蟾酥对豚鼠离体心脏的毒性作用和物质基础研究

目的:研究蟾酥对豚鼠离体心脏的毒性作用和其物质基础。方法:通过Langendorff灌流研究蟾酥对豚鼠离体心脏的毒性作用,HPLC测定灌流后心脏中蟾蜍甾烯的含量。结果:蟾酥诱导豚鼠离体心脏出现房室传导阻滞、室速、室颤多种心律失常现象。当给药量累积达(60±11.5)μg时致其停跳。采用HPLC在灌流心脏中测到9种蟾蜍甾烯类化合物,其与心脏亲和力增加的顺序为:沙蟾毒精>蟾毒灵>远华蟾毒配基>嚏根草苷元>日蟾毒它灵>华蟾毒灵>蟾毒它灵>脂蟾毒配基>去乙酰蟾毒它灵。结论:蟾酥对豚鼠心脏具有显著毒性,其物质基础可能是脂蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵、日蟾毒灵等9种蟾蜍甾烯类化合物。     

血竭注射液对离体豚鼠心脏的影响

血竭注射液1：3000明显减慢离体豚心脏的心率，减弱收缩力，增加冠脉流量；并能使缺氧心肌细胞的乳酸脱氢酶释放减少，降低心律失常发生率。提示血竭可降低氧耗量，增加氧供，对缺氧心肌有保护作用及抗心律失常作用。     

血清药理学方法研究复方中药对癫痫大鼠离体脑片的作用

目的：观察对癫痫大鼠给予复方中药提取物后,其含药血清对离体海马脑片的作用。方法：癫痫大鼠每日2次灌胃给予复方中药提取物5、10、20g/kg,末次给药后60min取血,分离血清。将含药血清加到癫痫大鼠离体海马脑片系统,观察复方中药对癫痫大鼠海马脑片CAI区诱发场电位的影响。结果：灌胃给予复方中药提取物后,含药血清均能使癫痫大鼠海马脑片诱发场电位的幅度明显下降,同时场电位恢复正常的时间也明显缩短（P〈0.05）。结论：复方中药能降低癫痫大鼠海马脑片诱发场电位的幅度,提示复方中药具有抗癫痫作用。     

心脑苏提取物对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响实验

目的 通过对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响实验,考察心脑苏提取物(有效部位群)的主要药理作用.方法 按常规调节恒温灌流装置,制备豚鼠离体心脏,通过对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响试验,观察并比较各组豚鼠心脏冠脉流量、心率和心搏幅度.结果 该品能显著提高冠脉流量,并能明显降低心率,而对心搏幅度无明显影响,因而不增加心肌耗氧量,这与硫酸异丙肾上腺素的作用明显不同.结论 该品对冠心病有较好的治疗作用.     

复方丹参滴丸对豚鼠离体心脏心电图的影响

目的 观察复方丹参滴丸及其组成药物丹参、三七对豚鼠离体心脏心电图的影响,研究其心脏毒性作用.方法 应用Langendorff离体豚鼠心脏灌流装置,将复方丹参滴丸浸膏和丹参浸膏(给药质量浓度均以丹参素计)、三七浸膏(给药质量浓度以人参皂苷Rg1计)均按3、0.3、0.1、0.03 μg/mL灌注,观察离体豚鼠心脏心电图的变化.结果 复方丹参滴丸浸膏和丹参浸膏对豚鼠离体心脏心电图无明显影响,三七浸膏在低质量浓度(0.3、0.1、0.03 μg/mL)对豚鼠离体心脏心电图没有影响,但在3 μg/mL时可轻微延长PR、RR间期,减慢心率,与对照相比差异显著(P＜0.05).3种药物对校正后的QT间期(QTc)及T波峰到T波结束间期(Tp-e)均无显著影响.结论 复方丹参滴丸及其组成药物丹参、三七在实验质量浓度范围内不诱发心室肌细胞复极化延长及严重心律失常.     

用生脉散预处理的兔血清对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的保护作用

生脉散又名生脉饮，是中医益气养阴的著名古方，由人参、麦冬、北五味子组成。方中人参补肺益气以生津，为主药；麦冬养阴、消热以生津为辅药；瓦味子同表止汗而生津，为佐使药。以人参、麦冬、五味子三药-补-清-敛，益气生津，敛阴止汗，使气阴复而脉气生。因而后世将其作为“益心复脉”的基础方。近年来的众多研究显示其药理作用相当广泛，尤其对心血管系统作用的研究报道颇多，如正性肌力、抗心律失常、改善顽固性心衰、双向调节血压以及降低心肌梗塞后的死亡率^[1]等。但用血清药理学实验方法来研究生脉散对大鼠离体灌流心脏缺血再灌注损伤足否具有保护作用尚未见报道。本实验旨在用灌流大鼠离体心脏模型，观察含生脉散血清对大鼠离体灌流心脏缺血再灌注损伤的影响，以探讨生脉散对缺血性心肌损伤的保护作用。     

黄芪预处理对离体心脏再灌注损伤的保护作用

目的：比较黄芪和非创伤性肢体缺血两种预处理方法对大鼠离体心肌再灌注损伤的保护作用。方法：采用雄性大鼠,在Langendorff装置上对离体心脏进行灌流。预灌15min后,缺血15min,随后15min再灌注。观察先用含黄芪注射液（10mg/L)预灌在相应点分别测定冠脉流出液和心肌匀浆中SOD的活性和MDA含量,同时记录心肌细胞的单相动作电位（MAP）和心肌收缩张力曲线。结果：黄芪预处理和非创伤性肢体缺血预处理能显降低再灌注心律失常发生率,显降低心肌组织中MDA含量,提高SOD活性,稳定心肌细胞的膜电位和肌张力。结论：黄芪预处理对大鼠离体心肌再灌注损伤有明显的保护作用,可能是通过增强心肌的抗氧化能力、稳定心肌的膜相结构等途径而实现的。     

金荞麦片的血清药理学研究——对离体豚鼠回肠的影响

用血清药理学方法观察了金荞麦片抗过敏作用的时－效与量－效关系,发现等效剂量的金荞麦片给予豚鼠４０ｍｉｎ出现效应,８０ｍｉｎ到达峰值,１６０ｍｉｎ效应开始衰减,效应至少可以维持１６０ｍｉｎ。临床等效剂量的金荞麦片口服有效,３倍与９倍临床等效剂量效应是呈比例的增加,有明显的量效关系。     

盐酸川芎嗪对蟾蜍离体心脏作用机制的研究

目的 观察盐酸川芎嗪对蟾蜍离体心脏的作用,并探讨其作用机制.方法 采用斯氏离体蛙心灌流方法,通过BL420E描记心脏收缩力及心率变化,观察盐酸川芎嗪对离体心脏的心肌收缩力和心率的影响,及对肾上腺素、阿托品、氯化钙对心肌收缩的量效关系曲线的变化.结果 盐酸川芎嗪使蟾蜍离体心脏的收缩力减弱,心率略有所减慢.在4.9×10-4 ～ 4.9×10-2 mol/L浓度范围内,盐酸川芎嗪抑制心肌收缩力的作用与剂量之间呈现明显的量效关系,最大效应可使心肌收缩力降低95％.盐酸川芎嗪可使肾上腺素及氯化钙对心脏的兴奋作用降低.结论 盐酸川芎嗪可抑制蟾蜍离体心脏的收缩力和心率,其作用可能与其作用于β受体,抑制细胞外的钙离子内流,减少细胞内钙有关.     

番茄红素对离体豚鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响

目的:探讨番茄红素对豚鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响。方法:将30只豚鼠离体心脏随机分为5组:正常组、缺血/再灌注组(Model)、番茄红素低剂量组(2.5 mg·L-1)、番茄红素中剂量组(5 mg·L-1)、番茄红素高剂量组(10 mg·L-1),模型组全心缺血40 min之后,K-H液继续灌注60 min,治疗组的灌流液中加入不同质量浓度的番茄红素。观察的指标有:心率、冠脉流量、梗死面积、灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:各组在再灌注后各项指标均发生变化,在再灌注60 min时,模型组与正常组比较心率下降(125±9),(169±16)次/min(P<0.01);灌流量下降(3.48±0.43),(5.53±0.30)mL·min-1(P<0.01);梗死面积显著增加(19.57±2.34),(1.57±0.29)%(P<0.01);LDH漏出量增加(206.67±11.85),(120.96±13.56)U·L-1(P<0.01);SOD活性下降(99.14±8.24),(153.22±8.93)U·mg-1(P<0.01),MDA含量增加(6.17±0.73),(3.80±0.41)μmol·g-1(P<0.01)。与模型组比较,番茄红素各组心率和冠脉流量增加,梗死面积减少,LDH漏出量减少,心肌组织中MDA含量降低,SOD活性增加,各剂量组之间呈剂量依赖性。结论:番茄红素对豚鼠离体心脏缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激相关。     

基于UPLC-HDMS技术的生脉散血清药物化学初步研究

目的：分析鉴定口服生脉散后大鼠血中移行成分,揭示生脉散的药效物质基础。方法：应用UPLC-HDMS 技术建立生脉散以及大鼠口服生脉散后含药血清样品的分析方法,通过对比空白血清、含药血清的成分异同,确定大鼠口服生脉散后的血中移行成分,并利用质谱数据表征血中移行成分的结构。结果：大鼠口服生脉散后（12g·kg-1）在血中分析鉴定了18 个血中移行成分,其中5 个为新产生的代谢产物,13 个成分为生脉散的原型成分。结论：血中移行成分及代谢产物可能为生脉散的体内直接作用物质,对其进行深入的研究将有助于阐明生脉散的有效成分及作用机理。     

川芎嗪对吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断收缩的影响

目的观察中药川芎的主要成分川芎嗪对吗啡依赖离体豚鼠回肠催促戒断反应的影响,评价川芎嗪对吗啡依赖豚鼠回肠的作用。方法采用豚鼠回肠体外孵育方法。催促戒断收缩由1μmol/L纳络酮加入已在含3μmol/L吗啡的37.5℃Krebs液中孵育4 h的离体豚鼠回肠引起。分别在给予纳络酮前、后1 min加入不同浓度的盐酸川芎嗪,观察豚鼠回肠的收缩反应。结果川芎嗪100,200,300μmol/L对正常回肠收缩未见明显影响。当川芎嗪100,200,300μmol/L在加入纳洛酮前1 min给药,纳洛酮催促的回肠戒断性收缩被明显抑制,与吗啡依赖对照组相比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。川芎嗪200,300μmol/L在加入纳洛酮后1 min给药,对戒断性收缩也有明显抑制作用。结论川芎嗪对纳洛酮催促的吗啡依赖豚鼠离体回肠戒断性收缩的形成有抑制作用,对已出现的戒断收缩也有明显阻断作用。提示川芎嗪具有抑制吗啡戒断症状的作用。     

桂郁金醇提物和水提物对离体蛙心的影响

目的 探讨桂郁金醇提物和水提物对离体蛙心的影响.方法 采用斯氏蛙心灌流法制备离体蛙心标本,逐滴加入桂郁金提取物,观察药物对离体蛙心的作用.结果 当桂郁金醇提物和水提物的终浓度分别达到2.54×10-2g/ml和2.55×10-3g/ml时,开始明显抑制蛙心的收缩张力最大值;两种提取物的终浓度分别达到4.90×10-2g/ml和1.73×10-3g/ml时,开始明显抑制蛙心的收缩张力平均值,并表现出明显的量效关系.两种提取物对蛙心收缩频率的影响并不明显.药物溶媒(纯净水)对蛙心没有明显影响.结论 桂郁金醇提物和水提物有显著的负性肌力作用.     

基于网络药理学的生脉散用于COVID-19恢复期治疗的物质基础与作用机制研究

目的：利用网络药理学方法探索“生脉散（SMS）”用于新型冠状病毒肺炎(COVID-19）恢复期治疗的物质基础与作用机制。方法：结合中华人民共和国药典并从TCMSP、在线分析平台(ETCM、TCMID、HIT）以及Chemdb数据库搜索SMS复方中每味中药的归经和成分。药物成分潜在靶标通过PharmMapper、DrugBank、E-TCM和Swiss Target Prediction 4个数据库进行预测。然后，运用String数据库进行SMS药物成分靶标与COVID-19之间靶蛋白相互作用关系的分析，接着利用Cytoscape软件进行网络的构建和分析。最后用DAVID和FunRich数据库对候选靶标进行富集分析。结果：生脉散里的3味中药均归属于肺经，从生脉散复方中共筛选出21个符合选择标准的化学成分，主要包括常见的皂苷类化学成分如人参皂苷Rh4、醇类化学成分如β-谷甾醇，木脂素类化学成分如五味子素，另外还有生物碱类、黄酮类和萜类等化学成分。预测得到中药化学成分相关靶标457个，COVID-19靶标51个。通过String分析发现，化学成分中的70个靶标与COVID-19的29个靶标之间存在着紧密的相互作用；通路富集分析表明，候选靶标富集的通路主要包括癌症相关的多条通路、FoxO信号通路、病毒致癌作用信号通路等。结论：SMS中的有效活性成分可能通过作用于CUL2、NUP62、RAE1等多个靶点进而调节多条信号通路来起到抑制新型冠状病毒肺炎作用，研究结果将为进一步研究提供重要信息依据。     

补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎的治疗作用

目的 探讨补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的影响。方法 将花色豚鼠随机分为AR(A)组、AR 脾气虚(B)组、补中益气汤(C)组和空白对照(D)组。各组用卵清蛋白(D组用生理盐水代替)行基础致敏，结束后行PCA试验，确定卵清蛋白IgE抗体效价升高后，以卵清蛋白滴入鼻腔行局部致敏(D组滴入生理盐水)，C组同时给予灌胃补中益气汤(5．6g／kg)，观察豚鼠鼻部症状的变化。实验结束时处死豚鼠，行鼻分泌物涂片子找嗜酸细胞(EOS)及取鼻粘膜病理切片子找嗜酸细胞与肥大细胞。结果 A、B、C组在局部致敏的前期，均出现了抓鼻、打喷嚏、流清涕等典型的鼻部症状，至后期，C组鼻部症状减轻；C、D组鼻分泌物及鼻粘膜EOS阳性率均低于A、B组，而C、D组之间别无显著性差异；鼻粘膜肥大细胞计数C组亦低于A、B组。结论 补中益气汤能抑制脾虚AR豚鼠鼻粘膜嗜酸细胞及肥大细胞的浸润，从而改善鼻部症状。     

灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠血液流变学异常的预防作用

目的：观察运用灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠的影响,探讨灵龟八法延缓衰老的作用机理。方法：以健康成年豚鼠为研究对象,随机分为肾阳虚模型灵龟八法预防组、肾阳虚模型命门灸预防组、肾阳虚模型对照组等3组,以全血粘度（200s^-1、30s^-1、5s^-1、1s^-1）、红细胞压积（HCT）、纤维蛋白原（FIG）为客观指标,比较灵龟八法按时开穴灸、命门灸对肾阳虚模型豚鼠血液流变学的影响差异。结果：在造模结束后,肾阳虚模型灵龟八法预防组没有出现明显肾阳虚征象,其200s^-1、30s^-1、5s^-1、1s^-1、HCT及FIG无明显改变;肾阳虚模型命门灸预防组没有出现明显肾阳虚征象,但其2008s^-1及30s^-1升高明显,差异有显著性意义,5s^-1、1s^-1、HCT及FIG无明显改变;肾阳虚模型对照组出现明显的肾阳虚症状,且20s^-1、30s^-1、HCT及FIG升高,差异有显著性意义,5s^-1、1s^-1无明显改变。结论：灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠具有明显的预防作用,可防止血液流变学的异常改变,其延缓衰老的机理可能与调节血液流变学有关;灵龟八法按时开穴灸组对肾阳虚模型豚鼠的预防作用略优于命门灸组。     

柴朴汤对支气管哮喘豚鼠支气管肺组织中Bcl-2表达的影响

目的:观察中药柴朴汤对哮喘豚鼠支气管肺组织中Bc1-2表达的影响.方法:40只健康豚鼠随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松组(0.001 g·kg-1),柴朴汤组(0.35 g·kg-1),每组10只.采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入激发建立哮喘模型,各组豚鼠均于激发前30 min予相应灌胃处理,隔日1次,共7次.末次激发24h后,处死各组豚鼠.检测各组豚鼠血液中嗜酸性粒细胞数及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)数,嗜酸粒细胞(EOS)数及百分比;HE染色法观察各组豚鼠支气管肺组织病理改变;免疫组化法检测支气管肺组织中Bcl-2蛋白表达,原位杂交法检测支气管肺组织中Bcl-2 mRNA的表达.结果:柴朴汤组外周血中EOS数,BALF中WBC敷、EOS数及百分比均较哮喘模型组明显降低(P＜0.05).与哮喘模型组比较,柴朴汤组支气管肺组织中Bcl-2 mRNA及蛋白的表达有显著性差异(P＜0.05).地塞米松组与柴朴汤组比较,无明显差异.结论:柴朴汤可以明显降低哮喘豚鼠外周血和支气管肺泡灌洗液中EOS,减轻支气管肺组织的炎症反应,下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平.     

乌蛇驱风汤及诸加减方对豚鼠慢性湿疹模型的疗效比较

目的:比较乌蛇驱风汤及诸加减方对豚鼠慢性湿疹的疗效。方法:健康豚鼠58只,随机抽取8只,雌雄各半,作为正常组,将其余的50只豚鼠参照进行造模,背部剃毛,小剂量2,4-二硝基氯苯为抗原,多次刺激豚鼠皮肤制备慢性湿疹模型,将造模成功的48只豚鼠分雌雄随机分为6组,分别为1号方组(乌蛇驱风汤原方,8.05 g·kg-1),2号方组(7.22 g·kg-1),3号方组11.75 g·kg-1,4号方组(12.86 g·kg-1),丁酸氢化可的松乳膏组(0.5 g·kg-1)、模型组,口服ig给药,连续给药7 d,末次用药后24 h,处死所有实验动物,根据皮损局部的症状评分和皮损处的病理改变进行疗效评估。结果:与正常组比较,模型组病理症状评分明显升高(P0.05),模型组皮损处的病理表现仍呈现表皮和真皮水肿,表皮层增厚,以棘层细胞增生为主,真皮浅层血管轻度扩张,周围有以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润;与模型组比较,1号方组,2号方组,3号方组,4号方组及丁酸氢化可的松乳膏组病理症状评分明显降低(P0.05),乌蛇驱风汤组及丁酸氢化可的松乳膏组皮损组织病理改变较模型组明显改善,与氢化可的松组病理表现相似;各乌蛇驱风汤加减方组组织病理表现较模型组改善不明显。结论:乌蛇驱风汤对豚鼠慢性湿疹的疗效优于诸加减方,与丁酸氢化可的松乳膏组疗效相当。     

不同针刺频度对致敏豚鼠血清总IgE影响的实验研究

目的:对针刺“大椎”治疗哮喘的时效性进行初步探讨。方法:将豚鼠随机分为空白组、模型组、每日针刺组、隔日针刺组和隔2日针刺组共5组,除空白组外均用卵清白蛋白致敏并激发哮喘。选“大椎”作为治疗穴位,以放免法检测各组血清总IgE。结果:各针刺组均可使致敏豚鼠升高的血清总IgE含量下降,但下降幅度有所差异,以隔日针刺组最为明显,与模型组相比有极其显著差异(P<0·001),其次为隔2日针刺组(P<0·01),再次为每日针刺组(P<0·05)。结论:针刺“大椎”穴使血清IgE含量明显下降,提示针刺“大椎”穴对支气管哮喘有治疗作用,且随治疗频度的不同,其疗效可能不同。     

冠心康对豚鼠缺血再灌注心室乳头肌电生理特性的影响

目的观察中药复方冠心康对豚鼠模拟缺血再灌注损伤心室乳头肌细胞电生理作用,初步探讨其心肌保护机制。方法将32只豚鼠随机分为模型组、格列苯脲组、吡那地尔组、冠心康组（每组8只）,分离左心室乳头肌标本。模型组于正常台氏液平衡灌流30min后,用模拟缺血缺氧液灌流15min,再用正常台氏液复灌30min。吡那地尔组（100μmol/L）和格列苯脲组（100μmol/L）缺血前行药物预处理,其余步骤同模型组。冠心康组动物预先灌胃给予冠心康溶液生药6g.kg^-1.d^-1,每日1次,连续14日,然后分离左心室乳头肌,其余步骤同模型组。采用细胞内标准玻璃微电极技术记录各组动物心室乳头肌细胞电生理参数的变化。结果冠心康预处理对平衡期心肌无明显影响;进一步缩短了缺血早期5min和再灌注早期1min心肌90%动作电位时程（action potential duration at90%repolarization,APD90）,与模型组比较有明显差异（P〈0.05）;自再灌注5min起,冠心康组心肌动作电位时程（action potential duration,APD）迅速恢复,至再灌注30min时50%动作电位时程（action potential duration at50%repo-larization,APD50）和APD90明显长于平衡期（P〈0.05）;冠心康对各时期心肌静息电位（resting potential,RP）、动作电位振幅（ac-tion potential amplitude,APA）均无明显影响。吡那地尔明显缩短缺血5min、再灌注1min、5min和10min心肌APD50和APD90,与模型组比较有显著差异（P〈0.05）,而格列苯脲则明显延长缺血和再灌注心肌APD。结论中药复方冠心康对缺血再灌注心肌细胞具有一定的保护作用,其电生理作用可能与影响KATP通道（ATP-sensitive potassium channels,KATP channels）和Ca2＋通道有关。