活体共聚焦显微镜检查在角膜营养不良诊断中的应用

活体共聚焦显微镜检查(in vivo confocal microscopy,IVCM)无创、快速,可活体观察眼表组织及细胞结构的生理、病理变化,在感染性角膜炎诊断及治疗评价、干眼病眼表评估、眼表手术治疗效果评估及糖尿病早期筛查等方面均有广泛应用。利用IVCM观察角膜营养不良有助于诊断、监测疾病进展、评价治疗效果及了解其病理生理变化等。     

应用共聚焦显微镜对中央角膜组织与屈光度相关性的初步研究

目的 应用共焦显微镜对活体正常角膜各层组织与屈光度之间的相关性进行观察和分析.方法 选择门诊进行屈光检查的患者107例(107只眼).所有患者均经散瞳检影验光检查進行确诊,且矫正视力为0.8以上(屈光度≥-0.75D),检查各层角膜图像均被记录,并对各层细胞形态、细胞密度、角膜全厚、基质厚度、上皮厚度等进行分析.结果上皮基底細胞密度与等效球镜度数呈负性相关性.前基质角膜细胞密度与等效球镜度屈光度呈正相关性.后基质角膜细胞密度与等效球镜度屈光度呈正相关性.内皮细胞密度与等效球镜度呈负性相关性.内皮细胞的多型性与等效球镜度正相关性. 内皮细胞的异型性与等效球镜度无相关性.上皮厚度与等效球镜度数之间无相关性.角膜全厚、基质厚度与等效球镜度数呈负性相关.结论 随着屈光度增加,角膜上皮基底膜细胞、角膜基质细胞、角膜内皮细胞数量下降,角膜全层、角膜基质厚度减少.     

活体共聚焦显微镜在角膜病临床研究中的新进展

活体共聚焦显微镜能在细胞水平实时、非侵入性、高清晰地检测角膜结构,它已广泛应用于角膜病的研究.本文对活体共聚焦显微镜在感染性角膜炎、圆锥角膜、角膜后沉着物、长期应用抗青光眼药物引起的角膜病变及糖尿病相关的角膜病变的临床研究新进展进行综述.     

共聚焦显微镜在活体角膜上皮肿瘤鉴别诊断中的应用

目的 通过活体共聚焦显微镜在角膜上皮肿瘤诊断中的应用,分析、鉴别角膜上皮肿瘤性质.方法 7例角膜上皮肿瘤患者术前均行常规眼部裂隙灯检查、眼前节OCT和活体共聚焦显微镜检查.所有患者均实施角膜肿瘤切除术,术后行肿瘤组织病理学检查,与术前共聚焦显微镜结果比较.结果 7例角膜上皮肿瘤均侵犯透明角膜、角膜缘和球结膜,突起于眼球表面,形状似桑葚,血管丰富.在眼前节OCT检查中5例角膜肿瘤显示密度均匀,与角膜组织之间界限清晰,浅层基质中未见肿瘤密度影;另外2例角膜肿瘤显示,密度不均,与角膜组织界限不清,而且侵犯前弹力层和浅层角膜基质.在活体共聚焦显微镜中7例均显示角膜上皮细胞非典型增生,其中2例非典型增生明显,侵犯前弹力层,在角膜上皮层和浅基质层内形成“癌巢”,5例诊断为角、结膜乳头状瘤,2例诊断为角膜鳞状上皮细胞癌,与术后组织病理学诊断结果一致.结论 活体共聚焦显微镜检查对角膜上皮肿瘤术前诊断肿瘤性质提供重要依据.     

中国人正常角膜的共焦显微镜检查

摘要目的探讨正常人共焦显微镜下角膜各层细胞的活体细胞形态学特征及密度.方法对28例(年龄36.6士14.5岁,范围19～68岁)41眼(男14眼,女27眼)正常人中央部角膜进行活体共焦显微镜检查,描述角膜各层结构的图象特点,并分析角膜各层细胞的密度与年龄的相关性.结果上皮表层细胞排列疏松,边界清楚,核反光较强;基底层细胞排列紧密,胞质和核反光弱,偶尔可见点状细胞核,细胞平均密度为5724.41士562.5个/mm2.Bowman's膜为无一定形状的膜状物,仅可分辨的结构是上皮下的念珠状神经纤维.基质层中可见相对较暗的背景下明亮的角膜细胞核.前基质内有放射状分布的神经纤维.前基质层角膜细胞平均密度为1099.10士164.90个/mm     

共焦显微镜对活体Francois角膜营养不良中央混浊的观察

目的：报告用共焦显微镜观察活体Francois角膜营养不良中央混浊的结果。方法：2位不相关的患者，一位78岁男性和一位75岁女性。均患有Francois角膜营养不良伴中央混浊，用常规裂隙灯活体显微镜和共焦显微镜进行检查。     

共焦显微镜检查在角膜病的应用

共焦显微镜作为一种新型的光学显微镜已广泛应用于眼科临床，使得活体正常人角膜各层结构得以显示。各种屈光矫正方法(角膜接触镜、PRK、LASIK)、角膜营养不良、角膜炎症、角膜移植手术后及虹膜角膜内皮综合征等引起的角膜病理变化均可通过共焦显微镜三维、实时、断层无损伤的检查，得以明确。共焦显微镜在角膜疾病的早期诊断及指导治疗上有其不可比拟的优越性。     

应用活体共聚焦显微镜观察糖尿病患者的角膜细胞

活体角膜共聚焦显微镜是一种无创、快速且全层面的技术,可以实时、动态地观察角膜组织的所有层面。共聚焦显微镜可以通过直接可视化检查角膜不同层面的形态和细胞密度。随着糖尿病患病率的不断上升,眼部并发症已经变得越发常见,并引起眼科临床工作者和科研工作者越来越多的兴趣和逐渐深入的研究。文章旨在通过采用活体角膜共聚焦显微镜观察糖尿病患者角膜组织各层的研究进展进行综述。     

Ⅱ型糖尿病患者角膜的共聚焦显微镜观察

目的共聚焦显微镜下观察Ⅱ型糖尿病患者角膜上皮下神经纤维以及角膜各层细胞密度和形态学改变。设计比较性病例系列。研究对象选取确诊为Ⅱ型糖尿病的患者20例(20眼)为病例组和就诊于眼科门诊的无糖尿病的老年性白内障患者20例(20眼)为对照组。方法病例组和对照组均进行角膜共聚焦显微镜检查,对所得的图片和结果进行分析。主要指标角膜上皮下神经纤维密度、角膜上皮基底细胞密度、角膜浅基质细胞密度、角膜中基质细胞密度、角膜深基质细胞密度、角膜内皮细胞密度、内皮细胞的变异系数和六角形百分比。结果糖尿病组与对照组相比,上皮下神经纤维密度明显减少(t=-4.951,P=0.000);角膜浅基质细胞密度、中基质细胞密度和深基质细胞密度均有显著下降(P值均=0.000);角膜内皮细胞变异系数增加(t’=3.652,P=0.001),六角形百分比减少(t=-3.778;P=0.001)。结论共聚焦显微镜下显示Ⅱ型糖尿病患者角膜上皮下神经纤维密度和各层细胞密度下降。     

《活体角膜激光共聚焦显微镜图谱》一书出版

由北京同仁眼科中心、北京市眼科研究所孙旭光教授主编《活体角膜激光共聚焦显微镜图谱》一书,已由人民军医出版社出版。活体角膜激光扫描共聚焦显微镜分辨率1μm,放大倍率800倍,通过对角结膜组织无创、实时的观察,使眼科医生在活体上,从细胞水平直接观察角结膜及其众多疾病的组织细胞学变化,动态了解疾病的发展和转归,深入探讨疾病的病理机制。本图谱收集整理了作者及其课题组多年来积累的典型角结膜病例,包括感染性角膜病、免疫性角膜病、角膜营养不良与变性、神经营养性角膜病变、角膜手术后、药源性角膜病变、干眼、全身疾病相关性角膜病以及外伤和肿瘤等,通过300余幅图片,展现和总结了共聚焦显微镜在临床指导角结膜病诊断及治疗方面的应用经验。     

Thiel-Behnke角膜营养不良活体共聚焦显微镜下特征及TGFBI基因突变分析

目的 研究Thiel-Behnke角膜营养不良患者临床表现、活体共聚焦显微镜下影像学特征及其TGFBI基因突变。 设计 前瞻性研究。 研究对象 Thiel-Behnke角膜营养不良家系35名成员。 方法 对该家系成员进行视力、裂隙灯显微镜、眼前节相干光断层扫描以及活体共聚焦显微镜检查；取外周静脉血制备血白细胞基因组DNA，PCR扩增TGFBI致病基因，分析患者基因序列变化情况。 主要指标 视力、裂隙灯显微镜检查、眼前节相干光断层扫描影像学观察、活体共聚焦显微镜检查，以及患者外周血基因序列突变分析。 结果 本家系4代35名家系成员中，10例患者表现为双眼角膜前弹力层及其附近可见弥漫性、灰白色混浊物沉积；病灶主要位于角膜中央区和角膜中周部的前弹力层，但浅基质层亦可见点状混浊病灶，呈线状或蜂窝状外观。眼前节相干光断层扫描显示患者角膜前弹力层及浅基质层出现连续、均匀一致的高反光沉积物，沉积物前缘（朝向上皮层）呈锯齿样；活体共聚焦显微镜在上皮层至浅基质层之间可见高反光、不规则、无定形物质沉积，病灶及周围组织未见炎性细胞浸润。外周血基因序列示该家系患者TGFBI基因第12外显子的第39密码子第2个碱基呈杂合子点突变G→A，导致精氨酸转变为谷氨酰胺取代（R555Q）。 结论 R555Q突变所致的Thiel-Behnke角膜营养不良活体共聚焦显微镜下影像学特征为角膜前弹力层高反光、不规则、蜂窝状、无定形物质沉积。     

应用共聚焦显微镜观察有干眼症状软性角膜接触镜配戴者的角膜神经密度

目的 利用活体共聚焦显微镜分析软性角膜接触镜配戴者干眼症状的出现与角膜上皮下神经密度的相关性.方法 前瞻性临床研究.选择无症状软性角膜接触镜配戴者20例(40眼),有症状软性角膜接触镜配戴者20例(40眼)以及从未配戴软性角膜接触镜者17例(34眼,对照组).利用活体共焦显微镜分别拍摄角膜中央、颞侧及鼻侧上皮下神经密度.比较3组眼表疾病评分问卷(OSDI)得分、角膜荧光素染色评分、泪膜破裂时间(BUT)及Schirmer Ⅰ试验结果.采用单因素方差分析.结果 各组之间BUT( F=9.04,P＜0.01),角膜荧光素评分(F=3.21,P＜0.05)差异具有统计学意义.有症状软性角膜接触镜配戴组Schirmer Ⅰ试验结果较对照组小(P＜0.05).各组间不同方位角膜神经密度比较差异无统计学意义.各组内不同方位角膜神经密度比较,鼻侧与中央、颞侧相比较小,差异均有统计学意义(P＜0.05),中央与颞侧差异无统计学意义.结论 有症状软性角膜接触镜配戴者各项客观的干眼评价指标较未配戴软性角膜接触镜者高,与无症状者基本无差异.软性角膜接触镜配戴者干眼症状的出现不会影响角膜中央、颞侧及鼻侧的神经密度.角膜神经密度中央与颞侧基本无差异,而鼻侧小于中央及颞侧.     

《活体角膜激光共聚焦显微镜图谱》一书出版

由北京同仁眼科中心、北京市眼科研究所孙旭光教授主编《活体角膜激光共聚焦显微镜图谱》一书,已由人民军医出版社出版。活体角膜激光扫描共聚焦显微镜分辨率1μm,放大倍率800倍,通过对角结膜组织无创、实时的观察,使眼科医生在活体上,从细胞水平直接观察角结膜及其众多疾病的组织细胞学变化,动态了解疾病的发展和转归,深入探讨疾病的病理机制。     

活体共聚焦显微镜下干燥综合征角膜潜基质神经纤维变化与临床症状相关性分析

目的:应用活体共焦显微镜观察干燥综合征患者角膜潜基质神经纤维的形态学变化,分析其与临床症状的关系。方法:收集22例44眼干燥综合征患者(观察组)和22例44眼同龄健康人(对照组)进行角膜中央神经纤维直径、念珠状结构数目、弯曲度的观察,记录泪膜破裂时间、泪液分泌试验、泪河高度、树突状细胞密度,并对结果进行统计分析。结果:在活体共焦显微镜观察下,观察组角膜潜基质神经纤维直径较对照组小,念珠状结构数目和神经纤维弯曲度均增加(P<0.05)。Pearson相关分析:观察组的角膜潜基质神经纤维直径与泪膜破裂时间(r=0.472,P<0.01)、泪液分泌(r=0.562,P<0.01)、泪河高度(r=0.246,P=0.02)和树突状细胞密度(r=-0.636,P<0.01)呈相关性,角膜潜基质神经纤维念珠状结构数目与泪膜破裂时间(r=-0.621,P<0.01)、泪液分泌(r=-0.688,P<0.01)、泪河高度(r=-0.438,P<0.01)和树突状细胞密度(r=0.528,P<0.01)呈相关性,神经纤维弯曲度与泪膜破裂时间(r=-0.634,P<0.01)、泪液分泌(r=-0.713,P<0.01)、泪河高度(r=-0.384,P<0.01)和树突状细胞密度(r=0.604,P<0.01)呈相关性。结论:活体共焦显微镜能有效观察角膜潜基质神经纤维的形态,干燥综合征患者角膜潜基质神经纤维直径变小,念珠状结构数目增多,神经纤维弯曲度增加,神经纤维损伤程度与干眼症的严重程度呈相关性。     

共聚焦显微镜在LASIK术后角膜检查中的应用

目的评估共聚焦显微镜在准分子激光原位角膜磨镶术（LASIK）术后角膜检查的应用价值。方法横断面研究。选择在北京协和医院行LASIK手术的患者27例（54眼）,根据随访时间分为术后半年组和术后1年组。使用共聚焦显微镜观察其角膜神经的形态,并大致了解其角膜瓣的愈合情况以及各层细胞的结构变化。采用ACCMetrics软件对神经纤维的长度、密度,神经分支密度,神经纤维的弯曲度及反光度进行量化分析,并做组间对比。数据采用成组t检验。结果LASIK术后1年患者的角膜中央神经长度、密度,神经分支密度,神经弯曲度和反光度评分值均显著大于术后半年者（t=7.246、5.335、3.789、3.808、2.825,P<0.01）,飞秒激光制作的角膜瓣边缘更为齐整;术后视力未达1.0的2例患者,共聚焦显微镜提示其角膜微结构存在异常。结论共聚焦显微镜观察发现,LASIK术后1年内患者角膜中央神经处于再生状态,其数量与形态均会发生显著变化;此外,其还能在细胞水平对角膜微结构的改变作出评估,从而协助LASIK术后并发症的诊治。     

激光共焦显微镜对正常人眼角膜缘和中央角膜的观察

目的应用激光共焦显微镜对正常人眼角膜缘和中央角膜的组织结构与细胞形态的观察和分析。方法选择15名正常人的28只眼接受常规裂隙灯显微镜和检眼镜检查后,作为正常健康眼入选本研究。使用激光共焦显微镜对其上、下方角膜缘和角膜中央区进行检查,各层角膜图像均被记录,观察组织结构和细胞形态,对细胞密度进行计数并分析。结果所获角膜缘和角膜中央各层平面图像(x,y轴)及纵向断层图像(z轴)均非常清晰,同时获取动态录像。上、下方角膜缘均呈现Vogt栅栏状结构,并动态观察到血细胞在血管内的流动。表层上皮细胞排列非常疏松,边界明亮,胞体发暗,上方和下方角膜缘表层上皮细胞平均密度分别为(812±297)个/mm2和(785±263)个/mm2,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。上皮下可见明亮的Langerhans细胞,形态不规则,呈树枝状,上方和下方角膜缘Langerhans细胞平均密度分别为(288±102)个/mm2和(254±127)/mm2,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。角膜中央表层上皮细胞排列疏松,边界发亮,胞体发暗,细胞平均密度为(1098±315)个/mm2,多于上方和下方角膜缘(P<0.05)。基底上皮细胞排列紧密。上皮下和前基质层可见反光强烈的神经纤维丛,旁边偶见明亮的Langerhans细胞,形态不规则,细胞密度难以计算。浅层的神经纤维细小、弯曲度大、多小分支,深层的神经纤维粗大、弯曲度小、少见分支。基质层暗背景下散在分布细长的基质细胞,边缘欠清,细胞核明亮呈纺锤形。内皮细胞为排列整齐的六边形细胞,胞体发亮,边界发暗。角膜中央全层、基质层、上皮层厚度分别为(543.0±62.9)、(462·0±69.5)、(59.9±11.2)μm。结论激光共焦显微镜不仅可以对角膜进行无创的、实时的、活体的检查,而且与传统的光学共焦显微镜相比,具有高清晰度、确切的深度定位、时间动态观察、纵向断层扫描等优势,更可提供理想的角膜缘图像,对角膜疾病尤其是角膜缘疾病的基础研究与临床诊断将更有价值。     

《眼表活体共聚焦显微镜》一书出版

由复旦大学附属眼耳鼻喉科医院孙兴怀教授总主编的《眼科新技术应用丛书》之一《眼表活体共聚焦显微镜》（徐建江教授主编）一书已由复旦大学出版社正式出版。眼表活体共聚焦显微镜是近年来出现的一种新型的高精密度、高放大倍率显微镜。     

《眼表活体共聚焦显微镜》一书出版

由复旦大学附属眼耳鼻喉科医院孙兴怀教授总主编的《眼科新技术应用丛书》之一《眼表活体共聚焦显微镜》（徐建江教授主编）一书已由复旦大学出版社正式出版。眼表活体共聚焦显微镜是近年来出现的一种新型的高精密度、高放大倍率显微镜。     

《眼表活体共聚焦显微镜》一书出版

由复旦大学附属眼耳鼻喉科医院孙兴怀教授总主编的《眼科新技术应用丛书）之一《跟表活体共聚焦显微镜》（徐建江教授主编）一书已由复旦大学出版社正式出版。眼表活体共聚焦显微镜是近年来出现的一种新型的高精密度、高放大倍率显微镜。     

共聚焦显微镜在真菌性角膜炎诊治中的临床应用

目的：评价共聚焦显微镜联合角膜刮片在真菌性角膜炎中的临床应用。

方法：对我院临床诊断为真菌性角膜炎的患者56例56眼行共聚焦显微镜检查和角膜刮片检查,包括涂片后显微镜下检查和真菌培养,并进行药物或联合手术治疗,统计诊断的阳性率和治疗预后。

结果：入院时共聚焦显微镜诊断阳性率为91%,角膜刮片病原学检测诊断阳性率为54%,共聚焦显微镜和角膜刮片联合诊断阳性率为95%。治疗后,单纯药物治疗达到临床治愈者44眼(79%),单纯药物治疗无法控制感染需要进行手术治疗者12眼(21%)。

结论：共聚焦显微镜具有非侵入性、快速、重复性好等特点,联合角膜刮片实验室检查可以提高真菌性角膜炎的诊断阳性率,更好地指导治疗。