深染、细胞质略呈蓝色的神经节细胞。NADPH-d染色组痉挛段标本镜下背景清晰,无任何着色,未见神经丛及神经节细胞。HE染色组扩张段标本肌间神经丛内隐约可见神经节细胞,痉挛段肌间及黏膜下可见分布杂乱的神经丛,其间无神经节细胞。结论 NADPH-d染色法诊断婴幼儿先天性巨结肠快速、精确、易操作,NADPH-d法与术中快速HE染色法联用能提高诊断效率,准确判断病变段肠管的切除范围。     

烟酰胺N-甲基转移酶的研究进展

烟酰胺N-甲基转移酶?(NNMT)?是一种甲基化酶,在体内能使烟酰胺?(NAM)?甲基化,生成N1-甲基烟酰胺?(MNAM)?从体内排出.近来的研究表明NNMT除了能够清除NAM外,还可以通过消耗甲基供体及生成活性代谢产物参与脂肪及肝脏等组织的多种代谢途径调节.本文对近年来研究发现的NNMT在生理和病理状态下的作用以及...     

腺嘌呤核苷酸转位酶与细胞凋亡

腺嘌呤核苷酸转位酶（adenine nucleotide translocase,ANT）是位于线粒体内膜上的一类转运蛋白,既能将细胞的产能和耗能过程耦联起来,也与线粒体膜通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore MPTP）密切相关,MPTP是位于线粒体内外膜之间的多蛋白组成的高导离子通道,它的开放可诱导细胞凋亡。所以ANT是一种能量转运和凋亡诱导的双重功能蛋白。本文主要就其与细胞凋亡的关系做一综述。     

腺嘌呤核苷酸转移酶与凋亡的研究进展

线粒体是机体的能量工厂,机体所需 ATP 的 95%由线粒体内氧化磷酸化作用而产生;而线粒体膜通透性转换是调控细胞凋亡的关键步骤和限速步骤.腺嘌呤核苷酸转移酶(adenine nucleotide translocase,ANT)作为细胞线粒体上含量最丰富的能量转运载体蛋白,既是将细胞的产能和耗能过程耦联起来的主要载体,也是组成线粒体膜通透性转换孔复合物(mitochondrial permeability transition pore complex,mtPTPC)的关键组分,参与调节线粒体膜通透性转换孔的开放,与细胞凋亡紧密相关.     

氧化型辅酶Ⅰ对受辐射小鼠免疫功能的影响

目的探讨氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)对受辐射小鼠免疫功能的影响。方法 60只小鼠随机分为对照组、照射组和NAD+组,每组20只。收集处理24 h后各组小鼠股骨骨髓细胞,进行骨髓有核细胞计数,检测细胞凋亡率、p53和bcl-2蛋白阳性表达以及Caspase-3活性;收集处理后10 d各组小鼠脾脏单核细胞,检测脾淋巴细胞凋亡率、p53和bcl-2蛋白阳性表达以及Caspase-3活性。结果照射组和NAD+组小鼠骨髓有核细胞数显著少于对照组(P<0.05),而NAD+组小鼠骨髓有核细胞数显著高于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组小鼠骨髓有核细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),而NAD+组小鼠骨髓有核细胞凋亡率显著低于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组小鼠骨髓有核细胞p53蛋白阳性表达率显著高于对照组(P<0.05),而NAD+组小鼠骨髓有核细胞p53蛋白阳性表达率显著低于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组小鼠骨髓有核细胞bcl-2蛋白阳性表达率显著低于对照组(P<0.05),但NAD+组骨髓有核细胞的bcl-2蛋白阳性表达率显著高于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组骨髓有核细胞的Caspase-3活性显著高于对照组(P<0.05),但NAD+组骨髓有核细胞的Caspase-3活性显著低于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组脾淋巴细胞凋亡率和p53蛋白阳性表达率显著高于对照组(P<0.05),NAD+组小鼠脾淋巴细胞凋亡率和p53蛋白阳性表达率显著低于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组小鼠脾淋巴细胞的bcl-2蛋白阳性表达率显著低于对照组(P<0.05),但NAD+组脾淋巴细胞的bcl-2蛋白阳性表达率显著高于照射组(P<0.05)。照射组和NAD+组小鼠脾淋巴细胞Caspase-3活性显著高于对照组(P<0.05),但NAD+组小鼠脾淋巴细胞Caspase-3活性显著低于照射组(P<0.05)。结论 NAD+可通过抑制受辐射损伤小鼠免疫细胞凋亡而发挥免疫防护作用;NAD+发挥抗免疫细胞凋亡作用的分子机制可能是通过下调受辐射损伤细胞p53表达水平、上调bcl-2表达以及抑制Caspase-3活性。     

氧化低密度脂蛋白致血管内皮损伤机制及中药复方防治的研究进展

低密度脂蛋白经氧化修饰后主要通过凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1导致管内皮细胞损伤,诱导黏附分子和炎症因子的合成与释放,加重血管炎症反应,诱导内皮细胞凋亡,进而导致动脉粥样硬化等心血管疾病。中药复方通过抑制低密度脂蛋白(LDL)氧化生成氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）,防治血管内皮损伤,进而防治动脉粥样硬化的发生与发展。综述近年来有关OX-LDL损伤血管内皮细胞功能的机制,及具有抗OX-LDL损伤作用的、脑心通、冠心合剂、血脉脂康胶囊、通心络、六味地黄方,黄连解毒汤等中药复方的研究进展。     

芝麻素对AD模型小鼠学习和记忆能力的影响及其机制

目的：观察芝麻素对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠学习记忆和能力的影响,阐明其可能的作用机制。方法：40只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组、吡拉西坦组、低剂量芝麻素组和高剂量芝麻素组,每组8只。除对照组外其他各组小鼠采用侧脑室注射淀粉样β蛋白片段25-35（Aβ_25-35）的方法建立AD模型,24 h后,吡拉西坦组小鼠给予吡拉西坦灌胃,低和高剂量芝麻素组小鼠分别给予50和100 mg·kg^-1芝麻素灌胃,对照组和模型组小鼠给予等量的生理盐水。采用Morris水迷宫实验观察各组小鼠逃避潜伏期、小鼠在目标象限游程和目标象限停留时间,流式细胞术检测各组小鼠脑组织中活性氧（ROS）水平,ELISA法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平,Western blotting法检测各组小鼠脑组织中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长（P<0.05）,目标象限游程和目标象限停留时间明显缩短（P<0.05）;与模型组比较,吡拉西坦组、低剂量芝麻素组和高剂量芝麻素组小鼠逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,目标象限游程和目标象限停留时间增加（P<0.05）。与对照组比较,模型组小鼠脑组织中ROS和MDA水平明显升高（P<0.05）,SOD活性明显降低（P<0.05）,Bax和Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达水平和Bcl-2/Bax比值明显降低（P<0.05）;与模型组比较,吡拉西坦组、低和高剂量芝麻素组小鼠脑组织中ROS和MDA水平明显降低（P<0.05）,SOD活性明显升高（P<0.05）,Bax和Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达水平和Bcl-2/Bax比值明显升高（P<0.05）。结论：芝麻素可能通过提高神经元抗氧化能力、抑制神经元凋亡而提高AD模型小鼠的学习和记忆能力。     

冠心病患者血尿酸、氧化修饰低密度脂蛋白水平及其相关性研究

目的通过检测冠心病(CHD)患者血尿酸(UA)和氧化修饰低密度脂蛋白(oxLDL)水平,探讨血UA和oxLDL与CHD严重程度的关系及其在CHD发生中的作用。方法选择急性冠脉综合征(ACS)、稳定型心绞痛(SAP)和对照组(CO)患者各30例,测定外周血UA和oxLDL水平,然后进行统计学分析。结果 ACS和SAP组患者血UA和oxLDL水平均高于CO组(均P<0.05);ACS组和SAP组患者相比,血UA水平差异无统计学意义(P>0.05),而oxLDL水平明显增高(P<0.05)。SAP组高尿酸血症(HUA)者与正常血UA者相比,oxLDL水平明显增高(P<0.05);ACS组HUA者与正常血UA者相比,oxLDL水平明也显增高(P<0.05)。     

颈腰曲弓形面积测量法——240例正常颈腰曲弓形面积报告

目的:测量正常颈曲、腰曲的弓形面积,为临床观察颈、腰曲变化提供数据。方法:按Borden法和Seze法的标准,测出正常颈曲和腰曲,然后按数学几何学扇形面积计算公式,即S_(弓形)=(πr~2α/360°)-(2/1)Lh,计算出正常的颈曲、腰曲的弓形面积,并统计正常颈曲126例,正常腰曲114例,经统计学处理得出均值和标准差。结果:正常颈曲弓形面积为均值(x)14.10cm2(标准差2.86cm2),正常腰曲弓形面积为均值(x)32.36cm2(标准差5.26cm2)。结论:对椎曲弓形面枳进行计算,统计出其正常值范围,将为临床观察椎曲的改变提供数据化的观测方法,为整脊疗法的标准化提供依据。     

脊髓型多发性硬化的临床与MRI的研究

目的探讨脊髓型多发性硬化(spinal cord formof multiple sclerosis,SMS)的临床和MRI特点及其诊断意义。方法对17例SMS的临床特点和磁共振(MRI)结果进行回顾性分析。结果SMS呈急性或亚急性起病,表现为复发—缓解或慢性进展病程,病灶分布上以颈髓受累最多,MRI特点为髓内散在的长T1、长T2斑块状病灶,其长度一般小于2个椎体的长度,位于脊髓的后外侧,面积小于脊髓横截面的1/2。应用糖皮质激素试验性冶疗对脊髓出现的可疑脱髓鞘病灶者诊断有一定帮助。结论诊断SMS主要依据其临床表现,MRI有助于发现病灶,明确病灶位置,是目前诊断SMS最敏感的影像学方法。     

WR-2721, PF4对于全身照射条件下小鼠造血系统保护作用的比较

目的：比较细胞因子PF4与辐射防护剂WR-2721对全身照射(TBI)后小鼠造血系统的保护作用．方法：雄性BALB／c小鼠随机分为正常对照组、照射对照组、WR-2721保护组和PF4保护组，后3组给予7Gy^60Cγ射线全身照射．用流式细胞仪(FCM)测定细胞周期和细胞凋亡，采用内源性脾结节法测定脾集落形成单位(CFU-s)，进行小鼠骨髓病理检查．结果：WR-2721和PF4可以减少造血细胞坏死、凋亡，增多CFU-s，还能减轻骨髓基质水肿、出血；PF4造血保护作用更强．结论：PF4和WR-2721在小鼠全身照射前使用，可以减轻骨髓辐射损伤，可作为肿瘤患放射治疗时的骨髓保护剂．PF4对于全身照射(TBI)后小鼠造血系统保护作用更好．     

重组人粒细胞刺激因子对8Gy、10Gy与15Gy照射小鼠救治方案的差别研究

目的探讨骨髓型急性放射病与肠型急性放射病的救治方案差别。方法采用重组人粒细胞刺激因子（rhG-CSF）对接受8 Gy、10 Gy、15 Gy60Coγ射线照射的C57BL/6J小鼠进行救治,并对比其骨髓、胃肠受损程度。结果 rhG-CSF对8 Gy照射组救治作用良好（P〈0.05）,而对10 Gy、15 Gy照射组则不能起作用（P〉0.05）。结论rhG-CSF单独用药适用于小鼠骨髓型急性放射病损伤,而对肠型急性放射病疗效不佳。     

番茄红素与大豆异黄酮对荷瘤小鼠辐射损伤的保护作用

目的 研究番茄红素与大豆异黄酮对荷瘤小鼠辐射损伤的保护作用.方法 将荷瘤小鼠随机分为肿瘤组、肿瘤辐射组、番茄红素组、大豆异黄酮组及联合用药组5组.各组用相应的药物灌胃,连续灌胃给药14 d,分别于第7 d、第14 d,除肿瘤组外,其他4组给予全身照射.第15 d处死,测得瘤/体比及胸腺指数,检测血中各项指标、骨髓有核细...