组织芯片研制的几点体会

目的：进行组织芯片制作可行性探讨，为快速、规范、简便、经济地进行各项科研工作提供一种新的技术方法。方法：制作出组织芯片蜡块，进行HE、免疫组织化学和荧光原位杂交(nSH)染色，对组织芯片免疫组化与普通免疫组化的结果进行比较。结果：各种染色切片上的组织芯基本符合观察需要，芯片免疫组化结果与普通免疫组化结果在统计学上无显著性差异。结论：组织芯片的研制具有高通量、经济节约、减少实验误差的特点，是科研工作中的一种新方法。     

组织芯片技术在病理学中的应用

组织芯片(tissue microarray)是在cDNA微阵列的基础上发明的一种特殊的生物芯片。其原理是根据不同需要，利用特殊的仪器，将组织高密度的排列在固相载体上，用各种酶、基因、寡核苷酸、抗体与之进行杂交或标记染色，以研究目的基因或基因产物在不同组织中的特异表达。组织芯片的应用广泛，特别是对肿瘤易感因素的判定、特殊基因和抗体的筛选，临床早期诊断和治疗方案的制订及预后的判断都具有重要的意义。与传统的病理研究方法相比，组织芯片具有体积小、信息含量高、并可根据不同的需要进行组合和设计的特点。对某些基因和蛋白质与疾病关系的研究、疾病相关基因的验证、新药的开发与筛选、疾病的分子诊断、治疗过程的动态观察和预后的判断等方面具有重要的实际意义和广阔的市场前景。     

早期糖尿病视网膜病变患者血清相关细胞因子的检测

目的 应用抗体芯片技术研究早期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中细胞因子表达谱及其水平变化,并探讨其临床意义.方法 32例2型糖尿病患者,其中16例合并轻中度非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR组),16例未合并视网膜病变(DM组).应用Raybiotech人类细胞因子抗体芯片同步检测血清中42种细胞因子水平的变化.以8名健康志愿者作为正常对照组.结果 与DM组相比,NPDR组中性粒细胞活化剂(ENA-78)、生长相关基因(GRO)、调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)、血管生成素、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和血小板源性生长因子(PDGF)的水平均显著升高(P<0.05);而IL-1α表达水平下降(P<0.05).在芯片所包含的42种细胞因子中ENA-78的水平变化明显,NPDR组是DM组的1.88倍和正常对照组的3.6倍.结论 早期DR患者血清中部分细胞因子表达水平存在差异,提示炎症反应在DR发生和发展中起重要作用,细胞因子有可能成为DR临床早期预警的标志物.     

组织芯片技术在医学研究中的应用进展

1 组织芯片的概念 组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarray),是将数一、数百、甚至上千个小组织按预先设计的顺序整齐地排放在一张玻片上制成的组织切片[1].组织芯片按放置组织的多少分为多组织切片和组织切片和组织微阵列;按组织来源的不同分为人类组织芯片、动物组织芯片;人类组织芯片又可分为人类疾病组织芯片、正常组织芯片和胚胎组织芯片;人类疾病组织芯片又可分为恶性肿瘤组织芯片、良性肿瘤组织芯片、其他疾病组织芯片;根据研究目的不同,恶性肿瘤组织芯片又可分为单一肿瘤、多种肿瘤、进展期肿瘤、特定病理类型肿瘤等数十种不同的组织芯片.     

液相芯片技术一步反应法联合定量测定人血清CEA、AFP和tPSA

目的 建立用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和总前列腺特异性抗原(tPSA)水平的一步反应法,并对该方法进行评价.方法 制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗体夹心法测定临床血清标本.结果 联合测定CEA、AFP和tPSA的线性范围分别为0.063～200 ng/ml、0.052～66.6 ng/ml、0.016～20 ng/ml;最低检测限分别为31.3 pg/ml、26.0 pg/ml、7.8 pg/ml;批内精密度<10 %,批间精密度<14 %;血清标本CEA、AFP和tPSA检测值与化学发光免疫分析法(CLIA)测值的相关系数为0.920～0.940,与液相芯片两步反应法测值的相关系数为0.952～0.979.该方法仅需1 μl标本,2 h即可完成检测.结论 液相芯片一步反应法具有高通量、检测范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有较大临床应用潜力.     

两种免疫学检验方法对结核病的诊断价值比较

目的对比分析蛋白质芯片法和胶体金法对结核病的诊断价值。方法将94例患者按照是否患有结核病划分为A组(结核组,68例)和B组(非结核组,26例),根据结核疾病类型将A组患者划分为A1组(活动性肺结核组,48例)和A2组(结核性胸腹膜炎组,20例)。对全部患者均采用蛋白质芯片法和胶体金法检测结核抗体,观察比较两种检测方法结果的差异。结果 A组、A1组和A2组蛋白质芯片法阳性检出率高于胶体金法(P<0.05);A组、A1组和A2组蛋白质芯片法阳性检出率高于B组(P<0.05);A组、A1组胶体金法阳性检出率高于B组;A2组和B组胶体金法阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论蛋白质芯片法对活动性肺结核以及结核性胸腺膜炎患者均具有较高的检出率,而胶体金法灵敏度相对有限,两种检测方法在非结核病的诊断方面大致相当。     

抗体蛋白质芯片及其在医学中的应用近况

在蛋白质组研究中，由于蛋白质芯片能够在一次实验中时少量样本中的大量目的蛋白质同时进行检测，这一技术已引起人们的很大兴趣。作为蛋白质芯片的一种，抗体蛋白质芯片在基础与临床研究中有着很大的潜在价值，本文中作者就抗体蛋白芯片的基本原理、技术特点以及其在医学中的应用近况进行综述。     

DNA芯片技术的研究进展

随着后基因组时代 (ｐｏｓｔｇｅｎｏｍｅｅｒａ)的到来 ,研究的工作重心已从基因结构方面转向基因功能方面[1] 。传统的建立在电泳基础上的基因表达、序列测定、突变和多态性检测等研究方法 ,费时、耗资 ,且不利于自动化 ;而ＤＮＡ芯片 (ＤＮＡＣｈｉｐ)技术结合人类基因组计划 (ＨＧＰ)提供的大量信息 ,使得我们能够在全部基因组水平上对上述问题进行研究 ,因此有人说今后基因组研究的大部分工作将在芯片上的实验室 (ｌａｂ -ｏｎ-ａ -ｃｈｉｐ)完成。ＤＮＡ芯片又称基因芯片 (ｇｅｎｅｃｈｉｐ)、微排列 (ｍｉｃｒｏａｒ ｒａｙ)。是指一…     

限制性显示技术作为一种高密度长链寡核苷酸芯片样本标记方法的初步研究

目的 初步研究限制性显示技术(RD-PCR)作为一种高密度长链寡核苷酸芯片样本标记方法对芯片杂交信号的影响。方法 收集3个健康人外周血单核细胞,提取RNA后分为两组,采用RD-PCR进行样本双色(Cy3/Cy5)荧光标记,与3张Agilent60mer高密度(22K)人1B寡核苷酸芯片进行杂交。排除阴性和阳性对照信号值、Cy3和(或)Cy5的前景与背景间无统计显著性差异点的信号值,进一步排除两种荧光标记间存在统计显著性差异点的信号值,将3张芯片的共同信号值用于分析。SPSS软件进行常规统计分析和作图,R语言环境下的VSN统计包排除芯片间和两种不同荧光标记间的系统误差。结果 3张芯片的8744个共同点用于本研究。芯片间及两种荧光标记间存在明显的可校正的系统误差。芯片间杂交信号值相关显著。RD-PCR样本标记方法对较低表达基因信号值较为敏感。结论 初步的统计分析结果表明,RD-PCR是一种潜在的有用的高密度长链寡核苷酸芯片样本标记方法。     

生物微矩阵(芯片)方法检测100例幽门螺杆菌抗体的临床分析

目的 生物微矩阵芯片技术检测患者血清中幽门螺杆菌(Hp)毒素相关蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)及尿素酶抗体(Ure),快速提供胃十二指肠疾病诊断的依据.方法 对100例胃病患者留取血清,用生物微矩阵芯片方法检测.结果 CagA阳性为55%,VacA阳性为29%,Ure阳性为16%.结论 芯片法在幽门螺杆菌感染的诊断、筛查和防治中具有重要意义.