喉癌及癌旁不同距离组织中ras、c—myc、p53蛋白的复合表达

目的：研究癌基因（ras,c-myc)及抗癌基因（p53)蛋白在喉癌及癌旁不同距离处的复合表达及意义。方法：应用LSAB微波免疫组织化学法,检测了ras、c-myc及p53在30例喉癌组织、边缘区、癌旁0．5cm,1.0cm,1.5cm,2.0cm处粘膜组织和4例正常喉粘膜组织中的复合表达情况。结果：①2种以上基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织中为28例（93．3％）,其中ras c-myc p53为17例（56．7％）,癌旁组织中也存在着不同程度的复合表达,而正常喉粘膜组织中无一例复合表达;②复合表达阳性率依正常粘膜组织→癌旁2．0cm→1.5cm→1.0cm→0.5cm→边缘区→癌组织递增,且癌旁1．0cm处与0．5cm范围内的表达存在显著差异（P＜0．05）;③种癌基因产物的复合表达与喉癌的部位,分化程度, 临床分期无关（P＞0．05）。结论：喉癌及癌旁组织中存在着3种癌基因的复合表达,其在喉癌的发生中的协同作用;距离0．5cm以内的癌旁组织应视为危险性病变。     

HPV16/18与喉鳞状细胞癌发生发展的关系

目的：研究喉鳞状细胞癌的发生与HPV16／18的相关性。方法：采用原位杂交法检测54例喉癌中HPV16／18的表达。结果：54例喉癌组织中30例HPV16／18阳性，喉癌组HPV16／18的阳性表达为55．6％，癌旁不典型增生组为38．1％，二者比较有显著性差异（P〈0．05）；HPV16／18在癌周正常组织、癌旁单纯增生及轻度不典型增生组织中无表达。随着不典型增生程度的增大，HPV16／18阳性表达率增高，轻、中、重度增生分别为0％、7．1％和12．5％；HPV16／18的表达与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：HPV16／18与喉癌的发生有关，与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关。     

喉黏膜白斑和喉鳞状细胞癌中survivin表达的意义

目的 探讨survivin蛋白在喉黏膜白斑和喉鳞状细胞癌中的表达情况及其意义。方法 通过免疫组化法对28例喉黏膜白斑、46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和16例正常喉黏膜中survivin的表达情况进行检测。结果 发现survivin蛋白在喉黏膜白斑、喉癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为46．43％（13／28）、71.74％（33／46）、33．33％（8／24）；在正常黏膜组织中没有表达，喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织、喉黏膜白斑中的表达率。中重度不典型增生喉黏膜白斑组的阳性表达率（66．67％）显著高于轻度不典型增生的阳性表达率（23．08％），发生了恶变的5例喉黏膜白斑组织中survivin蛋白均为阳性表达，但与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论 survivin在中重度不典型增生喉黏膜白斑组织和喉癌组织中过度表达，参与了喉癌的形成，是喉癌形成的一个早期事件，可望成为预测喉癌癌前病变发展成恶性肿瘤的一个诊断工具。     

p27KIP1和CyclinE表达与喉鳞状细胞癌生物学行为的关系

目的:探讨p27^KIP1和CyclinE基因蛋白与喉鳞状细胞癌（LSCC）生物学行为的关系。方法：采用免疫组化法检测60例LSCC、40例喉不典型增生病变和20例喉正常粘膜中p27^KIP1和CyclinE基因蛋白的表达。结果：p27^KIP1和CyclinE阳性表达主要定位于细胞核；在LSCC、喉不典型增生病变和喉正常粘膜中p27^KIP1阳性表达率分别为：58．3％（35／60）、67．5％（27／40）和90．0％（18／20）（P＜0．05）；CyclinE阳性表达率分别为：45．0％（27／60），20．0％（8／40），5．0％（1／20）（P＜0．001）。LSCC中颈淋巴结转移组和非淋巴结转移组，淋巴结转移阳性组p27^KIP1阳性表达率明显低于阴性组（P＜0．01）；淋马结转移组CyclinE阳性表达率明显高于非淋巴结转移组（P＜0．01）。p27^KIP1和CyclinE表达显著相关性（P＜0．01）。结论：p27^KIP1和CyclinE异常表达可能是喉癌发生中早期分子事件，对喉癌发生发展起重要作用。     

P53蛋白在喉癌细胞中的表达

（1）目的：对喉癌发生，发展的分子生物学机制进行初步的探讨。（2）方法：喉癌手术新鲜标本30例，喉正常粘膜16例为对照组。采用流式细胞术检测喉癌组织及正常粘膜的P53蛋白的含量，基因蛋白以荧光指 数（FI）作为定量分析的指标，以FI大于正常粘膜的x 2s为阳性。（3）结果：a、癌组织中P53的阳性率高达96．7％，其FI均明显高于正常粘膜（P＜0．01）。b.临床Ⅲ、Ⅳ期癌组织P53的FI明显高于Ⅰ、Ⅱ期（P＜0．01），T3,T4病变的P53的FI明显高于T1、T2病变（P＜0．05）；淋巴结转移组的P53的FI明显高于无淋巴结转移组（P＜0．01）。（4）结论：P53蛋白在喉癌中的表达明显高于喉正常粘膜，而且与临床分期，T分级及淋巴结转移呈正相关，与年龄、肿瘤大小和病理分级无关。     

喉癌及癌旁组织中P53蛋白的表达

应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化技术，。用Ｐ５３单克隆抗体检测了３０例喉鳞癌，癌旁交界处及癌旁０．１，１．０，１．５，２．０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜和Ｐ５３蛋白的表达。结果显示；１．Ｐ５３在喉癌组织中的阳性表达率为６３．３％；在癌旁交界处，癌旁０，５，１．０，１．５，２．０ｃｍ处的阳性表达率分别为６０％，３６．７％，１０％，０．０％，０．１＾％；４例正常喉粘膜中无阳性表达，其间差异显著。２．Ｐ     

粘着斑激酶在喉及下咽鳞状细胞癌组织芯片中的表达及意义

目的应用组织芯片免疫组化技术探讨粘着斑激酶（FAK）表达与喉和下咽鳞状细胞癌生物学行为的相关性。方法设计制作喉及下咽鳞状细胞癌组织芯片，应用免疫组化技术在组织芯片上检测FAK的表达，分析FAK表达与喉及下咽鳞状细胞癌临床和病理分期的相关性。结果FAK在原发癌中的阳性表达率为96．00％（72／75），明显高于癌旁正常组织（13／29，44．83％，P〈0．01）；淋巴结转移癌中FAK的阳性表达率为100．00％（20／20），明显高于癌旁正常组织（P〈0．001）；有淋巴结转移组FAK表达率为95．35％（41／43），明显高于无淋巴结转移组（12／32，37．50％，P〈0．01）；高分化组FAK表达率明显低于中、低分化组（P〈0．001）；而FAK的表达率与肿瘤的原发部位、浸润范围（T分期）、年龄和性别等因素均无明显相关性（P〉0．05）。结论FAK在喉癌和下咽癌组织中高表达，其表达率与喉癌和下咽癌的分化程度和淋巴结转移有关，可作为临床预测喉癌和下咽癌颈淋巴结转移趋势和估计预后的主要参考指标之一。     

胃癌组织中P53及P21蛋白的表达及意义

目的：探讨P53和P21蛋白异常表达在胃癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化技术检测38例胃癌及相应癌旁组织中P53和P21蛋白的表达。结果：胃癌组织P53蛋白表达率84．21％（32／38）,癌旁组织P53蛋白表达均为阴性。胃癌组织P53蛋白表达率明显高于癌旁组织,差别具有显著性（χ^2=55．27,P〈0．05）。胃癌组织P21蛋白阳性表达率52．63％（20／38）,癌旁组织P21蛋白阳性表达率89．73％（34／38）,胃癌组织P21蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织,差别有显著性（χ^2=12．546,P〈0．05）。胃癌组织中P21与P53蛋白共同阳性表达率为47．36％,但两者无相关性（P〉0．05）。结论：P53和P21蛋白表达异常与胃癌发生有着密切关系。     

非小细胞肺癌组织中P53和C-erbB-2蛋白的表达

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中P53和C-erbB-2蛋白的表达。方法：采用免疫组织化学sP法检测30例癌旁正常组织和58例NSCLC组织中P53和C-erbB-2的表达,结合临床资料进行分析。结果：NSCLC组织中P53和C-erbB．2蛋白的阳性表达率分别为63．8％（37／58）和70．7％（41／58）,均高于癌旁正常组织（13．3％（4／30）,17．7％（5／30）,P均〈0．05）。NSCLC淋巴结转移组P53和C-erbB-2蛋白的阳性表达率分别为75．O％和80．O％,均高于无淋巴结转移组（38．9％,50．0％,P均〈0．05）。NSCLC组织中P53和C-erbB-2的表达有关（x2=5．32,P〈0．05）。结论：NSCLC组织中P53和C-erbB-2蛋白高表达,2者可能共同参与了NSCLC的发生发展与转移。     

喉癌及癌旁不同距离组织中ras、c-myc、p53蛋白的复合表达

目的 :研究癌基因 (ras,c myc)及抗癌基因 (p5 3)蛋白在喉癌及癌旁不同距离处的复合表达及意义。方法 :应用LSAB微波免疫组织化学法 ,检测了ras、c myc及p5 3在 30例喉癌组织、边缘区、癌旁 0 .5cm ,1.0cm ,1.5cm ,2 .0cm处粘膜组织和 4例正常喉粘膜组织中的复合表达情况。结果 :① 2种以上基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织中为 2 8例 (93.3 % ) ,其中ras +c myc +p5 3为 17例 (5 6 .7% ) ,癌旁组织中也存在着不同程度的复合表达 ,而正常喉粘膜组织中无一例复合表达 ;②复合表达阳性率依正常粘膜组织→癌旁 2 .0cm→ 1.5cm→ 1.0cm→0 .5cm→边缘区→癌组织递增 ,且癌旁 1.0cm处与 0 .5cm范围内的表达存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;③ 3种癌基因产物的复合表达与喉癌的部位 ,分化程度 ,临床分期无关 (P >0 .0 5 )。结论 :喉癌及癌旁组织中存在着 3种癌基因的复合表达 ,其在喉癌的发生中有协同作用 ;距癌 0 .5cm以内的癌旁组织应视为危险性病变。     

喉鳞状细胞癌中PUMA、P53基因的表达及其临床意义

目的:研究PUMA、P53在喉鳞状细胞癌组织中表达,探讨PUMA在喉鳞癌发生发展中作用及与P53的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例喉癌组织以及16例癌旁组织中的PUMA和P53的表达情况。结果:PUMA在喉癌中的表达阳性率(62.5%)低于癌旁组织(87.5%),P<0.05,PUMA的表达与喉鳞癌患者的颈淋巴结转移及预后有关。P53在喉癌中的表达阳性率(65.0%)高于癌旁组织(0%),P<0.01,P53的表达与喉鳞癌患者的肿瘤分化程度、颈淋巴结转移及预后有关。PUMA与P53在喉鳞癌中的表达呈负相关关系。结论:PUMA可能是喉鳞癌的一个重要的预后标记物。P53的表达与肿瘤分化、淋巴结转移有关,可作为判断预后的一个有意义的指标。     

Ras、c-myc、p~(53)癌基因蛋白在喉癌及癌旁 不同距离组织中表达的研究

研究癌基因及抗癌基因在喉癌及癌旁不同距离处的表达特点及意义。方法：应用ＬＳＡＢ微波 免疫组化法,检测了ｒａｓ,ｃ－ ｍｙｃ及 ｐ５３在 ３０例喉癌、边缘区、癌旁 ０．５ｃｍ、１．０ｃｍ、１．５ｃｍ、２．０ｃｍ处粘膜和４例正 常喉粘膜中的表达。结果;①ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３在喉癌组织中有较高的阳性表达率,分别为８６．７％（２６／３０）、９６．７％ （２９／３０）、６３．３％（１９／３０）,与癌旁及正常组织相比,差异显著（Ｐ＜０．０１）,ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ在正常组织中有低量表达,ｐ５３ 从癌旁１．０ｃｍ处开始出现表达。②两种以上癌基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织为２８例（９３．３％）,其中 ｒａｓ＋ｃ－ｍｙｃ＋ｐ５３者为１７例（５６．７％）。癌旁组织中也存在着复合表达,在正常组织中无一例联合表达。③ｒａｓ、ｃ －ｍｙｃ、ｐ５３的单独及联合表达依正常粘膜→癌旁２．０ｃｍ→１．５ｃｍ→１．０ｃｍ→０．５ｃｍ→边缘区→癌依次增高,多 数在癌旁１．０ｃｍ处与０．５ｃｍ以内处的表达存在有显著差异（Ｐ＜０．０５）。④三种癌基因产物的表达与喉癌的分化 程度无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３基因改变均参与了喉癌?     

P53蛋白在喉上皮癌前病变及癌组织中的表达及其意义

为探讨喉上皮癌变过程中Ｐ５３蛋白表达水平,采用免疫组化技术检测了１１例喉上皮单纯性增生（ＳＨＦ）、３２例非黄型性增生（ＡＨＥ）及４２例喉鳞状细胞癌（ＬＳＣＣ）Ｐ５３蛋白的表达,结果：Ｐ５３蛋白阳性表达率在ＳＨＥ、ＡＨＥ及ＬＳＣＣ中分别为０．００％、３１．２５％及５２。３８％;轻、中、重度ＡＨＥ阳性率分别为０．００％、３３．３３％及７５％;高、中、低分化ＬＳＣＣ阳性率分别为６２．５０％、７６．９２％     

Bcl-2与Ki-67蛋白在喉鳞癌中的表达检测及临床相关性分析

目的 检测喉鳞状细胞癌中Bcl-2蛋白和Ki-67蛋白的表达水平并分析两者的相关性. 方法 收集54例喉鳞癌组织和42例正常喉粘膜组织的样本,采用SP免疫组化法观察石蜡切片中Bcl-2、Ki-67蛋白的表达,并结合临床相关病理因素分析在喉鳞状细胞癌中两者的相关性. 结果 在喉鳞癌组织中,Bcl-2蛋白高表达,阳性表达率70.37％（38/54）,正常的喉粘膜组织中Bcl-2蛋白阳性微弱表达或不表达,阳性率9.5％ （4/42）（P＜0.05）;Bcl-2蛋白表达水平与临床分期、淋巴结转移有明显相关性：在晚期（Ⅲ～Ⅳ期）的表达高于早期（Ⅰ～Ⅱ期）（P＜0.05）,而其在不同年龄、性别中的表达,差异无统计学意义（P＞0.05）.Ki-67蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达为81.48％（44/54）,在正常组织中表达明显下调仅为16.67％ （7/42）;在喉鳞癌中Bcl-2蛋白与Ki-67蛋白的表达呈正相关（rs=0.317,P＜0.05）. 结论 与正常组织比较,在喉鳞癌中Bcl-2蛋白与Ki-67蛋白表达明显上调,并呈正相关,可能两者在喉鳞癌癌变中发挥了协同作用.     

c-myc癌基因蛋白在喉癌及癌旁不同距离组织中的表达研究

目的：研究ｃ ｍｙｃ癌基因在喉癌及癌旁不同距离组织中的表达特点及意义。方法：应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化法，检测了ｃ ｍｙｃ癌基因蛋白在３０例喉癌边缘区及癌旁０５、１０、１５、２０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜中的表达。结果：ｃ ｍｙｃ蛋白在喉癌组织中的阳性表达率为９６７％（２９／３０），与正常组织相比差异显著（Ｐ＜００１），在癌旁１５ｃｍ处１０ｃｍ以内组织的表达存在着显著性差异（Ｐ＜００５）。ｃ ｍｙｃ表达从正常粘膜→癌旁组织→癌呈逐步递增趋势。结论：ｃ ｍｙｃ癌基因过度表达与喉癌的发生有关，且在喉癌发生中可能为一早期事件，距肿瘤１０ｃｍ以内之癌旁组织应视为危险病变。     

EphA2 E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关性研究

目的 研究络氨酸蛋白激酶受体A2 （EphA2）、上皮细胞钙粘蛋白（E-cadherin）在喉鳞状细胞癌中的表达及相关性.方法 将62份喉鳞状细胞癌标本作为实验组,另选取同期60例鳞状上皮正常者标本作为对照组,采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法（SP法）对两组标本进行检查,对比两组EphA2、E-cadherin的表达情况.结果 实验组EphA2表达阳性率高于对照组,但E-cadherin表达阳性率低于对照组,组间差异均有显著性（均P＜0.01）.在喉鳞状细胞癌标本中,EphA2与E-cadherin的表达呈负相关.结论 在喉鳞状细胞癌发生发展中,EphA2起促进作用,E-cadherin起抑制作用,研究EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及相关性具有重要现实意义.     

增殖诱导配体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的观察增殖诱导配体（APRIL）在喉鳞癌（LSCC）中的表达。方法采用免疫组织化学SABC法检测150例喉鳞癌患者中癌旁喉黏膜组织、癌组织中是否有APRIL的表达及APRIL的表达量与临床指标之间的关系。结果APRIL在癌旁喉黏膜组织及癌组织中的阳性表达率分别为6．7％（10／150）、89．3％（134／150）,在喉鳞癌不同的TNM分期中随着分期的增进APRIL的表达量逐渐增加且差异有统计学意义（P〈0．05）,APRIL的表达量与TNM分期相关（P〈0．05）。结论APRIL蛋白在喉鳞癌中高表达,且在不同TNM分期之间差异有统计学意义。     

抑癌基因p53第5～8外显子突变与喉鳞癌关系的研究

为探讨抑癌基因ｐ５３基因突变与喉鳞癌之间的关系,应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染系统,检测６０例喉鳞癌新鲜组织中抑癌基因ｐ５３基因第５￣８外显子的突变情况。结果：６０例喉鳞癌组织中,发生４７例第５￣８外显子迁移率异常的ＳＳＣＰ区带,总的突变率为７８．３％。ＳＳＣＰ阳性病例在外显子５、６、７、８中的突变率由高到低依次为Ｅｘｏｎ５、Ｅｘｏｎ７、Ｅｘｏｎ８、Ｅｘｏｎ６。提示第     

环氧合酶-2在喉鳞癌组织中的表达及其临床意义

 【目的】 检测环氧合酶-2（COX-2）在喉鳞癌和喉鳞癌旁非癌组织中表达，分析其与喉鳞癌临床病理因素的关系以及对喉鳞癌患者预后的预测意义。【方法】 收集1997年1月～1998年12月我院收治的81例喉鳞癌患者的临床资料和石蜡块，制作组织芯片，用链霉素亲生物素-过氧化物酶法（SP法）检测81例患者肿瘤组织和癌旁正常喉组织的COX-2表达；采用SPSS10.0软件分析COX-2表达与临床病理因素的关系，采用Cox比例风险模型分析影响预后的因素。【结果】 COX-2在喉鳞癌和癌旁喉组织中的表达率分别为48.15%和0%，（P<0.05）；喉癌COX-2阳性组（5年生存率9.65%）较阴性组（5年生存率97.56%）预后差（P<0.05）；COX-2表达与临床分期、T分期、N 分期、病理分级、发病部位、复发相关（P<0.05）；Cox比例风险模型多因素预后分析结果显示：COX-2表达、临床分期、T分期、病理分级是影响喉癌预后的独立因素（P<0.05）。【结论】 COX-2在喉鳞癌组织中表达上调；COX-2与喉鳞癌患者的病理分化程度、TNM分期、淋巴结转移、复发呈正相关；COX-2表达升高可作为预测喉鳞癌患者预后的独立指标之一。