胆囊结石与胆囊黏膜及胆汁幽门螺杆菌、磷脂酶A2的关系

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与胆囊结石形成之间的关系.方法 PCR法和快速尿素酶法分别检测胆囊结石患者胆囊黏膜及胆汁Hp DNA和尿素酶,酸滴定法测定胆囊黏膜和胆汁磷脂酶A2(PLA2)活性,并做黏膜和胆汁普通、厌氧和Hp培养.结果黏膜Hp DNA阳性检出率45.24%,胆汁阳性检出率35.71%,其中胆汁Hp DNA检测结果阳性者,其黏膜检测结果均阳性.黏膜Hp DNA阳性组胆汁中PLA2的活性显著高于阴性组胆汁,分别为(480.92±164.21)U/L,(225.01±79.01)U/L;黏膜之间的PLA2活性差异无统计学意义(P＞0.05).黏膜及胆汁尿素酶检测均为阴性,普通、厌氧和Hp培养阴性.结论胆囊结石患者存在Hp感染因素,并可能通过PLA2促进胆囊结石形成.     

椎间盘内注射医用臭氧对椎间盘退变模型自身免疫反应的影响

目的:观察椎间盘内注射医用臭氧对椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)动物模型自身免疫反应的影响,探讨其作用机理.方法:50只新西兰兔随机分为A、B、C、D、E共5组,其中A组为正常组,不作处理;B组为假手术组,仅暴露纤维环而不穿刺;C、D、E组采用后外侧纤维环穿刺的方法建立腰椎间盘退变模型(L6/7),在造模后14dD组模拟临床手术椎间盘内注射臭氧干预,E组椎间盘内注射医用纯氧,于造模后14d、21d对5组动物进行自由行走疼痛行为学评分,并于21d获取各组动物外周血,L6、L7神经根及L6/7髓核,运用透射比浊法测定各组动物血清中免疫球蛋白IgG和IgM水平,ELISA法测定血清中TNF-α、IL-1、IL-6的含量;免疫组化染色观察髓核中抗原抗体复合物沉积情况,应用图像分析系统记录染色阳性细胞的累积光密度值(integrated optical density,IOD);BCA蛋白定量法检测腰神经根中PLA2的活性.结果:造模后1周左右(平均7.4d)C、D、E组动物手术侧后肢活动减少,并在爬行前进时明显偏离手术侧,行走疼痛学评分分别为2.81±0.13分、2.69±0.11分、2.64±0.31分,组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);D组注射臭氧后上述异常行为逐渐减轻,处死前行走疼痛学评分为0.54±0.12分,低于C组(2.75±0.17分)及E组(2.52±0.96分)(P＜0.05);D组动物血清中IgG、IgM水平(6.05±0.49g/L,1.98±0.28g/L)低于C组(8.98±0.77g/L,2.40±0.25g/L)及E组(8.52±0.63g/L,2.91±0.3 1g/L) (P＜0.05),与A组(5.43±0.29g/L,1.72±0.15g/L)及B组(4.97±0.35g/L,1.66±0.27g/L)比较差异无统计学意义(P＞0.05);D组炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6的含量(98±11pg/ml,247±21pg/ml,149±23.4pg/ml)亦低于C组(256±39pg/ml,404±19pg/ml,231±41.3pg/ml)及E组(244±45pg/ml,410±15pg/ml,249±21.7pg/ml) (P＜0.05),与A组(70±6pg/ml,223±17pg/ml,141±12.6pg/ml)及B组(79±1 1pg/ml,238±32pg/ml,138±17.4pg/ml)比较差异无统计学意义(P＞0.05);D组髓核中抗原抗体复合物阳性沉积光密度值(7.40±3.56)小于C组(27.49±12.84)及E组(29.55±10.38)(P＜0.05),其相应节段腰神经根PLA2活性(0.0189±0.0072μmol/min·L)较C组(0.1685±0.0103μmol/min·L)及E组(0.1994 ±0.080μmol/min·L)明显下降(P＜0.01),与A组(0.0036±0.0081μmol/min·L和B组(0.0098±0.0043 μmoL/min·L)比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:医用臭氧能够在一定程度上抑制腰椎间盘退变模型中异常的自身免疫反应,这可能是臭氧治疗椎问盘退变引起的腰痛的作用机制之一.     

解脲支原体感染患者精浆中细胞因子对精子活力的影响

目的 观察解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)感染患者精浆中细胞因子的变化对精子活力的影响.探讨Uu对精子活力影响的免疫机制.方法 采用ELISA方法对Uu阳性组(44例)、治疗后转阴组(30例)和正常对照组(14例)精浆中的IL-8、IL-10、TNF-α,抗精子抗体(AsAb)进行检测.使用全自动精子分析仪对精子活力(路径速度、前向速度和活动率)进行分析.结果 Uu阳性组的IL-8、IL-10和TNF-α分别为(157.2±74.6)pg/ml、(315.4±112.5)pg/ml和(223.6±89.7)pg/ml,明显高于正常对照组IL-8、IL-10和TNF-α的(78.7±28.6)pg/ml、(158.2±56.3)pg/ml和(84.3±47.9)pg/ml,两组差异比较具有统计学意义(P<0.01).治疗转阴后该组IL-8、IL-10和TNF-α分别为(114.3±61.5)pg/ml、(237.2±86.1)pg/ml和(152.6±83.5)pg/ml,也显著下降(P<0.05).同时精子活力亦随三种细胞因子的下降而明显提高.结论 Uu可引起精浆中细胞因子紊乱,AsAb阳性率增高,使精子凝集、活力下降,从而生育能力下降.Uu转阴后细胞因子趋于正常,精子的活力也得以提高.     

西罗莫司对创伤小鼠脾脏树突状细胞诱导T淋巴细胞应答能力的影响

目的 了解西罗莫司对创伤小鼠脾脏树突状细胞(DC)诱导异源性T淋巴细胞应答能力的体外调节作用.方法 将24只BALB/c小鼠按随机数字表法分为对照组与创伤组,每组12只.将创伤组麻醉后造成失血合并闭合性骨折,对照组仅麻醉不致伤,24 h后分离2组小鼠脾脏DC.将2组DC分为西罗莫司阴性对照组和创伤组(不用西罗莫司处理),以及西罗莫司阳性对照组和创伤组(用10μg/L西罗莫司处理6 h).检测各组DC自噬活性(用荧光强度值表示)及DC介导的混合淋巴细胞反应(MLR)变化(用吸光度值表示).流式细胞仪检测细胞表面主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ与共刺激分子CD40、CD80、CD86表达.用ELISA法检测LPS刺激后DC中IL-12p40、IL-12p70和IL-10的水平.对数据进行单因素方差分析.结果 (1)西罗莫司阴性创伤组小鼠脾脏DC自噬活性(荧光强度值为13±2)及其介导的MLR强度均较西罗莫司阴性对照组(荧光强度值为22±6)明显减弱(F=212.836,P<0.05).与西罗莫司阴性对照组和创伤组比较,西罗莫司阳性对照组和创伤组自噬活性(45±8、44±8)均明显增强(F=212.836,P<0.05或P<0.01).西罗莫司阳性创伤组MLR强度较西罗莫司阴性创伤组明显增强(F值分别为101.426、86.533,P值均小于0.05).(2)西罗莫司阴性创伤组小鼠脾脏DC表面的MHCⅡ[(60±9)%]及CD40[(4±1)%]表达较西罗莫司阴性对照组[(85±6)%、(8±1)%]明显降低(F值分别为37.918、40.426,P值均小于0.05),西罗莫司阳性创伤组MHCⅡ表达[(78±7)%]较西罗莫司阴性创伤组明显提高(F=37.918,P<0.05).(3)两罗莫司阴性创伤组小鼠脾脏DC的IL-12p40、IL-12p70表达水平[(120±13)、(10±3)pg/mL]较西罗莫司阴性对照组[(200±25)、(20±6)pg/mL]明显降低(F值分别为218.646、310.253,P值均小于0.05);与西罗莫司阴性对照组和创伤组比较,西罗莫司阳性对照组和创伤组IL-12p40[(560±34)、(540±29)pg/mL]、IL-12p70[(55±8)、(60±11)pg/mL]表达水平均明显提高(F值分别为218.646、310.253,P值均小于0.01),IL-10表达水平降低(F=246.108,P<0.01).结论 西罗莫司在体外可部分改善创伤小鼠DC功能,并提高其诱导T淋巴细胞的应答能力.     

内毒素血症时小肠黏膜损害的实验研究

目的观察大鼠内毒素血症早期枯否细胞(KC)在小肠黏膜损害中的作用及氯化钆(GdCl3)阻断KC功能后对肠道完整性的影响。方法将大鼠分为3组。A组:单纯注入内毒素;B组注入内毒素之前24h先经静脉注入GdCl3;C组:假手术对照组。注射内毒素后4h处死大鼠,取材并收集胆汁。光镜下观察回肠黏膜的形态学变化。分离大鼠的KC,用RT-PCR检测KC中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达。采用ELISA检测胆汁和血浆中TNF-α和IL-6水平的变化。结果A组回肠黏膜绒毛上皮表浅坏死,伴中性粒细胞浸润以及上皮脱落;B组回肠黏膜损害明显减少;C组回肠黏膜的形态学无改变。A组KC表达TNF-α和IL-6mRNA显著;B组表达明显减少;C组表达不明显。A组胆汁中TNF-α和IL-6的水平分别为(1032±107)pg/ml和(1185±127pg/ml,血浆中TNF-α和IL-6的水平分别为(207±29)pg/ml和(213±33)pg/ml,显著高于B组犤(521±76)pg/ml和(572±54)pg/ml,(113±18)pg/ml和(147±22)pg/ml犦及C组犤(72±13)pg/ml和(118±22)pg/ml,(67±10)pg/ml和(109±18)pg/ml犦(P均<0.05)。结论内毒素血症早期K释放的TNF-α和IL-6在回肠黏膜损害的启动和进程中可能起重要作用。     

复方玄驹胶囊治疗自身免疫性前列腺炎大鼠的实验研究

目的:研究复方玄驹胶囊对自身免疫性前列腺炎大鼠的治疗效果。方法:健康Wistar大鼠60只,随机分为5组,对照组、低浓度蛋白免疫模型组、低浓度蛋白免疫+复方玄驹胶囊全方治疗组、高浓度蛋白免疫模型组、高浓度蛋白免疫+复方玄驹胶囊全方治疗组。除对照组外,其余4组用高低两种浓度(15 mg/ml及80 mg/ml)的同种大鼠前列腺匀浆蛋白提纯液进行注射造模。造模(30 d)成功后,对照组和模型组生理盐水[1 ml/(200 g·d)]灌胃,治疗组用生理盐水溶解的复方玄驹胶囊全方[0.068 g/(ml·d)]灌胃,随后分别于30、45、60 d分批处死大鼠。用ELISA法检测大鼠血清中的IL-8、IL-10及TNF-α的表达,并观察大鼠前列腺组织病理切片。结果:与模型组相比,经复方玄驹胶囊全方灌胃治疗的高浓度蛋白免疫大鼠血清中IL-8、TNF-α在造模45 d时由(148.54±17.23)pg/ml、(62.14±5.59)pg/ml下降到(100.77±11.08)pg/ml、(32.63±2.91)pg/ml(P0.05);60 d时由(143.69±17.28)pg/ml、(59.38±5.50)pg/ml降到(95.77±10.53)pg/ml、(29.63±2.66)pg/ml(P0.05)。低浓度组造模45 d时IL-8、TNF-α亦由(128.47±12.21)pg/ml、(40.43±3.64)pg/ml下降至(111.76±10.07)pg/ml、(35.44±3.17)pg/ml(P0.05),60 d时由(131.07±10.93)pg/ml、(43.34±3.91)pg/ml降至(97.46±8.75)pg/ml、(30.44±2.75)pg/ml(P0.05)。高浓度蛋白免疫的治疗组大鼠血清IL-10在造模45 d、60 d分别由(189.14±16.78)pg/ml、(184.14±15.89)pg/ml上升至(230.48±29.96)pg/ml、(248.48±31.03)pg/ml(P0.05),低浓度组由(223.14±17.87)pg/ml、(224.14±17.93)pg/ml升高至(231.42±23.18)pg/ml、(249.42±24.97)pg/ml(P0.05)。病理切片示对照组无明显变化;实验组病理切片显示大鼠前列腺组织腺体结构破坏,炎性细胞浸润;治疗组治疗15 d后光镜下观察病变逐步改善,腺腔增大,上皮细胞轻度增生,间质中无明显炎性细胞浸润,可见少量纤维组织。结论:复方玄驹胶囊能降低自身免疫性前列腺炎大鼠前列腺组织炎性改变,并有效改善炎性因子表达,对大鼠自身免疫性前列腺炎有一定疗效。     

氯化钆对内毒素刺激后小鼠巨噬细胞Toll样受体表达的影响

目的观察氯化钆(GdCl3)对内毒素刺激后的小鼠巨噬细胞来源的细胞系RAW264.7细胞Toll样受体(TLRs)表达的影响。方法RAW264.7细胞分为空白组、内毒素处理组(LPS组)及GdCl3处理组(GdCl3组),采用流式细胞仪检测TLR2/4蛋白表达情况;用逆转录PCR(RT-PCR)法分析细胞中TLR2/4mRNA表达的变化;用ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α的水平。结果与LPS组相比,不同浓度的GdCl3作用于RAW264.7细胞后,其TLR2/4蛋白和基因的表达以及TNF-α的表达水平均明显下降,在观察浓度范围内以2000μmol/L时最明显,TLR2/4蛋白:200μmol/L时为(70.2±1.28)%/(66.7±2.59)%,400μmol/L时为(64.9±1.43)%/(60.4±1.25)%,2000μmol/L时为(47.4±0.98)%/(32.1±0.74)%,其与LPS组的(94.4±1.76)%/(95.7±0.87)%比较,P<0.01;TLR2/4mRNA(A值):200μmol/L时为(76.42±2.76)/(101.72±3.14),400μmol/L时为(75.60±3.76)/(89.65±5.17),2000μmol/L时为(64.22±4.67)/(78.44±4.88),其与LPS组的(127.64±3.25)/(119.82±5.59)比较,P<0.05,P<0.01;TNF-α:200μmol/L时为(2540±77)pg/ml,400μmol/L时为(2041±106)pg/ml,2000μmol/L时为(1020±220)pg/ml,其与LPS组的(4688±127)pg/ml比较,P<0.01。结论GdCl3能明显抑制内毒素引起的RAW264.7细胞Toll样受体的表达及相应炎症因子的生成。     

破裂型椎间盘突出动物模型中自身免疫反应的实验研究

目的:从动物实验的角度探讨破裂型椎间盘突出动物模型中的自身免疫反应.方法:20只SD大鼠分为两组,实验组采用自体髓核移植于坐骨神经旁的方法建立破裂型椎间盘突出动物模型(坐骨神经痛模型);对照组大鼠手术方法同实验组,但不放置髓核.术前及术后1、2、3周时采用爬坡实验及后肢机械缩爪阈值测定评估大鼠造模前后后肢运动能力及痛觉过敏的变化.术后3周时处死动物应用透射比浊法检测大鼠血清中免疫球蛋白IgG、IgM的含量,ELISA法测定血清中TNF-α、IL-6、IL-12的含量;采用免疫组化染色观察移植髓核中抗原抗体复合物沉积情况;应用BCA蛋白定量法观察坐骨神经中磷脂酶A2(PLA2)的活性.结果:所有大鼠模型建立前爬坡试验结果均为Ⅳ级,造模后对照组爬坡试验仍为Ⅳ级,实验组在造模后1、2及3周时爬坡试验均为Ⅲ级.实验组大鼠造模后1、2、3周时的后肢机械缩爪阈值分别为67.2±8.4、41.3±5.2及40.7±5.3mmHg,较术前(90.4±5.0mmHg)及对照组明显降低(P＜0.01),出现较为明显的痛觉过敏.术后3周实验组大鼠血清中IgG含量4.98±0.96g/L及IgM含量1.45±0.37g/L较对照组(4.31±0.77g/L及0.79±0.35g/L)明显上升(P＜0.05);血清中TNF-α、IL-6、IL-12的含量(205.77±46.32pg/L,186.4±87.3pg/L,69.23±27.46pg/L)较对照组(11.01±2.53pg/L,85.0± 13.2pg/L,21.65±11.93pg/L)均明显升高(P＜0.05).实验组大鼠移植髓核中出现抗原抗体复合物阳性沉积,阳性率为80％,明显高于对照组(P＜0.01);其坐骨神经中PLA2活性为0.0766±0.0039μmoL/(min·L),较对照组0.0006±0.0010μmoL/(min·L)明显升高(P＜0.05).结论:破裂型椎间盘突出动物模型中存在着由移植髓核引起的全身及局部异常的自身免疫反应,这可能是导致其疼痛的主要原因.     

细胞信号转导调控剂对严重烫伤小鼠T淋巴细胞分泌功能的影响及机制

目的观察不同信号转导调控剂对严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞分泌白细胞介素(IL)2、IL-10功能的影响,并探讨其机制。方法分离正常小鼠及高压热蒸气烫伤小鼠(烧伤面积18％TBSA,Ⅲ度)伤后12、96 h的脾脏T淋巴细胞。分为正常对照组(不加T淋巴细胞活化相关信号转导分子调控剂)、调控剂组[正常细胞分别加入以下调控剂:膜蛋白激酶C(PKC)抑制剂H-7(50μmol／L,1 ml)、PKC激活剂佛波酯(TPA,30μmol／L,1 ml)、非受体型蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂Herbimycin(10μmol／L,1 ml)、丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)抑制剂PD098059(25μg／ml,1 ml)和Ca2 导入剂A23187(100 nmol/L,1 ml)]、烫伤组(不加调控剂)、烫伤 调控剂组(加入上述调控剂)。检测各组细胞IL-2、IL-10的分泌水平。结果伤后各组细胞中IL-2、IL-10含量均低于正常对照组(P<0．05或0．01);烫伤12 h H-7组、烫伤96 h H-7组分别低于烫伤12 h组和烫伤96 h组(P<0．01)。TPA能使IL-2、IL-10分泌明显升高,但对IL-2升高效能更显著。加入PD098059的各组IL-2、IL-10值均低于正常对照组(P<0．05或0．01)。Herbimycin能显著降低烫伤12 h Herbi- mycin组及烫伤96 h Herbimycin组IL-2的分泌,对IL-10亦有明显抑制。烫伤12 h A21387组中IL-2、IL-10含量为(2417±39)、(2793±25)pg／ml,烫伤96 h A21387组为(921±50)、(2633±35) pg／ml均明显高于烫伤12 h组[(1542±40)、(2390±15)pg／ml]和烫伤96 h组[(328±19)、(1618±21)pg／ml(P<0．05或0．01)]。结论PKC、Ca2 、MAPKK和PTK在严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL-2、IL-10的功能紊乱中起重要作用,其中PKC和PTK主要作用于IL-2的分泌而MAPKK影响IL-10的分泌。TPA和A21387均能显著提高烫伤后IL-2的分泌,并明显纠正伤后IL-2／IL-10分泌比值的失调。     

杂合肾脏替代治疗合并急性肾损伤的多器官功能障碍综合征

目的:探索两种杂合肾脏替代技术,包括"连续低效每天透析(SLEDD)"及"连续低效每天透析滤过(SLEDD-f)",在治疗合并急性肾损伤的多器官功能障碍综合征过程中调节内环境及调节免疫的能力。方法:将40例患者纳入研究,随机分入两个治疗组,初次治疗前及治疗结束后采血送检血生化指标及炎症因子[白细胞介素6(IL-6)],并进行统计学分析。结果:SLEDD组血肌酐由(477.4±123.8)μmol/L下降至(247.5±70.7)μmol/L,SLEDD-f组血肌酐由(459.7±106.1)μmol/L下降至(229.8±61.9)μmol/L,SLEDD组血IL-6水平由(311.85±80.76)pg/ml下降至(171.80±28.41)pg/ml,SLEDD-f组血IL-6水平由(308.85±85.43)pg/ml下降至(168.7±30.28)pg/ml,治疗前后数据变化差异有统计学意义,而两个治疗组数据组间差异无统计学意义。结论:SLEDD与SLEDD-f均能有效调节内环境及清除炎症介质,适用于治疗合并急性肾损伤的多器官功能障碍综合征。     

慢性HBV感染者外周血中IL-35表达水平的检测及其意义

目的 通过检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血中白细胞介素-35(IL-35)水平,探讨IL-35在HBV持续感染致病机制中的作用.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测27例慢性乙型重型肝炎(CSHB)患者,69例慢性乙型肝炎(CHB)患者,24例乙型肝炎肝硬化(LC)患者,29例慢性乙型肝炎病毒携带者(ASC)和26例健康者作为正常对照组(NC)的外周血中IL-35水平,并对不同组别患者之间的IL-35水平进行比较;对IL-35水平与HBV DNA载量、肝功能指标ALT、AST、ALB和TBil进行了相关性分析.结果 HBV感染者中IL-35水平高于NC组,其中CSHB组患者IL-35水平(19 408±23 272.6 pg/ml),显著高于CHB组(4478.1±5838.9 pg/ml,P< 0.05)、LC组(3920.9±6520.2 pg/ml,P< 0.05)、ASC组(224.7 ± 123.3 pg/ml,P< 0.05)及NC组(37.0 ± 48.6 pg/ml,P< 0.05);CHB组IL-35水平显著高于ASC和NC组(P< 0.05),与LC组无显著性差异;ASC组显著高于NC组(P< 0.05);IL-35水平与ALT、AST、TBil和PT水平呈正相关(P< 0.05),与ALB水平呈负相关(P< 0.05);与HBV DNA载量无显著线性相关,HBeAg阳性与阴性者患者血清中IL-35水平比较差异无统计学意义.结论 HBV感染者外周血中IL-35水平增高,提示IL-35在HBV持续感染的免疫致病机制中起着一定作用,为临床中通过调控IL-35水平来治疗HBV感染提供了新的思路.     

姜黄素诱导的耐受性树突状细胞及其机制

目的 探讨姜黄素(Cur)诱导耐受性树突状细胞(DC)的效果及其机制.方法 分别用不同浓度Cur(0、10、20和30μmol/L)作用于Wistar大鼠来源的不成熟DC,流式细胞仪分析其表型.再以30μmol/L的Cur作用于不成熟DC,加或不加脂多糖(LPS)刺激,流式细胞仪检测其吞噬葡聚糖的能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定DC分泌白细胞介素12(IL-12)的能力,Western印迹法检测DC中核因子кB(NF-кB)p65和RelB核转位,NF-кB DNA结合ELISA和荧光素酶报告基因检测核内NF-кB活性,混合淋巴细胞反应检测其刺激Lewis大鼠T淋巴细胞增殖的能力.结果 Cur能显著抑制DC共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达,呈剂量依赖性,当Cur的浓度达30 μmol/L时,其共刺激分子的表达与不成熟DC比较,差异无统计学意义.DC在LPS刺激下(LPS组),吞噬葡聚糖的DC占(36.6±7.2)%,IL-12的分泌量达(415.9±42.7)pg/ml,其核内RelB及NF-кB p56高表达,RelB DNA结合活性和NF-кB p65 DNA结合活性分别为0.65±0.08和0.74±0.07,报告基因荧光素酶活性是对照细胞的435%,该DC有较强的刺激同种T淋巴细胞增殖的能力.而先以30μmol/L Cur作用于DC,然后再加入LPS者(Cur+LPS组),吞噬葡聚糖的DC占(78.6±14.2)%,明显高于LPS组(P＜0.01)IL-12的分泌量为(97.5±19.6)pg/ml,明显低于LPS组(P＜0.01);其核内RelB及NF-кB p56低表达;RelB DNA结合活性和NF-кB p65 DNA结合活性分别为0.15±0.06和0.29±0.06,均明显低于LPS组(P＜0.01);报告基因荧光素酶活性是对照细胞的197%,明显低于LPS组(P＜0.01);该DC刺激同种T淋巴细胞增殖的能力明显弱于LPS组.结论 Cur诱导产生耐受性DC可能是通过抑制DC中NF-кB的活化实现的.     

白介素4及CD40抗体作用下肾小管上皮细胞钙调神经磷酸酶活性及其与RANTES分泌的关系

目的观察小鼠肾小管上皮细胞(TEC)在白介素4(IL-4)及CD40激活状态下钙调神经磷酸酶(CaN)活性,并进一步探讨其与趋化因子RANTES分泌的关系。方法取Ⅱ级6～7周的雌性DBA小鼠,分离肾小管上皮细胞进行培养、刺激。采用RT-PCR检测RANTESmRNA表达;ELISA检测培养上清中RANTES含量;流式细胞仪检测CD40表达。结果(1)常规培养TEC可表达一定量的CD40;用IL-4刺激TEC24h,细胞表面CD40平均荧光强度(MFI)显著高于对照组(7.92±0.56vs4.33±0.30,P<0.001)。(2)常规培养TEC中有一定量的CaN活化(8.98±0.56)nmol/mg.pro;用IL-4、CD40抗体(mAb)及IL-4 CD40mAb刺激细胞,3组CaN活性均显著高于对照组(P<0.05)。(3)常规培养TEC仅分泌极少量的RANTES;在IL-4刺激或CD40mAb激活后TECRANTES蛋白分泌增高,分别为(43.61±13.73)pg/ml和(73.77±4.28)pg/ml,显著高于对照组(14.78±2.20)pg/ml(P<0.001)。(4)常规培养TEC微量表达RANTESmRNA;用IL-4、CD40mAb及IL-4 CD40mAb刺激细胞24h,各刺激组RANTESmRNA表达显著高于对照组(P<0.05)。(5)在IL-4、CD40mAb及IL-4 CD40mAb刺激下,FK506对TEC分泌RANTES蛋白及mRNA有显著抑制作用(P均<0.05)。结论Th2细胞因子IL-4及CD40-CD40配体(CD40L)共刺激信号可通过活化TECCaN,调控RANTES基因表达及分泌、     

幽门螺杆菌感染对慢性荨麻疹患者外周血γ-干扰素和白细胞介素-4的调控机制

目的探讨并发幽门螺杆菌感染的慢性荨麻疹患者外周血γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的调控机制。方法随机选取2014年7月至2015年5月于本院就诊且具有较为典型临床表现的慢性荨麻疹患者共70例,选择同期于本院体检的50例健康人为对照组;筛选抗-Hp阴性和抗-Hp阳性患者,采用ELISA法检测其外周血IFN-γ和IL-4水平。结果慢性荨麻疹患者与对照组患者抗-Hp阳性率存在较大差异;对照组患者中抗-Hp阳性和抗-Hp阴性者IFN-γ水平差异无统计学意义。慢性荨麻疹患者组中抗-Hp阳性患者IFN-γ和IL-4水平分别为(298.74±35.46)pg/ml和(251.31±29.98)pg/ml,低于抗-Hp阴性患者的(322.45±50.02)pg/ml和(214.45±51.01)pg/ml,差异均具有统计学意义(t=1.734、P=0.034,t=3.569、P=0.028);慢性荨麻疹患者IFN-γ及IL-4水平为(122.74±81.36)pg/ml和(297.12±79.14)pg/ml,对照组患者分别为(89.46±34.56)pg/ml和(1 512.12±151.24)pg/ml,差异具有统计学意义(t=2.374、P=0.016,t=1.072、P=0.034)。结论幽门螺杆菌感染对慢性荨麻疹患者外周血单个核细胞产生IFN-γ和IL-4具有调控作用,可以导致Th细胞亚群失衡,进而导致患者免疫功能异常程度加重。     

间质性膀胱炎与1型/2型辅助性T淋巴细胞漂移的相关研究

目的 探讨间质性膀胱炎(IC)患者血浆及膀胱黏膜1型/2型辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)与免疫调节失衡的关系.方法 女性IC患者血浆及黏膜标本16例,输尿管结石患者标本16例作为对照组.2组患者性别及年龄匹配.IC患者符合美国糖尿病、消化及肾病协会诊断标准.依据盆腔疼痛和尿急/尿频症状评分(PUF评分)结果分为低评分(0～20分)和高评分(21～35分)2组.采用酶联免疫吸附试验和免疫组化染色检测2组患者血浆和膀胱黏膜中Th1(IFN-γ和IL2)和Th2(IL-4和IL-10)细胞因子表达情况. 结果①IC患者血浆IFN-γ、IL-2表达量分别为(4.57±2.92)、(17.52±7.52)pg/ml,对照组分别为(4.11±2.27)、(20.99±5.09)pg/ml,2组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05);IC患者血浆IL-4、IL-10表达量分别为(O.34±0.22)、(4.37±2.34)pg/ml,对照组分别为(0.14±0.07)、(1.18±0.61)pg/ml,2组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).②IC患者和对照组膀胱黏膜标本中IFN-γ、IL-2表达强度比较χ2值=1.900、0.514,差异均无统计学意义(P＞0.05);2组IL-4、IL-10表达强度比较χ2值=8.237、8.209,差异均有统计学意义(P＜0.05).③IC患者PUF低评分组血浆IL-4、IL-10表达量分别为(0.16±0.11)、(2.42±1.27)pg/ml,高评分组分别为(0.53±0.12)、(6.31±1.21)pg/ml,2组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).2组膀胱黏膜标本IL-4表达强度比较χ2＝7.608,γ3＝0.467,差异有统计学意义(P＜0.05);IL-10表达强度比较χ2＝8.844,γ3＝0.517,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IC患者存在免疫调节失衡,Th2介导的体液免疫反应增强,且免疫失衡随症状程度而加重.     

残胃黏膜白细胞介素-8和环氧化酶-2 mRNA表达与吻合方式的关系

目的 探讨残胃黏膜白细胞介素-8(IL-8)和环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的特点及其与吻合方式的关系。方法 选择58例残胃病例行胃镜检查,于吻合口和胃体大弯处采用两点取材的方法进行胃镜活检,活检标本分别进行幽门螺旋杆菌(Hp)感染检测和通过实时聚合酶链反应(PCR)方法检测IL-8和COX-2mRNA表达。结果 吻合口处IL-8和COX-2mRNA表达与残胃体部的比较均有增高趋势,BillrothI(BⅠ)式吻合口处的IL-8mRNA表达明显高于残胃体部的表达;当Hp感染阴性时,BⅠ式吻合口处IL-8和COX-2mRNA表达明显高于BⅡ式吻合口处它们的表达;而当Hp感染阳性时,吻合口处BI式的IL-8和COX-2mRNA表达与BⅡ式的表达无显著差异;在残胃体部,不管BⅠ式还是BⅡ式吻合,Hp感染阳性的IL-8和COX-2 mRNA表达明显高于Hp感染阴性的表达。结论 残胃吻合口周围癌发生的危险性高于其它部位;吻合方式影响残胃癌发生危险性。     

IL-17和IL-8在单纯BPH与合并炎症BPH患者前列腺组织中的表达

目的:探讨单纯良性前列腺增生(BPH)与伴有前列腺炎的BPH患者前列腺组织中IL-17和IL-8表达差异。方法:收集行经尿道前列腺电切术的60例BPH患者标本。根据标本HE染色不同分为单纯BPH组23例和合并炎症的BPH组37例。对两组患者的临床资料进行分析比较;用免疫组化方法检测各标本IL-17和IL-8的表达情况,用荧光定量PCR和Western印迹检测各标本IL-17和IL-8 mRNA和蛋白的表达。结果:单纯BPH组和合并炎症的BPH组患者的国际前列腺症状评分(IPSS)[(21.6±3.7)分vs(29.1±6.2)分]、生活质量评分(Qo L)[(4.4±1.6)分vs(5.4±1.3)分]、最大尿流率(Qmax)[(8.2±1.8)ml/s vs(4.7±2.1)ml/s]、残余尿量(RUV)[(98.2±19.3)ml vs(198.6±15.5)ml]、前列腺体积[(49.8±16.5)ml vs(69.2±24.1)ml]、PSA[(2.8±0.8)μg/L vs(7.4±1.9)μg/L]和C反应蛋白(CRP)[(1.5±0.6)mg/L vs(5.1±2.0)mg/L],两组相比差异明显,有统计学意义(P0.05);合并炎症的BPH组患者尿潴留的发生率[32.4%(12/37)]明显高于单纯BPH组[8.69%(2/23),P0.05];IL-17 mRNA和IL-8 mRNA在合并炎症的BPH组前列腺组织中的表达量(0.303±0.076和0.536±0.059)均明显高于单纯BPH组(0.042±0.019和0.108±0.025,P0.05);IL-17和IL-8蛋白在单纯BPH组和在合并炎症的BPH组患者前列腺组织中的蛋白表达(0.34±0.05 vs 0.88±0.10,0.43±0.04 vs1.07±0.08),两者相比差异显著,有统计学意义(P0.05)。结论:IL-17和IL-8在合并炎症的BPH患者前列腺组织中的表达上调,其可能在BPH的发生发展中起重要作用。     

骨关节炎患者血清及关节液中白细胞介素-17表达及其意义

目的检测膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者血清及关节液中自细胞介素-17(interleukin-17)的表达并评估其与OA严重程度的相关性。方法收集100例原发性膝OA患者血清及关节液标本,并以50例健康志愿者血清标本作为对照。OA严重程度及分级分别采用Lequesne指数和K-L分级系统。酶联免疫吸附法分别检测血清及关节液中IL-17浓度,并分析其与OA严重程度的相关性。结果 OA组患者血清中IL-17浓度[(5.292±1.470)pg/ml]明显高于对照组[(4.173±0.640)pg/ml],差异有统计学意义(P0.05)。K-L4级或3级OA患者关节液IL-17的浓度明显高于2级OA患者,差异有统计学意义(P0.05)。4级OA患者关节液IL-17的浓度[(6.161±1.120)pg/ml]明显高于3级OA患者[(4.474±0.816)pg/ml],差异有统计学意义(PO.05)。关节液IL-17浓度与Lequesne指数呈正相关(r=0.6232,P0.05);血清IL-17浓度与Lequesne指数之间无明显相关。结论 IL-17在OA患者血清及关节液中的表达明显升高,关节液中IL-17的水平与OA严重程度之间明显相关,提示IL-17的失衡表达在OA的发病机制中具有一定作用。     

α7 烟碱型乙酰胆碱受体在电针减轻肢体缺血再灌注兔肺损伤中的作用

目的:观察α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤中的作用。方法:40只健康雄性新西兰大白兔,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、电针组和α-银环蛇毒素(α-BGT)组(n=10)。采用夹闭股动脉3 h、再灌注4 h的方法制备兔肢体缺血再灌注模型;电针组、α-BGT组于模型制备前1～4 d(30 min/次,1次/d)及模型制备过程中电针足三里穴和肺俞穴(电流l～2 mA,频率2/15 Hz,疏密波);α-BGT组于模型制备前30min腹腔注射α7nAChR拮抗剂α-BGT(1μg/kg)。再灌注4 h时采集颈动脉血样,随后处死兔取肺组织,观察病理学结果并行肺损伤评分,计算肺湿/干重(W/D)比值。采用ELISA法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)含量,Western blot法检测α7nAChR蛋白表达水平。结果:模型组、电针组和α-BGT组再灌注4 h时肺组织W/D比值分别为6.89±1.07、4.56±0.75、8.68±1.49,均明显高于假手术组(2.83±0.43,P0.05);肺损伤评分分别为7.52±1.05、4.16±0.68、9.23±1.57,均明显高于假手术组(1.19±0.22,P0.05);TNF-α分别为(13.3±2.3)pg/mg、(11.0±1.6)pg/mg、(14.1±3.0)pg/mg,均明显高于假手术组[(3.2±0.3) pg/mg,P0.05];IL-1β分别为(9.2±2.0)pg/mg、(7.4±1.7)pg/mg、(10.5±1.9)pg/mg,均明显高于假手术组[(2.1±0.5) pg/mg,P0.05];IL-6分别为(14.2±2.3)pg/mg、(11.7±2.0)pg/mg、(14.8±1.8)pg/mg,均明显高于假手术组[(4.2±0.7)pg/mg, P0.05];α7nAChR表达水平分别为(0.55±0.09)、(0.87±0.14)、(0.33±0.08),均明显高于假手术组(0.23±0.04,P0.05)。与模型组比较,电针组再灌注4h时肺组织W/D比值、肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著降低(P0.05),电针组α7nAChR表达均显著上调(P0.05)。与电针组比较,α-BGT组再灌注4h时肺组织W/D比值、肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高(P0.05),α7nAChR表达下调(P0.05)。结论:α7nAChR表达上调,可能参与了电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤的过程。