矽肺,煤工尘肺肺泡巨噬细胞膜性质和结构的改变

矽肺、煤工尘肺肺泡巨噬细胞膜性质和结构的改变刘保连，姚汝琳，郭鼐，张国高体外实验已经证明粉尘作用于肺泡巨噬细胞可引起细胞膜流动性和通透性发生变化〔１，２〕。而有关矽肺和煤矽肺患者肺泡巨噬细胞膜流动性和通透性的改变未见报道。本文阐述了上述指标和肺泡巨噬...     

矽肺大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能检测方法研究

目的研究适用于矽肺模型大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的检测方法.方法气管注入法制备矽肺模型,分别两次通过气道、腹腔给予矽肺大鼠模型及正常对照动物卡介苗（BCG）.第2次免疫后35天气道注入鸡红细胞,评价肺泡巨噬细胞的吞噬功能.结果矽肺动物肺泡巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率、吞噬指数都显著低于正常对照大鼠.结论本实验室应用的大鼠半体内肺泡巨噬细胞吞噬功能测定方法,简单适用,能反映动物肺泡巨噬细胞吞噬功能;矽肺动物肺泡巨噬细胞吞噬功能显著下降.     

丹参对实验性大鼠矽肺肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化损伤的动态影响

本实验动态观察了丹参对肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化系统在实验性大鼠矽肺发生发展过程中的影响。结果表明,在染尘后7、15天丹参组肺泡巨噬细胞MDA的含量和共轭二烯的含量均低于石英尘组,以后二者逐渐接近,和正常对照组无差异。而GSH-Px的活性在染尘后30、60天丹参组高于石英尘组,说明丹参具有保护该酶的作用。作者认为丹参阻抑肺纤维化和其抑制肺泡巨噬细胞脂质过氧化反应有关。     

矽肺患者肺泡灌洗液中巨噬细胞游走抑制因子和活化因子的观察

目的 探讨矽肺患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中的巨噬细胞活化及巨噬细胞游走抑制冈子(MMIF)的表达.方法 对47例矽肺患者及20例正常对照,利用细胞块切片作免疫组化染色,观察矽肺患者BALF中巨噬细胞数目、MMIF、巨噬细胞炎症蛋白lα(MIP-1α)、核闪子KBP65(NF-κBP65)蛋门表达.结果 各期矽肺患者BALF中巨噬细胞数量明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期矽肺患者BALF细胞块中MMIF、MIP-1α、NF-κBP65蛋白染色阳性细胞数明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),各期矽肺患者BALF中MMIF、MIP-1α、NF-κBP65染色阳性细胞数,差异有统计学意义(P<0.01).结论 矽肺患者BALF中巨噬细胞数目增多,MMIF、MIP-1α、NF-κBP65蛋白表达升高.     

锌对SiO2致大鼠肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的 观察锌对SiO2致肺泡巨噬细胞（alveolar macrophages,AMs）产生氧自由基的动态变化和超微结构、膜酶的影响。方法 对AMs产生的O2^-和H2O2进行原位显示、定量测定并做相关趋势分析;以ATPase作为膜功能酶改变的反映;在亚细胞水平观察细胞形态结构。结果 与单纯SiO2组比较,锌保护组AMs O2^-和H2O2反应强度降低,超微结构及膜酶损伤减弱。结论 锌能减弱SiO2致AMs氧自由基的反应强度,降低超微结构和膜酶的损伤,保护AMs。其作用机制可能与锌增强AMs抗氧化作用有关,给临床用药提供了理论指导。     

二氧化硅对矽肺患者肺泡巨噬细胞白细胞介素-1β表达的影响

目的 探讨二氧化硅(SiO2)刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)对白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响.方法 收集矽肺患者的肺泡灌洗液,分离培养AM,对照组加入无血清培养液,处理组加入含SiO2粉尘不含血清的培养液.两组在相同条件下分别培养3、6、12、18、24、36 h,用免疫细胞化学法和酶联免疫吸附(ELISA)方法检测AM细胞内及其培养上清中IL-1β的表达.结果 处理组AM胞质中的IL-1β表达呈双峰,3 h已有较高水平的IL-1β(平均吸光度值为0.2597±0.0102),并随刺激时间不同表达量不同,在12 h达最高浓度(平均吸光度值为0.3632±0.0076),且处理组AM胞质中IL-1β的表达在各个时间点均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);AM培养上清IL-1β的表达与细胞质内的情况一致.结论 SiO2可促进AM的IL-1β表达增高,IL-1β在肺纤维化形成过程中起较重要的作用.     

石英作用下的肺泡Ⅱ型上皮细胞培养液对肺泡巨噬细胞的作用

采用体外细胞培养实验方法，观察石英作用过的肺泡Ⅱ型细胞培养液，对石英尘毒作用下的肺泡巨噬细胞的影响。结果表明：该液能明显地保护肺泡巨噬细胞免受石英尘的损害，其机制可能与该培养液能抑制石英尘诱发肺泡巨噬脂质过氧化反应有关。也可能 清液中的表面活性物质能够有效地减低石英对肺泡巨噬细胞的细胞毒性有关。     

煤石英对大鼠肺泡巨噬细胞氧化系统的影响

利用染煤石英混合粉尘大鼠作为实验模型，研究在实验性大鼠煤矽肺形成过程中肺泡巨噬细胞氧化和抗氧化系统的改变。结果表明在染煤石英粉尘７天，脂质过氧化产物有轻度升高，至３０天时己恢复正常，超氧化物歧化酶在染尘后７天降低，以后恢复至正常，而还原型谷胱甘肽和谷胱甘肽过氧化物酶升高明显，这与石英所致肺泡巨噬细胞的变化明显不同，说明脂质过氧化反应在煤矽肺形成过程中作用不明显。     

煤工尘肺肺泡巨噬细胞形态学观察

观察１７例煤工尘肺患者肺胞巨噬细胞形态学变化表明，主要有３个特点：（１）肺胞巨噬细胞受损表现为细胞体积增大，伪足皱褶减少，细胞表面可见肉眼性结构以及细胞破坏：（２）肺胞巨噬细胞数量增加和肺泡巨噬细胞受粉尘的刺激有关。肺泡巨噬细胞可以在肺间质内或肺泡内分化；（３）肺泡巨噬细胞形态各异，既有幼稚型，又有功能衰退和坏死型。     

过氯酸铵对大鼠肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞影响的研究

目的通过探讨过氯酸铵(AP)对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)损伤及对肺成纤维细胞(FB)增殖的影响,研究AP的致肺纤维化作用。方法用AP浓度分别为0.5,1.0,2.0 mg/ml和SiO2浓度为0.1 mg/ml 的培养液培养AM,对照组采用RPMI1640培养液培养,24 h 后收集培养上清液,分别检测AM内MDA含量、GSH-Px活力以及上清液中LDH活力。并用AM上清液培养FB,检测FB增殖活力和FB内羟脯氨酸含量.结果 1.0,2.0 mg/ml AP组及SiO2组MDA含量(2.21,2.58,2.32 nmol/ml)均比对照组(1.97 nmol/ml)增加,差异有显著性或非常显著性(P＜0.05或P＜0.01); 2.0 mg/ml AP组及SiO2组GSH-Px活力(29.47,30.79 U/106 AM)比对照组(26.70 U/106 AM)明显增强,差异有显著或非常显著性(P＜0.05或P＜0.01); 0.5,1.0,2.0 mg/ml AP组和SiO2组LDH活力(151.03,252.31,446.50,583.88U/106 AM)均明显高于对照组(77.06U/106 AM,P＜0.05或P＜0.01), 且随AP染毒剂量的增加而升高。SiO2组AM上清液使FB羟脯氨酸含量(0.900 μg/ml)及增殖活力(0.165)明显高于对照组(0.379 μg/ml,0.138,P＜0.05或P＜0.01)。结论 AP对肺泡巨噬细胞具有一定的细胞毒作用,而AP染毒的AM上清液未发现有促进FB的增殖和胶原合成的作用。     

西北地区沙漠尘对大鼠肺巨噬细胞毒性的实验研究

目的探讨和田沙漠尘和民勤沙漠尘对大鼠肺巨噬细胞的毒性作用。方法用50、100、200、400、800、1600μg/ml的和田沙漠尘、民勤沙漠尘和SiO_2的混悬液培养肺巨噬细胞,用DMEM培养液培养肺巨噬细胞作为对照组,24 h后用MTT法测定肺巨噬细胞的存活率,并收集细胞及上清液,检测肺巨噬细胞内丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,上清液中LDH活力和转化生长因子(TGF-β_1)含量。结果与对照组比较,和田沙漠尘400μg/ml以上组、民勤沙漠尘100μg/ml以上组和SiO_2组的大鼠肺巨噬细胞存活率降低(P<0.05,P<0.01);随染毒剂量增加,大鼠肺巨噬细胞内MDA含量、GSH-Px活力,上清液中LDH活力、TGF-β_1含量均有增高趋势,和田沙漠尘和民勤沙漠尘浓度200μg/ml以上组MDA含量和GSH-Px活力高于对照组(P<0.05,P<0.01),和田和民勤沙漠尘浓度100μg/ml以上组和SiO_2组LDH活力高于对照组(P<0.01),两地沙漠尘浓度200μg/ml以上组和SiO_2组TGF-β_1含量高于对照组(P<0.01)。结论民勤沙漠尘和和田沙漠尘对肺巨噬细胞有一定的损伤作用,使肺巨噬细胞脂质过氧化作用增强,并能引起纤维化因子FGF-β_1的释放。     

一氧化氮等自由基对矽肺患者损伤效应的研究

检测７３例矽肺患者和６０例健康对照者血浆一氧化氮（Ｐ－ＮＯ）、维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）、过氧化脂质（Ｐ－ＬＰＯ）及红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｅ－ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ）和过氧化脂质（Ｅ－ＬＰＯ）值的结果表明,与对照组比较,患者组Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ、Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ、Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ平均值均显著降低（Ｐ＜０．００１）,Ｐ－ＮＯ、Ｐ－ＬＰＯ、Ｅ－ＬＰＯ平均值均显著升高（Ｐ＜０．００１）;上述检测值与患者病程、病情、肺功能状态均有相关;逐步回归表明,患者病程与Ｐ－ＮＯ、Ｐ－ＶＥ、Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＬＰＯ值相关最为密切;提示矽肺患者体内一氧化氮和氧自由基反应病理性加剧,氧化抗氧化平衡严重失调     

维生素A及维生素C对肺巨噬细胞产生活性氧及细胞因子的影响

目的 为观察维生素 A(VA)及维生素 C(VC)对肺巨噬细胞(肺 Mφ)功能的影响.方法 以大鼠为动物模型观察VA及VC对大鼠肺Mφ产生自由基(Q_2~-,H_2O_2)及细胞因子(IL-1,TNF-α)的影响.结果 补充 VA及 VC均明显增加肺Mφ的吞噬功能及O_2~-、H_2O_2 产生(P<0.01);补充 VA可明显增加细胞因子(IL-1,TNF-α)的产生(P<0.05),而补充VC效果不明显.结论 适当补充VA可活化肺Mφ,对防治呼吸道感染有重要意义.     

甲醛对豚鼠肺巨噬细胞DNA的损伤作用

为探讨甲醛对呼吸道的遗传性损伤和致肺癌机理，本研究以豚鼠的肺巨噬细胞为研究材料，采用碱洗膜膜过滤荧光分析分析方法，检测了甲醛对ＤＮＡ的损伤作用，结果表明，甲醛的急性细胞毒性较小，但能引起豚鼠巨噬细胞ＤＮＡ－说明甲醛对呼吸系统深部的细胞具有遗传性损伤，并进一步证实了具有遗传毒性。     

石棉对大鼠肺泡巨噬细胞毒作用的体外研究

本文研究了新康温石棉,加拿大(UICC)温石棉和石英粉尘,经5,10,15小时体外染尘对大鼠肺泡巨噬细胞的毒作用,结果表明各组细胞的存活率均随培养时间而下降,以石英组下降最快,加拿大组次之,各染尘组与对照组间有明显差异,染尘细胞的形态与功能有明显改变经光镜和电镜检查可见细胞迅速增大,内含多量不同大小的空泡,两石棉组不少细胞成锥形或梭形,肾形核双核和三核细胞明显增加,并有两巨噬细胞共吞长石棉纤维,三种粉尘均无例外地被吞噬,毒性有所差异以石英最大,认为此种差异由粉尘性质和形状不同所致.     

矽肺患者肺灌洗液巨噬细胞自噬与凋亡分析

[目的]研究不同期别矽肺患者肺灌洗回收液中巨噬细胞自噬活动强弱的变化以及与凋亡的联系.[方法]选择接尘观察对象、壹期、贰期、叁期矽肺患者各30例作为研究对象.调查职业史,并采用大容量全肺灌洗术,收集灌洗回收液,分离肺巨噬细胞.运用透射电子显微镜观察肺组织切片中自噬前体、自噬体、自噬溶酶体等,并检测肺巨噬细胞早期凋亡率. [结果]观察对象肺巨噬细胞胞核周围可观察到自噬体;壹期矽肺患者肺巨噬细胞胞核附近可观察到自噬前体、胞浆中其他细胞器均较少见;贰期矽肺患者肺巨噬细胞胞核周围自噬体、自噬溶酶体较多见;叁期矽肺患者肺巨噬细胞胞浆中可见成群大小不等初级溶酶体,但未观察到典型的自噬前体、自噬体、自噬溶酶体.观察对象、壹期、贰期、叁期矽肺患者肺巨噬细胞凋亡率分别为(15.28±0.20)％、(18.13±0.58)％、(19.56±1.07)％、(23.92±2.52)％,各组间凋亡率差异有统计学意义(P＜ 0.01). [结论]不同期别矽肺患者肺巨噬细胞自噬活动强弱以及凋亡程度不同,巨噬细胞自噬与凋亡在矽肺纤维化发生发展中可能起一定作用.     

矽肺患者肺功能分析

目的探讨矽肺患者肺功能受损情况。方法对57例矽肺患者最大肺活量（VCmax）,用力肺活量（FVC）,1秒时间用力呼出量（FEV1）,1秒时间用力呼出量与用力肺活量之比（FEV1／FVC）,最大呼气中期流速（MMEF）,25％、50％、75％肺量时的最大呼气流量（V25、V50、V75）,肺总量（TLC）,残气量（RV）,残总比（RV／TLC）,肺弥散量（DLCO）等肺功能指标进行测定分析。结果I期与Ⅱ期矽肺患者肺功能损伤以混合型为主,且I期矽肺患者FEV1％、FEV1／FVC、V25、V50、MMEF测定值与Ⅱ期矽肺患者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论矽肺患者肺功能损伤明显,且随矽肺期别增加而加重,损伤类型以混合为主。Ⅱ期矽肺患者大、小气道的阻塞较I期矽肺病人加重。     

实验性矽肺大鼠脂质过氧化损伤与抗氧化损伤的动态观察

本文对实验性矽肺大鼠肺组织的脂质过氧化损伤和抗氧化损伤进行了动态观察。结果发现:(1)实验组肺组织膜脂质过氧化物丙二醛含量1—9周均显著高于对照组,3周时最高;(2)超氧化物歧化酶含量2—9周显著低于对照组,3周时最低;(3)谷胱甘肽过氧化物酶活力1—9周显著低于对照组;(4)还原型谷胱甘肽含量先降低后升高,3周后保持在高于对照组水平上。