复元胶囊对大鼠实验性骨关节炎软骨IL-6、bFGF的干预研究

目的:研究复元胶囊对大鼠实验性骨关节炎(OA)软骨白细胞介素-6(IL-6)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:Hulth法复制大鼠OA模型,随机分为对照、模型、四环素和复元胶囊高、中、低剂量组。灌胃给药,每天1次,连续10周。10周后取软骨标本,行大体观察、Mankin’s评分及免疫组化测定软骨中IL-6、bFGF的表达水平,并将IL-6、bFGF的表达水平与Mankin’s评分指数进行Pearson相关分析。结果:复元胶囊各组关节软骨Mankin’s评分、IL-6表达水平均低于模型组(P<0.01或P<0.05),bFGF表达水平均高于模型组(P<0.01);复元胶囊各剂量组Mankin’s评分差异具有显著性(P<0.05),IL-6表达水平与关节病理改变的Mankin’s评分指数呈正相关(P<0.01),bFGF表达水平与关节病理改变的Mankin’s评分无明显相关。结论:复元胶囊能下调大鼠OA软骨IL-6的表达,上调bFGF的表达,其作用呈剂量依赖性。高剂量复元胶囊抗大鼠OA作用与四环素相当。     

川芎嗪对膝骨性关节炎大鼠软骨下骨中miR-20b/VEGF和BMP2/Smad1通路的影响

目的:研究川芎嗪对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠软骨下骨中微小核糖核酸miR-20b/血管内皮生长因子(VEGF)和骨形态发生蛋白2(BMP2)/Smad1通路的影响,并探讨川芎嗪防治KOA的作用机制。方法:取健康雄性SD大鼠18只,随机分为正常对照组、模型组、川芎嗪组,每组6只。对后两组大鼠通过膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶溶液建立KOA模型。末次注射后第2天起,川芎嗪组大鼠灌胃川芎嗪混悬液(100 mg/kg)2 m L,正常对照组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续6周。给药结束后,暴露大鼠双侧膝关节软骨进行大体情况观察。截取大鼠膝关节,进行切片和苏木精-伊红(HE)染色,在显微镜下观察组织病理学变化,并采用改良的Mankin’s评分进行组织学评分。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠软骨下骨组织中VEGF、BMP2、Smad1的mRNA表达和miR-20b表达水平;采用Western Blot法检测VEGF、BMP2、Smad1的蛋白表达水平。结果:模型组和川芎嗪组大鼠的膝关节均出现不同程度的软骨损伤;与正常对照组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织Mankin’s评分显著升高(P<0.01);软骨下骨组织中BMP、Smad1的m RNA和蛋白表达以及miR-20b表达水平均显著降低,VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,川芎嗪组大鼠关节软骨组织Mankin’s评分显著降低(P<0.01);软骨下骨组织中BMP、Smad1的mRNA和蛋白表达以及miR-20b表达水平均显著升高,VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:川芎嗪能修复KOA模型大鼠损伤的关节软骨,其机制可能是通过上调软骨下骨中miR-20b表达水平,促进VEGF mRNA降解继而抑制VEGF蛋白的表达,同时激活BMP-2/Smad1信号通路而实现的。     

闹羊花毒素Ⅲ介导氧化应激途径对创伤后骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的 探讨闹羊花毒素Ⅲ对创伤后骨关节炎大鼠软骨损伤的影响及其作用机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组(根据交叉韧带切断法建模)、低剂量实验组(建模后灌胃给予0.12 mg·kg^-1闹羊花毒素Ⅲ)、高剂量实验组(建模后灌胃给予0.24 mg·kg^-1闹羊花毒素Ⅲ)、阳性药物组(建模后灌胃给予2 mL/100 g的硫酸氨基葡萄糖),每组10只大鼠,连续灌胃28 d后,心脏采血并处死大鼠取软骨组织备用。以Mankin’s评分法分析各组大鼠软骨组织情况,以蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达水平,以酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清骨形成指标及软骨组织中相关因子表达水平,以试剂盒法检测氧化应激相关指标的表达水平。结果 假手术组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和阳性药物组的Mankin’s评分分别为(0.10±0.30)、(5.30±0.46)、(4.00±0.63)、(3.10±0.54)和(1.50±0.81)分,骨钙素(BGP)水平分别为(10.25±0.77)、(2.39±0.34)、(4.87±0.27)、(7.99±0.5...     

MMP-1、MMP-13在大鼠骨关节炎软骨中的表达

目的观察MMP-1和MMP-13在大鼠前交叉韧带切断加内侧半月板切除的骨关节炎模型中的表达,探讨MMP-1和MMP-13表达与骨关节炎(OA)进程的关系。方法将25只SD大鼠右膝行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术(ACLT+MMx),对侧作为空白对照,分别于术后1周、2周、4周、6周、10周处死,每次随机处死5只,另取5只SD大鼠仅行右膝关节切开术作为假手术组,于术后10周处死,对膝关节软骨标本进行大体和组织学切片观察及评分,用ELISA法检测MMP-1、MMP-13在关节软骨中的表达。结果 ACLT+MMx组Mankin评分由1周的1.0分到4周的6.2分发展到10周的13.6分,与假手术组及空白对照组相比有显著差异(P<0.01)。ACLT+MMx组MMP-13的表达在OA早期增高,中重度期后出现明显下降趋势(P<0.01);MMP-1的表达则随着病程持续升高,与病变严重程度呈正相关性(P<0.01)。假手术组及空白对照组软骨细胞几乎不表达MMP-1及MMP-13。结论 MMPs在OA的发病机制中有重要作用,MMPs各亚型在OA进程中的表达各不相同。     

利拉鲁肽对膝骨关节炎大鼠炎症反应的影响

目的 探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽对膝骨关节炎大鼠模型炎症反应的改善作用.方法 选取成年雄性SD大鼠60只,分为模型组、假手术组和利拉鲁肽组,每组20只.模型组和利拉鲁肽组大鼠通过关节腔内注射单碘乙酸盐(MIA,4 mg)诱导大鼠膝骨关节炎模型.假手术组大鼠关节腔内注射相同体积的生理盐水.拉鲁肽组大鼠皮下注射利拉鲁肽(50μg·kg-1·d-1)用于上调GLP-1受体(GLP-1R)的表达,共处理4周.蛋白质印迹法(Western blotting)检测GLP-1R、蛋白激酶A(PKA)、环状单磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、Ⅱ型胶原(collagenⅡ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4(ADAMTS-4)的表达.免疫沉淀技术检测GLP-1R与PKA/CREB信号通路之间的相互作用.结果 与假手术组相比,模型组大鼠膝关节软骨组织中GLP-1R的蛋白相对表达量明显下调[(1.12±0.11)比(0.34±0.04)],而利拉鲁肽组(0.87±0.07)明显高于模型组(P<0.05).与假手术组相比,模型组大鼠膝关节软骨组织中PKA和CREB的磷酸化情况均被显著抑制(P<0.05),利拉鲁肽处理可显著提高PKA和CREB的磷酸化水平(P<0.05).模型组大鼠膝关节软骨组织中的aggrecan和collagenⅡ蛋白水平显著降低,利拉鲁肽组的两种蛋白的表达均显著升高(P<0.05).与假手术组相比,模型组大鼠的TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-13和ADAMTS-4蛋白表达水平均显著上调,利拉鲁肽处理可显著抑制膝骨关节炎大鼠膝关节软骨组织中上述因子的上调(P<0.05).结论 利拉鲁肽在膝骨关节炎大鼠模型中具有较好抗炎活性,可显著改善膝关节软骨组织.     

隐丹参酮调节HIF-1α/BNIP3信号通路对兔膝骨关节炎模型软骨细胞自噬和凋亡的影响

目的 探究隐丹参酮调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/腺病毒E1B19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路对兔膝骨关节炎（KOA）模型软骨细胞自噬和凋亡的影响。方法 取新西兰兔并以改良Videman法构建兔KOA模型,随机分为模型组、空载组、隐丹参酮组、HIF-1α敲低组、隐丹参酮+HIF-1α敲低组,每组9只;另取9只新西兰兔为对照组。分组干预后以Lequesne MG的膝关节级别评估法对兔膝关节临床症状（局部疼痛、步态、关节活动、关节肿胀）进行评分;HE染色检测兔膝关节软骨组织的退变情况并进行改良Mankin’s评分;TUNEL染色检测兔膝关节软骨组织细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测兔血清炎性因子白细胞介素（IL）-6、IL-18、IL-10水平;蛋白免疫印迹实验检测兔膝关节软骨组织自噬（LC3、Beclin-1）、凋亡（Bax、Cleaved Caspase-3）和HIF-1α/BNIP3信号通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组兔膝关节软骨组织出现明显退变症状,局部疼痛、步态、关节活动及关节肿胀评分、改良Mankin’s评分、凋亡率、血清IL-1...     

吉非替尼通过调控表皮生长因子受体影响兔膝骨关节炎软骨损伤作用的机制

目的 研究吉非替尼通过调控表皮生长因子受体(EGFR)影响兔膝骨关节炎模型软骨损伤作用机制.方法 将30只新西兰兔随机分为假手术组、模型组、吉非替尼组,模型组与吉非替尼组均采用Hulth-Telhag方式制成膝骨关节炎模型,假手术组仅剪开关节全不做任何处理,造模成功后吉非替尼组给予吉非替尼灌胃给药85 mg/kg,1次/天,其他组给予等量的生理盐水,连续给药4周.停药1周后苏木精-伊红(HE)染色观察软骨病理组织情况及Mankin′s评分,原位末端标记法(TUNEL)染色观察软骨细胞凋亡情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测兔关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.免疫组化法检测软骨组织中骨代谢标志物Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)阳性表达情况,蛋白质印迹法(Western blotting)检测软骨组织中EGFR、丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白的表达情况.结果 与假手术组相比,模型组关节软骨层明显变薄,并且有溃裂和裂隙情况存在,同时软骨柱状排列消失,结构遭到严重损坏,软骨细胞明显减少,与模型组相比,吉非替尼组软骨病理损伤情况更严重,且三组Mankin′s评分[(0.32±0.13)分、(7.38±0.28)分、(8.65±0.27)分]关系为假手术组<模型组<吉非替尼组(均P<0.05);三组间软骨凋亡率[(4.12±0.38)％、(29.83±3.05)％、(37.61±3.72)％]、IL-1β[(541.23±27.28)ng/L、(738.61±68.37)ng/L、(825.42±75.19)ng/L]、TNF-α[(49.31±7.28)ng/L、(82.62±25.42)ng/L、(95.05±32.56)ng/L]水平之间的关系均为假手术组<模型组<吉非替尼组(均P<0.05);COL-Ⅱ阳性表达率间的关系为吉非替尼组<模型组<假手术组(均P<0.05),MMP-13阳性表达率间的关系为假手术组<模型组<吉非替尼组(均P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,吉非替尼组中EGFR蛋白磷酸化水平显著低于模型组,模型组又显著低于假手术组,同时吉非替尼组中p38MAPK蛋白磷酸化水平显著高于模型组,模型组又显著高于假手术组(均P<0.05).结论 吉非替尼通过抑制EGFR磷酸化活化p38MAPK信号途径,促进MMP-13蛋白表达,降解COL-Ⅱ,同时促进软骨处炎症细胞因子水平,从而加重软骨损伤.     

氨基葡萄糖硫酸盐对兔膝关节骨关节炎的保护作用研究

目的研究氨基葡萄糖硫酸盐对兔骨关节炎的保护作用,并探讨其作用机制。方法大耳成年家兔分为对照组、模型组、硫酸氨基葡萄糖胶囊(250 mg/kg)组和氨基葡萄糖硫酸盐63、125、250 mg/kg组,每组8只。右膝Hulth手术方法建立骨关节炎模型。术后第1天开始给药,各给药组的给药体积均为5 m L/kg,对照组给予等容量双蒸水,1次/d,连续40 d,每天驱赶动物行走0.5~1.0 h。观察动物体质量变化,计算关节活动度。肉眼和手术显微镜下进行膝关节腔大体观察;HE和甲苯胺蓝染色,光镜下观察软骨组织结构、细胞数量、甲苯胺蓝染色和潮线完整性,并按Mankin’s评分标准对其退变程度进行评分。滑膜组织常规制片和HE染色,光镜下观察其病理学改变并评分。邻苯三酚法测定兔红细胞中SOD活性。结果与给药前比较,氨基葡萄糖硫酸盐各剂量组体质量变化均有不同程度的增加,但差异均无统计学意义。与模型组比较,氨基葡萄糖硫酸盐各剂量关节活动度均有不同程度的增加,尤以氨基葡萄糖硫酸盐250 mg/kg组明显(P0.05)。与模型组比较,氨基葡萄糖硫酸盐各剂量组关节炎软骨大体评分均明显降低(P0.01),表现为一定的量效关系。氨基葡萄糖硫酸盐各剂量组的Mankin’s评分的组织结构、细胞数量、基质染色和潮线完整性评分均有一定程度的好转(P0.05、0.01)。与模型组比较,氨基葡萄糖硫酸盐不同剂量组能不同程度地降低滑膜评分,尤以氨基葡萄糖硫酸盐125、250 mg/kg组作用明显(P0.05、0.01)。与模型组比较,氨基葡萄糖硫酸盐各剂量组均能不同程度提高兔红细胞中SOD活性,尤以氨基葡萄糖硫酸盐250 mg/kg组作用明显(P0.05)。结论氨基葡萄糖硫酸盐对兔骨关节炎具有明显的保护作用,且存在剂量相关性,其作用机制与减轻滑膜慢性炎症反应,提高红细胞SOD活性有关。     

骨瓜提取物对大鼠类风湿关节炎HA、IL-1β、BMPs及MMP-1的影响

目的观察骨瓜提取物注射液对大鼠类风湿关节炎关节滑膜骨形态发生蛋白(BMPs)、软骨细胞MMP-1阳性表达及关节积液透明质酸(HA)、白细胞介素-1β亚型(IL-1β)的影响,探讨其作用机制。方法大鼠40只,随机分为空白对照组、模型组、骨瓜小剂量组及骨瓜大剂量组,分别于模型组、骨瓜小剂量组、骨瓜大剂量组大鼠右膝关节腔内多点注射小牛软骨Ⅱ型胶原加福氏完全佐剂0.1 m L,制备类风湿性关节炎动物模型,造模成功后,骨瓜小剂量组、骨瓜大剂量组分别用骨瓜提取物注射液肌注治疗21 d,于治疗第1、7、14、21天,分别测定四组大鼠关节积液中HA及IL-1β含量;检测滑膜BMPs及MMP-1阳性表达,测量右足趾关节以下部位的容积并计算足肿胀度,记录各组动物消肿时间,评价骨瓜提取物注射液对大鼠类风湿性关节炎的治疗效果。结果治疗下14、21 d时,骨瓜小剂量组、骨瓜大剂量组MMP-1阳性表达及关节积液中IL-1β明显降低,BMPs及HA含量明显升高,消肿时间缩短,足肿胀度明显优于模型组,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),骨瓜小剂量组、骨瓜大剂量组间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论骨瓜提取物注射液可促进类风湿关节炎模型大鼠关节积液HA及BMPs分泌与合成,降低软骨细胞MMP-1阳性表达,抑制炎性介质IL-1β对关节滑膜的侵蚀而起到保护关节的作用。     

芦荟多糖对大鼠骨关节炎治疗作用的体内和体外研究 #br#

目的 通过体外和体内实验探究芦荟多糖（APS）对大鼠骨关节炎（OA）的治疗作用。方法 体外分离SD 乳鼠的关节软骨细胞,培养至2代后,通过CCK-8法筛选实验组APS安全剂量。后续通过检测DNA含量和糖胺聚糖 （GAG）分泌量评估软骨细胞的增殖和基质降解情况,实时荧光定量PCR检测OA相关基因表达情况,酶联免疫吸附 测定（ELISA）法检测炎症因子水平;通过HE染色、番红O和免疫荧光染色等来观察其抗炎和软骨保护效果;并进一 步在SD大鼠骨关节炎模型中探究其作用效果。结果 通过CCK-8法筛选出剂量为5、10、20 g/L的APS作为低、中、 高剂量组。各剂量组的DNA含量均显著高于模型组（P＜0.05）;高剂量组GAG分泌量高于模型组（P＜0.05）。高剂 量组的蛋白聚糖（ACAN）和Ⅱ型胶原（COL2A1）基因表达水平相对模型组显著上调（P＜0.05）,而肿瘤坏死因子 （TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、基质金属蛋白酶（MMP）-3和MMP-13基因表达显著下调（P＜0.05）。低、中、高剂量 组TNF-α和IL-6的分泌量显著低于模型组（P＜0.05）,HE和番红O染色也显示APS实验组的细胞形态较模型组好, MMP-13免疫荧光显示高剂量组的表达量显著低于模型组（P＜0.05）。体内实验软骨组织番红O染色及国际骨关节 炎研究学会（OARSI）软骨损伤评分结果显示APS干预的实验组关节软骨损伤程度明显低于模型组（P＜0.05）。结论 APS对OA具有一定的抗炎和软骨保护作用。     

复元胶囊对兔膝骨关节炎MMP-3、IL-1及SOD含量的影响

目的观察复元胶囊对兔膝骨关节炎（KOA）软骨组织变化及血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、白细胞介素-1（IL-1）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）含量的影响。方法新西兰兔32只,随机分为复元胶囊组、壮骨关节丸组、模型组和正常组,除正常组外,其余各组均按照Hulth法造模建立膝KOA动物模型,复元胶囊组、壮骨关节丸组分别给予复元胶囊组、壮骨关节丸灌胃,正常组及模型组给予0．9％氯化钠溶液。灌胃4周后分别随机选取6只采取血清检测SOD活性及MMP．3、白细胞介素-1（IL-1）的含量,采用HE染色光镜观察软骨组织病理改变。结果复元胶囊组软骨细胞明显增加,微血管管壁基本恢复正常,复元胶囊组血清中MMP-3、IL-1含量低于其他组（P〈0．05）;SOD含量高于其他组（P〈0．05）。结论使用复元胶囊可显著降低兔膝关节局部MMP-3、白细胞介素-1（IL-1）的含量,提高SOD的活性,从而有利于抑制滑膜炎症,缓解KOA早期的疼痛、肿胀症状,延缓关节软骨的退变。     

基于AMPK/mTOR信号通路研究膝痹宁方对膝骨关节炎模型大鼠的改善作用机制

目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探究膝痹宁方（XBN）对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠的改善作用机制。方法 将36只大鼠随机分为空白组、模型组、XBN组（12.56 g/kg）、XBN+二甲双胍（AMPK激动剂）组[12.56 g/kg XBN+100 mg/kg二甲双胍],每组9只。除空白组外,其余各组大鼠均通过离断前交叉韧带的方法复制KOA模型。造模成功后,各组大鼠给予相应药物/生理盐水,XBN和生理盐水每天灌胃1次,二甲双胍隔天腹腔注射1次,连续4周。观察大鼠软骨组织病理形态学变化并进行Mankin评分,检测大鼠软骨组织中聚集蛋白聚糖（Aggrecan）的表达水平,血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS-4)、ADAMTS-5、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、MMP-13的mRNA和蛋白表达水平,及AMPK、mTOR蛋白的磷酸化水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠软骨组织结构分层紊乱,软骨层基质淡染,潮线出现扭曲或中断,Mankin评分显著升高（P<0.05）;软骨组织中Aggrecan蛋白表达水平和AMPK蛋白的磷...     

膝骨性关节炎的发病机制及降钙素的治疗作用

目的探讨膝骨性关节炎(KOA)的发病机制及降钙素(CT)的治疗作用。方法 36只白兔随机均分为空白对照组(A组)、KOA模型组(B组)、CT 5U.kg-1.d-1治疗组(C组)。20d后处死动物,检测血清及关节液超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量,HE染色观察关节软骨病理组织学变化,免疫组织化学染色法检测软骨组织Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶1(MMP-1)蛋白表达情况。结果与A组相比,B组关节软骨损伤加重,Mankin’s评分、MDA及NO含量、MMP-1蛋白表达增加(P<0.05),SOD活性及Ⅱ型胶原含量降低(P<0.05);而C组能明显逆转B组上述各观察指标的改变过程(P<0.05)。结论 KOA的发生与机体氧化-抗氧化系统、细胞外基质合成-分解代谢系统的失衡密切相关,且CT对KOA的治疗作用与这两个系统失衡的恢复有关。     

苍术内酯对骨关节炎大鼠软骨损伤修复和软骨细胞凋亡的影响

目的 探讨苍术内酯（AT）对骨关节炎大鼠软骨损伤修复和软骨细胞凋亡的影响及其可能作用机制。方法 60只7～8周龄SPF级雄性SD大鼠，48只大鼠采用前后交叉韧带断离术建立骨关节炎（OA）模型，造模成功大鼠采用随机分为模型组、AT低、中、高剂量组，各12只，另设对照组（12只）。AT低、中、高剂量组腹腔注射5、10、20 mg/kg AT，对照组及模型组给予等量生理盐水，连续30 d。观察大鼠软骨组织形态计算Mankin’s评分；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平；苏木精-伊红（HE）染色观察软骨组织病理学变化；TUNEL法检测大鼠软骨组织细胞凋亡情况；实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测大鼠软骨组织中微RNA-98-5p(miR-98-5p)表达、高迁移率族蛋白2(HMGA2)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA表达；蛋白质印迹法（Western blotting）检测大鼠HMGA2、GSK-3β、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关...     

白芍总苷对大鼠胶原性关节炎体质量及足肿胀度和足爪组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的 研究白芍总苷(TGP,抗变态反应药)对大鼠胶原性关节炎(CIA)及足爪组织MMP-9表达的影响.方法 用鸡Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,观察药物对CIA大鼠体质量及足肿胀度的影响,用免疫组化法观察大鼠足爪组织中MMP-9蛋白的表达.结果 TGP可有效缓解CIA大鼠体质量减轻,明显抑制CIA大鼠足爪肿胀;大、中剂量TGP组的足爪组织MMP-9阳性表达较模型对照组明显降低,有非常显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 TGP可明显改善CIA大鼠症状,其机制可能与其下调MMP-9表达、降低血清IL-1β水平有关.     

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对大鼠胶原性关节炎的治疗作用

目的　研究重组人白细胞介素 1受体拮抗剂 (recom binanthumaninterleukin1receptorantagonist, rhIL 1ra)对大鼠胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)的治疗作用。方法　SD大鼠随机分为 6组:正常对照组、模型组、rhIL 1ra3个剂量组和进口IL 1ra组;采用Ⅱ型胶原(CⅡ)乳剂皮内注射诱导大鼠CIA模型;每周测体重观察体重变化;足爪容积法测量大鼠足爪肿胀度;测定CⅡ的迟发性变态反应(DTH);ELISA法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平;同时进行病理组织学的检查。结果　CIA大鼠在致炎d10,出现关节红、肿,体重减轻,血清抗CⅡ抗体水平升高,关节病理可见滑膜增生,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨和骨的破坏等。rhIL 1ra(7 5, 30, 120mg·kg-1 )和阳性对照组anakinra(120mg·kg-1 )皮下注射,连续 7d,能明显抑制CIA大鼠足肿胀;rhIL 1ra(30, 120mg·kg-1 )皮下注射,连续 7d,可以明显减轻CⅡ诱发的迟发性变态反应 (DTH);另外,rhIL 1ra也可明显降低CIA大鼠血清中抗CⅡ抗体的水平;病理学检查表明,rhIL 1ra大剂量能明显减轻CIA大鼠关节滑膜炎症和滑膜增生,减轻血管翳和软骨破坏。结论　rhIL 1ra对CIA具有治疗作用。     

诱导多能干细胞来源间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗作用

目的 研究诱导多能干细胞来源间充质干细胞(iPSC-MSCs)对大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用。方法 采用Hulth法建立大鼠OA模型,编号后运用Excel表格随机分组功能将其分为模型组、iPSC-MSCs组、人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)组、玻璃酸钠(HA)阳性对照组,另设假手术组作为对照,每组10只。除HA组动物多次给药(每周1次,共给药5次)外,其它各组均单次给药,每次每只动物在术侧关节腔注射50 μL药物iPSC-MSCs和hUC-MSCs,假手术组和模型组同法给予生理盐水。给药5周后处死动物,观察iPSC-MSCs对关节直径差值、关节腔结构及评分、关节面评分、病理学评分等指标的影响;检测膝关节基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-5表达情况。结果 iPSC-MSCs和hUC-MSCs给药均可显著降低膝关节面Pelletier评分、关节直径和病理Mankin评分,改善关节腔结构,降低X线评分和关节肿胀,且iPSC-MSCs较hUC-MSCs给药在降低Pelletier评分[(1.22±0.67)比(2.00±0.71),P=0.021]方面差异有统计学意义;相比于模型组,iPSC-MSCs关节腔注射给药可显著增加软骨层CollagenⅡ表达[(35.87±8.52)比(69.90±7.65),P＜0.01],降低MMP-13[(59.25±5.56)比(33.75±5.85),P＜0.01]和ADAMTS-5[(52.25±10.47)比(22.25±6.13),P＜0.01]表达水平,且与hUC-MSCs给药差异有统计学意义,iPSC-MSCs组与hUC-MSCs组CollagenⅡ、MMP-13、ADAMTS-5值分别为[(69.90±7.65)比(61.00±5.52),P=0.010]、[(33.75±5.85)比(43.25±6.02),P=0.028]、[(22.25±6.13)比(36.50±4.65),P=0.011]。结论 关节腔注射iPSC-MSCs可显著改善OA大鼠关节病理,具有明显的软骨保护作用。     

强力霉素治疗兔实验性骨关节炎的疗效及其作用机制的研究

目的:研究强力霉素局部给药对骨关节炎软骨的影响及其作用机制。方法:通过关节内注射木瓜蛋白酶,建立家兔膝关节炎模型。每日关节穿刺给予2、4 mg强力霉素,共4周,观察指标包括软骨大体形态,软骨Mankin's评分,软骨细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达,关节液中NO含量和一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:与正常对照组相比,模型对照组软骨面粗糙,见大量裂隙,局部纤维覆盖,边缘骨赘多,Mankin's评分显著增高,MMP-13表达、NO含量和NOS活性均显著升高(P<0.01)。给予2 mg强力霉素后,软骨面粗糙稍好转,裂隙数量减少,边缘骨赘小而少,Mankin's评分显著降低,MMP-13表达、NO含量和NOS活性均显著降低(P<0.01)。给予4 mg强力霉素后,上述改变更加显著。结论:强力霉素关节腔内给药对家兔骨关节炎软骨退变起到明显缓解效果,且其作用有剂量相关性,作用机制与抑制NO产生、NOS活性和MMP-13表达有关。     

兔膝骨性关节炎软骨损伤及降钙素的保护作用

目的:探讨兔膝骨性关节炎(KOA)时的软骨损伤及降钙素(CT)的保护作用.方法:将36只健康大耳白兔随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)和CT治疗组(C组),B、C组采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,A组除切开皮肤和关节腔外,不做其他处理,从术后第6周开始C组每天皮下注射CT 5 U/kg,A、B组给与等量生理盐水皮下注射,连续注射20d后处死动物.观察关节软骨病理组织学和关节液肿瘤坏死因子(TNF)-α、一氧化氮(NO)及关节软骨Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶(MMP)-1的变化,以及降钙素对上述指标的影响.结果:与A组相比较,B组JP和Mankin’S评分升高,关节软骨损伤加重,关节液中TNF-α、NO水平升高(P＜0.05),关节软骨Ⅱ型胶原含量降低,MMP-1活性升高(P＜0.05);与B组相比,C组关节液中TNF-α、NO水平降低(P＜0.05),关节软骨损伤减轻、Ⅱ型胶原含量升高,MMP-1活性降低(P＜0.05).结论:CT可能通过抑制TNF-α、NO的表达而对KOA软骨损伤起保护作用.     

膝关节骨性关节炎与髋关节退变的相关性研究

目的探讨膝关节骨性关节炎与髋关节退变的相关性,以指导临床治疗工作。方法创建一类去双前肢直立联合Malthus法模型,以该模型为基础检测各项指标,其宗旨是明确膝关节骨性关节炎与髋关节退变间的关联性。结果对HE、甲苯胺蓝、CollagenⅡ、MMP-13进行染色,进而其他组相比较,Hulth组大鼠膝关节软骨Mankin评分与MMP-13阳性细胞比例最高、CollagenⅡ阳性细胞比率最低;和其他组相比,Malthus组大鼠同侧髋关节软骨Mankin评分与MMP-13阳性细胞比例最高、CollagenⅡ阳性细胞比率最低,软骨退行病变最严重。膝关节骨性关节炎(KOA)患者中,膝关节疼痛、僵硬、关节活动范围减缩以及X线检查结果和髋关节对应症状无相关性或相关性微小。结论去双前肢直立联合Malthus组大鼠膝关节退变更为显著,大鼠的KOA可促使其髋关节退变更为严重化,对统计学结果进行分析,得出人体KOA和髋关节的退变之间无相关性的结论。