miRNA-21对其靶基因PTEN在前列腺癌中表达调控机制的研究

目的 观察前列腺癌组织和细胞中miRNA-21和PTEN的表达情况,探讨miRNA-21对PTEN的调控.方法 应用实时荧光定量PCR和Western blot检测正常前列腺组织、前列腺癌组织、非依赖性前列腺癌PC-3细胞中miRNA-21和PTEN的mRNA表和蛋白质表达水平.在前列腺癌PC-3细胞中通过转染miRNA-21 inhibitor成功抑制MiRNA-21表达后,实时荧光定量PCR和Western blot检测PC-3细胞中PTEN表达水平.结果 miRNA-21在前列腺癌组织中的相对表达量为(0.421±0.166),明显高于正常前列腺组织(0.033±0.018) (t=6.6,P＜0.05).miRNA-21 inhibitor转染PC3细胞后miRNA-21在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为(0.516±0.213)、(0.117±0.044)、(0.392±0.171),转染组与空白组及阴性对照组比较差异有统学意义(F=13.1,q=7.05、4.89,P＜0.05).PTEN mRNA在正常前列腺组织、前列腺癌组织的相对表达量分别为(1.534±0.385)、(0.376±0.232),正常前列腺组织高于前列腺癌组织差异有统计学意义(t=5.8,P＜ 0.05); PTEN蛋白在正常前列腺组织、前列腺癌组织中的相对表达量分别为(2.010±0.386)和(0.571±0.143),差异有统计学意义(t=12.3,P＜ 0.05).miRNA-21 inhibitor转染PC-3细胞后,PTEN mRNA在空白组、转染组和阴性对照组组织中的表达差异不显著,但其蛋白的相对表达量分别为(0.399±0.185)、(0.826±0.197)、(0.442±0.149),转染组与空白组及阴性对照组比较差异有统学意义(F=13.9,q=4.79、4.2,P＜ 0.05).结论 前列腺癌组织中miRNA-21的表达上调,在转录后水平抑制PTEN表达,miRNA-21有可能成为前列腺癌治疗的新靶点.     

β连环蛋白与T细胞抑制物过表达对子宫内膜癌细胞活性的影响

目的探讨β连环蛋白(β-catenin)与T细胞抑制物(ICAT)过表达对人子宫内膜癌细胞系HEC-1A活性的影响,为临床诊治提供参考依据。方法重组腺病毒载体ICAT转染HEC-1A细胞为ICAT过表达组,空白腺病毒载体转染HEC-1A细胞为空载腺病毒组,同时设置空白对照组,转染48 h后通过RT-PCR和Western blot法鉴定各组细胞ICAT表达情况;CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期,并进行Transwell细胞迁移和侵袭试验。结果转染48 h后,ICAT过表达组细胞ICAT mRNA和蛋白相对表达量明显高于空载腺病毒组与空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),空载腺病毒组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。转染后第3天、第4天ICAT过表达组细胞增殖速度明显高于空载腺病毒组与空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。转染后第3天,ICAT过表达组G0/G1期细胞比例明显低于空载腺病毒组与空白对照组,S期细胞比例明显高于空载腺病毒组与空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.01);G2/M期细胞比例在3组细胞间差异无统计学意义(均P>0.05)。Transwell细胞迁移和侵袭试验显示,ICAT过表达组迁移和侵袭细胞数明显多于空载腺病毒组和空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论HEC-1A细胞过表达ICAT后,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强,可能与ICAT过表达影响细胞周期及上皮细胞间充质转化有关。     

Piwil4基因敲除对HBV感染诱发肝癌细胞模型的抑制作用及相关机制

目的分析Piwil4基因敲除抑制乙型肝炎病毒(HBV)感染诱发肝癌细胞模型的相关机制。方法选取HBV全长的稳定肝癌细胞系HepG2.2.15作为HBV感染所诱发的肝癌细胞模型,做Piwil4基因敲除和过表达靶点选择、测序引物设计、质粒构建,转染至HepG2.2.15细胞,分为空白组(HepG2.2.15细胞未做任何处理)、敲除组(Piwil4基因敲除)、过表达组(Piwil4基因过表达)。测定细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及JNK/p38MAPK信号通路蛋白表达量。结果与空白组比较,过表达组Piwil4基因mRNA表达量升高,敲除组Piwil4基因mRNA表达量降低(P0.05);与空白组比较,过表达组细胞增殖率升高,细胞凋亡率降低,敲除组细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高,比较差异具有统计学意义(P0.05);与空白组比较,过表达组细胞迁移、侵袭数升高,敲除组细胞迁移、侵袭数降低,比较差异具有统计学意义(P0.05);与空白组比较,敲除组Caspase-3、Bax蛋白表达量升高,Survivin、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达量降低,JNK、p-JNK蛋白表达量升高,ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白表达量降低(P0.05)。结论 Piwil4基因敲除可抑制HBV感染所诱发的肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,发挥体外抗肿瘤作用,其机制可能与调控JNK/p38MAPK信号通路相关。     

CXCR7在骨肉瘤组织、细胞的表达及其意义

目的 研究CXCR7在骨肉瘤组织和骨肉瘤周围正常组织的表达差异,并构建CXCR7腺病毒表达载体,转染骨肉瘤细胞株MG63,观察CXCR7对MG63细胞增殖、炎症因子PGE2分泌的影响.方法 RT-qPCR检测CXCR7在骨肉瘤组织、细胞和骨肉瘤周围正常组织的表达差异;构建CXCR7腺病毒表达载体,感染MG63细胞后,采用RT-qPCR、MTT、ELISA分别检测其对MG63细胞CXCR7 mRNA表达、细胞增殖和PGE2分泌的影响.结果 （1）RT-qPCR结果显示,在骨肉瘤组织CXCR7 mRNA表达率93.80%和表达量（2.221±0.112）均显著高于骨肉瘤周围正常组织45.71%、（0.3448±0.098）;MG63细胞低表达CXCR7 mRNA.（2）CXCR7腺病毒表达载体转染MG63细胞48、72、96 h后,显著促进MG63细胞增殖（P〈0.05）和PGE2分泌（P〈0.05）.结论 骨肉瘤组织CX-CR7mRNA和蛋白表达显著高于骨肉瘤周围正常组织;CXCR7表达增高可以促进骨肉瘤细胞增值,促进炎症因子PGE2分泌,对骨肉瘤的进展将产生不利的影响.     

SDF-1/CXCR4在舌癌组织中的表达及对舌癌细胞系Tca8113增殖、迁移和侵袭的影响研究

目的探讨SDF-1/CXCR4在舌癌组织中的表达及对舌癌细胞系Tca8113增殖、迁移和侵袭的影响。方法 RTPCR及Western blot检测舌癌组织及癌旁组织中SDF-1和CXCR4的mRNA和蛋白表达;培养人舌癌细胞系Tca8113,将细胞分为对照组、SDF-1组、SDF-1+AMD3100组、AMD3100组,Western blot检测四组细胞CXCR4、MMP-2、MMP-9蛋白表达,CCK8试验检测四组细胞增殖,Transwell小室检测四组细胞迁移和侵袭数。结果舌癌组织中SDF-1和CXCR4的mRNA和蛋白表达均显著高于癌旁组织(P0.01);SDF-1组CXCR4、MMP-2、MMP-9蛋白表达及细胞增殖、迁移、侵袭均显著高于另外三组(P0.01);SDF-1+AMD3100组CXCR4蛋白表达显著低于对照组和SDF-1组;MMP-2、MMP-9蛋白表达及细胞增殖、迁移、侵袭与对照组差异不显著(P0.05),但均显著低于SDF-1组;CXCR4、MMP-2、MMP-9蛋白表达及细胞增殖、迁移、侵袭均显著高于AMD3100组(P0.01);AMD3100组CXCR4、MMP-2、MMP-9蛋白表达及细胞增殖、迁移、侵袭均显著低于另外三组(P0.01)。结论 SDF-1和CXCR4在舌癌组织高表达,SDF-1可上调CXCR4在人舌癌细胞系Tca8113的表达,其过程能被AMD3100减弱。SDF-1/CXCR4可促进细胞的增殖、侵袭和迁移,此过程可被AMD3100抑制。     

siRNA靶向干扰PTPRO对结直肠癌HCT116细胞增殖与侵袭影响

目的结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,近年来结直肠癌发病率上升趋势,已仅次于肺癌。本研究通过应用小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术,靶向干扰膜结合受体型蛋白酪氨酸磷酸酶O(protein tyrosine phosphatase-receptor-type O,PTPRO),观察其对结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭的影响。方法培养结直肠癌HCT116细胞,随机分为实验组、阴性对照组、空白组,利用脂质体2000将PTPRO-siRNA体外转染至实验组细胞内、将无关序列NC-siRNA体外转染至阴性对照组细胞内,空白组不予转染。转染48h后,利用荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测各组PTPRO的mRNA和蛋白表达情况;另取细胞,同法分组、转染,采用CCK-8法、Transwell小室细胞侵袭实验检测细胞的增殖、侵袭能力的变化。结果实验组、阴性对照组和空白组PTPRO mRNA的相对表达量分别为(0.112±0.031)、(0.776±0.077)和(0.972±0.074),差异有统计学意义,F=247.344,P0.001。实验组、阴性对照组和空白组PTPRO的相对表达量分别为(0.150±0.045)、(0.366±0.050)和(0.434±0.049),差异有统计学意义,F=47.391,P0.001。各组细胞增殖能力随着转染时间的延长逐渐提高,且实验组转染细胞增殖能力均高于同期阴性对照组及空白组,均P0.05。实验组穿膜细胞数(104.400±9.978)显著高于阴性对照组的(63.300±6.513)及空白组的(62.100±7.317),差异有统计学意义,F=266.970,P0.001。结论 siRNA靶向干扰PTPRO对结直肠癌HCT116细胞增殖及侵袭有促进作用,PTPRO可能是结直肠癌的抑癌因子之一,具有抑制肿瘤生长、侵袭的作用。     

miR-378对卵巢癌细胞增殖能力的影响

目的探究微小RNA378(miR-378)与c-Myc表达的关系及其与卵巢癌细胞增殖能力的影响。方法培养对数生长期人卵巢癌细胞系SKOV3,慢病毒转染法外源性上调SKOV3细胞中miR-378的表达作为实验组,同时转染空白载体作为对照组,Taqman实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术检测两组细胞miR-378及c-Myc mRNA表达水平,免疫印迹实验(Western Bolt)检测两组细胞c-Myc蛋白表达水平,CCK-8实验检测两组细胞增殖能力的情况,克隆形成实验检测两组细胞克隆形成能力的情况。结果实验组miR-378的表达水平显著高于对照组细胞(P0.001);实验组c-Myc mRNA表达水平显著低于对照组细胞(P0.05);实验组c-Myc蛋白表达水平同样显著低于对照组细胞(P0.05);实验组细胞增殖能力在48及72h时显著低于对照组细胞(P0.05);实验组细胞克隆形成能力显著低于对照组细胞(P0.01)。结论 miR-378可能通过抑制原癌基因c-Myc的表达,介导卵巢癌细胞增殖能力的下调。     

SDF-1/CXCR4信号通路对喉癌Hep-2细胞增殖的作用

目的:观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对喉癌Hep-2细胞的增殖作用,并探讨其作用机制。方法:体外培养Hep-2细胞,SDF-1慢病毒(4μl,1×1010病毒颗粒)和同剂量siRNA SDF-1转染Hep-2细胞6 d后,细胞分为对照组、siRNA SDF-1组和SDF-1组。MTT法检测各组Hep-2细胞增殖情况。实时荧光定量PC检测各组细胞SDF-1、CXCR4及血管内皮因子C(VEGF-C)mRNA相对表达。结果:镜下观察SDF-1组Hep-2细胞数量显著高于对照组和siRNA SDF-1组,MTT法显示SDF-1组Hep-2细胞在8 d增殖显著高于对照组和siRNA SDF-1组(P0.05),实时荧光定量PCR结果表明SDF-1转染组SDF-1、CXCR4和VEGF-C mRNA表达显著高于对照组和siRNA SDF-1组(P0.05),而对照组和siRNA SDF-1组SDF-1、CXCR4和VEGF-C mRNA表达未见显著差异(P0.05)。SDF1与CXCR4及VEGF-C mRNA表达显著正相关(P0.05)。结论:SDF-1/CXCR4信号通路能够通过上调VEGF-C表达促进喉癌Hep-2细胞增殖,SDF-1/CXCR4信号通路可成为治疗喉癌新的靶点。     

沉默CDK6对人卵巢癌细胞增殖和粘附的影响

目的探讨沉默周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)基因对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和粘附能力的影响。方法设计合成5条特异性CDK6 shRNA转染HO-8910细胞,检测转染前后细胞内CDK6 mRNA的表达变化;选出抑制作用最强的CDK6-shRNA转染HO-8910细胞,用MTT法检测转染前后HO-8910细胞增殖和粘附能力的变化。结果CDK6 shRNA-608表达载体明显抑制了HO-8910细胞中CDK6基因mRNA的表达,转染48 h后,细胞的增殖能力和粘附能力明显下降,与无关序列组和空白对照组比,差异显著(P<0.05)。结论沉默CDK6基因可抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖和粘附能力。     

Caveolin-1在人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系中的表达

目的研究人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3和PC-3m细胞中Caveolin-1 mRNA的表达，分析Caveolin—1与前列腺癌发生发展的关系，探讨Caveolin—1表达在PC-3m具有高侵袭性和转移性中的作用。方法以PC-3和PC-3m细胞系为研究对象，采用RT-PCR检测PC-3和PC-3m细胞系中Caveolin-1 mRNA的表达。结果PC-3、PC-3m细胞中均有Caveolin-1 mRNA的表达，其在PC-3m细胞中的表达水平明显高于PC-3细胞，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Caveolin-1在人前列腺癌的侵袭和转移过程中发挥作用。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

Choice of measures of vaccination and estimates of risk of pediatric pertussis

BackgroundVaccination uptake at the individual level can be assessed in a variety of ways, including traditional measures of being up-to-date (UTD), measures of UTD that consider dose timing, like age-appropriate vaccination, and risk reduction from individual doses. This analysis compared methods of operationalizing vaccination uptake and corresponding risk of pertussis infection.MethodsCity-wide case-control study of children in Philadelphia aged 3 months through 6 years, between 2001 and 2013. Multiple logistic regression was used to isolate the independent effects of each measure of vaccination uptake and the corresponding relative odds of pertussis.ResultsBeing UTD on vaccinations was associated with a 52% reduction in risk of pertussis (OR 0.48, 95% CI: 0.34, 0.69). Evaluation of delayed receipt of vaccine versus on-time UTD yielded similar results. There was a decrease in risk of pertussis for each additional dose received with the greatest reduction in pertussis infection observed from the first (OR 0.48, 95% CI: 0.28, 0.83) and second dose (OR 0.17, 95% CI: 0.08, 0.34). Additional doses conferred minimal additional protection in this age group.ConclusionExamining vaccination status by individual doses may offer improved predictive capacity for identifying children at risk for pertussis infection compared to the traditional UTD measure.     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。     

尘肺病患者145例死因调查

目的分析汉中市尘肺病的发生、发展和死亡原因，以提高尘肺病患者的生存质量。方法对145例尘肺病患者的死因进行回顾性分析，计算其平均发病年龄、死亡年龄及患尘肺病后的存活年限。结果矽肺的平均发病年龄和死亡年龄均早于煤工尘肺和石棉肺，尘肺病的主要死因为患肺部疾患，患尘肺病后的平均存活年限为12a。结论加强职业健康体检工作，对尘肺病人做到早发现早治疗和预防并发症的发生。     

Correlates of stages of change of smoking among inhabitants of deprived neighbourhoods

BACKGROUND: This study examines the prevalence and correlates of stages of change of smoking, in terms of psychosocial, structural and sociodemographic factors, among inhabitants of deprived neighbourhoods. METHODS: Cross-sectional data were obtained from a survey on health related behaviour. Subjects were 2009 current and former smokers, aged 20-46, living in deprived neighbourhoods in Rotterdam, the second largest city in the Netherlands. Three groups of smokers were formed according to the stages of change-definitions of the Transtheoretical Model: smokers not planning to quit (precontemplators), smokers planning to quit (contemplators/preparators) and former smokers (actors/maintainers). Smokers planning to quit and smokers not planning to quit were compared regarding psychosocial factors (attitude, social norm, self-efficacy), structural factors (neighbourhood problems, material deprivation, financial problems, employment status) and sociodemographic factors (age, gender, marital status, cultural background, educational level). Former smokers were compared with smokers planning to quit regarding structural and sociodemographic factors. Logistic regression was used to assess correlates of stages of change. RESULTS: Smokers planning to quit (prevalence = 19%) reported a more positive attitude, stronger social norms and higher self-efficacy expectations in quitting smoking than smokers not planning to quit (prevalence = 57%). Smokers planning to quit less often were Dutch-born, more often had attended higher vocational schooling or university and more often reported experiencing two or more neighbourhood problems compared to smokers not planning to quit. Former smokers (prevalence = 24%) were older, more often Dutch-born, married, employed and higher educated, compared to smokers planning to quit. Furthermore, former smokers less often reported material deprivation and financial problems than smokers planning to quit. CONCLUSION: Among people living in deprived neighbourhoods, different factors correlate with different stages of change of smoking. Implications for health promotion are discussed.     

西林瓶装注射用水的装量检查分析

为了检查西林瓶装注射用水的实际分装量是否符合2005年版《药典》三部要求,按照2005年版《药典》三部中“生物制品分装和冻干规程”,分装规格为0．8ml的西林瓶装注射用水10000瓶,随机在分装过程的前、中、后阶段共抽取100瓶,轧盖、目检。分别用1ml标定注射器及1ml普通无菌注射器抽取每瓶注射用水的实际体积,以t检验法对实际抽取量与标示量的差值进行统计学分析,结果显示其与2005年版《药典》三部要求分装附加量为0．1ml相比有显著性差异（P〈0．001）。     

对《医疗事故处理条例》的几点认识--学习《医疗事故处理条例》的一点体会

国务院颁布的《医疗事故处理条例》（以下简称《条例》）在吸收、总结原《医疗事故处理办法》（以下简称《办法》）实施十几年以来正反两方面经验教训的基础上，对《办法》作了许多重大的修改：《条例》扩大了医疗事故的主体与范围，提出了防范医疗事故的一些重要措施，授权医学会独立担纲医疗事故技术鉴定工作，赋予了患者更多的权利，规定医疗事故民事责任争议可以“私了”，制定了更为规范的医疗事故的赔偿制度等。《条例》作出的这些新规定必将使医疗事故得以更加科学、客观、公正、公平、合理的解决。认真学习、把握《条例》的这些新规定，很好地透视《条例》的立法宗旨与原则，必将极大地提高学习、宣传《条例》的主动性与积极性，更好地推进《条例》的贯彻执行工作。     

The analysis of case-control studies of the efficacy of screening for recurrence of cancer

Occasionally, the efficacy of screening for cancer recurrence has been evaluated by means of case-control studies. However, these studies generally have not been designed and analyzed in a manner that will yield an unbiased result. The commentary shows that by adhering to the principles developed for the analysis of studies of the efficacy of screening for the presence of a given cancer in persons with no history of this disease, a case-control study of screening for recurrence will improve its chances of obtaining valid findings.     

137例地中海贫血出生相关因素分析

目的:揭示地中海贫血患儿出生相关因素,提出干预措施,为进一步制定地贫预防控制总体规划提供决策参考。方法:对近3年137例地贫儿(45例重型β-地贫、29例中间型β-地贫、32例中间型α-地贫和31例巴氏胎儿水肿综合征)出生相关因素进行调查研究。结果:地贫儿出生相关社会心理因素顺位依次为:基因携带者不知情(70.07%)、经济困难(21.17%)、心理因素(5.11%)、其它(3.65%)。基因携带者对自身情况不知情是本组地贫儿主要出生相关因素,与其它出生相关因素有显著差异(P<0.05)。结论:基因携带者自身的认识与重视是预防控制工作的一个重要组成部分,地贫高发区人群携带者(轻型β-地贫、α-地贫特征和静止型携带者)的检出及系统管理是预防控制工作的关键环节,应进一步应用生物、社会及心理的医学模式搞好地贫预防控制工作。     

可乐对小鼠精子质量影响

目的 探讨可乐对雄性小鼠精子质量及数量的影响.方法 31只昆明种雄性小鼠按体重随机分为阴性对照组、低剂量组、高剂量组(分别以0.6ml生理盐水、0.3,0.6ml可乐灌胃),腹腔注射组(0.6ml可乐注射)和阳性对照组(0.6ml环磷酰胺腹腔注射)5组.灌胃及腹腔注射1次/d,连续7d,测定小鼠精子的运动参数,并观察其畸形发生率.结果 高剂量组肾脏系数与阴性对照、低剂量组比较差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔注射组与阴性对照组比较小鼠附睾系数明显升高(P<0.05).腹腔注射组的精子平均移动角度与阴性对照组比较明显升高(P<0.05),低剂量组精子密度与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).高剂量组、阳性对照组与阴性对照组比较精子畸形率明显升高(P<0.05);低、高剂量组及腹腔注射组与阳性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);低、高剂量组与腹腔注射组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 可乐对小鼠精子活性和形态有一定的影响.