蜂胶水提液预处理对缺血再灌注大鼠小肠肠系膜微循环的改善作用及机制

目的:研究蜂胶水提液(WEP)预处理对缺血/再灌注(I/R)大鼠小肠肠系膜微循环的改善作用及其机制。方法:32只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)、I/R和WEP(100、200mg/kg)预处理组,以无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉建立小肠I/R损伤模型,于再灌注2h时观测肠系膜微循环变化,分别采用Nackel氏分度法和测定小肠湿/干重比来判定肠道损伤水肿情况,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血浆可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)含量,分光光度计法测定小肠组织髓过氧化酶(MPO)活性。结果:(1)与I/R组比较,WEP预处理组小肠病理变化明显减轻,Nackel氏分度和小肠湿/干重比明显降低(P0.01);(2)WEP明显改善肠系膜微循环血流状态,减轻I/R所致的微动静脉收缩(P0.05)、血流速度减慢(P0.01)和微血管内白细胞贴壁滚动、黏附(P0.01),且明显降低血浆sICAM-1含量(P0.05)和小肠组织MPO活性(P0.01)。结论:蜂胶水提液预处理可改善小肠I/R大鼠肠系膜微循环,其机制可能与抑制ICAM-1介导的中性粒细胞活化有关。     

细胞间黏附分子-1抑制参与大鼠小肠缺血后处理的保护作用

目的观察缺血后处理（I-postC）对缺血／再灌注（I／R）大鼠小肠组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达和髓过氧化物酶（MPO）活性的影响，探讨其减轻I／R损伤的机制。方法32只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术（Sham）、I／R、I-postC及缺血预处理（IPC）组，以无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉建立小肠I／R损伤模型，常规制备病理切片，光镜下观察肠组织损伤情况。试剂盒测定MPO、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量，免疫印迹法检测小肠组织ICAM-1和NF-κBP65的表达。结果I-postC明显减轻I／R导致的小肠组织病理变化，抑制I／R所致的小肠组织MPO活性和MDA含量升高（分别为I／R组的68．7％和77、1％，P〈0.05），上调SOD活性（为I／R组的1．2倍，P〈0.05），并下调小肠组织NF-κBP65和ICAM-1表达（分别较I／R组低44．3％和49．0％，P〈0．01）。结论I-postC通过抑制ICAM-1表达和中性粒细胞游出而减轻小肠I／R损伤。     

转染Akt-1基因对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用研究

目的通过观察转染Akt-1基因对大鼠心肌缺血-再灌注（I-R）损伤心脏功能及细胞凋亡相关蛋白的影响,探讨Akt-1基因对心肌I-R损伤保护作用的机制。方法使用结扎／松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30min,再灌注2h,建立大鼠在体心肌I-R模型。40只雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组（S组）,缺血-再灌注组（I—R组）,转染Akt-1基因组（Gene组）,空载体组（VC组）,抑制剂组（AB组）,每组8只。Gene组术前48h开胸心肌内直接分点注射脂质体Akt-1质粒复合物,S组和I-R组分别注射同等体积PBS,VC组注射等体积脂质体,AB组注射等体积脂质体Akt-1质粒LY294002混合物。所有大鼠经颈动脉插管至左心室记录HR、LVSP、LVEDP和±do／dtmax变化,TTC染色法测定心肌梗死范围,TUNEL法原位标记凋亡心肌细胞,Western Blot测定Akt-1、Casepase-3蛋白表达,免疫组化检测Bcl-2、Bax表达。结果1．Gene组较I—R组、VC组和AB组左室心功能（HR、LVSP、LVEDP、±dp／dtmax）改善（P〈0．05）。2．Gene组凋亡指数（AI）及心肌梗死范围较I-R组、VC组及AB组均显著减少（P〈0．05）,但仍高于S组（P〈0．05）;S组细胞凋亡阳性细胞几无表达,心肌细胞凋亡指数（AI）明显低于其余各组（P〈0．05）。3．各组均可见Akt-1、Casepase-3蛋白表达,但S组中蛋白较其余各组减少（P〈0．05）;Gene组Akt-1蛋白表达较I-R组、VC组及AB组均增加（P〈0．05）;Gene组Casepase-3蛋白表达则较I-R组、VC组及AB组减少。4．S组Bcl-2和Bax表达较其余各组减少（P〈0．05）;Gene组较I-R组、VC组及AB组Bcl-2表达上调而Bax表达下调（P〈0．05）。结论Akt-1基因转染对I—R心肌具有保护作用,该作用可能与促进Bcl-2表达,抑制Bax和Casepase-3表达从而抑制凋亡的发生有关。     

注射用内给氧对缺血再灌注损伤兔肝脏SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影响

目的 探讨注射用内给氧对缺血再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）损伤兔肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和丙二醛（MDA）含量的影响。方法 48只健康新西兰长耳大白兔随机分为四组：假手术组（A组）、缺血再灌注组（B组）、缺血再灌注＋周围静脉注射用内给氧组（C组）、缺血再灌注＋肝动脉注射内给氧组（D组），每组12只。采用Pringle氏法建立肝脏I／R模型。比较四组大白兔缺血再灌注后1、2、24h肝组织的抗氧化能力（SOD、GSH-PX）、脂质过氧化产物丙二酮（MDA）含量。结果 与A组比较，B、C、D三组肝组织SOD、GSH．PX活力降低，MDA含量增高（P〈0．05）；与B组比较，C、D两组肝组织SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低（P〈0．05）；C组与D组比较，各参数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 注射用内给氧对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，可降低MDA含量，提高SOD活力和GSH-PX活性。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤时脑组织谷氨酸转运体功能变化及地塞米松的影响

目的：探讨大鼠脑缺血-再灌注损伤时脑组织谷氨酸转运体功能及超氧化物歧化酶（SOD）活性、脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量变化及地塞米松对其的影响。方法：采用大鼠三血管夹闭、松夹制作大鼠完全性脑缺血-再灌注损伤的模型。测定假手术对照组、脑缺血-再灌注损伤（l-R）组和I－R 地塞米松组的皮层、海马、纹状体的谷氨酸转运体功能及SOD活性、MDA含量的变化。结果：脑缺血-再灌注损伤时3个部位的谷氨酸转运体的功能均明显降低（P＜0.05．P＜0．01）、SOD活性显著降低（P＜0．05,P＜0．01）,MDA含量明显升高（P＜0．05,P＜0.01）,1－R 地塞米松组的3部位谷氨酸转运体功能与I-R组相比有明显恢复（P＜0.05,P＜0．01）,与对照组已无明显差异（P＞0.05）SOD活性回升（P＜0.05,P＜0．01）、MDA含量回降（P均＜0.05）。结论：大鼠脑缺血-再灌注损伤时脑组织三部位的谷氨酸转运体功能降低,且可能与自由基效应有关;而地塞米松则可能通过抗自由基效应使谷氨酸转运体功能恢复而发挥其抗损伤作用。     

左卡尼汀对肾缺血／再灌注损伤的保护作用

目的探讨左卡尼汀在肾缺血／再灌注损伤中的保护作用及其可能机制。方法建立大鼠肾急性缺血／再灌注模型,随机分为对照组（n=24）和左卡尼汀治疗组（n=24）,组内再分为假手术组及再灌注1、6、12h组。检测大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）水平和肾组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量,并观察肾组织形态学变化。结果对照组的BUN、Scr再灌注6h后开始与假手术组出现统计学差异（P〈0．05和P〈0．01）;治疗组再灌注12h的BUN和再灌注6、12h的Scr也显著高于假手术组（P〈0．05,P〈0．05和P〈0．01）,但低于同时点对照组（均P〈0．01）,治疗组再灌注12h后SOD活力显著高于（P〈0．01）,而MDA含量低于对照组（P〈0．01）,且病理损伤较同期对照组明显减轻。结论左卡尼汀对肾缺血／再灌注损伤具有保护作用,其机制与增强SOD活性,降低肾脏过氧化程度从而抗氧自由基损伤有关。     

缺血后处理对小肠缺血-再灌注损伤大鼠肠系膜微循环的影响

目的:观察缺血后处理对小肠缺血/再灌注损伤大鼠肠系膜微循环变化的影响。方法:64只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、缺血后处理(I-postC)组及缺血预处理(IPC)组,分别于再灌注2h、12h观测肠系膜微循环、肠壁血流量和血流动力学的变化,并按Hackel氏分度法判定肠道出血损伤情况。结果:与Sham组比较,I/R组平均动脉压、±dp/dtmax明显降低(P<0.05),小肠明显水肿、出血,Hackel氏分度显著升高(P<0.01);I-postC组与IPC组动脉压和±dp/dtmax明显高于I/R组(P<0.05),上述小肠病理变化明显减轻(P<0.05);I-postC明显减轻I/R所致的细动静脉收缩(P<0.05)、血流速度减慢(P<0.05)和微血管内白细胞贴壁滚动、粘附;肠缺血再灌注2h时,I-postC组肠壁血流量降低程度较I/R组减轻(P<0.05),与IPC的保护效果接近。结论:I-postC通过改善微循环减轻小肠I/R损伤。     

缺血后处理对在体大鼠缺血-再灌注心肌细胞色素P450表氧化酶2J3／环氧二十碳三烯酸系统的影响

目的观察缺血后处理拈抗心肌缺血-再灌注损伤时内源性细胞色素P450表氧化酶2J3／环氧二十碳三烯酸（CYP2J3／EET）系统的变化。方法复制在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤及缺血后处理模型。雄性Wistar大鼠（250—300）g随机分为三组：假手术组（Sham）、缺血-再灌注组（I—R）、缺血后处理组（IPo）。动脉插管测定心功能指标,采用TTC染色法测定心肌梗死范围,采用RT—PCR法检测心脏细胞色素P450表氧化酶亚型2J3（CYP2J3）mRNA表达,采用Western blot方法测定心肌组织CYP2J3蛋白水平的变化,高效液相色谱法测定11,12-EET含量。结果与I-R组相比IPo组左室收缩末压（LVESP）、左室内压最大上升／下降速率（±LVdp／dtmax）均显著升高;心肌梗死面积减少20．76％（P〈0．01）;与Sham组及I—R组相比IPo组CYP2J3mRNA、CYP2J3蛋白及11,12-EET含量明显升高（P〈0．05）。结论[Po可减轻在体心肌I—R损伤同时上调心脏CYP2J3／EET系统;提示CYP2J3／EET系统可能与IPo拮抗心脏I-R损伤作用相关。     

肢体缺血再灌注损伤对大鼠肠系膜微循环和血液流变性的变化及意义

目的研究大鼠肢体缺血再灌注损伤时肠系膜微循环和血液流变性的变化，并探讨其意义。方法用BI-2000医学图像分析系统对肢体缺血再灌注大鼠的肠系膜微循环进行观察，大鼠随机分为6组（每组10只），在肢体缺血前（Control组），缺血4h（Ⅰ组），再灌注20min（IP,．20组），再灌注60min（IR60组），再灌注120min（IR120组），再灌注200min（IR200组）时观察和记录肠系膜微循环改变，并测定血液流变学指标并于上述各时间点分别测定各组动物血液流变学指标及前列环素（Pros—tacyclin，PGI2）水平、血栓素A2（Thromboxane A2，TXA2）水平、前列环素／血栓素A2比值（PG12／TXA2）。结果①与Control组比较，IR20组、IR60组大鼠肠系膜微动脉和微静脉管径缩小（P〈0．01或P〈0．05）；IR120组、IR200组大鼠肠系膜微动脉和微静脉管径扩大（P〈0．01或P〈0．05）；Ⅰ组变化差异无显著性（P〉0．05）。②与Control组比较，IR20组、IR60组、IR120组、IR200组大鼠肠系膜微动脉和微静脉血流速度依次减慢（P〈0．01）；Ⅰ组变化差异无显著性（P〉0．05）。③再灌注期，白细胞黏附聚集、白微栓及管周出血增多；血浆黏度、全血低切还原黏度（1s^-1）、全血高切还原黏度（200s^-1）、红细胞比容、红细胞聚集指数、血沉方程K值、红细胞刚性指数等指标增高，红细胞变形指数降低。血浆中PGI2、TXA2含量均于再灌注期先升高后降低，但PGI2／TXA2比值减小。结论大鼠肢体IR损伤时存在肠系膜微循环障碍和血液流变性异常，其发生可能与血管内皮的功能受损，PGI2／TXA2水平的平衡失调有重要关系。     

重组人补体受体1型SCR15-18片段对肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨人补体受体1型功能域SCR15-18 (CR1-SCR15-18)对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用。方法: SD大鼠随机分为假手术组(SO)、缺血再灌注组(I/R)和CR1-SCR15-18保护组(CR1)。结扎肠系膜上动脉30 min,再灌注60 min,建立小肠缺血再灌注模型,再灌注前5 min注射CR1-SCR15-18蛋白(30 mg/kg)。测定肠黏膜血管的通透性、组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色观察小肠病理改变并根据Chiu's方法评分;免疫组织化学法检测补体C3组分的沉积。结果: 与SO组相比,I/R组通透性增加,MPO活性和MDA含量显著升高,而SOD活性降低,肠黏膜病理损伤严重且有大量补体C3组分沉积。与I/R组相比,CR1组肠黏膜血管通透性显著降低,MPO活性和MDA含量显著降低,而SOD活性升高,肠黏膜损伤明显减轻,只有少量补体C3组分沉积。结论: CR1-SCR15-18蛋白抑制肠缺血再灌注时补体的活化,减轻肠组织损伤。     

碱性成纤维细胞生长因子对脊髓缺血／再灌注损伤的保护作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）对脊髓缺血／再灌注损伤的保护作用。方法建立大鼠脊髓缺血／再灌注损伤动物模型。实验分对照组、缺血／再灌注组和bFGF组。测定血浆丙二醛、肌酸磷酸激酶、谷草转氨酶和乳酸脱氢酶含量。测定脊髓标本丙二醛、内皮素、细胞线粒体钙含量和组织湿／干重比值。结果缺血／再灌注组与对照组比较,血浆和脊髓的各项生化指标显著增高（P〈0．05）;使用bFGF后,血浆及脊髓各项测定指标较缺血／再灌注组相比明显降低（P〈0．05）。结论bFGF可减轻脊髓缺血／再灌注损伤,对脊髓有保护作用。     

苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子和自由基的影响

目的探究苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子和自由基的影响及其机制。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）制造大鼠溃疡性结肠炎模型,运用苦参碱对大鼠溃疡性结肠炎进行治疗,以柳氮磺胺吡啶作为阳性对照。治疗结束后,剖取结肠,检测黏膜细胞中IL-1α、TNF-α、IL-6和IL-8等细胞因子的水平;检测结肠黏膜细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。另取部分结肠做组织显微镜检查,并对组织损伤评分进行数理统计。结果与模型组相比,苦参碱和柳氮磺胺吡啶均能极显著降低IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8水平（均P〈0．01）;与模型组相比,苦参碱和柳氮磺胺吡啶均能极显著升高结肠黏膜细胞SOD水平（P〈0．01）,极显著降低MDA水平（P〈0．01）;苦参碱和柳氮磺胺吡啶均能促进溃疡面愈合,减少病灶部位炎性细胞浸润,水肿及纤维化。结论苦参碱能明显抵抗溃疡性结肠炎炎性反应,增强机体免疫,通过调节肠黏膜细胞因子失衡和抑制黏膜细胞氧自由基的产生和抗氧化功能干预溃疡性结肠炎发病过程。     

肠缺血再灌注损伤小鼠髓样细胞触发受体-1表达的改变及意义

目的 建立小鼠肠缺血再灌注（I/R）损伤模型,观察小鼠小肠I/R损伤后髓样细胞触发受体-1（TREM-1）的表达及其与炎症因子水平变化的关系。方法 将72只小鼠按数字表法随机分为3组,对照组（N组）8只、假手术组（S组）32只、I/R损伤组（I/R组）32只。制备肠I/R损伤模型,制模后S组与I/R组分别于6、12、24、48 h处死8只小鼠取标本：ELISA测定外周血清中可溶性（s）TREM-1、TNF-α的水平并进行相关性分析;免疫组织化学检测小肠组织中TREM-1的表达。结果 I/R组24 h时TREM-1浓度达峰值为（1 272.88±295.52）pg/ml,各时段浓度均高于N组[（168.99±22.79） pg/ml]和S组[24 h（178.58±10.98） pg/ml],差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。I/R组TNF-α值 12 h[（33.03±4.12） pg/ml]开始升高, 24 h[（94.01±9.44） pg/ml]达峰值。sTREM-1表达和TNF-α浓度的变化呈正相关（r=0.840,P=0.000）。免疫组化显示在I/R损伤后小鼠肠sTREM-1表达增高,24 h组染色积分最高为（3.38±0.66）分,且阳性部位主要是小肠黏膜固有层和上皮细胞。结论 小肠组织sTREM-1的表达上调可能是导致肠黏膜屏障功能下降及系统性炎症反应的重要环节;sTREM-1可作为判断肠I/R肠黏膜损伤严重程度的的检测指标。     

肥大细胞膜稳定剂对肠缺血再灌注小肠组胺、MDA和SOD的影响

目的：研究肥大细胞膜稳定剂色甘酸钠对缺血再灌注大鼠肠组织组胺、MDA和SOD水平的影响。方法:32只SD大鼠随机分为4组，假手术组（sham组）、模型组（model组）、模型＋色甘酸钠50　mg/kg组（C1组）及模型＋色甘酸钠25 mg/kg组（C2组）。复制肠缺血再灌注损伤模型，色甘酸钠于再灌注前15 min分别腹腔给予，观察肠黏膜病理结构变化和肠黏膜肥大细胞（IMMC）超微结构变化，测定小肠组织SOD活性、MDA和组胺浓度。结果:（1）model组肠黏膜结构破坏严重，Chiu’s评分明显高于sham组（P<0.01），经色甘酸钠处理组Chiu’s评分低于model组（P<0.01），C1组Chiu’s评分低于C2组（P<0.05）。（2）sham组IMMC超微结构正常，model组IMMC胞浆颗粒明显减少，颗粒包膜相互融合形成细胞内空泡等脱颗粒现象，C1、C2组IMMC超微结构形成空泡较少。（3）model、C2组的小肠组织组胺浓度明显低于sham组（P<0.05）；C1及C2组小肠组织组胺浓度明显高于model组（P<0.01）。（4）model组SOD活性最低，sham组最高（P<0.05）， C1、C2 2组间无明显差异（P>0.05）；model组的小肠组织MDA浓度明显高于其余3组（P<0.01）。（5）相关分析显示Chiu’s评分、MDA与小肠组胺浓度呈负相关（r＝-0.770，P<0.01; r＝-0.412，P<0.05）， SOD活性与组胺浓度呈正相关(r＝0.579，P<0.01)。结论:色甘酸钠能够稳定IMMC，减轻肠缺血再灌注氧化损伤。     

SOD对脑缺血-再灌注损伤大鼠谷氨酸转运体功能的影响

目的：探讨超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）对脑缺血再灌注损伤（Ｉ－Ｒ）大鼠皮层、海马、太体氨酸转运体功能的影响。方法：采用大鼠３个血管夹闭、松夹复制脑Ｉ－Ｒ损伤模型。利用脑组织突触膜顾粒对「＾３Ｈ」－Ｌ－谷氨酸摄入量的测定及分光光度法观察ＳＯＤ对皮层海马纹状体谷氨酸转运体功能、丙二醛（ＭＤＡ）含量及ＳＯＤ活性的影响。结果：Ｉ－Ｒ组谷氨酸转运体的功能及ＳＯＤ活性明显低于对照组,ＭＤＡ含量明显高于对照组。ＳＯ