荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验检测生殖器疱疹病毒感染的意义

目的:探讨荧光定量聚合酶反应(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测生殖器疱疹病毒感染的临床意义。方法:对性病门诊140例有现症生殖器疱疹(GH)患者用FQ-PCR检测生殖器疱疹病毒II型(HSV-2)和ELISA方法进行HSV-2抗原和抗体(包括IgG和IgM)检测。结果:FQ-PCR和HSV-2抗原法检测140例GH患者的阳性率分别为92.14%和89.29%,均明显高于HSV-2 IgG(66.43%)和IgM(14.29%)(P<0.01);125例具有典型临床症状如水疱、溃疡和宫颈糜烂等患者中:FQ-PCR和HSV-2抗原分别为100%和97.60%,均明显高于HSV-2IgG(65.60%)和HSV-2 IgM(14.40%)(P<0.01);15例表现为结痂的患者中:FQ-PCR、HSV-2抗原和HSV-2 IgM阳性率分别为26.67%、20.0%和13.33%,均明显低于HSV-2 IgG阳性率(P<0.01)。结论:FQ-PCR法和ELISA HSV-2抗原法均能快速准确检测GH感染;ELISA HSV-2 IgM抗体诊断GH感染的价值不大;ELISA HSV-2 IgG法对诊断临床症状不典型的GH有较大的价值。     

性病门诊836例患者单纯疱疹Ⅰ,Ⅱ型检测结果分析

目的探讨性病专科门诊患者中HSV-Ⅰ,Ⅱ型病毒的感染情况及在典型和非典型生殖器疱疹(GH)患者中的分布。方法采用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)对836例性病专科门诊患者进行HSV-Ⅰ,Ⅱ型DNA的检测。结果836例患者中,HSV-Ⅰ型感染38例(4.54%),男性阳性率5.20%,女性为3.36%,二者差异无显著性;HSV-Ⅱ型感染380例(45.45%),男性阳性率39.96%,女性为55.37%,二者差异有显著性(P<0.05)。具有典型GH或高度可疑GH症状者369例,HSV感染者218例;无明显GH症状者467例,HSV感染者198例,二者差异有显著性(P<0.05)。结论HSV在本地区具有较高感染率,以HSV-Ⅱ型为主。在非典型GH患者中,HSV的检出率较高,须引起临床注意。     

特异性HSV抗体检测在生殖器疱疹诊断中的重要性分析

目的探讨生殖器疱疹(GH)患者HSV-Ⅰ、Ⅱ型IgG、IgM抗体检测的临床意义,评价其对GH诊断的重要性和实用性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对生殖器部位有皮损者检测HSV的抗原及IgG、IgM抗体。结果男性患者有生殖器皮损者215例,HSV抗原阳性率45.58%(98/215),抗体阳性率98.14%(211/215)。女性患者有生殖器皮损者193例,HSV抗原阳性率为38.86%(75/193),抗体阳性率99.48%(192/193)。生殖器有皮损者HSV抗体阳性率均明显高于抗原阳性率。男女IgMⅠ型阳性率42.37%(100/236),提示HSV-Ⅰ所致GH明显增加。结论对生殖器皮损时间短的进行HSV抗原检测,及对生殖器皮损时间长或反复者进行抗体检测是判断HSV感染的检测方法。IgM抗体检测对有生殖器皮损但抗原检测阴性,及对无皮损排毒期具有辅助诊断意义。     

亚临床型生殖器疱疹脱排病毒及药物干预的临床研究

目的:探讨亚临床型生殖器疱疹患者不同状态下无症状排毒情况及与药物干预的相关性.方法:收集亚临床型生殖器疱疹患者580例,分别用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitation polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测亚临床型生殖器疱疹患者体内血清抗体(HSV-ⅠIgG、IgM及HSV-ⅡIgG、IgM)的分泌情况,分析比较患者不同病程、不同复发频率和有无抗体产生等多种状态下及药物干预后HSV病毒脱排情况.结果:入选的580例患者中,排毒阳性299例(51.6％),DNA质粒数为81-9.9×103 copies/ml,平均3.8×103copies/ml.病程超过3年的患者与小于3年的患者比较,排毒阳性率的差异有统计学意义(x2=6.7271,P＜0.01).频发患者(每年复发频率大于6次)与少发患者比较,差异有显著的统计学意义(x2=11.4140,P＜0.01).血清抗体阳性组HSV脱排病毒阳性率明显低于血清抗体阴性组,差异有显著的统计学意义(x2=37.8977,P＜0.01).对299例排毒阳性患者进行药物干预,盐酸伐昔洛韦片(A组)、阿昔洛韦咀嚼片(B组)与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01),停药后与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论:亚临床型生殖器疱疹患者HSV病毒脱排率高达51.6％,病程越长者、复发频率越少者、血清中存在相关抗体者,其排毒检测阳性率越低,此时患者的传染性越小,且排毒阳性患者用药干预后能明显抑制HSV脱排.     

278例单纯疱疹病毒检测分析

目的:了解生殖器溃疡患者中单纯疱疹病毒(HSV)感染情况。方法:采用免疫酶技术对278例、6个病种生殖器溃疡标本作HSV检测。结果:278例生殖器溃疡患者HSV检出率36.70%(102/278)。其中男性HSV检出率34.86%(76/218),女性HSV检出率43.33%(26/60)。糜烂性龟头炎125例,不典型硬下疳50例,药物性皮炎27例,接触性皮炎40例,糜烂性扁平苔癣8例,机械性损伤28例,HSV检出率分别为16.20%(45/278),7.20%(20/278),3.20%(9/278),5.40%(15/278),1.10%(3/278)和3.50%(10/278)。结论:生殖器溃疡的HSV感染率升高。女性HSV检出率明显高于男性,加强对女性患者的HSV主动检测是防治生殖器溃疡的重要环节。并提示对高危人群的不典型生殖器溃疡,及时做HSV检测是早期诊断和鉴别生殖器疱诊的重要手段之一。     

对ELISA检测生殖器疱疹患者HSV及其临床应用的评价

目的评价酶联免疫吸附试验(ELISA)检测生殖器疱疹病毒的临床应用价值。方法采用ELISA和分型聚合酶链反应(分型PCR)检测生殖器标本中的单纯疱疹病毒(HSV),两种试验结果不符合者采用不分型PCR检测。结果164例受检者中,ELISA法HSV阳性96例(58.5%),其中具典型皮损者阳性84例(80.8%,84/104),非典型皮损阳性12例(20.0%,12/60);分型PCRHSV阳性98例(59.8%),其中典型皮损者HSV阳性86例(82.7%,86/104),非典型皮损者阳性12例(20.0%,12/60)。HSV1感染者占生殖器疱疹的5.1%,HSV2感染占88.7%,HSV1和HSV2混合感染者占6.1%。ELISA的敏感性和特异性分别为96.7%和94.0%。结论ELISA检测HSV感染,其敏感性高、特异性强,方便、快速,尤其适合大批量样本的检测。     

多聚酶链反应与酶标法检测生殖器疱疹病毒感染的比较研究

为探讨多聚酶链反应(PCR)与酶标法检测生殖器疱疹病毒感染的诊断价值。采用PCR和酶标法检测生殖器疱疹病毒感染者45例，并用PCR作病毒分型。结果：临床确诊的45例患者中，酶标法检测抗原HSV阳性27例，阳性率60．0%(27／45)；PCR检测HSV阳性42例，阳性率93．33％(42／45)．其中HSV-11例，占2．38%；HSV-241例，占97．62％。对于有皮损的患者，PCR法较酶标法有较高的阳性检出率。由此可见：(1)HSV-2是主要的致病因素；(2)在对病毒分型及有皮损患者的诊断上，PCR法明显优于酶标法。     

生殖器部位皮损的单纯疱疹病毒检测及分型

目的 探讨生殖器疱疹部位皮损的不典型表现及其与单纯疱疹病毒型别的关系。方法 对外生殖器部位及其周围有硬结或疖肿、裂隙、毛囊炎等非水疱性皮肤黏膜损害的患者进行临床资料采集和分析,并对皮损标本进行单纯疱疹病毒的分离培养、PCR检测和病毒分型。结果 105例有外生殖器部位非水疱性皮损的患者入选本研究,在硬结(或疖肿)、裂隙、毛囊炎、类似擦破、单个溃疡、非特异性红斑和红肿渗液性包皮龟头炎皮损中,PCR检测HSV的阳性率分别33.3%(6/18)、20%(3/15)、37.5%(6/16)、28.6%(2/7)、33.3%(4/12)、20%(5/25)和50%(6/12),总的检出阳性率为30.5%(32/105)。分离培养法检测HSV的阳性率分别为22.2%(4/18)、13.3%(2/15)、25%(4/16)、14.3%(1/7)、33.3%(4/12)、8%(2/25)和41.7%(5/12),总的检出阳性率为21%(22/105)。两种方法检测HSV的总检出率差异无统计学意义(κ=0.095,P=0.114)。HSV-PCR分型结果与荧光单克隆抗体分型结果相符。在所有HSV阳性者中,HSV-1感染占9.4%(3/32),HSV-2感染占90.6%(29/32)。结论 生殖器HSV感染的皮肤黏膜损害多样,可为外生殖器部位的硬结(疖肿)、裂隙、毛囊炎、类似擦破、单个溃疡、非特异性红斑和红肿渗液性包皮龟头炎等不典型表现,而且主要由HSV-2感染引起。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒基因分型检测

目的探讨尖锐湿疣(CA)患者人乳头瘤病毒(HPV)-DNA定量及分型。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对278例CA患者疣体组织进行HPV分型和HPV-DNA定量检测。结果 278例CA患者经二氧化碳激光治疗后173例治愈,105例复发。HPV亚型分析显示,278例患者的标本中均检出HPV-DNA(100.00%),244例(87.77%)基因型为HPV6/11,7例(2.52%)为HPV16/18,27例(9.71%)为HPV6/11+16/18。对278例HPV-DNA阳性患者治疗前病毒载量进行分组比较,病毒载量为103~105拷贝/ml的患者106例,有23例患者复发;病毒载量105~107拷贝/ml的患者82例,有29例患者复发;病毒载量107拷贝/ml的患者90例,有53例患者复发。HPV亚型为HPV6/11的有79例复发,HPV16/18的有5例复发,HPV6/11并发HPV16/18的有21例复发。结论检测CA患者皮损HPV-DNA能区分高危型和低危型HPV感染,可对CA复发进行预测。     

生殖器疱疹患者病毒DNA的定量测定研究

目的 对生殖器疱疹病毒(HSV)患者病毒DNA进行定量测定.方法 以标准的HSV质粒作为标准,用聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA),定量测定HSVDNA.结果 100例生殖器疱疹患者中93例HSV测定阳性,7例阴性.在93例阳性者中有58例为HSV-2(占62.4%),35例为HSV-1(占37.6%).93例阳性者定量测定结果,250μL标本混悬液中DNA质粒数为115～1.1×10⁵个,平均7.1×10⁴个;58例HSV-2阳性者,250μL标本悬液DNA质粒数为136～1.1×10⁵个,平均7.6×10⁴个;35例HSV-1阳性者DNA质粒数为115～9.4×10⁴个,平均6.3×10⁴个.分别随机取HSV-2和HSV-1阳性患者各8例已淬取和纯化的DNA混悬液10μL,定量测定结果显示:HSV-2患者最高为2.7×10⁴个DNA质粒数,最低35个,平均1.8×10⁴个.HSV-1最高2.5×10⁴个,最低29个,平均1.6×10⁴个.结论 所用几种检测法中ELISA定量总阳性率为93%,与DNA印迹法阳性率相同.诊断PCR阳性率为91%,HSV分型PCR阳性率为88%.     

女性原发性生殖器疱疹中HSV-Ⅱ的检测及意义

目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)与女性原发性生殖器疱疹(GH)的相关性及意义。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测患者血清中HSV-Ⅱ抗体以及分泌物中的HSV-Ⅱ抗原。结果HSV-Ⅱ中IgG均阴性的138例女性生殖器疱疹患者中HSV-Ⅱ抗原阳性78例(56.52%);HSV-Ⅱ中IgM抗体阳性130例(94.20%),抗体阳性率明显高于抗原阳性率(P<0.01)。典型病例组抗原阳性65例(87.84%),IgM抗体阳性66例(89.19%);不典型病例组抗原阳性13例(20.31%),IgM抗体阳性64例(100.00%)。结论对于皮损时间短,症状典型者可检测HSV-Ⅱ抗原;皮损时间长,或反复者可检测HSV-Ⅱ抗体,可以有效提高HSV感染的临床诊断率。     

酶联免疫吸附试验检测单纯疱疹病毒抗体在生殖器疱疹筛查中的应用

目的:探讨酶联免疫吸附试验检测单纯疱疹病毒(HSV)抗体对生殖器疱疹筛查的意义。方法:选取50例2010年2月至2013年10月来我院治疗疑似生殖器疱疹患者,将其作为试验组,使用酶联免疫吸附试验进行HSV抗体检测,另外选择50例健康体检人员血清作为对照组。结果:在50例疑似生殖器疱疹患者HSV-I Ig M,HSV-I Ig G的检出率依次为14%,32%,HSV-ⅡIg M检出率为20%,HSV-ⅡIg G的检出率为34%;在对照组中HSV-I Ig M,HSV-I Ig G的检出率依次为0.8%,14%,HSV-ⅡIg M检出率为10%,HSV-ⅡIg G的检出率为24%,两组患者HSV抗体检测阳性率有显著的不同,二者明显的差异具有统计学意义(P0.05)。结论:疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒抗体检出率高,酶联免疫检测HSV抗原的方法可直接检测出泌尿生殖道及皮损中HSV病原体,在生殖器疱疹筛查中具有一定的优势。     

生殖器疱疹患者尿道和宫颈HSV感染的研究

目的：了解生殖器疱疹（GH）患者伴发宫颈和男性尿道单纯疱疹病毒（HSV）感染情况，进一步探讨HSV和非淋菌性尿道炎／官颈炎（NGU）的关系。方法：用HSV聚合酶链反应（PCR）方法检测了56例GH患者的宫颈和男性尿道拭子标本。结果：56例患者中HSV PCR检测阳性共5例，阳性率为8．93％（5／56）。20例女性生殖器疱疹患者宫颈HSV PCR检测阳性率为25．0％（5／20）；36例男性GH患者尿道HSV PCR检测结果均为阴性。结论：生殖器疱疹患者伴发女性宫颈HSV感染更为常见，而伴发男性尿道HSV感染相对少见。HSV感染可能是非淋菌性尿道炎／宫颈炎的一个致病因子，在女性宫颈炎的发病中可能更有意义。     

140例女性疑似生殖器疱疹患者HSV-Ⅱ抗体检测分析

目的:了解女性疑似生殖器疱疹GH患者感染生殖器疱疹发病情况。方法:对140例女性疑似生殖器疱疹患者血清检测HSV-Ⅱ-IgG抗体,并与140例正常人群作对照检测。结果:140例高危人群血清HSV-Ⅱ抗体阳性率为15%,正常人群阳性率为1.4%,两组阳性率比较有显著性差异(2=17.10,P<0.01)。结论:在性病门诊,对有多个性伴或性伴感染生殖器疱疹的女性高危人群在GH临床症状不明显时,应进行血清HSV-Ⅱ抗体检测。     

生殖器疱疹患者皮损HSV-2病毒载量与外周血细胞免疫功能的关系

目的：研究生殖器疱疹（GH）患者皮损部位单纯疱疹病毒－Ⅱ（HSV－2）载量和外周血细胞免疫功能的相关性。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（fluorescent quantitative polymerase chain reaction，FQ—PCR）定量检测28例现症GH患者皮损部位HSV－2DNA载量，采用流式细胞计数的方法监测28例现症GH患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及B细胞的比例，用线性相关和回归方法分析现症GH患者病毒载量与细胞免疫功能的相关性。结果：①GH患者皮损内疱液HSV－2检出率为100％，病毒载量为6190714±1962085拷贝／μgDNA。HSV－2病毒载量与患者复发次数呈显著正相关。②GH患者CD3^＋、CD4^＋、CD56细胞数及CD4^＋／CD8^＋比值均较对照组低（P〈0．01），但B细胞数与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。GH患者皮损HSV-2病毒载量与患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、NK、CD4^＋／CD8^＋细胞呈显著的负相关。结论：GH患者的细胞免疫功能抑制可能是由于外周血T淋巴细胞亚群的变化和NK细胞减少，以及Th及Tc细胞亚群分化失衡造成，这种状态不利于机体抑制病毒复制和增殖，造成GH反复发作。     

评价在辅助生育中检测单纯疱疹病毒2抗体对诊断生殖器疱疹的意义

【摘要】 目的 在分析生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒（HSV）流行株的基础上,探讨HSV-2 IgM抗体、型特异HSV-2 IgG抗体的敏感性、特异性、阴性预测值和阳性预测值,评价辅助生育中二种抗体检测在诊断生殖器疱疹上的意义。 方法 对2009—2011年中山大学附属第一医院皮肤科193例生殖器疱疹患者临床分离病毒株培养并鉴定分型,了解主要的流行病毒型。生殖中心术前筛查HSV-2 IgM和（或）IgG阳性、疑诊生殖器疱疹的女性,丈夫同时抽血检查,共57对为临床观察组;选取HSV培养阳性生殖器疱疹患者68例作为阳性对照组;8 ~ 10岁儿童120例为阴性对照组。血清标本采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测HSV-1 IgM和HSV-2 IgM抗体及型特异HSV-1 IgG、HSV-2 IgG抗体,对结果进行比对分析。 结果 阳性对照组68例中,HSV-1 IgM 14例（20.59%）、HSV-2 IgM 9例（13.24%）、HSV-1 IgG 61例（89.71%）、HSV-2 IgG 62例（91.18%）阳性;阴性对照组120例,分别为26例（21.70%）、16例（13.30%）、49例（40.80%）和0例阳性;两组HSV-1 IgM及HSV-2 IgM阳性率差异均无统计学意义（P > 0.05）,但HSV-1 IgG及HSV-2 IgG阳性率差异均有统计学意义（P < 0.01）。临床观察组57例女性中,HSV-1 IgM 46例（80.70%）、HSV-2 IgM 52例（91.23%）、HSV-1 IgG 48例（84.21%）、HSV-2 IgG 8例（14.04%）阳性;男性（配偶）分别为11例（19.30%）、5例（8.77%）、50例（87.71%）和7例（12.28%）阳性;两性的HSV-1 IgM及HSV-2 IgM阳性率差异均有统计学意义（P < 0.01）,而HSV-1 IgG及HSV-2 IgG阳性率差异均无统计学意义（P > 0.05）。HSV-2 IgM诊断生殖器疱疹的敏感性为13.24%,特异性为86.67%,阳性预测值36.00%,阴性预测值63.80%;HSV-2 IgG诊断生殖器疱疹的敏感性91.18%,特异性100.00%,阳性预测值100.00%,阴性预测值95.24%。 结论 该地区生殖器疱疹主要流行病毒型为HSV-2,仅5.18%是HSV-1。HSV-2 IgM诊断生殖器疱疹的敏感性、阳性预测值以及特异性、阴性预测值均低于HSV-2 IgG;辅助生育中型特异性HSV-2 IgG检测在诊断生殖器疱疹上的意义大于HSV-2 IgM。 【关键词】 疱疹,生殖器; 单纯疱疹病毒属; 免疫球蛋白G; 免疫球蛋白M     

FQ—PCR与细胞培养检测女性HSV感染者宫颈排泌HSV的对照研究

目的：比较FQ—PCR与细胞培养方法检测无症状生殖器疱疹宫颈排泌HSV的阳性率。方法：用型特异性抗体-2型单纯疱疹病毒糖蛋白G—IgG（HSVgG2-IgG）筛选出阳性女性34例,每例连续2月每月在排卵期和月经前取宫颈拭子,共取材136个。每次取材的拭子分别使用细胞培养鉴定和荧光定量多聚酶反应（Fluorescent quantitation—polymerase chain reaction,FQ—PCR）检测宫颈分泌物中HSV。结果：FQ—PCR方法得到38个拭子阳性,均为HSV-2;细胞培养方法得到4个拭子阳性,经直接免疫荧光分型鉴定为HSV-2。即所有宫颈拭子HSV阳性标本均为HSV-2,无HSV-1。采用Mc-Nemer检验细胞培养与FQ—PCR检测结果阳性率的差异有统计学意义（P〈0．05）,FQ—PCR检测的阳性率比细胞培养法高。结论：对于女性无症状生殖器疱疹,FQ—PCR的方法检测宫颈排泌HSV优于细胞培养方法。     

STD门诊就诊者HSV-Ⅰ、Ⅱ型IgM和IgG的检测与分析

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测就诊者血清中HSV-Ⅰ、Ⅱ型IgM/IgG抗体.以掌握性传播疾病(STD)门诊就诊者HSV-Ⅰ、Ⅱ型感染情况.结果: 91例就诊者检出HSV-Ⅰ型IgM和IgG分别为6例(6.59%)和83例(91.21%);而HSV-Ⅱ型IgM和IgG分别为13例(14.29%)和14例(15.38%).检测血清中HSV-Ⅰ型IgM和HSV-Ⅱ型IgM/IgG作为生殖器疱疹筛查试验,有利于无症状和/或症状不典型HSV感染者的检出,提高诊断率.     

抗原捕获聚合酶链反应分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒

目的 :　建立直接分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒 (HSV)的抗原捕获聚合酶链反应 (AC -PCR)。方法 :　用抗HSV型共同性糖蛋白单克隆抗体 ,包被聚苯乙烯离心管 ,捕获HSV ,同时加入 3个引物 :HSV - 1 HSV - 2型共同性上游引物及HSV - 1和HSV - 2型特异性下游引物 ,进行PCR扩增。结果 :HSV - 1和HSV - 2标准病毒株均分别扩增出与设计大小相符的 4 77bp和 399bpDNA条带。AC -PCR可检测到 10PFUHSV - 1和 1PFUHSV - 2。用AC -PCR检测了 36 5份妇女生殖器拭子标本 ,阳性 10 1例(2 7.7% ) ,2 3例为HSV - 1(占 2 2 .8% ) ,78例为HSV - 2 (占 77.2 % ) ;其中 112份标本同时用AC -PCR和分离培养法检测 ,AC -PCR的阳性率为 2 6 .8% (30 112 ) ,分离培养法的阳性率为 2 0 .5 % (2 3 112 ) ,两者差异有显著性 (χ2 =4 .5 ,P <0 .0 5 )。结论 :　AC -PCR是特异、敏感、快速分型检测妇女生殖器HSV感染的方法     

生殖器疱疹患者530例HSV抗体型别检测分析

目的了解生殖器疱疹患者HSV-1和HSV-2的感染情况,并分析生殖器疱疹的流行特点。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对性病门诊530例临床诊断为生殖器疱疹的患者进行了HSV血清抗体检测。结果 530例中男311例(58.68%),女219例(41.32%)。HSV-1IgM抗体阳性60例(11.32%),HSV-1IgG抗体阳性471例(88.87%),HSV-2IgM抗体阳性213例(40.19%),HSV-2IgG抗体阳性349例(65.85%)。年龄以31～40岁最多,为210例,其次为21～30岁194例。职业中最多的是自由职业和民工。初发者304例(57.36%),复发者226例(42.64%),其中频繁发作(≥6次/年)85例(16.04%)。结论长春地区生殖器疱疹患者以HSV-2感染为主。女性近期感染多于男性。以21～40岁性活跃人群为高发年龄组。