CXCR2和CXCR4对人宫颈癌HeLa细胞作用

目的 了解 CXCR2 和 CXCR4 对 HeLa 细胞迁移、增殖和分泌 VEGF 的影响。方法 Transwell 检测 HeLa 细胞迁移情况;MTT 法检测 CXCR2 和 CXCR4 对HeLa细胞增殖的影响;ELISA法检测HeLa细胞VEGF表达情况。结果 敲除 CXCR2 或 CXCR4 后,宫颈癌 HeLa 细胞迁移率分别为（2.1±0.8）和（2.6±0.9）,未敲除组迁移率为（3.6±1.1）,差异有统计学意义（P<0.05）;激活 CXCR2 或 CXCR4 后,HeLa 细胞增殖率分别为（86.1±15.3）% 和（83.9±15.9）%,未激活组HeLa细胞增殖率为（66.7±8.7）%（P<0.05）,激活 CXCR2 或 CXCR4 后,VEGF 表达水平分别为（6.84±0.19）和（6.59±0.14） pg/L ,未激活组为（0.74±0.03） pg/L（P<0.05）。结论 HeLa细胞表面高表达的 CXCR2 和 CXCR4 在诱导 HeLa 细胞迁移、增殖和分泌 VEGF 方面具有重要的作用。     

CXCL12/CXCR4在人早孕期蜕膜腺上皮细胞存在共表达模式及其生物学作用

目的解析CXCL12/CXCR4在人早孕期蜕膜腺上皮细胞存在共表达模式及其生物学作用。方法收集正常妊娠6～10周蜕膜组织由天佑医院妇产科门诊手术室提供,免疫细胞化学法检测蜕膜腺上皮细胞CXCL12/CXCR4的表达;ELISA法检测蜕膜腺上皮细胞培养上清CXCL12的分泌水平;MTT法分析CXCL12/CXCR4对蜕膜腺上皮细胞的生物学调节作用。结果免疫细胞化学发现人早孕期蜕膜腺上皮细胞同时表达CXCL12/CXCR4,且体外培养的蜕膜腺上皮细胞可自发分泌CXCL12;MTT法发现CXCL12处理后蜕膜腺上皮细胞的体外增殖活力无明显改变。结论 CXCL12/CXCR4在人早孕期蜕膜腺上皮细胞存在共表达模式。     

异黄酮类化合物对前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制

[目的 ]通过观察金雀异黄素 (genistein ,GS)、大豆苷元 (daidzein ,DA)和大豆黄素 (glycitein ,GL)对前列腺癌细胞 (PC 3 )增殖的影响 ,探讨通过膳食干预途径预防前列腺癌发病的可行性。 [方法 ]将PC 3在PRMI 164 0培养液 (含10 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。实验设溶剂对照组、顺铂阳性对照组及三种受试物各三个剂量组 (5× 10 -6mol/L ,2 5× 10 -6mol/L ,75× 10 -6mol/L) ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对PC 3的增殖情况进行分析。 [结果 ]与溶剂对照组相比 ,2 5 μmol/LGS、75 μmol/LDA和 75 μmol/LGL对PC 3处理 72h可抑制PC 3增殖 ,抑制率分别为42 %、5 0 %及 3 9%。三种受试物均可抑制细胞DNA合成并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,降低细胞增殖指数。 [结论 ]大豆异黄酮类化合物GS、DA和GL均具有明显抑制前列腺癌细胞PC 3增殖效应 ,并呈现剂量 效应和时间 效应关系 ,提示通过膳食干预方式可预防前列腺癌的发生     

趋化因子CXCL12及其受体CXCR4与结直肠癌肝转移的相关性研究进展

结直肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其发病率、死亡率均呈逐年上升趋势。其中,肝转移是结直肠癌患者的主要死亡原因。因此,深入研究结直肠癌肝转移的分子机制尤其重要。新近研究表明,趋化因子及其受体在肿瘤转移的各个环节中起着重要促进作用,包括肿瘤细胞粘附内皮细胞,肿瘤细胞迁移出血管,转移瘤定植、血管再生、增殖等。本文主要探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4与结直肠癌肝转移之间的关系,以期达到对结直肠癌肝转移的早预防和早诊治的目的,从而提高结直肠癌患者的生存率。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞抑制作用

研究表明，主要存于葡萄皮、籽中的白藜芦醇能有效地治疗前列腺癌，但尚未应用于前列腺癌的预防。如果葡萄及其制品具有预防和抗前列腺癌功效，则可选择一种易加工、符合人们饮食习惯的消费产品-葡萄汁，以达到预防效果，从而放弃对需高成本的白藜芦醇单体的提取。本研究将葡萄（含皮、籽）制备成葡萄汁，观察其对体外人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制的作用及其机制。方法:白藜芦醇及不同浓度葡萄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测葡萄汁、白藜芦醇对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末端标记法(TUNEL)观察凋亡细胞的形态结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰。结果:葡萄汁、白藜芦醇能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞生长;TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰。以上各指标中,葡萄汁随着浓度增大作用加强;低剂量组的作用比白藜芦醇组差,中、高剂量组的白藜芦醇浓度低,但作用比白藜芦醇组强。结论:葡萄汁对抗人前列腺癌PC-3细胞的作用,除白藜芦醇外,可能还存在其他抗癌成分的作用。葡萄汁、白藜芦醇对PC-3细胞生长抑制作用的机制可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡有关。     

番茄红素对前列腺癌细胞PC-3增殖和细胞周期的影响

目的研究番茄红素对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3的抑制作用及其可能的作用机制。方法采用MTT法和H3-TdR掺入法观察番茄红素对癌细胞增殖的影响,流式细胞仪观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化,RT-PCR检测cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达的变化。结果番茄红素抑制PC-3细胞的增殖和DNA合成、诱导其凋亡、改变细胞周期分布(使G0/G1期细胞增多、而S期和G2/M期细胞减少)。RT-PCR结果显示,cyclin D1和bcl-2的mRNA表达水平下调,而bax的mRNA表达水平上调。上述作用呈剂量效应关系。结论番茄红素可诱导PC-3细胞凋亡、改变细胞周期分布、影响cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖。     

Leptin对人早孕期滋养细胞CXCR4、MMP_9及VEGF表达的影响

目的:研究不同浓度leptin对人早孕期滋养细胞表达CXCR4、MMP9及VEGF的影响。方法:分离、培养早孕期滋养细胞,并添加不同浓度的leptin,培养24 h后,RT-PCR法检测滋养细胞中CXCR4、MMP9及VEGF mRNA表达水平的变化。结果:添加了Leptin的滋养细胞表达CXCR4、MMP9及VEGF mRNA的量较空白对照组明显增加(P<0.01),其中,当Leptin剂量达到500 ng/m l时,CXCR4 mRNA 2倍增加、MMP9及VEGF mRNA均5倍增加。结论:Leptin能增强滋养细胞分泌CXCR4、MMP9及VEGF的能力。与早孕期滋养细胞分泌的CXCR4、MMP9及VEGF维系正常妊娠的作用相同,leptin可能在孕早期参与了胎盘形成等病理生理过程。     

VEGF对乳腺癌CXCR4表达及细胞增殖的影响

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)对乳腺癌细胞CXCR4蛋白表达及癌细胞增殖的影响。方法:选用高表达CXCR4的乳腺癌细胞系MDA-MB-231作为研究对象。将该细胞系分为4组培养:阴性对照组、siRNA-CXCR4组、VEGF组和siRNA-CXCR4同时加入VEGF组。Western-blot方法检测各组CXCR4蛋白水平表达,并用体外增殖实验检测各组乳腺癌细胞增殖情况。结果:Western-blot结果显示,siRNA-CXCR4组CXCR4表达量较阴性对照组低;VEGF组CXCR4表达量较阴性对照组高;且siRNA-CXCR4同时加入VEGF组CXCR4表达量较siRNA-CXCR4组增加。体外细胞增殖实验显示,不同时间点各实验组细胞增殖速度与阴性对照组相比,siRNA-CXCR4组显著减低(P<0.05),VEGF组显著提高(P<0.05);并且siRNA-CXCR4同时加入VEGF组与siRNA-CXCR4组相比细胞增殖速度增加(P<0.05)。结论:siRNA沉默CXCR4基因可下调乳腺癌细胞CXCR4表达且体外细胞实验显示可有效抑制细胞增殖,提示CXCR4可能有促进乳腺癌细胞增殖的作用。在VEGF刺激下,乳腺癌细胞CXCR4表达增加,且癌细胞增殖速度明显增快,即使在沉默CXCR4条件下,VEGF仍能上调CXCR4表达,从而促进乳腺癌细胞增殖。因此说明在乳腺癌细胞增殖过程中VEGF和CXCR4有协同作用,针对CXCR4的单一靶点治疗可能难以有效抑制肿瘤生长,而作用于二者的联合用药也许能获得更佳的疗效,该结论尚需在临床实践中进一步验证。     

CXCR－4和OPN在食管鳞状细胞癌组织的表达及其临床意义

目的探讨趋化网子受休4（CXCR-4）及骨桥蛋白（osteopontin,OPN）在食管鳞癌中的表达情况及其与各临床病理资料的关系。方法应用免疫组化技术检测60例食管鳞癌组织及其相应痛旁正常组织中CXCR-4和OPN的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果食管鳞癌组织中CXCR-4和OPN的阳件表达率分别为76．7％和80．0％。与癌旁正常组织表达率10．0％和5．0％相比差异有统计学意义（P〈0．05）。CXCR-4和OPN的表达与淋巴结转移状态、肿瘤临床分期有关（P〈0．05）。结论CXCR-4和OPN在食管鳞癌中的表达与食管鳞癌的发生、发展相关,表达增高可能预示食符癌发展较快、病程较晚、存在淋巴结转移,二者的联合检测可为食管痛的诊断、治疗提供重要信息,可能成为临床判断预后和指导治疗的重要指标,也为临床寻找有效治疗食管癌的方案提供了新的思路。     

急性髓系白血病细胞表面趋化因子受体CXCR4表达情况研究

摘要:目的　通过研究急性髓系白血病（AML）患者白血病细胞表面趋化因子受体CXCR4的表达情况,探讨CXCR4在AML中表达的意义。方法　收集初诊未治疗的130例AML患者,根据FAB分型标准进行分类,以急性淋巴细胞白血病（ALL）患者和非血液系统疾病患者作为对照,检测3组之间及不同FAB亚型之间CXCR4表达情况,分析CXCR4在白血病尤其是AML中表达的意义。结果　AML实验组和ALL对照组细胞表面CXCR4相对荧光强度明显高于非血液系统疾病对照组,且ALL对照组荧光强度最高（P＜0.05）。M3和M4/M5亚型组白血病细胞CXCR4 表达明显高于其他亚组（P＜0.05）。结论　CXCR4的高表达可能与白血病的发病、浸润及病情发展有关,可为预防白血病细胞迁移及髓外浸润,提高难治性AML疗效和减少AML复发等方面提供新的思路。     

CXCR4、VEGF-C、CK19和EMA在宫颈癌原位灶和淋巴结中的表达及相互关系

目的 探讨趋化因子受体CXCR4、血管内皮生长因子-C (VEGF-C)、上皮膜抗原EMA和细胞内角蛋白19 (CK19)在宫颈癌原位灶及淋巴结组织中的表达,并探讨这几个因子之间的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(Real Time PCR),对40例宫颈癌患者的原位灶组织中的CXCR4基因进行定量检测.用免疫组化方法(SP法)和HE染色法检测40例宫颈癌患者的原位灶组织中及淋巴结组织中的VEGF-C、CK19和EMA表达.结果 本研究显示宫颈癌原位灶表达CXCR4及VEGF-C,淋巴结高表达CK19、EMA.CK19与VEGF C间呈正相关(r=0.489,p=0.014),CXCR4与VEGF-C呈正相关(r=0.521,p=0.000),用逻辑回归的方法检测EMA与VEGF-C间无明显相关性(P=0.272).结论 CXCR4和VEGF-C及CK19、EMA的表达均与宫颈癌的发生发展相关.     

CXCR3／CXCL10在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨趋化因子受体3（CXCR3）及趋化因子配体10（CXCL10）在乳腺癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法及二步法对60例乳腺癌组织、20例乳腺纤维瘤组织及20例乳腺腺病组织分别进行CXCR3、CXCL10检测。结果乳腺癌中CXCR3（40／60,66．7％）、CXCL10（45／60,75％）的表达高于乳腺腺病[CXCR3（8／20,40％）X^2=4．44,P=0．035;CXCL10（10／20,50％）x。=4．36,P=0．037）],乳腺癌中CXCR3的表达与有无腋窝淋巴结转移、临床分期、HER-2的表达有关（X^2=4．15,P=0．042;X^2=7．74,P：0．021;X^2=4．27,P=0．039）,且CXCR3的表达强度与腋窝淋巴结转移数及临床分期目呈正相关（-=0．375,P=0．003;t=0．451,P=0．000）。结论CXCR3可能与乳腺癌的进展及早期转移有关,CXCR3可能作为乳腺癌的一个预后指标。     

番茄原汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用的研究

目的　探讨番茄原汁对人前列腺癌PC -3细胞生长抑制作用及其可能机制。方法　不同浓度的番茄原汁作用于人前列腺癌PC- 3细胞4 8小时;采用噻唑蓝(MTT)法检测番茄原汁对人前列腺癌PC- 3细胞的生长抑制作用,彗星试验检测PC -3细胞DNA损伤作用。结果　番茄原汁能抑制人前列腺癌PC- 3细胞生长,与对照组相比差异有极显著性;引起PC-3细胞DNA单链断裂,出现拖尾的彗星细胞,拖尾率与尾长随着番茄原汁浓度增大而增加,表现明显的剂量反应关系。结论　番茄原汁对PC- 3细胞生长抑制作用的机理可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞DNA损伤的有关     

染料木素对前列腺癌细胞恶性增殖的抑制作用

目的研究染料木素（Gen）对人前列腺癌细胞（PC-3）的影响。方法将PC-3细胞在DMEF-12培养液（含10％胎牛血清）中采用开放式单层贴壁培养，采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）比色法、细胞核分裂指数、集落形成和^3H-TdR掺入试验方法进行检测。染料木素剂量设为10，20，40，80μmol／L。以二甲基亚砜（DMSO）为溶剂对照。结果不同剂量的染料木素对PC-3细胞的生长增殖有不同的抑制作用。在MTT试验中，不同浓度染料木素对PC-3细胞的7d抑制率分别为27．7％，58．8％，72．3％，84．4％。在核分裂指数试验中，随着染料木素剂量的增高，其核分裂指数明显降低；遮集落形成试验中，随着染料木素剂量的增加，集落形成抑制作用增加；在^3H-TdR掺入试验中，可见随着染料木素剂量的增高，^3H-TdR掺入到PC-3细胞中明显的减少，与阴性对照组比较差异有统计学意义。结论染料木素对PC-3细胞的生长增殖有明显抑制作用，可能是染料木素抑制前列腺癌的机制之一。     

Formulation of the bivalent prostate cancer vaccine with surgifoam elicits antigen-specific effector T cells in PSA-transgenic mice

We previously developed and characterized an adenoviral-based prostate cancer vaccine for simultaneous targeting of prostate-specific antigen (PSA) and prostate stem cell antigen (PSCA). We also demonstrated that immunization of mice with the bivalent vaccine (Ad₅-PSA+PSCA) inhibited the growth of established prostate tumors. However, there are multiple challenges hindering the success of immunological therapies in the clinic. One of the prime concerns has been to overcome the immunological tolerance and maintenance of long-term effector T cells. In this study, we further characterized the use of the bivalent vaccine (Ad₅-PSA+PSCA) in a transgenic mouse model expressing human PSA in the mouse prostate. We demonstrated the expression of PSA analyzed at the mRNA level (by RT-PCR) and protein level (by immunohistochemistry) in the prostate lobes harvested from the PSA-transgenic (PSA-Tg) mice. We established that the administration of the bivalent vaccine in surgifoam to the PSA-Tg mice induces strong PSA-specific effector CD8⁺ T cells as measured by IFN-γ secretion and in vitro cytotoxic T-cell assay. Furthermore, the use of surgifoam with Ad₅-PSA+PSCA vaccine allows multiple boosting vaccinations with a significant increase in antigen-specific CD8⁺ T cells. These observations suggest that the formulation of the bivalent prostate cancer vaccine (Ad₅-PSA+PSCA) with surgifoam bypasses the neutralizing antibody response, thus allowing multiple boosting. This formulation is also helpful for inducing an antigen-specific immune response in the presence of self-antigen, and maintains long-term effector CD8⁺ T cells.