应用胆固醇和在仓鼠肝内传代的方法使纯培养的溶组织内阿米巴恢复毒力的试验

作者将从有症状的阿米巴病患者取得的溶组织内阿米巴经体外纯培养保种已3年以上的虫株,接种于白鼠盲肠或仓鼠肝内后,均未能使鼠发生感染。这个已失去毒力的虫株,经过用伴有菌群和米粉的鸡蛋-林格液培养基培养后,虽能使部分(3/6)白鼠的盲肠发生感染,但不产生溃疡。已失去毒力的虫株经在仓鼠肝内传代后,用伴有菌群和米粉的培养基培养后,接种于仓鼠的腹腔,使6只仓     

溶组织内阿米巴带虫者和病者虫株的单虫合并培养与纯培养

溶组织内阿米巴带虫者虫株10株,从精神病院分离获得病者虫株5株,4株是从阿米巴痢疾患者(其中PNH_5株是PN株感染田鼠肝5次以增强毒性),1株从皮肤阿米巴病患者分离而得。从包囊分离虫体是将含包囊的粪便分两部分,一部分用蒸馏水,另一部分用0.1N HCl制成悬液,经一小时,用Ringer液清洗2次,各取少量悬液接种到Jones培养基4管,2管还按每毫升加2毫克链霉素和1,000单位青霉素,在37℃温育3天后,选择生长最好而没有人酵母菌或真菌之类的干扰性伴合物的培养管移种入新鲜培养管内。     

阿米巴病毒和溶组织内阿米巴的毒力

自从发现溶组织内阿米巴的病毒以来,作者考虑到这些病毒与阿米巴的毒力之间的关系,为此进行了以下的实验。作者从培养的溶组织内阿米巴虫株分离和鉴定阿米巴的病毒。阿米巴的病毒在形态上有二十面体型、纤细型及新的含有 DNA的珠状型。近来作者发展了一种测试溶组织内阿米巴在新生仓鼠肝内的毒力的简单方     

溶组织内阿米巴:吞噬红细胞作用、溶胶原作用和肝脓肿产生作为毒力的标志

在离体试验中,高度吞噬红细胞作用和溶胶原作用可作为溶组织内阿米巴滋养体在体内的毒力指标。本研究用3个溶组织内阿米巴HMI:IMSS株细胞系虫体(A系是被克隆并经仓鼠肝3次;B系未克隆仅经仓鼠肝1次;C系是原先HMI:IMSS虫株,无克隆也未经肝)。以BI-S-33无菌培养基培养,在对数生长期取各系虫体试验,用作吞噬红细胞作用体外试验的虫数为2×10~5/ml;作为胶原酶分析的虫数为1×10~6/ml;腹腔内接种仓鼠的虫数为2.5×10~6/ml。同工酶分     

克隆化的致病性溶组织内阿米巴诱导的抗补体作用

新近从感染者粪便中分离的溶组织内阿米巴,培养在Robinson氏培养基、TYSGM-9或TYI-S-33培养基中,并根据感染者病史、同工酶分析、基因DNA分析鉴定出4株为非致病性虫株,7株为致病性虫株。另取在TYI-S-33培养基长期培养的致病株HM-1:IMSS通过仓鼠肝脏,称为HM-1-H株,或培养在无免疫性的人血清(NHS)替代灭活牛血清的改良TYI-S-33培养基中,称为     

低温保存对溶组织内阿米巴滋养体生物学特性的影响

我们于1990年,在培养溶组织内阿米巴的过程中,为了延长保种,避免经常传代转种的麻烦,试用液氮冷冻保存溶组织内阿米巴滋养体,并对冻后虫体的生物学特性进行了初步观察。材料与方法一、虫株系上海医科大学寄生虫学教研室提供溶组织内阿来巴B株(北京友谊医院馈赠),以及B株经长爪沙鼠盲肠内接种启传代培养的B_1株。二、冷冻虫体在琼脂-蛋白胨双相培养基中培养2d,取出培养管冰浴5min,收集虫体于无菌离心管,自然沉淀2min,弃去底部粗米粉,再加培养液洗涤悬     

贾第虫的培养及其分裂繁殖情况的观察

用于单栖培养的贾第虫株系从患者粪便中分离包囊,用蔗糖梯度离心提纯后感染家兔,再从感染兔肠粘膜取滋养体,接种在同时种有Saccharomyces cerevisiae悬液的培养基中,37℃培养24小时,生长最旺,此后虫体随酵母的增多而减少。用于纯培养的虫株及TPS-1培养基由美国疾病控制中心提供。在5个月内传代32次。用扫描电镜和光镜观察了虫体分裂繁殖的某些形态特点。     

多聚酶链反应分析溶组织内阿米巴的致病性

从急性阿米巴痢疾患者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴虫株SH-3、SH-6、SH-8的DNA和包囊携带者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴 SH-5、SH-7的 DNA应用多聚酶链反应技术扩增30个周期后作琼脂糖凝胶电泳分析,发现致病性引物 P_(11)、P_(12)可使SH-8虫株的DNA增殖;而非致病性引物P_(13)、P_(14)可使SH-3、SH-5、SH-6和SH-7虫株的DNA增殖。另外,酶株群分析和单克隆抗体反应也显示SH-8为致病性虫株,而另4株虫株均属于非致病性虫株,与多聚酶链反应的结果相一致。提示,致病性虫株与非致病性虫株的基因有区别,多聚酶链反应对溶组织内阿米巴进行基因分析是一种敏感和特异的新方法。     

溶组织内阿米巴经长期无菌培养保种后感染力/致病力和成囊可能性的不可逆的丧失

作者用经Diamond氏TIP-S-L培养基无菌培养保种2年以上已无毒力的溶组织内阿米巴作实验。将这株阿米巴转种洛克氏鸡蛋米粉培养基,并在培养基内加入一种或多种细菌(厌氧杆菌属菌种、产气荚膜杆菌、大肠杆菌及粪链球菌);另一种培养是将无菌培养保种的虫株用含短膜虫(Crithidia fasi-     

阿米巴病的研究现状

1.侵袭性阿米巴病的宿主及寄生虫特异性仅有小部分感染溶组织内阿米巴的个体会发展为有症状的侵袭性阿米巴病。一种假说认为溶组织内阿米巴存在致病株和非致病株。另一种假说则认为所有溶组织内阿米巴均能导致侵袭性阿米巴病,但阿米巴的毒力是不稳定的。无症状的阿米巴肠遭感染和有症状的阿米巴病的临床分离物的同工酶谱是不同的,但不是固定不变的。一个无症状肠道感染者的溶组织内阿米巴分离株克隆,体外与从侵袭性阿米巴结肠炎患者分离的经射线照射的细菌接触,其酶谱从“非致病性”转化为“致病性”,并具备侵袭性阿米巴株的致病特征。     

特异性识别溶组织内阿米巴包囊的单克隆抗体的研制

用常规方法从粪便中检测溶组织内阿米巴(E.h.)仍是一个难题。本文研究制备了可特异性地识别E.h.包囊的McAbs。 从22例患者粪便标本中分离出的阿米巴虫株,经rRNA-PCR和己糖激酶同工酶测定,5人为E.h.感染,16人为dispar内阿米巴(E.d.)感染,1人为E.h.和E.d.混合感染。用汞醛碘法从E.h.感染者粪便中收集E.h.包囊,经双阶蔗糖梯度离心和纤维素酶消化法纯化包囊。从503号E.h.感染者粪便中分离纯化出的包囊数达2×10~6个,且其     

切除脾脏的仓鼠对阿米巴肝脓肿大小及迁延病灶的影响

作者为了研究脾脏对阿米巴肝脓肿所起的作用,从阳性仓鼠肝脏分离IP-106-2溶组织内阿米巴,放入TPS-1培养基中备用。采用6周龄纯种叙利亚雌性仓鼠LHC/LAK株,体重6065g,分3组,每组8鼠,第1组在麻醉下切除脾脏;第2组打开腹腔,暴露脾脏后又把脾脏放回腹腔;第3组鼠作为对照。吸0.1ml含100,000无污染的阿米巴滋养体的     

以实验感染肌肉阿米巴病的仓鼠作为生物学模型

40多年来,动物实验感染溶组织内阿米巴都采用肓肠内或肝内接种的方法。本文作者根据人体阿米巴病的病理学以及溶组织内阿米巴能在人体不同部位生存和发育的事实,用仓鼠进行了肌内感染溶组织内阿米巴的实验研究实验用的溶组织内阿米巴是从急性肠道阿米巴病患者分离出的虫株,已在含有大肠     

小鼠对溶组织内阿米巴敏感性的遗传控制

作者用纯净的溶组织内阿米巴感染小鼠,首创性地建立了肠道阿米巴病的小鼠模型。在此基础上,作者用9个纯系和1个远交系的不同品系小鼠作材料,研究了遗传控制小鼠感染溶组织内阿米巴的易感性。建立动物模型所用的无菌溶组织内阿米巴为HM-1-L_3亚株,是将HM-1株阿米巴3次通过仓鼠肝脏而分离出来的一个毒性亚株。在盛有FYI-S-33培养液的250ml培养瓶中,于37℃培养3天后,取瓶中的阿米巴悬液,于400g离心10分钟,计数后用培养液稀释到所需浓度,即可用于接种。接种的具体步骤如下:先将不带鼠内阿米巴(E.     

致病性自由生活阿米巴的培养

致病性自由生活阿米巴病原体的分离培养,对疾病诊断和病原体研究都具有重要意义。本文综述该病原体国内外报道的分离培养方法,主要包括样品处理、培养条件、虫株传代、虫株致病性检测和虫株保存方法。     

柯氏棘阿米巴毒力相关的cDNA片段上调表达[英]

自由生活的棘阿米巴可引起阿米巴肉芽肿脑炎和角膜炎,其毒力可通过长期体外培养逐渐减弱,但又可经鼻内接种或小鼠脑传代感染而恢复。本研究将体外保种多年的柯氏棘阿米巴(Acanthamoeba culbertsoni),小鼠接种进行脑传代,采用mRNA差异显示聚     

巨噬细胞对宿主防御肝阿米巴病的作用

作者用兔的抗巨噬细胞血清(AMS)处理实验动物的方法,观察了巨噬细胞对阿米巴感染的细胞免疫效应。实验动物为65～70g重的纯系雌性金色仓鼠,用的溶组织内阿米巴IR-106-12株。按Stinnett等的方法,稍加改进制备对仓鼠巨噬细胞的抗血清,即将糖原经腹腔注射5只仓鼠,7天后收集腹腔渗出细胞,用冷的Hank’s平衡盐水以1,500g离心10分钟洗3次,而后悬浮于无血清的199-培养基内;用     

溶组织内阿米巴虫株同工酶的电泳谱及其对沙鼠盲肠的毒力关系

本文研究了溶组织内阿米巴同工酶电泳谱与虫体对长瓜沙鼠盲肠毒力的关系。实验用IP:0682:1、IP:1182:2、DKB、IP:0383:1、IP:0683:2、IP:0683:3六个虫株,前3株从病人肠内分离到,后3株则从无症状包囊携带者粪中分离所得。应用淀粉凝胶电泳技术进行L-苹果酸:辅酶Ⅱ氧化还原酶、已糖     

阴道毛滴虫小鼠模型的探讨

本文从症状轻重不同的病人中分离得A、B、C和D4株阴道毛滴虫,A及B株引起病人产生明显的症状,C株引起的症状较轻,D株系来自无症状的带虫者。将上述4株无菌培养的阴道毛滴虫,经腹腔或皮下接种注入小鼠,结果4株均引起小鼠体内产生脓肿。腹腔注射,以A及D株毒力最强,B及C株次之。皮下注射,A、B两株的毒力大于C、D两株.因此阴道毛滴虫注入小鼠皮下,可以比较不同株对人的致病力的强弱。病理切片结果表明,肝的阴道滴虫性脓肿边缘整齐,外缘有一层阴道毛滴虫密集排列,其长轴与脓肿边缘垂直。与滴虫接触的肝细胞多呈玻璃样变。在脓肿中央有坏死的肝组织及散在的阴道毛滴虫。     

对溶组织内阿米巴同工酶株的抗体反应的血清流行病学研究

作者对Durban南方一个村庄的303个健康者和医院中确诊为阿米巴肝脓肿患者38人及阿米巴痢疾患者16人作了调查。从粪便和脓液分离阿米巴,并作同工酶电泳确定其酶谱,同时以特异性IgG的免疫荧光抗体试验和凝胶扩散试验作为血清学方法进行了调查,荧光抗体试验以效价大于1:500、凝胶扩散试验以在20小时内出现沉淀线作为阳性。结果,在健康者中有61人抗体阳性(20%),其中17例为致病性同类群酶虫株